色譜定性和定量分析

1、Finding Whoa at Office 2.01第八章第八章色譜的定性分析色譜的定性分析混合物混合物樣品的來源性質(zhì)和分析目的樣品的來源性質(zhì)和分析目的一般定性一般定性單體1. 1.利用已知標準物對照定性利用已知標準物對照定性依據(jù)：相同的色譜操作條件，組分有固定的色譜依據(jù)：相同的色譜操作條件，組分有固定的色譜保留值保留值保留時間 有了解, 組成比較簡單, 有標準物質(zhì)作對照2、利用保留體積對照定性、利用保留體積對照定性 避免載氣流速變化的影響避免載氣流速變化的影響 V是利用載氣流速和保留時間來計算是利用載氣流速和保留時間來計算 利用利用T和和V與標準物質(zhì)的比較與標準物質(zhì)的比較 可靠性與分離度有

2、關可靠性與分離度有關 樣品中組分多，色譜峰密集，直接比較困難樣品中組分多，色譜峰密集，直接比較困難 同一保留時間對應多種化合物同一保留時間對應多種化合物3、利用加入法、利用加入法 將已知物質(zhì)加入到樣品，觀察各組分色譜峰的相對將已知物質(zhì)加入到樣品，觀察各組分色譜峰的相對變化來進行定性變化來進行定性 適用于樣品中組分色譜峰過密適用于樣品中組分色譜峰過密操作方法：操作方法： 做出樣品的色譜圖做出樣品的色譜圖 加入某純已知物加入某純已知物 在同樣的色譜條件下做混合物的色譜圖在同樣的色譜條件下做混合物的色譜圖 峰高增加即可能為加入的已知物峰高增加即可能為加入的已知物 另一種情況：增加了一個色譜峰另一種情

3、況：增加了一個色譜峰2. 利用文獻保留值定性利用文獻保留值定性 相對保留值定性相對保留值定性 組分和基準物質(zhì)的調(diào)整保留值的比值組分和基準物質(zhì)的調(diào)整保留值的比值 僅與固定液和柱溫僅與固定液和柱溫 適用于：組成簡單、已知范圍的混合物適用于：組成簡單、已知范圍的混合物 選定一定基準物按文獻報道的色譜條件進行實驗，選定一定基準物按文獻報道的色譜條件進行實驗，計算兩組分的相對保留值計算兩組分的相對保留值 選擇易得到純品，與分析組分保留至相近的作基準選擇易得到純品，與分析組分保留至相近的作基準物質(zhì)物質(zhì) 不受柱長、固定相填充情況、固定液用量、載氣的不受柱長、固定相填充情況、固定液用量、載氣的流速影響流速影響

4、 保留指數(shù)保留指數(shù)retention index 利用已知物得文獻保留值與未知物得測定保留值對照利用已知物得文獻保留值與未知物得測定保留值對照 保留指數(shù)保留指數(shù) 與柱溫和固定相性質(zhì)有關與柱溫和固定相性質(zhì)有關 計算：計算：Kovats指數(shù)指數(shù) 正構烷烴的保留指數(shù)為碳原子數(shù)乘以正構烷烴的保留指數(shù)為碳原子數(shù)乘以100 試驗方法：試驗方法： 測出組分保留時間測出組分保留時間 選擇選擇3種正構烷烴，分別大于小于樣品種正構烷烴，分別大于小于樣品 以正構烷烴的調(diào)整保留值的對數(shù)值對保留指數(shù)以正構烷烴的調(diào)整保留值的對數(shù)值對保留指數(shù)I作圖作圖 由被測組分的調(diào)整保留值的對數(shù)從圖上求得保留指數(shù)由被測組分的調(diào)整保留值的

5、對數(shù)從圖上求得保留指數(shù)保留指數(shù)的精密度及誤差來源保留指數(shù)的精密度及誤差來源1、系統(tǒng)誤差：、系統(tǒng)誤差： 氣流速控不穩(wěn)，如鋼瓶出口壓力低氣流速控不穩(wěn)，如鋼瓶出口壓力低 氣路有污染氣路有污染 溫度控制不十分準確溫度控制不十分準確2、測量誤差、測量誤差 死時間、保留時間、保留距離的測量死時間、保留時間、保留距離的測量3、采用雙柱或多柱、采用雙柱或多柱4、用保留指數(shù)進行定性需要知道被測樣品的化合物類型、用保留指數(shù)進行定性需要知道被測樣品的化合物類型，從文獻查找該類物質(zhì)的色譜條件，從文獻查找該類物質(zhì)的色譜條件 溫度對保留指數(shù)的影響溫度對保留指數(shù)的影響 不同溫度下的保留指數(shù)不同溫度下的保留指數(shù)1、同一物質(zhì)、

6、同一色譜柱上的保留指數(shù)在一定溫度范圍內(nèi)、同一物質(zhì)、同一色譜柱上的保留指數(shù)在一定溫度范圍內(nèi)與柱溫呈線性關系與柱溫呈線性關系 非極性固定相線性范圍比極性固定相大，非極性固定相線性范圍比極性固定相大，2、保留指數(shù)的溫度效應、保留指數(shù)的溫度效應 保留指數(shù)的溫度變化率（保留指數(shù)的溫度變化率（ I/ t）對于不同類物質(zhì)是不同）對于不同類物質(zhì)是不同的，如的，如 芳烴芳烴環(huán)烷烴環(huán)烷烴三取代烴三取代烴二取代烴和一取代烴二取代烴和一取代烴 4、計算機檢索、計算機檢索 計算機儲存的標準保留指數(shù)換算為用戶色譜條件下的保留計算機儲存的標準保留指數(shù)換算為用戶色譜條件下的保留指數(shù)和保留時間指數(shù)和保留時間 5、保留指數(shù)的優(yōu)點

7、、保留指數(shù)的優(yōu)點 以正構烷烴，把某組分的保留行為與緊靠它的正構烷烴來以正構烷烴，把某組分的保留行為與緊靠它的正構烷烴來標定，計算更為準確標定，計算更為準確 具有形象化優(yōu)點具有形象化優(yōu)點 與文獻值對照可定性鑒定，與固定相的性質(zhì)和柱溫有關，與文獻值對照可定性鑒定，與固定相的性質(zhì)和柱溫有關，準確度和重現(xiàn)性好準確度和重現(xiàn)性好 想關性好，利于判斷結構想關性好，利于判斷結構 保留指數(shù)是對數(shù)值，一組同系物的保留指數(shù)是對數(shù)值，一組同系物的I值與化合物的沸點和值與化合物的沸點和碳數(shù)呈線性關系碳數(shù)呈線性關系 比保留體積定性比保留體積定性Vg 氣液色譜法中最重要的定性指標氣液色譜法中最重要的定性指標缺點：實際工作中

8、，需要準確得知柱中固定液的量缺點：實際工作中，需要準確得知柱中固定液的量，固定液流失，固定液流失利用保留值規(guī)律進行定性利用保留值規(guī)律進行定性 1、利用雙柱或雙體系、利用雙柱或雙體系 同分異構體在同一色譜柱上保留值相同同分異構體在同一色譜柱上保留值相同 極性不同的色譜柱，極性相差越大，保留至相差也越極性不同的色譜柱，極性相差越大，保留至相差也越大大 非極性柱與極性柱配合使用非極性柱與極性柱配合使用 同系物的保留值在兩根不同極性色譜柱上呈線性關系同系物的保留值在兩根不同極性色譜柱上呈線性關系 非極性主上，各物質(zhì)按沸點高低出峰，極性柱上由化合物非極性主上，各物質(zhì)按沸點高低出峰，極性柱上由化合物結構決

9、定結構決定 兩個純物質(zhì)在性能不同的兩根或多根色譜柱上由完全相同兩個純物質(zhì)在性能不同的兩根或多根色譜柱上由完全相同的保留值，為同一物質(zhì)的保留值，為同一物質(zhì) 改變色譜條件，添加標準物質(zhì)，對比色譜條件改變前后樣改變色譜條件，添加標準物質(zhì)，對比色譜條件改變前后樣品中組分的分離結果品中組分的分離結果 GC中的碳數(shù)規(guī)律中的碳數(shù)規(guī)律 一定溫度下，同系物的調(diào)整保留值的變化遵循如下規(guī)律一定溫度下，同系物的調(diào)整保留值的變化遵循如下規(guī)律 lgVr = An+B n為分子的碳數(shù)為分子的碳數(shù) 已知同系物中幾個組分保留值，推測其他組分的保留值，已知同系物中幾個組分保留值，推測其他組分的保留值，再與未知物的色譜圖對比再與未

10、知物的色譜圖對比 先判斷未知物的類型先判斷未知物的類型 適用于任何同系物，有機化合物含有硅、硫及某些重復單適用于任何同系物，有機化合物含有硅、硫及某些重復單元（苯環(huán)，元（苯環(huán)，C=C等）的數(shù)目，也適用等）的數(shù)目，也適用 GC中的沸點規(guī)律中的沸點規(guī)律 同族具有相同碳原子數(shù)目的同分異構體的對數(shù)調(diào)整保留值同族具有相同碳原子數(shù)目的同分異構體的對數(shù)調(diào)整保留值與沸點的關系與沸點的關系 lgVr = CTb + D 與碳數(shù)規(guī)律相同與碳數(shù)規(guī)律相同 CX4，CHX3，CH2X2，CH3X 根據(jù)色譜圖上未知峰的根據(jù)色譜圖上未知峰的Vr值，查處該組分可能的沸點，參值，查處該組分可能的沸點，參考文獻上有關沸點的數(shù)據(jù)，

11、就可以推斷該組分為何種化合考文獻上有關沸點的數(shù)據(jù)，就可以推斷該組分為何種化合物物 LC中的保留值規(guī)則中的保留值規(guī)則 分離機理復雜分離機理復雜 不僅與固定相有關，還與流動相不僅與固定相有關，還與流動相 lnk = a + b lnCB + cCB3. 利用選擇性檢測器定性利用選擇性檢測器定性 FID，有機化合物，有機化合物 ECD，含鹵素、電負性強的原子或基團，含鹵素、電負性強的原子或基團 FPD，含，含S或或P NPD，含，含N、P UVD，具有雙鍵共軛結構，具有雙鍵共軛結構 DAD 雙檢測器定性雙檢測器定性 串聯(lián)，非破壞性串聯(lián)，非破壞性 TCD 并聯(lián)，破壞性，并聯(lián)，破壞性，F(xiàn)ID和和FPD

12、(三通三通)4. 聯(lián)用方法定性聯(lián)用方法定性 色譜色譜-質(zhì)譜聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用 GC-MS,LC-MS 色譜色譜-傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用 GC-FTIR 色譜色譜-核磁共振聯(lián)用核磁共振聯(lián)用 GC-NMR1) 色譜色譜-質(zhì)譜聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用 質(zhì)譜靈敏度高，掃描快，給出分子量質(zhì)譜靈敏度高，掃描快，給出分子量 真空匹配和接口，真空匹配和接口，LC-MS NIST庫庫; NIST/EPA/NIH; 應用最廣泛應用最廣泛 Wiley-農(nóng)藥庫；農(nóng)藥庫； Standard Pesticide Library 藥物庫，藥物庫，Pfleger Drug Library 揮發(fā)油庫揮發(fā)油庫 Essenti

13、al Oil Library2) 色譜色譜-傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用 有機化合物的結構分析有機化合物的結構分析 官能團定性官能團定性 有大量的標準圖譜可查有大量的標準圖譜可查 只適用于氣相和正相液相色譜只適用于氣相和正相液相色譜-MS EPA、Sadtler、Aldrich、Nicolet 色譜色譜-原子光譜聯(lián)用原子光譜聯(lián)用 金屬元素的定性定量分析金屬元素的定性定量分析 金屬元素的不同價態(tài)獲不同形態(tài)金屬元素的不同價態(tài)獲不同形態(tài) 色譜色譜-核磁共振聯(lián)用核磁共振聯(lián)用 色譜色譜-色譜聯(lián)用色譜聯(lián)用 GC-GC, GC-LC, LC-LC, LC-CE 液相色譜的輔助技術定性液相色譜

14、的輔助技術定性5. 化學方法定性化學方法定性1) 柱前預處理法柱前預處理法 使用物理或化學消除劑將樣品中某類化合物消除、減少或使用物理或化學消除劑將樣品中某類化合物消除、減少或轉化轉化 消除劑涂在載體上或放入消除柱消除劑涂在載體上或放入消除柱 放在進樣的注射器放在進樣的注射器 化合物發(fā)生不可逆吸附或化學反應，比對色譜圖化合物發(fā)生不可逆吸附或化學反應，比對色譜圖 加入化學試劑加入化學試劑 樣品中含有特定官能團樣品中含有特定官能團 含羥基的；乙酸酐；保留時間減小含羥基的；乙酸酐；保留時間減小 鹵代烷；乙醇鹵代烷；乙醇-硝酸銀；沉淀；吸收峰消失硝酸銀；沉淀；吸收峰消失 伯胺、仲胺；三氟乙酸酐；叔胺伯

15、胺、仲胺；三氟乙酸酐；叔胺 石油，烷烯芳烴；石油，烷烯芳烴；HBr；保留時間增加；保留時間增加 酮類；酮類；2,4-二硝基苯肼；橙黃色沉淀二硝基苯肼；橙黃色沉淀 裂解色譜法裂解色譜法 熱裂解有一定規(guī)律性，熱烈后的產(chǎn)物組成和含量是特征性的熱裂解有一定規(guī)律性，熱烈后的產(chǎn)物組成和含量是特征性的2) 柱上選擇除去法柱上選擇除去法 吸附劑或載體裝入短柱，串聯(lián)在分析柱前吸附劑或載體裝入短柱，串聯(lián)在分析柱前 5A分子篩；分子篩；C3-C11的正構烷烴的正構烷烴 KOH涂漬的石英粉；羧酸和酚類涂漬的石英粉；羧酸和酚類 酸性預柱酸性預柱-吸附胺類吸附胺類3) 柱后流出物化學反應定性法柱后流出物化學反應定性法 顏

16、色反應顏色反應 沉淀試劑沉淀試劑 放出氣體放出氣體 使用非破壞性檢測器，使用非破壞性檢測器，6. 平面色譜的定性法平面色譜的定性法 比移值比移值 固定相性質(zhì)、展開劑的性質(zhì)、被分離組分的性質(zhì)、展開時溫度和固定相性質(zhì)、展開劑的性質(zhì)、被分離組分的性質(zhì)、展開時溫度和展開距離展開距離 載體紙或吸附劑的種類和規(guī)格、薄層厚度、展開劑、平衡時間、載體紙或吸附劑的種類和規(guī)格、薄層厚度、展開劑、平衡時間、展開方式和距離、溫度。展開方式和距離、溫度。 相對比移值相對比移值 斑點的顯色斑點的顯色 自然光觀察半點顏色，紫外光觀察顏色和熒光自然光觀察半點顏色，紫外光觀察顏色和熒光 使用專屬性顯色劑使用專屬性顯色劑7. 多

17、種方法配合定性多種方法配合定性 GC-MS和保留指數(shù)配合和保留指數(shù)配合 GC-MS和和GC-FTIR配合定性配合定性色譜定量分析色譜定量分析定量分析的基本公式定量分析的基本公式 m = f A m，被測組分的量，被測組分的量 f, 被測組分的校正因子被測組分的校正因子 A, 被測組分的峰面積被測組分的峰面積定量校正因子定量校正因子 使檢測器產(chǎn)生的信號能真實反映物質(zhì)的量使檢測器產(chǎn)生的信號能真實反映物質(zhì)的量 對峰面積進行校正對峰面積進行校正 在定量分析時引入校正因子在定量分析時引入校正因子(f)，指單位峰，指單位峰面積所代表的被測組分的量面積所代表的被測組分的量1. 絕對校正因子絕對校正因子 同一

18、個檢測器，同一物質(zhì)其響應值只與該同一個檢測器，同一物質(zhì)其響應值只與該物質(zhì)的量有關，物質(zhì)的量有關， 主要由儀器的靈敏度決定，而靈敏度受樣主要由儀器的靈敏度決定，而靈敏度受樣品、時間、操作條件等影響品、時間、操作條件等影響2. 相對校正因子相對校正因子f 某物質(zhì)與標準物質(zhì)絕對校正因子之比某物質(zhì)與標準物質(zhì)絕對校正因子之比 TCD用苯作標準物質(zhì)，用苯作標準物質(zhì)，F(xiàn)ID用正庚烷用正庚烷 將相對校正因子簡稱為校正因子。將相對校正因子簡稱為校正因子。 樣品一定時，樣品一定時，f只與檢測器類型有關，與色譜條件無關只與檢測器類型有關，與色譜條件無關1) 質(zhì)量校正因子質(zhì)量校正因子fm 組分的量用質(zhì)量表示組分的量用

19、質(zhì)量表示 mi，Ai被測組分的質(zhì)量和峰面積被測組分的質(zhì)量和峰面積 ms，As標準物質(zhì)的質(zhì)量和峰面積標準物質(zhì)的質(zhì)量和峰面積mi/Aims/As=mimsAsAifm =fifs=2) 摩爾校正因子摩爾校正因子fM Mi被測組分的摩爾質(zhì)量被測組分的摩爾質(zhì)量 Ms標準物質(zhì)的摩爾質(zhì)量標準物質(zhì)的摩爾質(zhì)量MsMifM=fm3) 體積校正因子fM Mi被測組分的摩爾質(zhì)量 Ms標準物質(zhì)的摩爾質(zhì)量 氣體樣品，摩爾校正因子等于體積校正因子ViVsAsAifV =注意：注意： 物質(zhì)的校正因子可以通過查閱文獻或手冊獲得；物質(zhì)的校正因子可以通過查閱文獻或手冊獲得； 相對校正因子隨檢測器的類別和使用的載氣不同而有差異相對

20、校正因子隨檢測器的類別和使用的載氣不同而有差異 有時候也受物質(zhì)濃度、儀器結構和操作條件的影響有時候也受物質(zhì)濃度、儀器結構和操作條件的影響 在引用文獻數(shù)據(jù)和與文獻對照時要注意影響因素在引用文獻數(shù)據(jù)和與文獻對照時要注意影響因素3. 峰高定量校正因子峰高定量校正因子fh 適用于用峰高進行定量的色譜峰適用于用峰高進行定量的色譜峰 受操作條件影響較大，不能直接引用文獻值，在實際工作受操作條件影響較大，不能直接引用文獻值，在實際工作中，需標準純物質(zhì)測定。中，需標準純物質(zhì)測定。 不適用于不對稱的色譜峰和保留時間過小的色譜峰。不適用于不對稱的色譜峰和保留時間過小的色譜峰。4. 響應值響應值 絕對響應值絕對響應

21、值 單位量組分通過檢測器時產(chǎn)生的信號值，也成為絕對靈單位量組分通過檢測器時產(chǎn)生的信號值，也成為絕對靈敏度。敏度。 相對響應值相對響應值 被測樣品和標準樣品絕對應答值的比值被測樣品和標準樣品絕對應答值的比值。5. 校正因子的測量方法校正因子的測量方法 純品的待測化合物和標準物純品的待測化合物和標準物 將二者配成已知比例的混合物將二者配成已知比例的混合物 取準確量的該混合物進樣，在一定色譜條件下分析取準確量的該混合物進樣，在一定色譜條件下分析 準確測量組分和標準物質(zhì)所得色譜峰的峰面積準確測量組分和標準物質(zhì)所得色譜峰的峰面積 按上述公式計算校正因子按上述公式計算校正因子注：測量定量校正因子的色譜條件

22、最好與注：測量定量校正因子的色譜條件最好與樣品分析時的色譜條件一致或相近。樣品分析時的色譜條件一致或相近。6. 確定校正因子的其他方法確定校正因子的其他方法1) 利用文獻。利用文獻。 文獻查閱氣相色譜檢測器的相關組分校正因子文獻查閱氣相色譜檢測器的相關組分校正因子 液相影響因素多，難以重復文獻中的條件，需要液相影響因素多，難以重復文獻中的條件，需要自己進行測定自己進行測定 2) 校正因子的估算校正因子的估算 熱導池檢測器熱導池檢測器 內(nèi)插法內(nèi)插法 加和法加和法 換算法換算法 氫火焰離子化檢測器氫火焰離子化檢測器 內(nèi)插法內(nèi)插法 有效碳數(shù)法有效碳數(shù)法定量方法定量方法 把所有出峰組分的含量之和計為把

23、所有出峰組分的含量之和計為100%，計算，計算器中某一組分含量百分數(shù)的定量方法，稱為歸器中某一組分含量百分數(shù)的定量方法，稱為歸一化法。一化法。 適用條件：待測樣品中各組分均能流出色譜注適用條件：待測樣品中各組分均能流出色譜注，在檢測器上都能獨立的產(chǎn)生信號，在檢測器上都能獨立的產(chǎn)生信號1. 歸一化法歸一化法i=mimi=fiAifiAiii若樣品中的組分為同系物或同分異構體，校正因子近似相若樣品中的組分為同系物或同分異構體，校正因子近似相等，可不用引入校正因子，將峰面積或峰高直接利用歸已等，可不用引入校正因子，將峰面積或峰高直接利用歸已化公式，化公式，i=AiAiiX 100%X 100%優(yōu)點：

24、簡便、準確；進樣量、流速、柱溫等條件的變化優(yōu)點：簡便、準確；進樣量、流速、柱溫等條件的變化對定量結果的影響很小。對定量結果的影響很小。缺點缺點1.校正因子的測定較為麻煩校正因子的測定較為麻煩2.必須所有組分都出峰，重疊色譜峰影響峰面積的測定，必須所有組分都出峰，重疊色譜峰影響峰面積的測定，引起含量誤差。引起含量誤差。3.不適用于選擇性檢測器不適用于選擇性檢測器 歸一化法主要用于歸一化法主要用于GC的定量測定，在的定量測定，在HPLC中很少使用中很少使用。 GC中的中的FID和和TCD，對組分的校正因子相近或有一定的，對組分的校正因子相近或有一定的規(guī)律，從文獻中可以查到或計算得到。且當為同系物時

25、，規(guī)律，從文獻中可以查到或計算得到。且當為同系物時，可直接利用峰面積歸一化定量可直接利用峰面積歸一化定量 ，操作方便，結果誤差較，操作方便，結果誤差較小。小。 HPLC中，常用的紫外、熒光等檢測器對樣品的響應值差中，常用的紫外、熒光等檢測器對樣品的響應值差別較大別較大(即使是同系物即使是同系物)，不能忽略校正因子的影響；另外，不能忽略校正因子的影響；另外，該類檢測器對某些組分沒有響應值。，該類檢測器對某些組分沒有響應值。 外標法外標法 HPLC分析中比較常用分析中比較常用 操作簡單，計算方便，快速的操作簡單，計算方便，快速的絕對定量絕對定量分分析方法析方法2. 標準曲線法標準曲線法1. 標準樣

26、品繪制標準工作曲線標準樣品繪制標準工作曲線 配制梯度濃度的標準品溶液，在待測組分的分子色譜條件配制梯度濃度的標準品溶液，在待測組分的分子色譜條件下，等體積進樣，作出峰面積對濃度的工作曲線，即為標下，等體積進樣，作出峰面積對濃度的工作曲線，即為標準曲線。準曲線。 標準曲線的斜率為絕對校正因子。標準曲線的斜率為絕對校正因子。2. 樣品測定樣品測定 在繪制標準曲線的色譜條件下，對相同量或定量的樣品進在繪制標準曲線的色譜條件下，對相同量或定量的樣品進行色譜分析，得到色譜圖。行色譜分析，得到色譜圖。 測量色譜峰的峰面積或峰高，根據(jù)標準曲線計算樣品組分測量色譜峰的峰面積或峰高，根據(jù)標準曲線計算樣品組分的濃

27、度，得到樣品的量。的濃度，得到樣品的量。 單點校正法單點校正法 若得到的工作曲線通過原點若得到的工作曲線通過原點，已知待測組分的大概含量，已知待測組分的大概含量，可采用單點校正法。可采用單點校正法。 實驗操作實驗操作 配制一個與待測組分含量相近的已知濃度的標準溶液，在配制一個與待測組分含量相近的已知濃度的標準溶液，在相同的色譜條件下，分別將二者等體積進樣，得到色譜圖相同的色譜條件下，分別將二者等體積進樣，得到色譜圖，比較二者的峰面積或峰高，計算得出含量。，比較二者的峰面積或峰高，計算得出含量。標準曲線法的優(yōu)點：標準曲線法的優(yōu)點： 測定工作操作簡單，計算方便測定工作操作簡單，計算方便 適合于大批

28、量樣品分析適合于大批量樣品分析 給出的為樣品的絕對量給出的為樣品的絕對量缺點：缺點： 儀器和操作條件對分析結果影響很大，待測組分需與其他儀器和操作條件對分析結果影響很大，待測組分需與其他組分完全分離組分完全分離 色譜條件必須完全一致色譜條件必須完全一致 標準物質(zhì)的純度要求較高標準物質(zhì)的純度要求較高 樣品前處理過程的損耗無法補償樣品前處理過程的損耗無法補償 標準曲線使用一段時間后，需用標準物質(zhì)進行校正標準曲線使用一段時間后，需用標準物質(zhì)進行校正 將純物質(zhì)作為標準物加到待測樣品中，依將純物質(zhì)作為標準物加到待測樣品中，依據(jù)待測組分與標準物在檢測器上的響應值據(jù)待測組分與標準物在檢測器上的響應值(峰面積

29、或峰高峰面積或峰高)之比，參照標準物的量進行之比，參照標準物的量進行定量的方法定量的方法3. 內(nèi)標法內(nèi)標法i=AsAifismsm相對校正因子，標準物質(zhì)的質(zhì)量，樣品質(zhì)量，相對校正因子，標準物質(zhì)的質(zhì)量，樣品質(zhì)量，峰面積峰面積(峰高峰高)1. 選擇合適的內(nèi)標物是內(nèi)標法的關鍵選擇合適的內(nèi)標物是內(nèi)標法的關鍵2. 內(nèi)標物的要求內(nèi)標物的要求樣品中不存在的純物質(zhì)樣品中不存在的純物質(zhì)與待測組分的性質(zhì)相近，化學性質(zhì)穩(wěn)定，不與樣品或固與待測組分的性質(zhì)相近，化學性質(zhì)穩(wěn)定，不與樣品或固定相發(fā)生反應定相發(fā)生反應能與樣品完全互溶能與樣品完全互溶與樣品中所有組分能完全分離，峰不重疊與樣品中所有組分能完全分離，峰不重疊加入內(nèi)

30、標物的量接近待測組分的量加入內(nèi)標物的量接近待測組分的量稱量準確稱量準確內(nèi)標物的校正因子容易得到內(nèi)標物的校正因子容易得到內(nèi)標標準曲線法內(nèi)標標準曲線法 待測組分的純物質(zhì)配制梯度濃度標準溶液待測組分的純物質(zhì)配制梯度濃度標準溶液 取相同體積標液加入同樣量的內(nèi)標物，在相同的取相同體積標液加入同樣量的內(nèi)標物，在相同的色譜條件下分析色譜條件下分析 以濃度為橫坐標，以待測組分和內(nèi)標物的響應值以濃度為橫坐標，以待測組分和內(nèi)標物的響應值之比為縱坐標，得到標準曲線。之比為縱坐標，得到標準曲線。 相同條件分析樣品相同條件分析樣品內(nèi)標法的優(yōu)點內(nèi)標法的優(yōu)點可以忽略色譜條件可以忽略色譜條件(柱溫、載氣流速、橋電流和進樣量柱

31、溫、載氣流速、橋電流和進樣量)對測定結果的對測定結果的影響影響補償待測組分在樣品處理過程中的損失補償待測組分在樣品處理過程中的損失消除進樣量不準確產(chǎn)生的誤差，提高定量的準確度消除進樣量不準確產(chǎn)生的誤差，提高定量的準確度缺點缺點選擇合適的內(nèi)標物困難選擇合適的內(nèi)標物困難內(nèi)標物稱量要準確內(nèi)標物稱量要準確需要測得相對校正因子需要測得相對校正因子要求待測組分、內(nèi)標物和其他組分能完全分離要求待測組分、內(nèi)標物和其他組分能完全分離 以樣品中已有組分作為內(nèi)標物，將改組分以樣品中已有組分作為內(nèi)標物，將改組分的純品加到待測樣品中，在相同的色譜條的純品加到待測樣品中，在相同的色譜條件下，比較加入內(nèi)標物前后的響應值件下，比較加入內(nèi)標物前后的響應值(峰面峰面積或峰高積或峰高)，計算得待測組分的含量。，計算得待測組分的含量。4. 疊加法疊加法操作步驟操作步驟 對樣品進行色譜分析對樣品進行色譜分析 稱取樣品稱取樣品m，加入內(nèi)標物，加入內(nèi)標物mi，