2014年高考生物一輪復(fù)習(xí)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用專(zhuān)題訓(xùn)練(含(精)

1、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(限時(shí)30分鐘滿(mǎn)分60分)、非選擇題(共60分)1(15分)下面是分離分解尿素的細(xì)菌所用的培養(yǎng)基，據(jù)表回答下列問(wèn)題：KHPO24NaHPO24MgSO74HO2葡萄糖尿素瓊脂自來(lái)水1.4g2.1g0.3g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL(1) 該培養(yǎng)基中含有的最主要碳源是。(2) 該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分，屬于培養(yǎng)基。(3) 在該培養(yǎng)基中，可以通過(guò)檢測(cè)pH的變化來(lái)判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是，所用方法是在培養(yǎng)基中加入，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成色。(4) 如果將此培養(yǎng)基改為用來(lái)分離分解纖維素的微生物的培養(yǎng)基，則主要提供碳元素的物質(zhì)應(yīng)改為。2(15分)某學(xué)校打

2、算開(kāi)辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學(xué)生的勞動(dòng)技術(shù)課內(nèi)容。首先對(duì)食用菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清掃和消毒處理，準(zhǔn)備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購(gòu)來(lái)各種食用菌菌種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1) 對(duì)買(mǎi)回來(lái)的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，首先制備試管培養(yǎng)基，寫(xiě)出制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料：、。其中提供氮源的是；提供碳源的主要物質(zhì)是。(2) 微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中對(duì)各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時(shí)各成分要有合適的。在燒杯中加入瓊脂后要不停地，防止。(3) 將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個(gè)試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入中滅菌，壓力kPa，溫度，時(shí)間。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到0時(shí)，將試管取

3、出。如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應(yīng)(4) 使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)注意，先向鍋內(nèi)倒入。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(5) 從一支試管向另一支試管接種時(shí)注意，接種環(huán)要在酒精燈(“內(nèi)”或“外”)焰滅菌，并且待接種環(huán)后蘸取菌種，試管口不能離開(kāi)酒精燈火焰附近，將接種的試管在適溫下培養(yǎng)，長(zhǎng)成菌落后放入°C冰箱中保藏。3. (15分)(2013青島質(zhì)檢)微生物與人類(lèi)關(guān)系密切。雖然有些微生物能使動(dòng)植物患病，但多數(shù)微生物對(duì)人類(lèi)是有益的。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1) 培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為，這種培養(yǎng)基

4、稱(chēng)為培養(yǎng)基。(2) 在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？。(3) 微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和法。在用平板劃線法接種時(shí)，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？。4. (15分)下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)，完成下列問(wèn)題：(1) 實(shí)驗(yàn)原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥漿，接種到無(wú)氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長(zhǎng)繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離開(kāi)來(lái)。材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無(wú)氮培養(yǎng)基、牛

5、肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，盛9mL無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂布器、無(wú)菌培養(yǎng)皿、盛90mL無(wú)菌水的錐形瓶、恒溫箱。(2) 方法步驟： 倒平板：分別將無(wú)菌培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，操作過(guò)程應(yīng)在火焰旁。 制備土壤稀釋液：取土樣10g加入盛有90mL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無(wú)菌吸管吸取上清液1mL，轉(zhuǎn)至9mL的無(wú)菌水的大試管中，依次稀釋到10?稀釋度。 涂布：按照由107103稀釋度的順序分別吸取0.1mL進(jìn)行平板涂布，每個(gè)稀釋度下，無(wú)氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布個(gè)平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布1個(gè)平板。 培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在2830C下培養(yǎng)34天。 細(xì)菌的計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在的平板進(jìn)

6、行計(jì)數(shù)。如果測(cè)試的平均值為50，則每克樣品中的菌落數(shù)是。(稀釋度是105)(3) 預(yù)測(cè)結(jié)果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)應(yīng)多于無(wú)氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。請(qǐng)說(shuō)明原因。答案1解析：培養(yǎng)基中葡萄糖、尿素和瓊脂都含有碳元素，其中葡萄糖是最主要的碳源，尿素主要提供氮元素，瓊脂是凝固劑。由于瓊脂的存在，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；尿素分解會(huì)產(chǎn)生氨，氨能使酚紅指示劑變紅色，據(jù)此可以推測(cè)培養(yǎng)基中的尿素是否被分解。若該培養(yǎng)基改為用來(lái)分離分解纖維素的微生物的培養(yǎng)基，纖維素應(yīng)作為唯一碳源，因?yàn)橹挥羞@樣才具有選擇作用。答案：(1)葡萄糖(2)固體(3)微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高酚

7、紅指示劑紅(4) 纖維素2解析：(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方如下：牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂蒸餾水5.0g10.0g5.0g20.0g定容至1000mL由配方可知所需的原料；凡能提供所需氮元素的物質(zhì)為氮源，牛肉膏、蛋白胨均含氮元素。(2)在配制培養(yǎng)基時(shí)營(yíng)養(yǎng)要按所培養(yǎng)微生物對(duì)各種成分的需求確定；在加入瓊脂后，要不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。(3) 玻璃器皿的滅菌應(yīng)用高壓蒸汽滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121°C條件下，滅菌1530min。若棉塞上沾有培養(yǎng)基，易被雜菌污染，應(yīng)作廢。(4) 不加水，無(wú)從談起高壓蒸汽，還有可能損壞設(shè)備。(5) 酒精燈外焰溫度高，滅菌效果好。

8、灼燒后待冷卻再蘸取菌種，否則會(huì)燙死菌種造成實(shí)驗(yàn)失敗；菌落長(zhǎng)成后，將試管放入4C水箱中保藏。答案：(1)牛肉膏蛋白胨水無(wú)機(jī)鹽瓊脂蛋白胨、牛肉膏牛肉膏(2)比例攪拌瓊脂糊底引起燒杯破裂(3)高壓蒸汽滅菌鍋100121C1530min廢棄(4)適量水(5)外冷卻43解析：從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌，需用選擇性培養(yǎng)基，唯一的氮源是尿素。接種過(guò)程中，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法兩種方法。每次劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落。操作的第一步和最后一步需灼燒接種環(huán)的目的分別是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基、以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染和感染操作者。答案：(1)尿素選擇(2)防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)(3)稀釋涂布平板第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其他微生物而污染培養(yǎng)基，每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落需要。目的是防止菌種對(duì)環(huán)境造成污染和感染操作者4解析：分離自生固氮微生物，應(yīng)用無(wú)