G試驗和GM試驗-原

1、G test and GM test一、血清G試驗二、血清GM試驗三、肺泡灌洗液GM試驗主 要 內(nèi) 容血清G試驗原理血清G試驗的臨床價值血清G試驗檢測方法血清G試驗假陽性的情況血清G試驗假陰性的情況血清G試驗的優(yōu)勢和局限一、血清G試驗1.1 血清G試驗原理 G試驗檢測的是真菌的細胞壁成分-1,3-D-葡聚糖（BG），人體的吞噬細胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液中含量增高。 定植時BG很少釋放入血，因此可有助于鑒別真菌侵襲與定植。 -(1,3)-D-葡聚糖細胞核 1 ,3-D 葡聚糖為真菌細胞壁成分,適用于除隱球菌和接合菌（毛霉菌）外的所有深部真菌感染的早期診斷，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不

2、能確定菌種。 診斷侵襲性真菌感染（如侵襲性念珠菌病、侵襲性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等）的方法之一。1.2 血清G試驗的臨床價值1.3 血清G試驗檢測方法 Fungitec G test 陽性閾值為20ng/L 敏感性67-100% 特異性84-100% Glucatell test 陽性閾值為60ng/L或80ng/L 敏感性70-80% 特異性90%左右 使用纖維素膜進行血透，標本接觸過紗布或其他含有葡聚糖的材料； 靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品； 標本中存在脂多糖； 操作者處理標本時存在污染； 使用多糖類抗癌藥物； 放化療造成的粘膜損傷導致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道

3、進入血液； 服用多粘菌素,厄他培能,頭孢噻肟、吡肟, 磺胺也會不同程度引起假陽性。1.4 血清G試驗假陽性的情況 隱球菌具有厚壁包膜，生長緩慢，導致假陰性； 局灶性曲菌病，BG很少釋放入血； 抗真菌藥物的使用。1.5 血清G試驗假陰性的情況 優(yōu)勢： 鑒別侵襲性感染與定植； 不受機體免疫狀態(tài)影響，早于臨床診斷平均4天；是早期真 菌感染的敏感生物標志。 局限： 不能區(qū)分真菌的種類。1.6 血清G試驗的優(yōu)勢和局限血清GM試驗原理血清GM試驗的臨床價值血清GM試驗檢測方法血清GM試驗假陽性的情況血清GM試驗假陰性的情況血清GM試驗的優(yōu)勢和局限二、血清GM試驗 GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖（glacto

4、mannan，GM），主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷； 半乳甘露聚糖是廣泛存在于曲霉和青霉細胞壁的一種多糖，菌細胞壁表面菌絲生長時，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原； 檢測法是一種微孔板雙抗體夾心法，采用小鼠單克隆抗體EBA-2，檢測人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。2.1 血清GM試驗的原理 曲菌定植時極少釋放入血，因此有助于鑒別侵襲與定植； GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度； 連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測； 在造血干細胞移植患者中的診斷敏感性高； 參考值：I0.5為陽性。2.2 血清GM試驗的臨床價值 使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦； 新生兒和兒童（

5、雙歧桿菌定植、食用乳制品）； 血液透析； 自身免疫性肝炎等； 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。2.3 血清GM試驗假陽性的情況 釋放入血循環(huán)中的曲霉GM并不持續(xù)存在而是會很快清除； 以前使用了抗真菌藥物； 病情不嚴重； 非粒細胞缺乏的患者。 2.4GM試驗假陰性的情況 優(yōu)勢： 鑒別曲霉菌侵襲性感染與定植； 早于臨床癥狀和影像學異常1周； GM診斷侵襲性曲霉感染的敏感度高于G試驗； 血清中存在時間較短，可作為療效監(jiān)測。 局限： 不能區(qū)分曲霉菌的種類。2.5 血清GM試驗的優(yōu)勢和局限G試驗和GM試驗的聯(lián)合使用G G試驗試驗GMGM試驗試驗種屬種屬念珠菌屬念珠菌屬鐮刀菌屬鐮刀菌屬隱球菌屬隱球菌屬

6、曲霉菌屬曲霉菌屬青霉青霉/ /擬青霉擬青霉接合菌綱接合菌綱同時測定同時測定G G試驗和試驗和GMGM試驗有助于早期診斷侵襲性真菌感染！試驗有助于早期診斷侵襲性真菌感染！ 血液病患者中IPA診斷價值（回顧性、前瞻性）； 重癥COPD患者合并IPA的診斷價值； 綜合ICU中重癥患者IPA的診斷價值。三、肺泡灌洗液（BAL）的GM試驗 回顧性分析99名血液病患者，其中58名確診或臨床診斷IPA者。所有患者的BALF樣本均用Platelia（雙夾心酶聯(lián)免疫吸附的方法檢測GM水平的試劑盒）檢測。 結果顯示，與培養(yǎng)法（50%）和顯微鏡法（53.3%）相比，BALF的GM檢測法敏感性更高91.3%，光密度（

7、OD）臨界值1.0，陽性、陰性預測值分別為76%和96%（OD臨界值1.0）。 中性粒細胞減少患者和未見減少者的平均OD臨界值無差異。 在接受預防性抗真菌治療的患者中，GM檢測法敏感性下降顯著。Bronchoalveolar lavage fluid galactomannan for the diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis in patients with hematologic diseasesClin Infect Dis. 2009 Dec 1;49(11):1688-93. 3.1 3.1 文獻一文獻一3.1 文獻一：研究結

8、果 目的：前瞻性的病例對照研究，以確診或臨床診斷的侵襲性肺曲霉菌?。↖PA）血液病患者VS 不符合確診或者擬診IPA診斷標準的血液病患者組以及無曲霉感染證據(jù)的非血液病患者組。 結果：10例病例組VS 52例對照組，病例組BAL的GM試驗OD值明顯高于對照組，通過ROC分析，合適的OD界值點為1.1，具有98.1%的特異性和100%的敏感性。Galactomannan testing of bronchoalveolar lavage fluid is useful for diagnosis of invasive pulmonary aspergillosis in hematology p

9、atients.BMC Infect Dis. 2010 Mar 3;10:44.3.1 3.1 文獻二文獻二 明確肺泡灌洗液中GM檢測在重癥慢性阻塞性肺疾?。–OPD）合并侵襲性肺曲霉菌病中的臨床價值。 結果:(1) 50例重癥COPD患者中有34例行纖維支氣管鏡檢查并獲取BALF標本，IPA臨床診斷9例，疑診6例，定植2例，對照組17例；(2)根據(jù)ROC曲線，當BALF中GM分光光度比值以0.795為界值時其IPA診斷靈敏度為88.9%，特異度為95.1%，陽性預測值為100%，陰性預測值為93.7%。 支氣管肺泡灌洗液半乳甘露聚糖檢測在重癥COPD合并侵襲性肺曲霉菌病中的臨床價值2010

10、年危重癥醫(yī)院全國會議年危重癥醫(yī)院全國會議3.2 3.2 文獻三文獻三 目的：比較肺泡灌洗液GM試驗和血清GM試驗及G試驗對重癥患者肺侵襲性曲霉菌病的診斷效度。 入組：51人納入研究，9例侵襲性曲霉菌?。↖A）（4例確診，5例臨床診斷），3例肺孢子菌肺炎（PJP），1例混合IA和PJP。A prospective comparison of galactomannan in bronchoalveolar lavage fluid for the diagnosis of pulmonary invasive aspergillosis in medical patients under intensive care: comparison with the diagnostic performance of galactomannan and of (1 3) d-glucan chromogenic assay in serum samplesClin Microbiol Infect 2011; 17: 105310603.3 3.3 文獻四文獻四3.3 文獻四：研究結果All IAPr