乙型肝炎的實(shí)驗(yàn)室診斷

1、乙型肝炎的實(shí)驗(yàn)室診斷血清標(biāo)志物對(duì)于乙肝的病原學(xué)診斷最初、也是最常用的是乙肝病毒血清標(biāo)志物（HBVM）檢測(cè)。HBVM主要包括：兩對(duì)半（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）、HBxAg、HBxAb、前S抗原及抗體、DNA多聚酶（DNAP）及抗體等。通過(guò)檢測(cè)HBVM可以間接的多角度了解患者HBV感染、復(fù)制以及病情恢復(fù)情況。常用血清標(biāo)志物是兩對(duì)半，臨床意義如下： 1.表面抗原（HBsAg）：位于病毒外殼表面，由HBV基因組S區(qū)和前S區(qū)基因編碼，完整的大分子HBsAg是完整病毒的必需條件。血清HBsAg的出現(xiàn)，意味著HBV的現(xiàn)癥感染，是乙肝血清學(xué)檢查最重要的指標(biāo)。HBsAg雖然只

2、是HBV存在的間接指標(biāo)，但診斷乙肝的最常用也是最重要的指標(biāo)，主要因它出現(xiàn)最早，一般在感染后3周出現(xiàn)，有利于早期診斷。第二，它持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，急性患者至少持續(xù)5周，最長(zhǎng)可持續(xù)5個(gè)月，并且在血液中的釋放量大，非常容易檢測(cè)。前S1和前S2緊隨HBsAg而出現(xiàn)在血流中，并與HBeAg和HBVDNA相關(guān)。2.表面抗體（HBsAb）:由于病毒HBsAg抗原性誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生的保護(hù)性抗體，HBsAb是一種保護(hù)系抗體，在HBsAg消失后數(shù)周后出現(xiàn)，并可持續(xù)多年存在。HBsAb是所有乙肝要關(guān)抗體中出現(xiàn)最晚的。常與HBcAb同時(shí)存在，而很難與HBsAg同時(shí)被檢出來(lái)?？骨癝1抗體出現(xiàn)于潛伏期，是所有抗體中出現(xiàn)最早的?？筍3

3、抗體出現(xiàn)在急性期，處于HBV復(fù)制終止前后，提示有清除病毒的作用。 3. e抗原（HBeAg）:HBeAg是一種可溶性蛋白抗原，一般僅見(jiàn)于HBsAg陽(yáng)性血清中，陰性中偶見(jiàn)。HBeAg出現(xiàn)在血中稍后于HBsAg，同時(shí)消失很快，所以窗口期也不能出現(xiàn)。HBeAg是由HBVDNA開(kāi)放讀碼框前C區(qū)編碼，與HBV的活動(dòng)性復(fù)制密切相關(guān)，是HBV傳染性的重要指標(biāo)。HBcAg是HBV復(fù)制的標(biāo)記，而HBeAg是HBV正在復(fù)制的標(biāo)記。 4. e抗體（HBeAb）:在病毒復(fù)制過(guò)程中，e抗原暴露誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生。有一定保護(hù)作用。HBeAb緊接著HBeAg消失而出現(xiàn)，表示HBV復(fù)制已經(jīng)減少，傳染性降低。HBeAb持續(xù)時(shí)間不長(zhǎng)，

4、幾月后逐漸消退。血清中HBeAb的檢出意味著病毒復(fù)制中止或減少。 5. 核心抗體（HBcAb）:由病毒C區(qū)編碼的HBcAg誘導(dǎo)產(chǎn)生，沒(méi)有保護(hù)作用。由于HbcAg位于病毒內(nèi)部，一般方法不能檢出，在血清中只能檢測(cè)到HbcAb。HbcAb可以作為HBV感染的標(biāo)志。血清中的檢出HBcAb表明病毒正在或曾經(jīng)進(jìn)行復(fù)制。常說(shuō)的HBcAb一般是指HBcAbIgG，是最用的兩對(duì)半中最先出現(xiàn)的抗體，一般在HBsAg出現(xiàn)后24周出現(xiàn)。當(dāng)HBsAg消失，而HBsAb還沒(méi)有出現(xiàn)時(shí)，常只能檢出HBcAb，因此臨床將此階段稱(chēng)為窗口期。HBcAb和HBsAb一樣也可以持續(xù)多年存在。HBcAbIgM僅出現(xiàn)在急性期，具有鑒別診斷

5、意義。.乙型肝炎病毒DNA聚合酶（DNAP）DNAP位于HBV核心部分，有逆轉(zhuǎn)錄酶活性，是HBV復(fù)制的直接指標(biāo)?；蛟\斷隨著分子生物學(xué)技主的發(fā)展，應(yīng)用DNA分子雜交和PCR技術(shù)可以檢測(cè)出血清、體液和組織中HBV DNA的存在情況，是直接、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷證據(jù)。使用PCR及定量PCR技術(shù)檢測(cè)HBV DNA，是乙肝診斷的重大進(jìn)步。1HBV DNA檢測(cè)或定量檢測(cè)（病毒載量）：（1） 靈敏度提高：WANG等對(duì)206名HBsAg陰性、ALT陰性的健康供血者用PCR方法檢測(cè)HBV DNA，檢出陽(yáng)性9例，占4%。這說(shuō)明HBsAg雖然是HBV的感染的標(biāo)志，但由于S基因的變異或低水平表達(dá)，而常規(guī)方法難以檢出，會(huì)

6、導(dǎo)致漏檢。而使用PCR能較好的彌補(bǔ)。（2） 與HBVM結(jié)合使用，可以對(duì)臨床提供更為有效、更有價(jià)值的信息：基因?qū)W診斷與HBVM并不是矛盾的，各有優(yōu)勢(shì)，在乙肝的診治過(guò)程結(jié)合使用更具臨床價(jià)值。如：臨床有資料顯示，對(duì)于HBV DNA陽(yáng)性、HBeAg陽(yáng)性的慢性乙肝病人病情較HBV DNA陽(yáng)性、HbeAb陰性的病人重，自然緩解率也較低。（3） 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)病毒的載量是療效監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)：乙肝療效監(jiān)測(cè)以前用的是指標(biāo)血清學(xué)“兩對(duì)半”檢測(cè)，但由于血清學(xué)指標(biāo)反應(yīng)相對(duì)滯后、靈敏度較差，并不是理想的療效監(jiān)測(cè)指標(biāo)。近年隨著定量PCR在臨床上的應(yīng)用，連續(xù)監(jiān)測(cè)HBV DNA血清載量已經(jīng)成為療效監(jiān)測(cè)的理想指標(biāo)。臨床上一般認(rèn)為用藥后HBV DNA下降到105拷貝ml以下為對(duì)藥物完全應(yīng)答；定量下降大于2個(gè)數(shù)量級(jí)為對(duì)藥物部分應(yīng)答；未達(dá)上述標(biāo)準(zhǔn)為無(wú)應(yīng)答。 常見(jiàn)的兩對(duì)半結(jié)果HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb病程-未感染+-感染早期+-+-感染初期+-+-+急性或慢性乙型肝炎，高傳染性+-+急性、慢性乙型肝炎或HbsAg攜帶者+-+急性乙肝趨向恢復(fù)或慢性乙肝，弱傳染性-+急性HBV感染