巰基乙酸-中國(guó)食品藥品檢定研究院

1、附件1化妝品中航基乙酸的檢測(cè)方法(征求意見(jiàn)稿)1范圍本方法規(guī)定了離子色譜法測(cè)定化妝品中疏基乙酸的含量。本方法適用于化妝品中疏基乙酸及其鹽類(lèi)和酯類(lèi)含量的測(cè)定。2方法提要樣品中的疏基乙酸經(jīng)水溶解提取后，用離子色譜儀分離疏基乙酸根與無(wú)機(jī)離子，電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，峰面積定量。本方法疏基乙酸的檢出限5.8ng,定量下限20ng。取樣量為0.5g時(shí)，檢出濃度為46科g/g最低定量濃度0.15mg/g。3試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。3.1 疏基乙酸，優(yōu)級(jí)純。3.2 甲醇，優(yōu)級(jí)純。3.3 三氯甲烷，分析純。3.4 氫氧化鈉，分析純。

2、3.5 硫酸溶液2(H2SO4)=10%：取硫酸(3=1.84g/ml)10mL,緩慢加入到90mL水中，混勻。3.6 鹽酸溶液*(HCl)=10%：取鹽酸(磔=1.19g/ml)10mL,加入90mL水中，混勻。3.7 淀粉溶液(10g/L)：稱(chēng)可溶性淀粉1g,加水5mL調(diào)成溶液，再加入沸水95mL,煮沸，并加水楊酸0.1g或氯化鋅0.4g防腐。3.8 氫氧化鈉溶液(500g/L)：稱(chēng)取氫氧化鈉50g,加水適量使溶解并至100mL。再量取一定量用經(jīng)超聲脫氣的水稀釋到淋洗液濃度。3.9 重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液c(1/6K2Cr2O7)=0.1000mol/L：準(zhǔn)確稱(chēng)取已于120c±2C電烘

3、箱中干燥至恒重的重銘酸鉀基準(zhǔn)物質(zhì)4.9031g,溶于水并轉(zhuǎn)移至1000mL量瓶中，定容至刻度，搖勻。3.10 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mol/L）:稱(chēng)取硫代硫酸鈉（Na2s2O3?5H2。）26g（或無(wú)水硫代硫酸鈉16g）溶于1000mL新煮沸放冷的水中，加入氫氧化鈉0.4g或無(wú)水碳酸鈉0.2g,搖勻,貯存于棕色瓶?jī)?nèi)，放置兩周后過(guò)濾，用重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定其濃度，標(biāo)定方法如下：準(zhǔn)確吸取重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.9）25.00mL于500mL碘量瓶中，加碘化鉀2.0g和硫酸溶液（10%）20mL,立即密塞，搖勻，于暗處放置10min。加入水150mL,用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈淡黃色時(shí)，加入

4、淀粉溶液（3.7）2mL,繼續(xù)滴定至藍(lán)色變?yōu)榱辆G色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。c(Na2s2O3)C25.00V1V0式中：c（Na2s2O3）硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;C重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c（1/6K2Cr2O7）,mol/L;V1硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL;V?？瞻自囼?yàn)硫代硫酸鈉溶液的體積,mL03.11 碘標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05mol/L）：稱(chēng)取碘13.0g和碘化鉀35g,加水100mL使溶解，加入鹽酸3滴，用水稀釋至1000mL,過(guò)濾后轉(zhuǎn)入棕色瓶中。3.12 疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（10g/L）：稱(chēng)取疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)品（3.1）1.0g,用水稀釋并轉(zhuǎn)

5、移至100mL容量瓶中，加入甲醛1mL,加水定容得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，臨用時(shí)標(biāo)定。標(biāo)定方法如下:準(zhǔn)確吸取疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液10.00mL,置于250ml碘量瓶中，加入水10mL,鹽酸10mL,精確加入碘標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.11）20.00mL,混勻，于暗處放置3分鐘，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，至溶液顏色變?yōu)闇\黃色時(shí)，加入淀粉溶液（3.7）2mL,（溶液變?yōu)樗{(lán)色，）繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失即為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)，按下式計(jì)算前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。c(HSCH2COOH)92.1c(v0V1)10001000V1000式中：c（HSCH2COOH）疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度，囚/mL;硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，

6、mol/L;Vo空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,V 1疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液消耗硫代硫酸鈉溶標(biāo)準(zhǔn)液的體積，mL;V 疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的體積，mL;92.1疏基乙酸的摩爾質(zhì)量，g/mol。4儀器和設(shè)備4.1 離子色譜儀，抑制型電導(dǎo)檢測(cè)器。4.2 電子天平。4.3 渦旋振蕩器。4.4 超聲波清洗器。4.5 高速離心機(jī)。5分析步驟5.1 疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)系列溶液制備臨用新配。取經(jīng)碘量法標(biāo)定的疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液適量，分別配制成0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、80.0mg/L的疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。5.2

7、 樣品處理稱(chēng)取本品0.5g(精確到0.001g)于100mL具塞比色管中，加水至刻度，膏狀樣品用渦旋振蕩器振搖均勻，超聲波清洗器提取20min,加入三氯甲烷(3.3)2mL,輕輕振搖，靜置。渾濁樣品，在14000rpm轉(zhuǎn)速下高速離心15min,取上清液經(jīng)0.25m濾膜過(guò)濾，濾液作為待測(cè)溶液。5.3 參考色譜條件色譜柱：AS11-HC(250X4mmI.D.),AG11-HC(50X4mmI.D.),柱填料為強(qiáng)堿性離子交換樹(shù)脂，烷醇季鏤作功能基；抑制器：ASRSULTRA;抑制模式：外接水1.0mL/min,自動(dòng)抑制電流50mA;淋洗液：25mmol/LNaOH+1%甲醇混合液；淋洗液流速：0.

8、85mL/min;柱溫：室溫；進(jìn)樣量：25此5.4 測(cè)定在“5.3”色譜條件下，取前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（5.1）分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取“5.2”項(xiàng)下的樣品待測(cè)溶液進(jìn)樣，記錄色譜圖，量取峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品待測(cè)溶液中疏基乙酸的濃度。按“6”計(jì)算樣品中疏基乙酸的含量。6計(jì)算按下式計(jì)算前基乙酸的濃度（以前基乙酸計(jì)）：:VW（前基乙酸）=m式中：（疏基乙酸）-樣品中疏基乙酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，閔/g;P-測(cè)試溶液中萌基乙酸的質(zhì)量濃度，mg/L；V-樣品定容體積，mL;m-樣品取樣量，g。7色譜圖1:疏基乙酸（Tr=16.587）化妝品中航基乙酸的

9、檢測(cè)方法修訂說(shuō)明根據(jù)中國(guó)食品藥品檢定研究院化妝品衛(wèi)生規(guī)范修訂項(xiàng)目工作安排，我所承擔(dān)“疏基乙酸的檢測(cè)方法（離子色譜法）修訂”項(xiàng)目，現(xiàn)已完成修訂工作，修訂說(shuō)明如下：1修訂的必要性：疏基乙酸（Thioglycolicacid,簡(jiǎn)稱(chēng)TGA）又稱(chēng)硫代乙醇酸、氫疏基乙酸、疏基醋酸，分子式QHQS,分子量：92.12,外觀為無(wú)色油狀透明液體，有特異臭味，熔點(diǎn)：-16.5C,沸點(diǎn)：123C,可與水、醇、醛以任何比例混合，在空氣中迅速氧化，質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于70%勺疏基乙酸水溶液在室溫下貯藏穩(wěn)定。疏基乙酸可用于制備燙發(fā)劑和脫毛劑，疏基乙酸的鈉鹽、鈣鹽或鏤鹽在堿性作用下，能對(duì)皮膚快速脫毛，與傳統(tǒng)的堿金屬或堿土金屬的硫化

10、物做脫毛劑相比，對(duì)皮膚刺激溫和，幾乎無(wú)臭，賦香容易，脫毛時(shí)間短，效果好。疏基乙酸在堿性條件下有較強(qiáng)的還原作用，能與頭發(fā)中的胱氨酸反應(yīng)，切斷胱氨酸的（-S-S-）鍵，生成易于卷曲的半胱氨酸。因此，疏基乙酸在燙發(fā)、脫毛類(lèi)化妝品中一直被廣泛應(yīng)用，但是用量過(guò)大會(huì)導(dǎo)致頭發(fā)干燥、易斷，所以使用時(shí)需控制其含量，以免使?fàn)C發(fā)劑變成脫毛劑，造成毛發(fā)脫落的嚴(yán)重后果。同時(shí)，疏基乙酸也屬于高毒類(lèi)物質(zhì)，對(duì)皮膚、眼睛有較強(qiáng)的刺激作用，在2007版化妝品衛(wèi)生規(guī)范中疏基乙酸及其鹽類(lèi)、酯類(lèi)被定為限用物質(zhì)，根據(jù)作用效果不同而限量各異?，F(xiàn)行化妝品衛(wèi)生規(guī)范（2007年版）疏基乙酸測(cè)定的第一法為離子色譜法，操作主要可分為兩部分，即疏基乙

11、酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定和離子色譜測(cè)定。其疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定的方法為直接滴定法，該法步驟較繁瑣，需先以重銘酸鉀基準(zhǔn)物質(zhì)配制重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液-用重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液-用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定碘標(biāo)準(zhǔn)溶液-用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定疏基乙酸溶液，溶液顏色由無(wú)色變?yōu)闇\藍(lán)色作為碘標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定終點(diǎn)的判定依據(jù)。實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)終點(diǎn)的顏色變化過(guò)程較長(zhǎng)突躍不明顯，易導(dǎo)致操作者對(duì)終點(diǎn)顏色判定尺度把握不一，有的會(huì)以淺紫色為滴定終點(diǎn)，有的會(huì)以淺藍(lán)色為滴定終點(diǎn)，同時(shí)振搖力度和滴定速度也影響顏色的變化，也可能導(dǎo)致對(duì)終點(diǎn)的判斷，最終影響標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，進(jìn)而影響離子色譜測(cè)定樣品的準(zhǔn)確性。同時(shí)，現(xiàn)標(biāo)

12、準(zhǔn)規(guī)定配制的疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度為0.01mol/L（1g/L）,而標(biāo)定用的碘標(biāo)準(zhǔn)溶液為0.05mol/L,濃度差距較大（疏基乙酸與碘的反應(yīng)當(dāng)量為2:1）,會(huì)增加滴定誤差，不夠合理。因此，需對(duì)疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定方法部分進(jìn)行修訂，離子色譜測(cè)定部分尚未發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，未作修改。2起草依據(jù)及文獻(xiàn)(1)化妝品衛(wèi)生規(guī)范(2007年版)(2)化妝品及其原料中禁限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范(3)鄭星泉等，化妝品衛(wèi)生檢驗(yàn)手冊(cè)，北京：化學(xué)工業(yè)出版社出版社，2003,105-107(4)鐘志雄等，離子色譜法測(cè)定化妝品中疏基乙酸的研究，衛(wèi)生研究，2004,33(4):491493.(5)張展，疏基乙酸的提純工藝研究

13、與疏基乙酸鏤合成開(kāi)發(fā)，20073修訂原則本次修訂方法兼具顧可行性和合理性，將直接滴定法改為終點(diǎn)更明確的剩余滴定法，修改了疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度，使之與碘標(biāo)準(zhǔn)溶液更匹配，方法的可操作性更強(qiáng)，結(jié)果更加準(zhǔn)確。盡量采用目前化妝品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室普遍具備的分析技術(shù)，并選擇準(zhǔn)確、可行、便于實(shí)際操作的分析條件，保證檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。4修訂過(guò)程中國(guó)食品藥品檢定研究院于2014年6月委托我所進(jìn)行疏基乙酸檢測(cè)方法的修訂和驗(yàn)證工作。我所在原有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，通過(guò)查閱國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)資料，重點(diǎn)考察了現(xiàn)有的化妝品衛(wèi)生規(guī)范(2007年版)疏基乙酸的檢測(cè)方法中疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的標(biāo)定。通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)工作和征求多家檢

14、驗(yàn)機(jī)構(gòu)的意見(jiàn)，初步形成了疏基乙酸的測(cè)定方法(離子色譜法)修訂的方案。2014年7月，中國(guó)食品藥品檢定研究院組織召開(kāi)專(zhuān)家論證會(huì)，經(jīng)專(zhuān)家評(píng)議認(rèn)為該方法修訂方案基本合理，能夠滿足化妝品中疏基乙酸的檢測(cè)要求，同時(shí)提出了相關(guān)修改意見(jiàn)。根據(jù)專(zhuān)家論證會(huì)意見(jiàn)，我所對(duì)修訂方案進(jìn)行了完善，并按方案完成了方法修訂，并將修訂后的疏基乙酸的檢測(cè)方法提請(qǐng)廣東省食品藥品檢驗(yàn)所、江蘇省疾病預(yù)防控制中心和遼寧省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院進(jìn)行復(fù)核。5重點(diǎn)說(shuō)明的問(wèn)題(2007年(1)關(guān)于檢測(cè)方法的體例。本檢測(cè)方法的體例主要參照化妝品衛(wèi)生規(guī)范版)的衛(wèi)生化學(xué)檢驗(yàn)方法的體例，力求統(tǒng)一協(xié)調(diào)及便于化妝品檢驗(yàn)領(lǐng)域相關(guān)檢驗(yàn)人員的閱讀和實(shí)際操作。(2)關(guān)于檢

15、測(cè)方法的驗(yàn)證。本檢測(cè)方法為容量法中的剩余碘量法，主要從三個(gè)方面驗(yàn)證：滿足GB/T601-2002化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備中技術(shù)指標(biāo)要求：相同條件下單人4平行測(cè)定結(jié)果極差的相對(duì)值不大于重復(fù)性臨界極差CrR95(4)的相對(duì)值0.15%,雙人8平行測(cè)定結(jié)果極差的相對(duì)值不大于重復(fù)性臨界極差CrR95(4)的相對(duì)值0.18%;與自動(dòng)電位滴定法比較，對(duì)手動(dòng)初、復(fù)標(biāo)疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度的8組數(shù)據(jù)與自動(dòng)電位滴定儀測(cè)定疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度的8組數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，P單尾=0.108及P雙尾=0.217均大于0.05,即兩種標(biāo)定方法的結(jié)果沒(méi)有顯著差異。提請(qǐng)三家實(shí)驗(yàn)室復(fù)核，復(fù)核結(jié)果表明，本次修訂后的方法，其滴

16、定終點(diǎn)更易判定，滴定濃度設(shè)置更為合理，方法可行。(3)關(guān)于疏基乙酸所含雜質(zhì)對(duì)標(biāo)定結(jié)果影響的說(shuō)明根據(jù)文獻(xiàn)疏基乙酸的提純工藝研究與疏基乙酸鏤合成開(kāi)發(fā)，在工業(yè)化生產(chǎn)疏基乙酸的方法中普遍存在副產(chǎn)物二硫代二乙酸(HOOCCH2SSCH2COOH,簡(jiǎn)稱(chēng)DTDGA),二硫代二乙酸是疏基乙酸的氧化產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)中不含“-SH”基團(tuán)，不會(huì)被碘氧化，故對(duì)疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定結(jié)果無(wú)影響。化妝品中航基乙酸的檢測(cè)方法編制說(shuō)明1任務(wù)來(lái)源根據(jù)中國(guó)食品藥品檢定研究院與深圳市藥品檢驗(yàn)所簽訂的合作協(xié)議，深圳市藥品檢驗(yàn)所承擔(dān)疏基乙酸的測(cè)定方法（離子色譜法）的修訂項(xiàng)目。2研究背景疏基乙酸（Thioglycolicacid,簡(jiǎn)稱(chēng)TGA

17、）又稱(chēng)硫代乙醇酸、氫疏基乙酸、疏基醋酸，分子式C2H4O2S,分子量：92.12,外觀為無(wú)色油狀透明液體，有特異臭味，熔點(diǎn)：-16.5C,沸點(diǎn)：123C,可與水、醇、醛以任何比例混合，在空氣中迅速氧化，質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于70%勺疏基乙酸水溶液在室溫下貯藏穩(wěn)定。疏基乙酸可用于制備燙發(fā)劑和脫毛劑，疏基乙酸的鈉鹽、鈣鹽或鏤鹽在堿性作用下，能對(duì)皮膚進(jìn)行快速脫毛，與傳統(tǒng)的堿金屬或堿土金屬的硫化物做脫毛劑相比，對(duì)皮膚刺激溫和，幾乎無(wú)臭，賦香容易，脫毛時(shí)間短，效果好。疏基乙酸在堿性條件下有較強(qiáng)的還原作用，能與頭發(fā)中的胱氨酸反應(yīng)，切斷胱氨酸的（-S-S-）鍵，生成易于卷曲的半胱氨酸，因此，疏基乙酸在燙發(fā)、脫毛類(lèi)化妝

18、品中一直被廣泛采用，但是用量過(guò)大會(huì)導(dǎo)致頭發(fā)干燥、易斷，所以使用時(shí)要控制其含量，以免使?fàn)C發(fā)劑變成脫毛劑，造成毛發(fā)脫落的嚴(yán)重后果。同時(shí)，疏基乙酸也屬于高毒類(lèi)物質(zhì)，對(duì)皮膚、眼睛有較強(qiáng)的刺激作用，在2007版化妝品衛(wèi)生規(guī)范中疏基乙酸及其鹽類(lèi)、酯類(lèi)被定為限用物質(zhì)，根據(jù)作用效果不同而限量各異。3現(xiàn)行方法現(xiàn)行化妝品衛(wèi)生規(guī)范（2007年版）疏基乙酸收載了兩種方法，第一法為離子色譜法，第二法為化學(xué)滴定法，其中，第一法離子色譜法的操作主要可分為兩部分，即疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定和離子色譜測(cè)定。其疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定的方法為直接滴定法，該法步驟較繁瑣，先以重銘酸鉀基準(zhǔn)物質(zhì)配制重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液用重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定硫代硫

19、酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液-用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定碘標(biāo)準(zhǔn)溶液-用碘標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定疏基乙酸溶液，溶液顏色由無(wú)色變?yōu)闇\藍(lán)色作為碘標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定終點(diǎn)的判定依據(jù)，。實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)終點(diǎn)的顏色變化過(guò)程較長(zhǎng)突躍不明顯，易導(dǎo)致操作者對(duì)終點(diǎn)顏色判定尺度把握不一，有的會(huì)以淺紫色為滴定終點(diǎn)，有的會(huì)以淺藍(lán)色為滴定終點(diǎn)，同時(shí)振搖力度和滴定速度也影響顏色的變化，也可能導(dǎo)致對(duì)終點(diǎn)的判斷，最終影響標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，進(jìn)而影響離子色譜測(cè)定樣品的準(zhǔn)確性。同時(shí)，現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定配制的疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度為0.01mol/L(1g/L),而標(biāo)定用的碘標(biāo)準(zhǔn)溶液為0.05mol/L,濃度差距較大(疏基乙酸與碘的反應(yīng)當(dāng)量為2:1)

20、,會(huì)增加滴定誤差，不夠合理。本項(xiàng)目在現(xiàn)有的化妝品衛(wèi)生規(guī)范(2007年版)疏基乙酸檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上，將疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定方法由直接碘量法改為剩余碘量法，即先定量加入過(guò)量的碘溶液，使疏基乙酸與碘反應(yīng)完全，再用已標(biāo)定的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定剩余的碘，同法做空白校正，以溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)闊o(wú)色作為滴定終點(diǎn)。同時(shí)，將疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度修訂為0.1mol/L(10g/L),即稱(chēng)取疏基乙酸1.0g,用水稀釋并轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，加入甲醛1ml,加水定容得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。疏基乙酸的離子色譜測(cè)定部分未作修改。4項(xiàng)目完成情況根據(jù)中國(guó)食品藥品檢定研究院與深圳市藥品檢驗(yàn)所簽訂的合作協(xié)議，在現(xiàn)有化妝品衛(wèi)生規(guī)

21、范(2007年版)疏基乙酸檢測(cè)方法(離子色譜法)的基礎(chǔ)上，將疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定方法由直接碘量法修改為剩余碘量法，同時(shí)將疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度修改為0.1mol/L(10g/L)。具體工作如下：(1)建立了用剩余滴定法標(biāo)定疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法。滿足GB/T601-2002化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備中技術(shù)指標(biāo)要求：相同條件下單人4平行測(cè)定結(jié)果極差的相對(duì)值不大于重復(fù)性臨界極差CrR95(4)的相對(duì)值0.15%,雙人8平行測(cè)定結(jié)果極差的相對(duì)值不大于重復(fù)性臨界極差CrR95(4)的相對(duì)值0.18%。(2)本方法負(fù)責(zé)修訂單位為深圳市藥品檢驗(yàn)所，參與復(fù)核驗(yàn)證單位分別為廣東省食品藥品檢驗(yàn)所、江蘇省疾

22、病預(yù)防控制中心和遼寧省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院。驗(yàn)證結(jié)果滿足化妝品及其原料中禁限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范相關(guān)要求。5方法概述5.1 技術(shù)原理：在疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液中先加入定量、過(guò)量的碘標(biāo)準(zhǔn)溶液，待碘與疏基乙酸反應(yīng)完全后，然后用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定剩余的碘，以求出疏基乙酸的含量。反應(yīng)過(guò)程為:2HSCH2COOH+I2-HOOCH2C-S-S-CH2COOH+2HI2Na2s2O3+I2-Na2s4O6+2NaI5.2 試齊【J:5.2.1 疏基乙酸，批號(hào)：STBB6196,含量：99.60%,來(lái)源：Sigma-Aldrich。5.2.2 三氯甲烷，分析純。5.2.3 淀粉溶液：稱(chēng)可溶性淀粉1g用水5ml

23、調(diào)成溶液后加入沸水95ml,煮沸，臨用現(xiàn)配。5.2.4 重需酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液c(1/6K2Cr2O7)=0.1000mol/L:準(zhǔn)確稱(chēng)取已于120c±2C電烘箱中干燥至恒重的重銘酸鉀基準(zhǔn)物質(zhì)4.9031g,溶于水并轉(zhuǎn)移至1000ml量瓶中，定容至刻度。5.2.5 硫代硫酸鈉溶液(0.1mol/L):稱(chēng)取硫代硫酸鈉(Na2s2O3?5H2O)26g(或無(wú)水硫代硫酸鈉16g)溶于1000ml新煮沸放冷的水中，加入氫氧化鈉0.4g或無(wú)水碳酸鈉0.2g,搖勻，貯存于棕色瓶?jī)?nèi)，放置兩周后過(guò)濾，用重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定其準(zhǔn)確濃度，標(biāo)定方法如下：準(zhǔn)確吸取重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液25.00ml于500ml碘量瓶中

24、，加碘化鉀2.0g和硫酸溶液(10%)20ml,立即密塞，搖勻，于暗處放置10min。加入水150ml,用硫代硫酸鈉溶液滴定，直至溶液呈淡黃色時(shí)，加入淀粉溶液(10g/L)2ml,繼續(xù)滴定至藍(lán)色變?yōu)榱辆G色。同時(shí)做空白試驗(yàn)。按下式計(jì)算硫代硫酸鈉溶液的濃度。c25.00c(Na2s2O3)=V1V0式中：c(Na2s2。3)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;c重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c(1/6K2Cr2O7),mol/L;V1硫代硫酸鈉溶液的用量，ml;V0空白試驗(yàn)硫代硫酸鈉溶液的用量，ml。5.2.6 碘溶?夜(0.05mol/L)：稱(chēng)取碘13.0g和碘化鉀35g,加水100ml,溶解后加入鹽

25、酸3滴，用水稀釋至1000ml,過(guò)濾后轉(zhuǎn)入棕色瓶。5.2.7 疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(10g/L)：稱(chēng)取疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)品1.0g,用水稀釋轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，加入甲醛1ml,加水定容得標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，臨用時(shí)采用剩余滴定法標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，標(biāo)定方法如下：準(zhǔn)確吸取疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液10.00ml,置于250ml碘量瓶中，加入水10ml,鹽酸10ml,精確加入碘溶液(0.05mol/L)20.00ml,混勻，于暗處放置3分鐘，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液顏色變?yōu)闇\黃色時(shí)，加入淀粉溶液(10g/L)2ml,繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失即為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)，按下式計(jì)算前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。92.1c(V

26、o1)10001000c(HSCH2COOH)=vvv1000式中：c(HSCH2COOH前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度，0ml;V 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;V 0空白試驗(yàn)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量，ml;V 1硫代硫酸鈉溶標(biāo)準(zhǔn)液的用量，ml;V 疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml；92.1疏基乙酸的摩爾質(zhì)量，g/mol。6方法研究本次應(yīng)用的方法為碘量法中的剩余碘量法，主要從以下兩個(gè)方面驗(yàn)證：6.1初、復(fù)標(biāo)重復(fù)性考察滴定管：25ml(編號(hào)128500)移液管：10ml(編號(hào)135001313),校正值為0.009ml,校正后體積為10.009ml初標(biāo)：結(jié)果見(jiàn)表1計(jì)算：c(HSCH2COOH)

27、(V0-V1)cV表1疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液初標(biāo)結(jié)果初標(biāo)筑基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備乙酸標(biāo)準(zhǔn)鈉標(biāo)準(zhǔn)溶硫代硫酸儲(chǔ)備溶液消耗平均值儲(chǔ)備溶液液濃度鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量硫代硫酸鈉標(biāo)份溶液的濃(mol/L)的用量(V,ml)(c,準(zhǔn)溶液的用量數(shù)(V0,ml)度(mol/L)mol/L)(V1,ml)119.4210.160.095292210.0090.103019.4210.170.0951890.095241319.4210.170.095189419.4210.160.095292式中：c(HSCH2COOH)疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度，mol/LV0空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量,V1疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液消耗硫

28、彳t硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量，ml;C硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L;V取用疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量，ml；初標(biāo)極差的相對(duì)值：100%=0.11%0.095292-0.0951890.095241復(fù)標(biāo)：結(jié)果見(jiàn)表20.095292-0.095189100%=0.11%表2疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液復(fù)標(biāo)結(jié)果復(fù)標(biāo)份數(shù)乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的用量(V,ml)鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(c,mol/L)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量(V0,ml)儲(chǔ)備溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量(V1，ml)筑基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度(mol/L)平均值(mol/L)119.4410.180.095292210.0090.103019.4410.

29、190.0951890.095215319.4410.190.095189419.4410.190.095189復(fù)標(biāo)極差的相對(duì)值:0.095215初、復(fù)標(biāo)前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度平均值：0.095228mol/Lt0.09523mol/L初、復(fù)標(biāo)極差的相對(duì)值：I0.095292-0.095189。、。.0.095228滿足GB/T601-2002化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備中技術(shù)指標(biāo)要求：相同條件下單人4平行測(cè)定結(jié)果極差的相對(duì)值不大于重復(fù)性臨界極差CrR95(4)的相對(duì)值0.15%,雙人8平行測(cè)定結(jié)果極差的相對(duì)值不大于重復(fù)性臨界極差CrR95(4)的相對(duì)值0.18%。6.2與自動(dòng)電位滴定法比較使用瑞

30、士梅特勒T50自動(dòng)電位滴定儀，配備DMi140-SC鉗電極本次滴定的化學(xué)反應(yīng)均為氧化還原反應(yīng)，可用自動(dòng)電位滴定儀滴定加以驗(yàn)證，滴定曲線見(jiàn)圖1、2,標(biāo)定結(jié)果見(jiàn)表3。圖1.空白校正試驗(yàn)的滴定曲線圖2.標(biāo)定前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液試驗(yàn)的滴定曲線表3疏基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液自動(dòng)電位滴定法標(biāo)定結(jié)果定酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液濃代硫酸鈉標(biāo)備溶液消耗硫代標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備平均值份溶液的用量度準(zhǔn)溶液的用硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液溶液的濃(mol/L)數(shù)(V,ml)(c,mol/L)量（V。，ml）的用里（V1，ml）度(mol/L)110.1790.095230210.1820.095200310.1800.095220410.0090.1030

31、19.43310.1760.0952610.09520510.185095169610.1880.095138710.1860.095158810.1820.095200對(duì)手動(dòng)初、復(fù)標(biāo)前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度的8組數(shù)據(jù)與自動(dòng)電位滴定儀測(cè)定前基乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液濃度的8組數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表4:表4t-檢驗(yàn)結(jié)果t-檢驗(yàn)：雙樣本等方差假設(shè)手動(dòng)滴定電位滴定平均0.0952280.095197力差2.84E-091.65E-09觀測(cè)值88臺(tái)開(kāi)力左2.24E-09假設(shè)平均差0df14tStat1.293115P(T<=t)單尾0.108452t單尾臨界1.76131P(T<=t)雙尾0.216903t雙尾臨界2.144787P單尾=0.108及P雙尾=0.217均大于0.05,即兩種標(biāo)定方法的結(jié)果沒(méi)有顯著差異。7 化妝品中疏基乙酸含量測(cè)定一一離子色譜法7.1 儀器：戴安ICS2000離子色譜儀XS204電子天平渦旋振蕩器超聲波清洗器高速離心機(jī)7.2 色譜條件色譜柱：AS11-HC(250X4mm,AG11-HC(50X4mm抑制器：ASRSULTRAt2mm淋洗液：25mmol/L氫氧化鈉溶液+1%用醇混合液淋洗液流速：0.42ml/min抑制模式：外接水，自動(dòng)抑制電流50mA