第七章細菌感染的檢測方法與防治原則

1、n細菌學診斷細菌學診斷檢測病原菌及其抗原、代謝檢測病原菌及其抗原、代謝產(chǎn)物或其核酸以達到診斷目的。產(chǎn)物或其核酸以達到診斷目的。n血清學診斷血清學診斷通過檢測患者血清中的特異通過檢測患者血清中的特異性抗體達到診斷目的。性抗體達到診斷目的。 二、細菌的檢測二、細菌的檢測 直接涂片鏡檢直接涂片鏡檢(痰痰/糞便糞便/拭子等拭子等)標本標本 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落 增菌增菌( (血液血液/ /腦脊液等腦脊液等) ) 涂片鏡檢涂片鏡檢 生化反應生化反應 血清學鑒定血清學鑒定 藥敏試驗藥敏試驗 動物試驗動物試驗涂片鏡檢涂片鏡檢 生化反應生化反應 血清學鑒定血清學鑒定 藥敏試驗藥敏試驗 動物試驗動物

2、試驗分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)根據(jù)營養(yǎng)根據(jù)營養(yǎng)/ /生生長條件長條件/ /菌落菌落特征初步鑒別特征初步鑒別細菌細菌涂片鏡檢涂片鏡檢( (動力動力/ /形態(tài)形態(tài)/ /大小大小/ /排列方式排列方式/ / 染色特性染色特性/ /特殊結構特殊結構) )生化試驗生化試驗(根據(jù)酶和代謝產(chǎn)物根據(jù)酶和代謝產(chǎn)物鑒別細菌鑒別細菌)動物實驗動物實驗(檢測細菌毒力檢測細菌毒力)u酶免疫技術酶免疫技術u協(xié)同凝集試驗協(xié)同凝集試驗u免疫熒光技術免疫熒光技術u對流免疫電泳對流免疫電泳u免疫印記技術免疫印記技術u核酸雜交技術核酸雜交技術uPCR技術技術u基因芯片技術基因芯片技術u氣相色譜法氣相色譜法u呼氣試驗呼氣試驗n用已知的細菌或其

3、特異性抗原去檢測用已知的細菌或其特異性抗原去檢測患者體液中有無相應抗體以及效價的患者體液中有無相應抗體以及效價的動態(tài)變化動態(tài)變化, ,作為某些傳染病的輔助診斷作為某些傳染病的輔助診斷n主要適用于抗原性較強的病原和病程主要適用于抗原性較強的病原和病程較長的傳染病的診斷較長的傳染病的診斷n因一般采取病人因一般采取病人血清血清進行試驗，故稱進行試驗，故稱血清學診斷血清學診斷. .u直接凝集實驗直接凝集實驗u補體結合實驗補體結合實驗u中和試驗中和試驗u乳膠凝集實驗乳膠凝集實驗uELISAELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗酶聯(lián)免疫吸附試驗n特異性防治是給機體注射或服用特異性防治是給機體注射或服用病原病原微生物抗

4、原微生物抗原或或特異性抗體特異性抗體，以達到預，以達到預防和治療疾病的目的防和治療疾病的目的, ,這種方法稱為這種方法稱為人人工免疫工免疫, ,包括包括人工主動免疫人工主動免疫和和人工被動人工被動免疫免疫. . 一、人工主動免疫一、人工主動免疫 概念：將概念：將疫苗或類毒素疫苗或類毒素接種于人體，接種于人體，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫應答，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性免疫應答，從而對相應病原體感染產(chǎn)生從而對相應病原體感染產(chǎn)生特異性預防特異性預防作用的措施。作用的措施。 （一）疫苗（一）疫苗1 1 死疫苗：已死死疫苗：已死, ,多次接種多次接種, ,劑量劑量 大大, ,副反應明顯副反應明顯 2

5、 2 活疫苗（減毒活疫苗）：活疫苗（減毒活疫苗）： （一）疫苗（一）疫苗2 2 活疫苗（減毒活疫苗）：活活疫苗（減毒活疫苗）：活, ,無毒無毒或弱毒或弱毒, ,接種一次接種一次, ,劑量小劑量小, ,副作用小副作用小, ,免疫力持久免疫力持久. .嚴防回復毒力嚴防回復毒力 活疫苗與死疫苗的比較活疫苗與死疫苗的比較 活疫苗活疫苗 死疫苗死疫苗 接種次數(shù)接種次數(shù) 1 1次次 2-32-3次次 接種量接種量 小小 較大較大 接種反應接種反應 輕輕 重重 免疫效果免疫效果 較好較好, ,維持維持1-51-5年年 差差, ,維持維持0.5-10.5-1年年 毒力回升毒力回升 有可能有可能 不可能不可能

6、安全性安全性 有潛在危險性有潛在危險性 安全性好安全性好 疫苗穩(wěn)定性疫苗穩(wěn)定性 相對不穩(wěn)定相對不穩(wěn)定 相對穩(wěn)定相對穩(wěn)定 保存保存 不易保存不易保存 易保存易保存3 3 亞單位疫苗亞單位疫苗:利用保護性抗原,不含核 酸,無毒性、可避免回復突變。（一）疫苗（一）疫苗 4 基因工程疫苗:如把HBsAg基因插入酵母細胞中，成功制備乙型肝炎疫苗。 優(yōu)點：安全、經(jīng)濟、可批量生產(chǎn) 缺點：技術要求高（一）疫苗（一）疫苗 5 重組載體疫苗:將將（一）疫苗（一）疫苗 6 核酸疫苗（DNA疫苗） 是將編碼保護性抗原的基因重組到是將編碼保護性抗原的基因重組到真核表達載體真核表達載體上，然后將重組的質(zhì)粒上，然后將重組的

7、質(zhì)粒DANDAN直接注射入宿主體內(nèi)，外源基因在直接注射入宿主體內(nèi)，外源基因在體內(nèi)所表達的抗原能刺激機體產(chǎn)生免體內(nèi)所表達的抗原能刺激機體產(chǎn)生免疫應答。疫應答。 優(yōu)點：免疫效果好、可同時誘導體優(yōu)點：免疫效果好、可同時誘導體液和細胞免疫、免疫應答持久、制備液和細胞免疫、免疫應答持久、制備簡單、成本低廉、可聯(lián)合免疫。簡單、成本低廉、可聯(lián)合免疫。 缺點：安全？缺點：安全？（一）疫苗（一）疫苗（二）類毒素（二）類毒素（toxoid） 類毒素是外毒素經(jīng)類毒素是外毒素經(jīng)0.3-0.4%0.3-0.4%甲醛甲醛處理后處理后, ,失去毒性仍保持抗原性的生物失去毒性仍保持抗原性的生物制品制品. .如白喉類毒素、破傷

8、風類毒素等如白喉類毒素、破傷風類毒素等, ,還可與死疫苗一起制成聯(lián)合疫苗還可與死疫苗一起制成聯(lián)合疫苗, ,如如DPTDPT二、人工被動免疫二、人工被動免疫抗毒素抗毒素-動物血清中提取的免疫球蛋白動物血清中提取的免疫球蛋白丙種球蛋白丙種球蛋白-人類免疫球蛋白人類免疫球蛋白其他免疫制劑其他免疫制劑 干擾素干擾素- -主要為主要為INF-,通過產(chǎn)生通過產(chǎn)生炎癥反應和活化炎癥反應和活化MM增強機體對胞內(nèi)增強機體對胞內(nèi)寄生菌的抵抗能力寄生菌的抵抗能力 IL-2- -能刺激能刺激T T細胞增殖細胞增殖, ,增強增強細胞免疫功能細胞免疫功能 集落刺激因子、集落刺激因子、LAKLAK細胞等細胞等 這些免疫制劑

9、在抗菌免疫中應用這些免疫制劑在抗菌免疫中應用不多，主要試用于一些病毒性疾病和不多，主要試用于一些病毒性疾病和腫瘤腫瘤 人工自動免疫和人工被動免疫的比較人工自動免疫和人工被動免疫的比較 區(qū)別要點 主動免疫 被動免疫 免疫物質(zhì) 抗原 抗體或CK接種次數(shù) 1-3次 1次免疫出現(xiàn)時間 慢,2-4周 快,立即免疫持續(xù)時間 長,數(shù)月-數(shù)年 短,2-3周主要用途 預防 治療或 緊急預防C7 課堂檢測題(20s/題，同桌分奇偶數(shù)答題） 1屬于人工自動免疫的生物制品（） A 白喉抗毒素 B 破傷風類毒素 C 細胞因子 D 胸腺素 E 白細胞介素 2下列哪種生物制品用于人工被動免疫( ) A 卡介苗 B 麻疹減毒

10、活疫苗 C 乙肝疫苗 D 胎盤丙種球蛋白 E 類毒素333一個從未進行過破傷風免疫接種的人目前有可能感染這種細菌,醫(yī)生決定對他進行被動免疫,應該注射（）A 破傷風類毒素B 破傷風抗毒素C 破傷風外毒素D 混合的人丙種球蛋白E 血液4下列哪種生物制品對人既是抗原又是抗體（）A 類毒素B 卡介苗(BCG)C 動物免疫血清D 轉(zhuǎn)移因子E 活疫苗34 5下列哪項屬于人工主動免疫 ( )A注射丙種球蛋白預防麻疹B接種卡介苗預防結核C注射免疫核糖核酸治療惡性腫瘤D注射CK治療腫瘤E骨髓移植治療白血病6、細菌感染的血清學診斷中，通常采取雙份血清檢測，要確認現(xiàn)癥感染，需要恢復期或一周后血清抗體效價比早期A 升

11、高4倍以上（含4倍）B 升高2倍以上C 升高4倍以上D 降低4倍以上（含4倍） E 降低2倍以上35 7.類毒素刺激機體后產(chǎn)生的特異性免疫應答物質(zhì)是（） A 干擾素 B 抗毒素 C 補體 D 乙型溶素 E 細胞因子15細菌標本的采集與送檢錯誤做法是（2）A 根據(jù)病原菌不同而采集不同標本 B 標本最好在使用抗生素之前采集C 盡量采取病變明顯部位的材料D 用于分離的標本均需冷藏快送E 采局部標本時應先用消毒劑，避免雜菌污染36 A 通過胎盤或初乳 B 接種抗毒素 C 接種疫苗 D 患傳染病后 E 注射丙種球蛋白3712.自然自動免疫獲得方式（ ）14人工自動免疫獲得方式（ ）11.人工被動免疫獲得

12、方式（多）13.自然被動免疫獲得方式（ ）第三節(jié)第三節(jié) 細菌感染的治療原則細菌感染的治療原則何時用？何時用？怎樣用？怎樣用？WHOWHO的統(tǒng)計結果表明，中國有的統(tǒng)計結果表明，中國有1/21/2的兒的兒 童一旦出現(xiàn)咳嗽、流鼻涕的癥狀，就童一旦出現(xiàn)咳嗽、流鼻涕的癥狀，就 使用抗生素進行治療。使用抗生素進行治療。對全國對全國8383萬名萬名0 01313歲兒童支氣管歲兒童支氣管 哮喘患病情況調(diào)查顯示，哮喘患病情況調(diào)查顯示，94%94%以上的以上的 哮喘兒童應用抗菌藥物治療，多數(shù)為哮喘兒童應用抗菌藥物治療，多數(shù)為 盲用或濫用。盲用或濫用。w w w . m e d i n f e c t . c o

13、mw w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o m濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種資料資料w w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o m濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種資料資料 不送檢驗標本，沒有藥敏試驗，長期不送檢驗標本，沒有藥敏試驗，長期“經(jīng)經(jīng) 驗用藥驗用藥”，你有足夠的經(jīng)驗嗎？，你有足夠的經(jīng)驗嗎？ 病毒感染者常規(guī)使用：預防？病毒感染者常規(guī)使

14、用：預防？“保險保險”？ 無知？其他？無知？其他？ 忽視毒副反應的濫用：肝腎毒性、藥物熱忽視毒副反應的濫用：肝腎毒性、藥物熱 首選三代、四代頭孢，是對還是錯？首選三代、四代頭孢，是對還是錯？ 首選碳青霉烯類首選碳青霉烯類所謂所謂“一次搞定一次搞定”， 是對還是錯？是對還是錯？濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種表現(xiàn)表現(xiàn)無菌手術的濫用無菌手術的濫用: : 術前、術中、術后各個環(huán)節(jié)的濫用：劑術前、術中、術后各個環(huán)節(jié)的濫用：劑 量、時間、預防？量、時間、預防？無依據(jù)地濫用：如無依據(jù)地濫用：如不明原因發(fā)熱、不明原因發(fā)熱、病毒病毒 感染（感染（談談SARSSARS治療治療）、局部疼痛）、局部疼痛無指

15、征地聯(lián)合用藥：保險？經(jīng)驗？無指征地聯(lián)合用藥：保險？經(jīng)驗？抗感染治療中忽視支持治療抗感染治療中忽視支持治療抗結核藥物單用，或療程不足抗結核藥物單用，或療程不足濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種表現(xiàn)表現(xiàn)不恰當聯(lián)用不恰當聯(lián)用: :如頭孢菌素與大環(huán)內(nèi)酯類藥如頭孢菌素與大環(huán)內(nèi)酯類藥 物聯(lián)用（有爭議？）物聯(lián)用（有爭議？）錯誤聯(lián)用錯誤聯(lián)用: :氧哌嗪青霉素派拉西林合用氧哌嗪青霉素派拉西林合用 1616天（同一藥物，只是名字、廠家不同）天（同一藥物，只是名字、廠家不同）無知用藥：無知用藥：慶大霉素與奈替米星合用，同慶大霉素與奈替米星合用，同 屬氨基糖苷類藥合用，加重了耳腎毒性屬氨基糖苷類藥合用，加重了耳

16、腎毒性胡亂用藥：胡亂用藥：頸部無菌手術預防性使用頭孢頸部無菌手術預防性使用頭孢 他定他定8g/d8g/d，1010天，出院后帶紅霉素天，出院后帶紅霉素w w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o m濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種舉例舉例w w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o m濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種舉例舉例w w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o m濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種濫用抗菌藥物表現(xiàn)種種舉例舉例w w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o mw w w . m e d i n f e c t . c o m濫用抗菌藥