柴胡檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、柴胡檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼：S0P-QC-ZJ-3013-02 題 目 柴胡檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程制定部門：質(zhì)量檢驗(yàn)中心頒發(fā)部門：質(zhì)量管理部分發(fā)部門：質(zhì)量管理部、質(zhì)量檢驗(yàn)中心制定人： 日期: 年 月 日 審核人： 日期: 年 月 日批準(zhǔn)人： 日期： 年 月 日生效日期: 年 月 日變更歷史：1.2003年3月制定； 2.2005年7月執(zhí)行中國藥典2005年版第一次修訂； 3.2010年10月執(zhí)行中國藥典2010年版第二次修訂。 目 的：建立柴胡檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。規(guī)范檢驗(yàn)操作，確保柴胡質(zhì)量。適用范圍：適用于柴胡的檢驗(yàn)。責(zé) 任 者：質(zhì)量管理部經(jīng)理、質(zhì)檢中心主任、質(zhì)量檢驗(yàn)員。內(nèi) 容： 1品名：柴胡 2取

2、樣：按藥材和飲片取樣標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6065）取樣 3檢驗(yàn)依據(jù)：柴胡內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（STP-QS-ZJ-3124）4性狀 4.1北柴胡：取本品，在明亮處用肉眼觀察，呈圓柱形或長圓錐形，尺量，長615cm，直徑 0.30.8cm，根頭膨大，頂端殘留315個(gè)莖基或短纖維狀葉基，下部分枝。表面黑褐色或淺棕色，具體縱皺紋、支根痕及皮孔。質(zhì)硬而韌，不易折斷，斷面顯纖維性，皮部淺棕色，木部黃白色。氣微香，味微苦。4.2南柴胡：取本品，在明亮處用肉眼觀察，根較細(xì)，圓錐形，頂端有多數(shù)細(xì)毛狀枯葉纖維，下部多不分枝或稍分枝。表面紅棕色或顯黑棕色，靠近根頭處多具細(xì)密環(huán)紋。質(zhì)稍軟，易折斷，斷面略平坦，

3、不顯纖維性。具敗油氣。 5 鑒別 5.1 儀器：超聲波清洗機(jī)、電子天平、薄層噴霧氣壓泵、三用紫外分析儀 5.2試劑與試液 5.2.1 試劑：甲醇、乙酸乙酯、乙醇。 5.2.2試液2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液：量取28.8ml98%濃硫酸，緩緩加入77ml水中，邊加邊攪拌，放冷后即為40%硫酸溶液；再將稱取的2g對二氨基苯甲醛加入，攪拌使溶解成100ml即得。5.3對照品與對照藥材：柴胡皂苷a對照品、柴胡皂苷d對照品、柴胡對照藥材5.4操作方法5.4.1取本品粉末0.5g，置50ml具塞錐形瓶中加甲醇20 ml，密塞，超聲處理10分鐘，濾過，濾液置蒸發(fā)皿中濃縮至約5ml，作為供試品溶液。

4、另取北柴胡對照藥材0.5g，置50ml具塞錐形瓶中加甲醇20 ml，密塞，超聲處理10分鐘，濾過，濾液置蒸發(fā)皿中濃縮至約5ml，同法制成對照藥材溶液。再取柴胡皂苷a、柴胡皂苷d對照品，加甲醇制成每1 ml各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液。按薄層色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6039）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5µl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8：2：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，置已升溫至60電熱恒溫烘箱中，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在對照藥材和對照品

5、色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。6檢查6.1水分：按水分測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6020）烘干法測定，不得過10.0%。6.1.1儀器：鼓風(fēng)電熱恒溫干燥箱、電子天平。6.1.2操作方法：接通電子天平電源，啟動電子天平，使電子天平預(yù)熱30分鐘。取潔凈的稱量瓶，置烘箱內(nèi)100105干燥5小時(shí)，取出，置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量，再置烘箱內(nèi)100105干燥1小時(shí)，取出置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下為止。供試品適量迅速粉碎為最粗粉，取約25g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm。精密稱定，記

6、錄數(shù)據(jù)；打開瓶蓋置熱風(fēng)循環(huán)烘箱中，在100105干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定；再在上述溫度干燥1小時(shí) ，冷卻，稱重，并記錄數(shù)據(jù)，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算出供試品中含水量(%)。6.2總灰分：按灰分測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6016)總灰分測定法測定，不得過8.0%。6.2.1儀器：節(jié)能電阻爐、電子天平、坩鍋。6.2.2操作方法：接通電子天平電源，啟動電子天平，使電子天平預(yù)熱30分鐘。取潔凈的坩堝，置節(jié)能電阻爐內(nèi)，將坩堝蓋斜蓋于坩堝上，經(jīng)加熱至600熾灼約1小時(shí)，停止加熱，待節(jié)能電阻爐溫度冷卻至約300，取出坩堝，置

7、干燥器內(nèi)，蓋好坩堝蓋，放冷至室溫，精密稱定重量，再以同樣條件重復(fù)操作，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下為止。取本品粉碎，能通過二號篩并混合均勻的粉末35g，置熾灼至恒重的坩堝中，在電子天平上精密稱定，放入節(jié)能電阻爐內(nèi)，緩緩熾熱，至完全炭化呈黑色，逐漸升高溫度至500600，停止加熱，待節(jié)能電阻爐溫度冷卻至約300，取出觀察 ，直至完全灰化，取出坩堝，置干燥器內(nèi)，蓋好坩堝蓋，放冷至室溫，精密稱定重量；再以同樣條件重復(fù)操作，直至連續(xù)兩次熾灼后稱重的差異在0.3mg以下為止。并記錄數(shù)據(jù)。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中總灰分的含量。 6.3酸不溶性灰分：按灰分測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-

8、ZJ-6016)酸不溶性灰分測定法測定，不得過3.0%。6.3.1儀器：節(jié)能電阻爐、電子天平、坩鍋6.3.2試液稀鹽酸：取鹽酸234ml,加水稀釋至1000ml，即得。（含鹽酸應(yīng)為9.5%10.5%） 稀硝酸 ：取硝酸105ml,加水稀釋至1000ml，即得。（含硝酸應(yīng)為9.5%10.5%） 硝酸銀試液：取用硝酸銀滴定液（0.1mol/L） 。6.3.3取上項(xiàng)所得灰分，在坩堝中加入稀鹽酸10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，向坩堝內(nèi)加入熱水，洗滌坩堝內(nèi)的殘?jiān)?，洗液用上述無灰濾紙濾過，如此反復(fù)，直至坩堝內(nèi)無可見殘?jiān)?。取最后一次?/p>

9、液1ml，置小試管中，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸銀試液，若不生成白色凝乳狀沉淀，濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，放入節(jié)能電阻爐內(nèi)，緩緩熾熱，至完全炭化呈黑色，逐漸升高溫度至500600，停止加熱，待節(jié)能電阻爐溫度冷卻至約300，取出觀察 ，直至完全灰化，取出坩堝，置干燥器內(nèi)，蓋好坩堝蓋，放冷至室溫，精密稱定重量，再以同樣條件重復(fù)操作，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下為止。并記錄數(shù)據(jù)。根據(jù)殘?jiān)亓浚?jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量（%）。 6.4浸出物：按浸出物測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6015）項(xiàng)下的熱浸法測定，用乙醇作溶劑，不得少于11.0%。 6.4.1儀器：鼓風(fēng)電熱

10、恒溫干燥箱、 電子天平、電子恒溫水浴鍋。 6.4.2試劑：乙醇 6.4.3操作方法：接通電子天平電源，啟動電子天平，使電子天平預(yù)熱30分鐘。取潔凈的蒸發(fā)皿，置烘箱內(nèi)100105干燥1小時(shí)，取出，置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量，再置烘箱內(nèi)100105干燥1小時(shí)，取出置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下為止。 取樣品適量粉碎能通過二號篩并混合均勻的供試品約4g，置250ml的磨口錐形瓶中，精密加乙醇100ml，密塞，稱定重量，靜置1小時(shí)后連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時(shí)。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重

11、量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于100105干燥3小時(shí) ，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。并記錄數(shù)據(jù)。除另有規(guī)定外，以干燥品計(jì)算供試品浸出物的含量。 6.5二氧化硫殘留量：按二氧化硫殘留量測定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6062）測定，不得過150mg/kg。6.5.1儀器：SO2測定裝置（1000ml）、電熱套、10ml棕色滴定管、250ml錐形 瓶、磁力攪拌器、100ml量筒。 6.5.2試液6mol/L鹽酸溶液：取鹽酸54ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。淀粉指示液：本液應(yīng)臨用新制。取可溶性淀粉0.5

12、g，加水5ml攪勻后，緩慢傾入100ml沸水中，隨加隨攪拌繼續(xù)煮沸2分鐘，放冷，傾取上層清液，即得。0.01mol/L碘滴定液： 6.5.3 儀器裝置：A為1000ml兩頸圓底燒瓶；B為豎式回流冷凝管；C 為（帶刻度)分液漏斗；D 為連接氮?dú)饬魅肟?；E 為二氧化硫氣體導(dǎo)出口； 6.5.4操作方法： 取藥材細(xì)粉約10g，精密稱定W，置兩頸圓底燒瓶中，加水300400ml（應(yīng)加水至沒過氮?dú)鈱?dǎo)氣管的下端），取6mol/L鹽酸溶液10ml加入帶刻度分液漏斗中。錐形瓶里加入水125ml和淀粉指示液1ml作為吸收液，置于磁力攪拌器上不斷攪拌。打開冷凝管，將冷凝管的上端口處連接一橡膠導(dǎo)氣管置于錐形瓶內(nèi)液面以

13、下。連接導(dǎo)氣管入口。開通氮?dú)?，調(diào)節(jié)適宜的氣體流量（氮?dú)饬魉偌s為0.2L/min,至蒸餾瓶內(nèi)有氣泡均勻排出）。打開帶刻度分液漏斗的活塞，使鹽酸溶液10ml流入燒瓶中。給兩頸燒瓶內(nèi)的溶液加熱至沸，并保持微沸約3分鐘后開始用碘滴定液（0.01mol/L）滴定，吸收液置于磁力攪拌器上不斷攪拌，至吸收液顯藍(lán)色或藍(lán)紫色持續(xù)30秒鐘不完全消褪，記錄樣品消耗滴定液體積A；并用空白試驗(yàn)校正，記錄消耗滴定液體積B。每1ml的碘滴定液（0.01mol/L）相當(dāng)于0.6406mg的SO2。C為碘滴定液濃度的校正因子 7 含量測定：北柴胡 按高效液相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6041）測定。 7.1儀器：

14、高效液相色譜儀、電子天平、超聲波清洗機(jī)。 7.2試劑與試液：7.2.1試劑：乙腈、甲醇7.2.2試液5%濃氨試液：取濃氨溶液5ml，加水使成1000ml，即得。7.3對照品：柴胡皂苷a、柴胡皂苷d對照品7.4操作方法 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑：以乙腈為流動相，以水為流動相，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長為210nm。理論板數(shù)按柴胡皂苷a峰計(jì)算應(yīng)不低于10000。 時(shí)間(分鐘)流動相 A(%)流動相B05 025 9090505 59010對照品溶液的制備 取柴胡皂苷a對照品、柴胡皂苷d對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a0.4mg（C對a）、柴胡皂苷d0.5mg（C對d）的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備 取本品粉末（過四號篩）約0.5g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，加入含5%濃氨試液的甲醇溶液25ml，密塞，30水溫超聲處理（功率200W，頻率40kHZ）30分鐘，濾過，用甲醇20ml分兩次洗滌容器及藥渣，洗液