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1、華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生理學(xué)實驗報告 專業(yè) 生物技術(shù) 班級 生實1301 姓名 陳云豐 學(xué)號 U201312485 實驗一 蛙離體心臟灌流一、實驗?zāi)康募耙?1、 學(xué)習(xí)離體蛙心灌流法。 2、 觀察Na+,K+,Ca2+及腎上腺素,乙酰膽堿對離體心臟活動的影響。 二、實驗原理 心臟的正常節(jié)律性活動需要一個適宜的內(nèi)環(huán)境(如Na+,K+,Ca2+等的濃度及比例、pH值和溫度),而內(nèi)環(huán)境的變化則直接影響到心臟的正常節(jié)律性活動。在體心臟還受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)的雙重支配,交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素,使心肌收縮力加強,傳導(dǎo)速度加快,心率加快;迷走神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿,使心肌收縮力減弱,心肌傳導(dǎo)速度
2、減慢,心率減慢。將失去神經(jīng)支配的離體心臟保持于適宜的理化環(huán)境中(如任氏液),在一定時間內(nèi)仍能產(chǎn)生自動節(jié)律性興奮和收縮。離體心臟脫離了機體的神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響,可以通過改變灌流液的某些成分,觀察其對心臟活動的作用。心肌細(xì)胞的自律性、興奮性、傳導(dǎo)性及收縮性,都與鈉、鉀及鈣等離子有關(guān)。外源性給予去甲腎上腺素或乙酰膽堿可產(chǎn)生類似心交感神經(jīng)或迷走神經(jīng)興奮時對心臟的作用。 三、實驗對象、器材及藥品實驗對象:青蛙實驗器材:計算機生物信號采集與處理系統(tǒng)、張力換能器、蛙類常用手術(shù)器械一套、玻璃分針、蛙板、蛙釘、蛙心插管、蛙心夾、燒杯、細(xì)線、滴管等實驗藥品:任氏液、一定濃度的NaCl、CaCl2、K
3、Cl溶液、腎上腺素、乙酰膽堿4、 實驗方法與步驟1、 斯氏蛙心插管法 (1) 青蛙雙毀髓后背位置于蛙板上,打開胸腔,暴露心臟。仔細(xì)識別心臟周圍的大血管。在主動脈干下方穿雙線,一條在左主動脈上端結(jié)扎作插管時牽引用;另一根在動脈球上方打一活結(jié)備用(用以結(jié)扎和固定插管)。左手提起左主動脈上方的結(jié)扎線,右手持眼科剪在左主動脈根部(動脈球前端)沿向心方向剪一斜口,將盛有少許任氏液、大小適宜的蛙心插管由此開口處輕輕插入動脈球。當(dāng)套管尖端到達(dá)動脈圓錐基部時,將套管稍稍后退,使尖端向動脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進(jìn),經(jīng)主動脈瓣插入心室腔內(nèi)。(可見套管中血液沖入套管,并使液面隨心臟搏動而上下移動,表明操作成功
4、)。用滴管吸去套管中的血液,更換新鮮任氏液。將動脈球上已準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊,并固定于插管側(cè)面的鉤上,以免蛙心插管滑出心室。剪斷結(jié)扎線上方的血管,輕輕提起插管和心臟,在左右肺靜脈和前后腔靜脈下引一細(xì)線并結(jié)扎,于結(jié)扎線外側(cè)剪去所有相連的組織則得到離體蛙心。用任氏液反復(fù)換洗插管內(nèi)的任氏液,直到插管中無殘留血液為止。(2) 將插好離體心臟的套管固定在支架上,用連有細(xì)線的蛙心夾夾住少許心尖部肌肉,將細(xì)線以適宜的緊張度與張力換能器相連。張力傳感器的輸出線與計算機生物信號采集處理系統(tǒng)的輸入通道相連。2、 實驗步驟 (1)記錄心臟在只有任氏液時的收縮曲線,觀察心率及收縮幅度,并將其作為正常對照。 (2)Na+的
5、作用:用吸管吸出插管中的任氏液后,換以等量的NaCl溶液,記錄并觀察心跳的變化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即將插管內(nèi)液體吸出,并以等量任氏液換洗23次,至心跳恢復(fù)正常。 (3)Ca2+的作用:將12滴CaCl2溶液加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 (4)K+的作用:將12滴KCl溶液加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 (5)腎上腺素的作用:將12滴腎上腺素加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。 (6)乙酰膽堿的作用:將1
6、2滴乙酰膽堿加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時,應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。五、實驗結(jié)果及分析1、 正常搏擊曲線圖 現(xiàn)象:正常情況下,蛙心以一定頻率跳動2、 Na+對蛙類離體心臟活動的影響現(xiàn)象:心搏曲線基線下降,說明Na+對蛙類心臟的收縮性起抑制作用,使心臟的收縮力降低。同時心搏曲線由密變疏,說明心率減慢。 解釋:心肌細(xì)胞的興奮-收縮偶聯(lián)在很大程度上依賴于胞外內(nèi)流的Ca2+,而當(dāng)Na+濃度升高時,Na+與Ca2+競爭性地與肌鈣蛋白結(jié)合,使得Ca2+與肌鈣蛋白的結(jié)合能力降低,從而使鈣內(nèi)流減少,因此心肌收縮力減弱。同時K+濃度大大下降,無法維持胞內(nèi)高K+的狀態(tài),使得
7、靜息電位進(jìn)一步增大,出現(xiàn)超極化,細(xì)胞需要更高的時間到達(dá)閥值,因此心率下降。3、Ca2+對蛙類離體心臟活動的影響 現(xiàn)象:心搏曲線基線上升,說明Ca2+對蛙類心臟的收縮性起促進(jìn)作用,使心臟的收縮力增強。且心臟跳動頻率加快,幅度變大。解釋:心肌興奮-收縮偶聯(lián)的媒介是Ca2+ ,正常心率細(xì)胞Ca2+在胞外和終末池內(nèi)濃度較低,加入Ca2+后,胞外Ca2+濃度升高,使得細(xì)胞內(nèi)外濃度差上升,更多的Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),靜息電位上升,自動去極化的時間縮短,心率加快,另外更多Ca2+的與肌高蛋白結(jié)合,加強了肌肉收縮能力。4、K+對蛙類離體心臟活動的影響 現(xiàn)象:加入K+后,心臟停跳 解釋:細(xì)胞外的K+升高時,細(xì)胞膜
8、對K+的通透性增強,心室肌細(xì)胞復(fù)極化過程加快,平臺期說縮短,不應(yīng)期也說縮短。對心肌細(xì)胞說所功能有所抑制作用,減弱了心肌收縮能力。5、 腎上腺素對蛙類離體心臟活動的影響 現(xiàn)象:心搏曲線呈上升趨勢,說明腎上腺素對蛙類心臟的收縮性起促進(jìn)作用,使心臟的收縮力增強。心跳頻率加快,幅度變大。 解釋:腎上腺素是一種兒茶酚胺,能激活心肌蛋白細(xì)胞膜上的受體,cAMP生成增加,從而增加心肌細(xì)胞膜對Na+和Ca2+ 的通透性,降低膜對K+的通透性,從而促進(jìn)鈣通道開放,加速鈣內(nèi)流;并促進(jìn)肌漿網(wǎng)鈣池釋放儲存的Ca2+;還能促進(jìn)ATP放能,增加心肌的收縮能力。6、 乙酰膽堿對蛙類離體心臟活動的影響 現(xiàn)象:心搏曲線的基線呈
9、非常明顯的下降趨勢,心肌收縮力減弱,心肌傳導(dǎo)速度減慢,心率減慢,最終不可逆停跳。 解釋:乙酰膽堿(ACh)可與心肌細(xì)胞膜上的M2膽堿能受體結(jié)合,增加了心肌細(xì)胞膜對K+通透性,導(dǎo)致鉀離子外流,靜息電位絕對值升高,需要更多的時間到達(dá)閾值電位,因此心率變慢。另外乙酰膽堿可以抑制鈣離子的內(nèi)流,這樣胞內(nèi)鈣離子減少,心肌收縮減弱。六、實驗總結(jié) 此次實驗進(jìn)行了蛙心離體灌流,個人認(rèn)為實驗主要難點在于將插管插入心臟并綁好,實驗過程中數(shù)次脫落,另外在添加各種試劑時應(yīng)及時清除以免對蛙心造成不可逆影響,實驗中曾因加入k+后未及時清除至心臟停跳。實驗二 刺激頻率對骨骼肌收縮的影響一、實驗?zāi)康募耙?#160;1、學(xué)習(xí)蛙
10、類動物雙毀髓的方法 2、掌握制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的操作技術(shù),為此后有關(guān)的神經(jīng)肌肉實驗打下基礎(chǔ)。 二、實驗原理 蛙類的一些基本生命活動和生理功能與恒溫動物相似,若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個小時內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激,可在神經(jīng)和肌肉上產(chǎn)生一個動作電位,肉眼可看到肌肉收縮和舒張一次,表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在機能學(xué)實驗中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性,刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等。 三、實驗對象、器材及藥品實驗對象:蛙實驗藥品:任氏液實驗器材: 普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭
11、無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、電子刺激器。五、實驗方法及步驟1、雙毀髓:左手握蟾蜍,背部向上。用食指按壓其頭部前端,拇指壓住軀干的背部,使頭向前俯;右手持毀髓針,由兩眼之間中線向后方劃觸,觸及兩耳后腺之間的凹陷處即是枕骨大孔的位置。將毀髓針由凹陷處垂直刺入枕骨大孔,然后針尖向前刺入顱腔,在顱腔內(nèi)攪動,以毀腦組織。再將毀髓針退至枕骨大孔,針尖轉(zhuǎn)向后方,與脊柱平行刺入椎管,以搗毀脊髓。脊髓徹底搗毀時,可看到蟾蜍后肢突然蹬直,然后癱軟,此時的動物為雙毀髓動物。2、剝制后肢標(biāo)本:左手持手術(shù)鑷提起兩前肢之間背部的皮膚,右手持手術(shù)剪橫向剪斷皮膚,然后往
12、后肢方向撕剝皮膚。剪開腹壁肌肉,用手術(shù)鑷提起內(nèi)臟,翻向頭部,在看清支配后肢的脊神經(jīng)發(fā)出部位后,于其前方剪斷脊柱。3、 分離兩后肢:將去皮的后肢腹面向上置于解剖盤上,右手持金冠剪縱向剪開脊柱,再剪開恥骨聯(lián)合,使兩后肢完全分離。 4、分離坐骨神經(jīng):將一側(cè)后肢的脊柱端腹面向上,用玻璃分針沿脊神經(jīng)向后分離坐骨神經(jīng),股部沿腓腸肌正前方的股二頭肌和半膜肌之間的裂縫,找出坐骨神經(jīng),剪斷蓋在上方的梨狀肌,完全暴露坐骨神經(jīng),剪去支配腓腸肌之外的分支,再剪去脊柱及肌肉,只保留坐骨神經(jīng)發(fā)出部位的一小塊脊柱骨。 5、分離股骨頭:沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍的肌肉,保留股骨的后2/3,剪斷股骨。
13、6、游離腓腸?。涸陔枘c肌跟腱下穿線并結(jié)扎,提起結(jié)扎線,剪斷肌腱與脛腓骨的聯(lián)系,游離腓腸肌,剪去膝關(guān)節(jié)下部的后肢,保留腓腸肌與股骨的聯(lián)系,制備出完整的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本。標(biāo)本應(yīng)包括:坐骨神經(jīng)、腓腸肌、股骨頭和一段脊柱骨四部分。7、連接好裝置,調(diào)節(jié)適宜的靈敏度及刺激強度,開動記錄儀、分別用1 Hz、2 Hz、3 Hz、4 Hz、5 Hz等頻率去刺激坐骨神經(jīng),記錄肌肉的收縮曲線。六、實驗結(jié)果及分析 由圖可看出,在一定范圍的刺激頻率內(nèi),連續(xù)刺激刺激蟾蜍坐骨神經(jīng),隨著頻率的遞增,逐漸出現(xiàn)單收縮,不完全強直收縮到完全強直收縮的變化。蟾蜍骨骼肌出現(xiàn)完全強直收
14、縮后,不會隨著頻率的遞增而發(fā)生變化。六、實驗總結(jié) 通過此次實驗,我學(xué)會了簡單的神經(jīng)肌肉標(biāo)本制作方法,并測試了外加刺激對肌肉影響,此次實驗相對容易,但所得強直頻率低于理論值,可能原因制作過程中對肌肉造成了損傷。實驗三 小白鼠脊髓半橫切1、 實驗?zāi)康?1.學(xué)會將哺乳動物的脊髓半橫切的手術(shù)方法;2.觀察脊髓半橫切后動物對刺激的反應(yīng)。 2、 實驗原理神經(jīng)系統(tǒng)基本的活動形式是反射。簡單的反射由脊髓完成,如膝反射,而復(fù)雜的反射則涉及到大腦皮層。脊髓把感受器接受到的信息傳到大腦;大腦發(fā)出的信息又通過脊髓傳到相應(yīng)的效應(yīng)器。這種傳導(dǎo)機能主要由脊髓的白質(zhì)來完成。白質(zhì)是由神經(jīng)元發(fā)出的長突起神經(jīng)纖維組成的。脊髓中的神
15、經(jīng)纖維按不同的機能順序排列。一旦脊髓被切斷,則可導(dǎo)致切口以下相應(yīng)部位的感覺或運動功能的喪失。 3、 實驗對象、器材及藥品 實驗對象:小白鼠實驗器材:木板、手術(shù)縫針、細(xì)線、解剖刀、剪刀、柳葉刀、鑷子等實驗藥品:乙醚4、 實驗步驟1、 用乙醚麻醉小白鼠。 2、 把小白鼠俯臥和固定在木板上,剪去胸腰部背面的毛,在正中處用解剖刀縱切皮膚,畫一個1.5cm長的切口。 3、 緊貼第13節(jié)腰椎的棘突,用解剖刀切斷椎上的肌腱,并分離肌肉,暴露椎骨。 4、 用鑷子夾住第二腰椎,另一手拿剪刀剪去棘突和椎弓,暴露白色的脊髓。5、 在脊髓背面正中有一條縱向的血管,以此為標(biāo)志,用眼科手術(shù)刀將一半脊髓從中央向外側(cè)完全切斷
16、。 6、 待其蘇醒后觀察小白鼠在實驗桌上運動狀況。5、 實驗結(jié)果: 現(xiàn)象:小白鼠在運動時,與脊髓損傷同側(cè)的后肢不能運動,即小白鼠在桌面上做逆時針圓周旋轉(zhuǎn)運動。 解釋:由大腦發(fā)出的運動指令到達(dá)脊髓后,通過脊髓白質(zhì)的神經(jīng)纖維繼續(xù)向下傳送,脊髓兩側(cè)的運動神經(jīng)纖維大都在本側(cè)里行走(即不交叉到對側(cè))。在脊髓被損傷的一側(cè),運動指令無法傳到橫切以下的部位,該側(cè)后肢得不到運動指令,因而不能隨意運動;脊髓未遭橫切的一側(cè),大腦發(fā)出的運動指令,可以通過脊髓白質(zhì)的神經(jīng)纖維傳到后肢肌肉,所以這一側(cè)后肢運動如常。 六、實驗總結(jié) 此次實驗進(jìn)行了小鼠脊髓半橫切,對脊髓與運動的控制關(guān)系有了一定了解,本次實驗較好的完成了任務(wù)。實
17、驗四 心血管活動的神經(jīng)、體液調(diào)節(jié)一、 實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)直接測定和記錄家兔動脈血壓的急性實驗方法2、 觀察某些神經(jīng)、體液因素對心血管活性的影響。 2、 實驗原理 在正常生理情況下,心血管活動受神經(jīng)、體液和自身機制的調(diào)節(jié)。 心臟受交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)的支配。心交感神經(jīng)興奮時,使心率加快、心肌收縮力加強,心內(nèi)興奮傳導(dǎo)加快,心輸出量增加、動脈血壓升高。心迷走神經(jīng)興奮時,使心率減慢、心房肌收縮力減弱、房室傳導(dǎo)減慢,從而使心輸出量減少、動脈血壓下降。在神經(jīng)調(diào)節(jié)中以頸動脈竇-主動脈弓的減壓反射尤為重要,當(dāng)動脈血壓升高時,壓力感受器發(fā)放沖動增加,通過中樞反射性引起心率減慢、心肌收縮力減弱、心輸出量下降、血管舒
18、張和外周阻力降低,使血壓降低。反之,當(dāng)動脈壓下降時,壓力感受器發(fā)放沖動減少,神經(jīng)調(diào)節(jié)過程又使血壓回升。支配血管的交感縮血管神經(jīng)興奮時,使血管收縮、外周阻力增加、動脈血壓升高。 家兔的壓力感受器的傳入神經(jīng)在頸部從迷走神經(jīng)分出,自成一支,稱為減壓神經(jīng),其傳入沖動隨血壓變化而變化。 心血管活動還受腎上腺素和去甲腎上腺素等體液因素的調(diào)節(jié)。它們對心血管的作用既有共性,又有特殊性。關(guān)鍵取決于心、血管壁上哪一種受體占優(yōu)勢。腎上腺素對與受體均有激活作用,去甲腎上腺素主要激活受體而對受體作用很小,因而使外周阻力增加,動脈血壓升高,但對心臟的作用要比腎上腺素弱。 3、 實驗對象、器材及藥品實驗對象:家兔實驗器材:
19、手術(shù)臺、止血鉗、眼科剪、生物機能分析系統(tǒng)、氣管插管、動脈套管、保護(hù)電極、照明燈、紗布、棉球、細(xì)線、注射器等實驗藥品:生理鹽水、肝素、烏來糖(麻醉劑)、腎上腺素4、 實驗步驟1. 、手術(shù) (1) 取家兔一只,耳緣靜脈注射烏來糖進(jìn)行麻醉。緩慢推注,當(dāng)以止血鉗刺激家兔腿部其無反應(yīng)時,停止注射。然后將家兔背位交叉固定。 (2) 將頸部喉結(jié)下部毛剪掉,沿頸部正中線做一長約5-7cm的皮膚切口,將皮下結(jié)締組織鈍性分離,至露出氣管,穿線,用手術(shù)刀在氣管上做一橫切口,插入氣管插管,結(jié)扎。 (3) 分離頸部神經(jīng)血管:分離胸骨舌骨肌和胸骨甲狀肌及其周圍結(jié)締組織,在接近氣管外側(cè),有一條較細(xì),壁厚的血管,即為主動脈血
20、管(可看出里面血流規(guī)律性搏動)。與主動脈伴行的有兩條較粗的神經(jīng),最粗的為迷走神經(jīng),其次為交感神經(jīng),兩者之間有一條很細(xì)的神經(jīng),即減壓神經(jīng)。分離出減壓神經(jīng),迷走神經(jīng),主動脈血管,分別穿線備用。 (4) 動脈套管插入:用注射器將肝素生理鹽水注入套管,至將其中所有空氣由插孔處排出,用肝素生理鹽水代替。注入處用止血鉗將膠管夾住。保證其中不能有空氣。準(zhǔn)備好動脈套管裝置后,用動脈夾夾住近心端,遠(yuǎn)心端動脈結(jié)扎,在兩者之間剪一小口,迅速插入動脈套管,用線將動脈插管固定于動脈內(nèi),并掛在套管上。 (5) 松開動脈夾,即可看到少量動脈血液沖入動脈套管。此時即可開始進(jìn)行試驗,記錄曲線。2、 曲線描記 (1) 描記一段正
21、常曲線,識別一級波(心波),二級波(呼吸波)。 (2) 夾閉頸總動脈 :用動脈夾夾閉右側(cè)頸總動脈1015 s,觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。(3) 牽拉頸總動脈 :手持左側(cè)頸總動脈上的遠(yuǎn)心端結(jié)扎線,向心臟方快速牽拉3 s。觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。 (4) 耳緣靜脈注射腎上腺素,觀察血壓變化。 六、 實驗結(jié)果1、正常狀態(tài)下的血壓圖描述:正常狀態(tài)下血壓頻率穩(wěn)定,呈規(guī)律性上下搏動,間隔相同,峰值適中。一級波(心搏波):由心室舒縮活動所引起的血壓波動,心縮時上升,心舒時下降,其頻率與心率一致。二級波(呼吸波):由呼吸運動所引起的血壓波動,吸氣時血壓先下降,
22、繼而上升,呼氣時血壓先上升,繼而下降,其頻率與呼吸頻率一致。2、血管收縮狀態(tài)下的血壓圖(向下拉細(xì)線): 現(xiàn)象:牽拉頸總動脈后,血壓下降,心率減慢。 解釋:牽拉頸總動脈,頸動脈竇壓力感受器興奮,發(fā)放的傳入沖動增多,到達(dá)延髓心血管中樞,使心迷走中樞的緊張性增強,而心交感中樞和交感縮血管中樞的緊張性下降,通過心迷走神經(jīng),心交感神經(jīng)和交感縮血管神經(jīng),使心臟活動減弱,心率減慢,心輸出量減少,血管舒張,外周阻力減少因而血壓下降。3、用止血夾夾住另一根頸動脈5秒,血壓圖:現(xiàn)象:夾閉另一側(cè)頸總動脈后,血壓會升高。夾閉另一側(cè)頸動脈后,管壁的被動收縮,會使頸動脈竇血壓下降,從而壓力感受器沖動減少,竇神經(jīng)傳入沖動減
23、少,使心迷走中樞抑制,心交感中樞興奮,并使縮血管中樞興奮。從而導(dǎo)致心跳的加快加強。交感神經(jīng)的興奮會使小血管收縮,從而增加回心血量,增加外周阻力,使血壓升高。4、向兔耳注射腎上腺素后的血壓圖:現(xiàn)象:注射腎上腺素后,血壓先升后降。解釋:腎上腺素可以與心肌細(xì)胞膜上的受體和血管上受體結(jié)合,由于靜脈注射以及血管上受體數(shù)量上的優(yōu)勢,注射腎上腺素后可以使全身血管廣泛收縮,從而使動脈血壓升高。激動心臟1受體,導(dǎo)致心輸出量增加,收縮壓升高,脈壓加大。但也可與2受體結(jié)合激動2骨骼肌血管,從而舒張血管使血壓下降。六、實驗總結(jié) 此次試驗我學(xué)習(xí)了直接測定和記錄家兔動脈血壓的實驗方法,并觀察某些了神經(jīng)、體液因素對心血管活
24、性的影響。本次實驗后期家兔動脈有出血現(xiàn)象發(fā)生,但血流量不大且緩慢滲出,猜想動脈夾或插管過程使血管出現(xiàn)輕微破損。實驗五 影響尿生成的因素1、 實驗?zāi)康?、學(xué)會輸尿管插管法或膀胱插管法記錄尿量。2、觀察與分析幾種因素對尿生成的影響。4、掌握氣管插管術(shù)和神經(jīng)血管分離術(shù)。二、實驗原理 尿是血液流過腎單位時經(jīng)過腎小球濾過,腎小管重吸收和分泌而形成的,凡對這些過程有影響的因素都可影響尿的生成。腎小球的濾過作用取決于腎小球的有效濾過壓,其大小取決于腎小球毛細(xì)血管血壓,血漿的膠體滲透壓和腎小囊內(nèi)壓。影響腎小管重吸收作用主要是管內(nèi)滲透壓和腎小管上皮細(xì)胞的重吸收能力,后者又為多
25、種激素所調(diào)節(jié)。三、實驗對象、器材及藥品實驗對象:家兔實驗器材:恒溫浴槽、哺乳動物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺、氣管插管、輸尿管導(dǎo)管、動脈插管、注射器及針頭、燒杯等實驗藥品:醫(yī)用酒精、生理鹽水、溫?zé)岬纳睇}水、呋塞米。四、實驗步驟1、標(biāo)本的制備 (1)取一只家兔,耳緣靜脈注射20%的烏來糖溶液進(jìn)行麻醉,待動物麻醉后仰臥固定于手術(shù)臺上。 (2)頸部手術(shù) :剪去家兔頸部的皮毛,沿頸部正中線作一長67cm的切口,用止血鉗鈍性分離皮下組織,暴露并游離氣管,并于氣管下穿線備用。分離右側(cè)的迷走神經(jīng),穿線備用,用溫生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)面。(3)尿液的收集:輸尿管插管法,沿膀胱
26、找到并分離兩側(cè)輸尿管,在靠近膀胱處穿線將它結(jié)扎;再在此結(jié)扎前約2厘米的近腎端穿一根線,在管壁剪一斜向腎側(cè)的小切口,插入細(xì)塑料導(dǎo)尿管并用線扎住固定,等待尿滴滴出,準(zhǔn)備計數(shù)。2、實驗項目(1)記錄正常情況下每分鐘尿分泌的滴數(shù)。(2)耳緣靜脈注射38的0.9%NaCl溶液20ml,觀察尿量的變化。(3)耳緣靜脈注射呋塞米半支,觀察尿量的變化。五、實驗結(jié)果與分析現(xiàn)象:在正常情況下,其尿量為1滴/5min。注射20mL38生理鹽水后,尿量增加,為25滴/5min。注射呋塞米后,尿量增加更為明顯,滴速也加快,速率約為155滴/5min。解釋:1.注射生理鹽水后,1)血漿蛋白被稀釋,血漿膠體滲透壓降低,有效
27、濾過壓升高2)血流量增大,容量感受器興奮,抑制抗利尿激素的釋放3)主動脈壓升高,主動脈壓力感受器興奮,抑制抗利尿激素的釋放4)腎小球入球動脈壓升高,入球端有效濾過壓>0,有原尿生成,有效濾過長度加長,原尿增多5)血漿晶體滲透壓降低,對滲透壓感受器刺激減弱,引起血管升壓素釋放減少,遠(yuǎn)曲小管和集合管對水的通透性降低,水的重吸收減少,尿量增多2.注射呋塞米:利尿劑,利尿作用可通過影響腎小球的過濾、腎小管的再吸收和分泌等功能而實現(xiàn),主要是影響腎小管的再吸收。利尿藥作用于腎臟,使腎小管在增加水排出的同時增加鈉的排出,達(dá)到增加尿量、消除水腫的目的。六、實驗總結(jié) 本次實驗較為成功的測得了在一些因素影響
28、下兔的尿生成量,對尿的調(diào)節(jié)方式有了一定了解,實驗中注射利尿激素后尿量顯著增加,加深了我對激素對人體作用的理解。實驗六 呼吸運動的調(diào)節(jié)一、實驗?zāi)康?、學(xué)會運用氣管插管描記呼吸流量間接反映家兔呼吸運動(呼吸頻率、節(jié)律、幅度)的 方法2、研究增大解剖無效腔、切斷頸部迷走神經(jīng)對呼吸運動的影響二實驗原理呼吸運動是呼吸肌的舒縮運動,是呼吸肌(胸壁上的肋間肌和隔?。┰谏窠?jīng)系統(tǒng)控制下進(jìn)行的有節(jié)律的收縮和舒張造成的。膈肌的收縮活動受來自中樞的傳出神經(jīng)支配,傳出沖動的節(jié)律與頻率,影響膈肌的收縮節(jié)律、頻率與強度人體及高等動物的呼吸運動所以能持續(xù)地節(jié)律性地進(jìn)行,是由于體內(nèi)調(diào)節(jié)機制的存在。體內(nèi)、外的各種刺激,可以直接作用于中樞或不同的感受器,反射性地影響呼吸運動,以適應(yīng)機體代謝的需要。肺牽張反射是保證呼吸運動節(jié)律的機制之一。三、實驗對象、器材及藥品實驗對象:家兔實驗器材:計算機生物信號采集處理系統(tǒng)、壓力換能器、保護(hù)電極、哺乳動物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺、T型氣管插管、50cm長橡皮管一條、呼吸換能器等實驗藥品:20烏來糖。4、 實驗步驟1、胸腔插管 在甲狀軟骨下第45個氣管軟骨處作一“”形切口。將T型氣管插管向肺的方向插入氣管內(nèi),用預(yù)留備用線線結(jié)扎固定。手術(shù)完畢后用紙巾擦拭手術(shù)傷口部位。2、觀察準(zhǔn)備 用皮管連接氣管插管和呼吸換能器。打開呼吸換能器,啟動計算機生物信號采集系統(tǒng),點擊“實驗
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