實(shí)習(xí)二 Vc含量的測定綜述.

1、實(shí)習(xí)二 果蔬中還原性維生素果蔬中還原性維生素C C的含的含量測定量測定 l 維生素維生素C C是一種己糖醛基酸，有抗壞血病的作是一種己糖醛基酸，有抗壞血病的作用，所以又稱作抗壞血酸。維生素用，所以又稱作抗壞血酸。維生素C C廣泛存在于植廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。豐富。l 維生素維生素C C具有較強(qiáng)的還原性，對(duì)光敏感，氧化具有較強(qiáng)的還原性，對(duì)光敏感，氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性。

2、進(jìn)一步水解則生成。進(jìn)一步水解則生成2 2，3 -3 -二酮古樂糖酸，失去生二酮古樂糖酸，失去生理作用。理作用。目的目的學(xué)習(xí)和掌握用學(xué)習(xí)和掌握用2,6-2,6-二氯酚靛酚滴定法測定植二氯酚靛酚滴定法測定植物材料中抗壞血酸含量的原理與方法。物材料中抗壞血酸含量的原理與方法。原理原理 2,6- 2,6-二氯酚靛酚是一種染料，在堿性溶液中呈藍(lán)色二氯酚靛酚是一種染料，在堿性溶液中呈藍(lán)色，在酸性溶液中呈紅色?？箟难峋哂袕?qiáng)還原性，能，在酸性溶液中呈紅色?？箟难峋哂袕?qiáng)還原性，能使使2,6-2,6-二氯酚靛酚還原褪色，其反應(yīng)如下：二氯酚靛酚還原褪色，其反應(yīng)如下：CCCCCHCH2OHOOHOHHOHONO-

3、OC lC lNO HOC lC l+（ 藍(lán) 色 ）OH-H+抗 壞 血 酸2,6-二 氯 酚 靛 酚（ 紅 色 ）CCCCCHCH2OHOOOHOHONO HOHC lC lH還 原 型 2,6-二 氯 酚 靛 酚（ 無 色 ）+脫 氫 抗 壞 血 酸當(dāng)用當(dāng)用2,6-2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗壞血酸的酸性溶液二氯酚靛酚滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時(shí)，滴下的時(shí)，滴下的2,6-2,6-二氯酚靛酚被還原成無色；二氯酚靛酚被還原成無色；當(dāng)溶液中的抗壞血酸全部被氧化成脫氫抗壞血酸當(dāng)溶液中的抗壞血酸全部被氧化成脫氫抗壞血酸時(shí)，滴入的時(shí)，滴入的2,6-2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈現(xiàn)紅色。二氯酚靛酚立即使

4、溶液呈現(xiàn)紅色。因此用這種染料滴定抗壞血酸至溶液呈淡紅色即因此用這種染料滴定抗壞血酸至溶液呈淡紅色即為滴定終點(diǎn)，根據(jù)染料消耗量即可計(jì)算出樣品中為滴定終點(diǎn)，根據(jù)染料消耗量即可計(jì)算出樣品中還原型抗壞血酸的含量。還原型抗壞血酸的含量。1 1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料取新鮮水果（蔬菜）樣品取新鮮水果（蔬菜）樣品100g100g，加，加100g 2100g 2草酸溶草酸溶液液，用研缽制成勻漿。過濾，棄濾渣，稱取，用研缽制成勻漿。過濾，棄濾渣，稱取10g10g勻勻漿，移入漿，移入100mL100mL容量瓶，用容量瓶，用1 1草酸定容至刻度，草酸定容至刻度，搖勻后靜置備用。搖勻后靜置備用。實(shí)驗(yàn)材料、主要儀器和試劑實(shí)驗(yàn)材

5、料、主要儀器和試劑2 2儀器儀器 （1 1）電子天平）電子天平 （2 2）研缽）研缽 （3 3）容量瓶（）容量瓶（100mL100mL） （4 4）刻度吸管（）刻度吸管（1mL1mL，5mL5mL，10mL10mL） （5 5）錐形瓶（）錐形瓶（250mL250mL） （6 6）滴定管）滴定管3 3試劑試劑（1 1）2 2草酸草酸（2 2）1 1草酸草酸（3 3）標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液（）標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液（0.1mg/mL0.1mg/mL）（4 4）2,6-2,6-二氯酚靛酚溶液二氯酚靛酚溶液（5 5）1%1%的淀粉溶液的淀粉溶液（6 6）0.1000%mol/L0.1000%mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)

6、備液碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（7 7）0.001%mol/L0.001%mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液 （8 8）6%6%的的KIKI溶液溶液1.2,6-1.2,6-二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定：二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定：(1)(1)抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定：確吸取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定：確吸取2.0mL2.0mL抗壞抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)液于血酸標(biāo)準(zhǔn)液于100mL100mL錐形瓶中，加錐形瓶中，加5mL 15mL 1草酸溶草酸溶液，液，6%6%的的KIKI溶液溶液0.5ml0.5ml，1%1%的淀粉溶液的淀粉溶液2 2滴，再以滴，再以0.001%mol/L0.001%mol/L碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液滴至淡藍(lán)色。碘酸鉀

7、標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液滴至淡藍(lán)色。 抗壞血酸濃度（抗壞血酸濃度（mg/mlmg/ml）= =（耗（耗0.001%mol/L0.001%mol/L碘酸鉀碘酸鉀mlml數(shù)數(shù)* *0.0880.088* *6 6）/2/2操作步驟操作步驟(2)(2)二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定：吸取已標(biāo)定過的抗壞二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定：吸取已標(biāo)定過的抗壞血酸溶液血酸溶液5ml5ml及及1%1%的草酸的草酸5ml5ml于錐形瓶中，以待標(biāo)于錐形瓶中，以待標(biāo)定的定的2,6-2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡紅色，在二氯酚靛酚溶液滴定至溶液呈淡紅色，在1515內(nèi)不褪色為止。內(nèi)不褪色為止。 1ml1ml染料相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)（記作染料相當(dāng)于

8、抗壞血酸的毫克數(shù)（記作T T）= =（壞血酸濃度（壞血酸濃度（mg/mlmg/ml）* *5 5）/ /滴定消耗染料毫升數(shù)滴定消耗染料毫升數(shù) 2 2樣品測定：準(zhǔn)確吸取樣品提取液（上清液或?yàn)V液樣品測定：準(zhǔn)確吸取樣品提取液（上清液或?yàn)V液），每份），每份5.0mL5.0mL，分別放入錐形瓶中，按上面的操，分別放入錐形瓶中，按上面的操作進(jìn)行滴定并記錄所用染料溶液體積（作進(jìn)行滴定并記錄所用染料溶液體積（mLmL）, ,平行平行操作三次，取平均值。操作三次，取平均值。 V V 滴定樣品提取液消耗染料平均值（滴定樣品提取液消耗染料平均值（mLmL） T T 每每mLmL染料所能氧化抗壞血酸染料所能氧化抗壞血酸mgmg數(shù)數(shù) G G 勻漿總重量（勻漿總重量（g g） G1 G1 制備提取液取用勻漿重量（制備提取液取用勻漿重量（g g） A A 樣品提取液定容體積（樣品提取液定容體積（mLmL） A1 A1 滴定時(shí)吸取樣品提取液體積（滴定時(shí)吸取樣品提取液體積（mLmL） W W 樣品重量（樣品重量（g g）100AGWAGV11100/樣品）抗壞血酸含量（gmg結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算注意1.操作要盡可能快操作要盡可能快，并防止與鐵銅器具接觸，并防止與鐵銅器具接觸，以減少以減少VC的氧化的氧化。2.樣品提取液避免強(qiáng)光直射。樣品提取液避免強(qiáng)光直射。3. 草酸具有抑制氧化酶，保護(hù)草酸具有抑制氧化酶，保護(hù)V V