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文檔簡(jiǎn)介
1、農(nóng)藥生物測(cè)定緒論第一節(jié) 農(nóng)藥生物測(cè)定的含義及簡(jiǎn)史第二節(jié) 農(nóng)藥生物測(cè)定的作用和地位第三節(jié) 農(nóng)藥生物測(cè)定的內(nèi)容及應(yīng)用第一章 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定第一節(jié) 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的基本概念一 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的內(nèi)容和意義二 生物測(cè)定的一般原理和原則第二節(jié) 標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲(chóng)的飼養(yǎng)一 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲(chóng)的要求和種類二 常用目標(biāo)昆蟲(chóng)的飼養(yǎng)三 標(biāo)準(zhǔn)目標(biāo)昆蟲(chóng)室內(nèi)大規(guī)模飼養(yǎng)的定向控制四 目標(biāo)昆蟲(chóng)的基本操作方法目標(biāo)昆蟲(chóng)群體的移取、分離和處理第三節(jié) 殺蟲(chóng)劑的室內(nèi)毒力測(cè)定方法一 初步毒力測(cè)定方法二 毒殺作用方式測(cè)定方法(觸殺、內(nèi)吸、胃毒、熏蒸、殺卵)第四節(jié) 昆蟲(chóng)特異性控制劑生物活性測(cè)定一 保幼激素(JH)及其類似物的活性測(cè)定二 抗蛻皮激素(幾
2、丁合成抑制劑)的活性測(cè)定三 昆蟲(chóng)拒食劑的活性測(cè)定四 昆蟲(chóng)引誘劑的活性測(cè)定第五節(jié) 殺蟲(chóng)劑室內(nèi)生物測(cè)定的評(píng)判和統(tǒng)計(jì)分析一 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定結(jié)果的評(píng)判和計(jì)算 1.目標(biāo)昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的確定 2.殺蟲(chóng)劑藥效的表示與計(jì)算二 殺蟲(chóng)劑室內(nèi)毒力測(cè)定的統(tǒng)計(jì)分析三 殺蟲(chóng)劑混用的聯(lián)合作用計(jì)算法第六節(jié) 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定技術(shù)的應(yīng)用一 殺蟲(chóng)劑的篩選二 殺蟲(chóng)劑持效期及殘留量的測(cè)定三 在害蟲(chóng)抗藥性研究中的應(yīng)用第二章 殺菌劑生物測(cè)定第一節(jié) 殺菌劑生物測(cè)定的基本概念一 殺菌劑的毒作用方式二 殺菌劑的使用方法三 殺菌劑生物測(cè)定的基本類型第二節(jié) 殺菌劑毒力、藥效測(cè)定的基礎(chǔ)操作及原理一 清潔及滅菌二 植物病原菌的培養(yǎng)第三節(jié) 殺菌劑生物
3、測(cè)定方法一 殺菌劑皿內(nèi)生物測(cè)定方法二 殺菌劑藥效的組織法測(cè)定(需補(bǔ)充內(nèi)容)三 殺菌劑盆栽藥效試驗(yàn)四 植物病毒防治劑藥效試驗(yàn)(需補(bǔ)充內(nèi)容)五 殺線蟲(chóng)劑室內(nèi)生物測(cè)定第四節(jié) 殺菌劑生物測(cè)定技術(shù)的應(yīng)用第三章 除草劑的生物測(cè)定第一節(jié) 除草劑生物測(cè)定的基本概念一 除草劑生物測(cè)定的意義二 除草劑生物測(cè)定的基本原理三 除草劑生物測(cè)定的程序和原則四 除草劑生物測(cè)定的優(yōu)缺點(diǎn)第二節(jié) 除草劑生物測(cè)定試材的確定和培育一、作物試材的確定和培育二、雜草試材的確定和培育三、試材所需環(huán)境條件的創(chuàng)造第三節(jié) 除草劑生物測(cè)定的鑒定技術(shù)一 除草劑活力的鑒定方法二 除草劑的藥效評(píng)價(jià)第四節(jié) 除草劑生物測(cè)定方法一 種子發(fā)芽測(cè)定法二 植株生長(zhǎng)
4、量測(cè)定法三 生理生化指標(biāo)測(cè)定法四 癥狀鑒定法五 愈傷組織鑒定法第五節(jié) 除草劑生物測(cè)定技術(shù)的應(yīng)用(需補(bǔ)充)一、除草劑的篩選二、除草劑的作用特性測(cè)定三、除草劑殘效期的測(cè)定四、除草劑在土壤中淋溶性的測(cè)定第四章 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的生物測(cè)定第一節(jié) 概述一、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生物測(cè)定的定義二、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生物測(cè)定的發(fā)展簡(jiǎn)史三、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生物測(cè)定的原理和基本類型四、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生物測(cè)定的特點(diǎn)第二節(jié) 常用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的生物測(cè)定技術(shù)一 生長(zhǎng)素的生物測(cè)定技術(shù)二 赤霉素的生物測(cè)定技術(shù)三 細(xì)胞分裂素的生物測(cè)定技術(shù)四 脫落酸的生物測(cè)定技術(shù)五 乙烯的生物測(cè)定技術(shù)六 其它調(diào)節(jié)劑的生物測(cè)定技術(shù)第五章 高新技術(shù)在農(nóng)藥生物測(cè)
5、定中的應(yīng)用第一節(jié) 生化技術(shù)在生物測(cè)定中的應(yīng)用第二節(jié) 電子計(jì)算機(jī)在生物測(cè)定中的應(yīng)用(構(gòu)效關(guān)系研究)第三節(jié) 高通量篩選技術(shù)及其在農(nóng)藥研究中的應(yīng)用 緒 論一、 藥生物測(cè)定(bioassay of pesticide)的含義及簡(jiǎn)史(一)生物測(cè)定的含義生物測(cè)定(bioassay)原義為biological assay,是用以測(cè)定具有生理活性的物質(zhì)在某有機(jī)體產(chǎn)生效力的一種技術(shù)。但有也人從更廣的范圍來(lái)理解生物測(cè)定的函義,如Finney(1952)認(rèn)為是“對(duì)生物任何刺激產(chǎn)生的效應(yīng)測(cè)定,包括來(lái)自物理、化學(xué)、生物、生理及心理等方面的刺激對(duì)生物活體產(chǎn)生的反應(yīng)”。亦即廣義的生物測(cè)定應(yīng)為:來(lái)自物理、化學(xué)、生理或心理的刺
6、激,對(duì)生物整體(living organism)和活體組織(tissue)產(chǎn)生效力大小的度量。當(dāng)前,生物測(cè)定已成為研究作用物、靶標(biāo)生物和反應(yīng)強(qiáng)度三者關(guān)系的一項(xiàng)專門技術(shù)。(二)農(nóng)藥生物測(cè)定(bioassay of pesticide)的定義簡(jiǎn)單地說(shuō),農(nóng)藥生物測(cè)定就是度量農(nóng)藥對(duì)動(dòng)植物群體、個(gè)體、活體組織或細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)大小的生物測(cè)定技術(shù)。在農(nóng)藥生物測(cè)定中包括農(nóng)藥、生物、測(cè)定三個(gè)方面,其中“農(nóng)藥”指殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、除草劑、殺螨劑、殺線蟲(chóng)劑、殺鼠劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等;“生物”泛指農(nóng)作物病、蟲(chóng)、草、鼠、衛(wèi)生害蟲(chóng)及高等動(dòng)物如鼠、兔等,同時(shí)還包括農(nóng)作物本身;而“測(cè)定”則是指通過(guò)供試生物對(duì)某種農(nóng)藥產(chǎn)生的特定生理
7、反應(yīng)來(lái)判定某種農(nóng)藥的活性,如通過(guò)對(duì)農(nóng)作物病、蟲(chóng)、草、鼠、衛(wèi)生害蟲(chóng)等的測(cè)定可知道某種農(nóng)藥的毒力、除害范圍、作用特點(diǎn)等。別外,需指出的是:所有的生物測(cè)定均是運(yùn)用特定的試驗(yàn)設(shè)計(jì),如測(cè)定殺蟲(chóng)劑的觸殺毒力采用點(diǎn)滴法、藥膜法,而測(cè)定殺蟲(chóng)劑的胃毒作用則采用飼喂法等,沒(méi)有這一保證,生物測(cè)定的結(jié)果的可靠性就不能保證;所有生物測(cè)定均是在一定條件下(局部控制)進(jìn)行的,比如殺蟲(chóng)劑室內(nèi)生測(cè)要求一定的溫度、濕度、光照及一定的蟲(chóng)齡等,否則所得結(jié)果無(wú)可比性,也就失去了測(cè)定的意義;生物測(cè)定均以群體反應(yīng)為基礎(chǔ),以生物統(tǒng)計(jì)為工具,通過(guò)對(duì)測(cè)定數(shù)據(jù)科學(xué)合理的分析而得出統(tǒng)計(jì)結(jié)果。從以上的分析討論,我們可以知道,所謂的農(nóng)藥生物測(cè)定是指:運(yùn)
8、用特定的試驗(yàn)設(shè)計(jì),利用生物的整體或離體的組織、細(xì)胞對(duì)農(nóng)藥(或某些化合物)的反應(yīng),并以生物統(tǒng)計(jì)為工具,分析供試對(duì)象在一定條件下的效應(yīng),來(lái)度量(判斷或鑒別)某種農(nóng)藥的生物活性。(三)農(nóng)藥生物測(cè)定的簡(jiǎn)史農(nóng)藥生物測(cè)定的發(fā)展歷史還不過(guò)一百年。自19世紀(jì)末法國(guó)學(xué)者埃利希(R. C. Ehrlich)研究出測(cè)定白喉抗毒素含量的標(biāo)準(zhǔn)方法以后,到1920至1923年間,陸續(xù)采用了測(cè)定多種醫(yī)藥激素含量的生物測(cè)定技術(shù),但這每時(shí)期都是用單個(gè)動(dòng)物體作直接的效力測(cè)定,將待測(cè)的藥劑與標(biāo)準(zhǔn)藥劑相比較來(lái)估計(jì)其相對(duì)藥效。這種方法只能用于某些特定的藥劑和生物類型。生物對(duì)藥劑反應(yīng)越快,測(cè)定結(jié)果越精確。不同生物個(gè)體或同一生物個(gè)體的不同
9、發(fā)育階段,對(duì)藥劑的忍受力不同。由于生物個(gè)體從受藥到中毒死亡需要一個(gè)過(guò)程,因而以生物中毒死亡為反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)出的致死劑量總比實(shí)際反應(yīng)所需劑量大。20世紀(jì)30年代后,研究出以生物群體為反應(yīng)基礎(chǔ)的生物測(cè)定方法,提高了測(cè)定精度,如1937年歐文(J.O.Irwin)首先提出了系統(tǒng)的生物測(cè)定方法報(bào)告。1947年芬尼(D.J.Finney)出版了系統(tǒng)的生物測(cè)定統(tǒng)計(jì)方法。1950年芬尼及古德溫(L.G.Goodwin)出版生物測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化一書(shū)。1957年布斯維納(J.R.Busvine)出版殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定評(píng)述。1959年張宗炳在其昆蟲(chóng)毒理學(xué)一書(shū)中以專章對(duì)殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定及統(tǒng)計(jì)分析作了系統(tǒng)的論述。1963年張澤薄等出
10、版殺蟲(chóng)劑及殺菌劑的生物測(cè)定,1984年張澤薄出版生物測(cè)定統(tǒng)計(jì)專著。20世紀(jì)70年代以后,由于具有各種特殊生理活性的化合物不斷出現(xiàn),生物測(cè)定方法也在不斷發(fā)展。例如研究利用昆蟲(chóng)神經(jīng)電生理方法檢測(cè)化合物對(duì)昆蟲(chóng)的拒食活性已取得進(jìn)展。殺菌劑也由以傳統(tǒng)的病原菌離體試驗(yàn)方法為主,轉(zhuǎn)變?yōu)榧闹髦参锷系幕铙w試驗(yàn)為主。由于活體試驗(yàn)必須在室內(nèi)或溫室培育大量寄主植物,繁瑣費(fèi)時(shí),費(fèi)用較高,80年代以來(lái)介于活體與離體之間的植物組織培養(yǎng)生物測(cè)定方法受到了廣泛的重視,有可能發(fā)展成一類新的殺菌劑生物測(cè)定方法。如適用于稻瘟病篩選的剝離葉鞘法;適用于細(xì)菌性病害篩選的塊根法;適用于大麥白粉病篩選的芽鞘表皮法;適用于水稻干枯病的蠶豆葉片
11、法;適用于病毒病篩選的局部病斑法及葉片漂浮法等。隨著分子生物學(xué)及生理、生化方面研究技術(shù)的提高,運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)和生化技術(shù)進(jìn)行生測(cè)的研究亦發(fā)展很快,如對(duì)新藥劑的篩選及利用酶學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行害物抗藥性的監(jiān)測(cè)和增效劑的篩選等等。同時(shí),由于電子計(jì)算機(jī)軟、硬件的迅速發(fā)展,農(nóng)藥生物測(cè)定中的統(tǒng)計(jì)分析,早已普遍程序化和微機(jī)化,使生物測(cè)定結(jié)果的分析計(jì)算更加簡(jiǎn)便、快捷,也更加準(zhǔn)確、可靠。二、農(nóng)藥生物測(cè)定的作用和地位不論在農(nóng)藥研制方面,還是在農(nóng)藥的使用方面,農(nóng)藥生物測(cè)定是均重要的先決條件。下面列舉農(nóng)藥新品種的研制、開(kāi)發(fā)及登記過(guò)程,從中可看出生物測(cè)定在農(nóng)藥研究和植物化保中的作用及地位。(插圖)以上過(guò)程中篩選如植物性農(nóng)藥的
12、研究中,采用活性跟蹤法合成農(nóng)藥的篩選。殺蟲(chóng)譜的測(cè)定,作用方式的測(cè)定,初步毒力測(cè)定等。藥效試驗(yàn)(制劑的藥效試驗(yàn))室內(nèi)、田間。毒性試驗(yàn)。代謝研究:如除草劑在自然條件下的持效性,消解途徑(揮發(fā)、微生物化學(xué)和光分解),在 中的只附,解吸淋滌,及除草劑被植物體吸收,在體內(nèi)運(yùn)轉(zhuǎn)、作用部殘留、代謝和降解均可利用生物測(cè)定的方法加以分析和鑒定。殘留分析(殺菌劑、除草劑用的多)。 水生生物魚(yú)、蛙等環(huán)境影響研究 蠶、蜜蜂、鳥(niǎo)類、天敵等對(duì)于混劑的研制來(lái)說(shuō),除上述外,尚需進(jìn)行兩種或兩種以上農(nóng)藥混合使用的效力大小,明確其有無(wú)增效或頡頏作用,以決定其能否混用及如何混用等。農(nóng)藥生物測(cè)定除了在上述的一些過(guò)程中有重要作用外,在下
13、面兩點(diǎn)中,可以看出農(nóng)藥生物測(cè)定技術(shù)在農(nóng)藥研究中的特別重要作用:發(fā)現(xiàn)新的試驗(yàn)方法等于發(fā)現(xiàn)新農(nóng)藥;新農(nóng)藥發(fā)現(xiàn)存在于生物測(cè)定過(guò)程的每個(gè)異常現(xiàn)象之中?;谝陨纤?,有人曾把生物測(cè)定與化學(xué)合成比喻為前進(jìn)中的兩個(gè)車輪,兩者互相制約、互相促進(jìn)。三、農(nóng)藥生物測(cè)定的內(nèi)容及應(yīng)用農(nóng)藥生物測(cè)定主要包括殺蟲(chóng)劑(殺螨劑),殺菌劑(殺線蟲(chóng)劑)、除草劑、殺鼠劑、抗生素以及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等有關(guān)的測(cè)定技術(shù)與方法。為了保證測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠,供試靶標(biāo)生物要有足夠的數(shù)量和良好的質(zhì)量。為此需進(jìn)行人工飼養(yǎng),通過(guò)對(duì)飼養(yǎng)條件的定向控制使靶標(biāo)生物在生理狀態(tài)、齡期大小、健康狀況及敏感性等方面達(dá)到一致性,所以人工飼養(yǎng)靶標(biāo)生物也是生物測(cè)定技術(shù)的一個(gè)重
14、要環(huán)節(jié)。此外,農(nóng)藥對(duì)非靶標(biāo)生物及農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的影響等方面的研究,也屬于生物測(cè)定的研究?jī)?nèi)容??傊?,農(nóng)藥生物測(cè)定是一項(xiàng)很重要的實(shí)用技術(shù),其內(nèi)容可歸納為以下幾個(gè)方面:1.測(cè)定農(nóng)藥對(duì)昆蟲(chóng)、螨類、病原菌、線蟲(chóng)、雜草以及鼠類等靶標(biāo)生物的毒力或藥效,包括除害范圍、作用方式、作用特點(diǎn)等。2.研究農(nóng)藥對(duì)植物的生理作用。包括農(nóng)藥對(duì)植物的刺激生長(zhǎng)作用和對(duì)植物的藥害測(cè)定。3.篩選新農(nóng)藥品種。4.研究化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與生物活性關(guān)系的規(guī)律,為定向創(chuàng)新農(nóng)藥提供依據(jù)。5.研究農(nóng)藥的理化性質(zhì)及加工劑型與毒效關(guān)系,提高農(nóng)藥的使用效果。6. 研究有害生物的生理狀態(tài)及外界環(huán)境條件與藥效的關(guān)系,以便提高農(nóng)藥使用水平,做到適時(shí)用藥。7.
15、測(cè)定不同農(nóng)藥混用的效力及尋找增效劑,為農(nóng)藥的合理混用提供依據(jù)。8. 對(duì)有害生物抗藥性的監(jiān)測(cè)和研究克服或延緩抗藥性發(fā)展的有效措施。9.研究農(nóng)藥的作用機(jī)理及生理效應(yīng),如拒食、不育、忌避、殺卵、性引誘及激素功能等。10.還可利用敏感生物(如蚊動(dòng)蟲(chóng)等)來(lái)測(cè)定農(nóng)藥的有效含量及殘留量。以生物為工具,利用其對(duì)藥物劑量與活性相關(guān)規(guī)律,測(cè)定農(nóng)藥的有效成分含量,或在植物、食品中微量殘留即狹義的生物分析。11.測(cè)定農(nóng)藥對(duì)溫血?jiǎng)游锛坝幸嫔锏亩拘?。隨著農(nóng)藥的迅速發(fā)展,生測(cè)技術(shù)顯得更加重要。但是,在我國(guó)生物測(cè)定技術(shù)與生產(chǎn)發(fā)展的實(shí)際需要還存在較大差距,在一定程度上影響到我國(guó)新農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)。另一方面,過(guò)去我國(guó)的生物測(cè)定技術(shù)主
16、要是針對(duì)重點(diǎn)病蟲(chóng)害(如棉蚜、棉鈴蟲(chóng)、水稻白葉枯病等),進(jìn)行新農(nóng)藥合成與篩選工作,這就有可能漏掉一些對(duì)其它病、蟲(chóng)、草、鼠類等靶標(biāo)生物有效的農(nóng)藥品種。例如瑞士汽巴嘉基公司的殺菌劑瑞毒霉是由除草劑部門合成,而在殺菌劑部門篩選出來(lái)的優(yōu)良?xì)⒕鷦?。因此,新合成的化合物?yīng)對(duì)重要病、草、蟲(chóng)害及鼠類等有害生物進(jìn)行同步系統(tǒng)篩選。一個(gè)新化合物從實(shí)驗(yàn)室合成到正式投產(chǎn)必須經(jīng)過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定、溫室測(cè)定和田間小區(qū)藥效試驗(yàn),表現(xiàn)活性高的,除進(jìn)行大田藥效試驗(yàn)外,還要做殘留、對(duì)高等動(dòng)物的毒性及對(duì)有益生物和農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的影響的研究,同時(shí)生產(chǎn)部門要對(duì)其劑型和加工技術(shù)進(jìn)行研究??梢?jiàn)生測(cè)技術(shù)在新農(nóng)藥的研究、生產(chǎn)、應(yīng)用中占有十分重要的地位,
17、是開(kāi)發(fā)新農(nóng)藥和毒理學(xué)研究的重要手段。四、教學(xué)目的和要求農(nóng)藥生物測(cè)定這門課程的教學(xué)目的主要是使學(xué)生通過(guò)學(xué)習(xí)理論和實(shí)踐,掌握殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、除草劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及殺線蟲(chóng)劑的室內(nèi)生物測(cè)定的基本理論和基本技能,掌握各類農(nóng)藥生物測(cè)定結(jié)果的評(píng)判和統(tǒng)計(jì)分析方法。以便在農(nóng)藥研究、生產(chǎn)和應(yīng)用中能夠正確合理地評(píng)價(jià)農(nóng)藥的活性,為科學(xué)合理使用農(nóng)藥提供依據(jù)。第一章 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定第一節(jié) 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的基本概念殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定(bioassay)是以昆蟲(chóng)(包括螨類)為測(cè)試對(duì)象,評(píng)價(jià)各種殺蟲(chóng)劑對(duì)昆蟲(chóng)的毒力。廣義的說(shuō),殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定就是利用生物(昆蟲(chóng)、螨類)對(duì)殺蟲(chóng)劑的反應(yīng),來(lái)鑒別某一種農(nóng)藥或某一類化合物的生物活性,也就是說(shuō)
18、藥劑對(duì)昆蟲(chóng)、螨類的毒力或藥效進(jìn)行測(cè)定的一種基本方法。一 、殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的意義和內(nèi)容 (一)殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的意義殺蟲(chóng)劑在我國(guó)的農(nóng)藥生產(chǎn)中,無(wú)論是品種還是產(chǎn)是都占第一位,發(fā)展速度很快,尤其是近年來(lái)取得了較大的進(jìn)展,如高效擬除蟲(chóng)菊酯的廣泛應(yīng)用,特異性殺蟲(chóng)劑的研制和生產(chǎn)等。為了安全合理、經(jīng)濟(jì)有效的使用殺蟲(chóng)劑防治害蟲(chóng)(螨類)保護(hù)農(nóng)作物免受危害,以達(dá)到農(nóng)作物獲得高產(chǎn)的目的,就需要不斷的開(kāi)發(fā)新的殺蟲(chóng)劑,改善和提高現(xiàn)有殺蟲(chóng)劑的使用效果,減少環(huán)境污染,克服害蟲(chóng)抗藥性以及保持自然環(huán)境的生態(tài)平衡,而這一切均離不開(kāi)生物測(cè)定。因此,生物測(cè)定在取代高殘留農(nóng)藥、延緩害蟲(chóng)抗藥性發(fā)展、延長(zhǎng)現(xiàn)有殺蟲(chóng)劑的經(jīng)濟(jì)使用壽命以及開(kāi)發(fā)新殺
19、蟲(chóng)劑品種等方面均有重要意義。(二)殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的內(nèi)容在農(nóng)藥中,無(wú)論是殺蟲(chóng)劑、殺螨劑、殺菌劑、殺鼠劑,還是植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等,它們的作用對(duì)象均是生物,即防治有害生物,保護(hù)和促進(jìn)農(nóng)作物的生長(zhǎng)發(fā)育。而殺蟲(chóng)劑的作用對(duì)象主要是昆蟲(chóng)和螨類,殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的主要任務(wù)是將殺蟲(chóng)劑作用于昆蟲(chóng)、螨類等,根據(jù)它們對(duì)殺蟲(chóng)劑的反應(yīng)強(qiáng)度來(lái)評(píng)判殺蟲(chóng)劑的毒力或毒效的大小,因此,殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定研究的主要內(nèi)容有:1. 測(cè)定殺蟲(chóng)劑對(duì)昆蟲(chóng)(包括螨類)的效力 不同的殺蟲(chóng)劑對(duì)不同種類的昆蟲(chóng)有其特效。如溴氰菊酯,對(duì)蚜蟲(chóng)、菜青蟲(chóng)、食心蟲(chóng)等多種害蟲(chóng)都有很好的效果,但對(duì)紅蜘蛛、介殼蟲(chóng)的效果就很差,這種現(xiàn)象是很普遍的。即使是同一種害蟲(chóng),由于蟲(chóng)態(tài)、蟲(chóng)
20、齡、性別甚至害蟲(chóng)所處生理狀態(tài)的不同也有很大差異,從而對(duì)同一種藥劑可以產(chǎn)生不同的效應(yīng)。就殺蟲(chóng)劑應(yīng)用而言,必須要選擇對(duì)某種害蟲(chóng)具有高效的新藥劑,所以也就必須在室內(nèi)控制一定條件下進(jìn)行活性篩選和毒力測(cè)定,這樣才可能選出最有效的藥劑,然后才能進(jìn)行大田試驗(yàn)肯定其藥效。2. 篩選新農(nóng)藥及探索化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與毒效關(guān)系的規(guī)律 在農(nóng)藥合成研究工作中,要想不斷篩選出質(zhì)的高效殺蟲(chóng)劑,則需從系列有效的化合物中進(jìn)行毒力比較,研究它們對(duì)靶標(biāo)昆蟲(chóng)的作用方式(觸殺、胃毒、熏殺及內(nèi)吸活性)才能選出新的殺蟲(chóng)劑。殺蟲(chóng)劑的活性與其化學(xué)結(jié)構(gòu)有密切的關(guān)系,如在已使用的殺蟲(chóng)劑中,溴氰菊酯有八種異構(gòu)體,但只有左旋順式體對(duì)昆蟲(chóng)毒效最高,六六六
21、的八種異構(gòu)體中,也只有丙體六六六的毒效最高,因此,欲定向創(chuàng)制高效殺蟲(chóng)劑,必須探索化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系的規(guī)律,而這些必須應(yīng)用生物測(cè)定的技術(shù)。3.研究殺蟲(chóng)劑的理化性狀與毒效的關(guān)系及鑒定加工劑型的質(zhì)量 殺蟲(chóng)藥劑對(duì)昆蟲(chóng)毒力的大小與殺蟲(chóng)劑本身的化學(xué)特性有關(guān)以外,還與殺蟲(chóng)劑的物理性能、使用方式以及加工質(zhì)量有關(guān)。如乳劑質(zhì)量好壞,油珠大小直接影響殺蟲(chóng)藥劑在植物體表及昆蟲(chóng)體表的濕潤(rùn)性、展著性、滲透性等物理性狀,從而對(duì)其藥效產(chǎn)生很大的影響;粉劑顆粒的大小、填充料的種類,如比重、硬度、粒子的形狀等都能影響藥劑的分散性和附著量,從而對(duì)藥效產(chǎn)生顯著的影響。此外藥劑的揮發(fā)性也會(huì)影響到殺蟲(chóng)劑的使用效果。在目前使用的劑
22、型中,有粉劑、可濕性粉劑、乳油、液劑、懸浮劑、濃乳劑、顆粒劑、超低量油劑等。在什么條件下,使用哪種劑型效果最好,究竟選用什么溶劑、乳化劑、濕潤(rùn)劑和填充料,以及采用何種配制方法才能發(fā)揮殺蟲(chóng)藥劑的最佳效果。殺蟲(chóng)劑成品的質(zhì)量、使用方法以及庫(kù)存農(nóng)藥的失效和質(zhì)量降低的鑒定等,都需采用生物測(cè)定,才能確定其真正的使用價(jià)值。4.研究靶標(biāo)昆蟲(chóng)的生理狀態(tài)及外界條件與藥效的關(guān)系 殺蟲(chóng)藥劑對(duì)靶標(biāo)昆蟲(chóng)毒力大小,除了與昆蟲(chóng)的生理狀態(tài)有著密切關(guān)系外,還同外界環(huán)境條件密切相關(guān)。在實(shí)際防治中,在某一時(shí)間用藥的效果不如另一時(shí)期,其原因除了外界環(huán)境條件有差異外,就是與昆蟲(chóng)的不同發(fā)育階段有關(guān)。這就是說(shuō),外界環(huán)境條件(溫、濕、光照)以
23、及昆蟲(chóng)的生理狀態(tài)(昆蟲(chóng)變態(tài)、齡期大上或發(fā)育階段、營(yíng)養(yǎng)狀況以及寄主狀態(tài))等對(duì)殺蟲(chóng)藥劑都有一定影響,因此,要改進(jìn)施藥方法或掌握施藥適期,達(dá)到提高藥效經(jīng)濟(jì)用藥的目的,也需用生物測(cè)定來(lái)解決。5.測(cè)定不同殺蟲(chóng)劑混用的效力以及尋找增效劑 兩種或兩種以上藥劑的混合使用是否能夠增效以及混配的最佳配比,均需采用生物測(cè)定技術(shù)進(jìn)行研究才能對(duì)其作出正確的評(píng)判。另外,有的化合物本身對(duì)昆蟲(chóng)無(wú)毒,但同另一種殺蟲(chóng)劑混用后,可以提高該藥對(duì)昆蟲(chóng)的毒效或降低藥效,這只有借助生物測(cè)定技術(shù)手段才能肯定,從而尋找出有效的增效劑。6.測(cè)定害蟲(chóng)抗藥性和研究延緩抗性發(fā)展的措施 近五十余年來(lái),由于大量、不合理地使用有機(jī)合成農(nóng)藥,致使害蟲(chóng)抗性種類
24、逐年增多、抗性程度逐年增強(qiáng)。據(jù)報(bào)道,世界范圍內(nèi)已有589種害蟲(chóng)(包括螨類)產(chǎn)生了抗藥性,其中農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)392種,害蟲(chóng)抗藥性的迅猛發(fā)展已成為當(dāng)前開(kāi)發(fā)新農(nóng)藥及使用中的重要問(wèn)題,并日益引起人們的重視。對(duì)抗性昆蟲(chóng)種群的鑒定、研究抗藥性程度及范圍,影響抗性產(chǎn)生和發(fā)展的因素以及研究和尋找克服或延緩害蟲(chóng)抗藥性發(fā)展的有效措施,均離不開(kāi)生物測(cè)定。7.測(cè)定農(nóng)藥生物體、土壤及水中的殘留量 殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定具有微量測(cè)定的特點(diǎn),可以用來(lái)測(cè)定農(nóng)藥施用一定時(shí)間后,在農(nóng)作物、果木、蔬菜等作物上的殘留量以及在土壤、水中的微量農(nóng)藥,從而可以了解殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)的殘效和判斷施藥后的安全期限,以保證人畜安全和避免環(huán)境污染。此外,還可研究殺蟲(chóng)
25、劑進(jìn)入植物體內(nèi)或昆蟲(chóng)體內(nèi)的分布情況,以弄清殺蟲(chóng)劑的滲透、內(nèi)吸性能以及對(duì)害蟲(chóng)的毒理作用等。8.測(cè)定殺蟲(chóng)劑對(duì)植物的藥害程度和對(duì)高等動(dòng)物的毒性以及殺蟲(chóng)劑對(duì)魚(yú)、鳥(niǎo)類、蜜蜂、天敵等有益生物的毒性,均屬于生物測(cè)定的范圍。此外,為了探索和解決符合室內(nèi)毒力測(cè)定所要求的目標(biāo)昆蟲(chóng),需要采用人工飼養(yǎng)目標(biāo)昆蟲(chóng),通過(guò)對(duì)飼養(yǎng)條件的控制,使目標(biāo)昆蟲(chóng)達(dá)到一致性并保證充分供應(yīng)。所以人工飼養(yǎng)目標(biāo)昆蟲(chóng)也是生物測(cè)定工作的一個(gè)重要組成部分。二、殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定效果的表示方法殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的效果一般采用藥效或毒力來(lái)表示。藥效指的是在綜合條件下某種藥劑對(duì)某種生物作用的大小,常以%來(lái)表示,且不同作物、保護(hù)對(duì)象和處理對(duì)象的不同而有不同的計(jì)算方法
26、。毒力即是毒性程度,用一個(gè)數(shù)量表示才能說(shuō)明或比較。常用的表示方式為致死中量(Median Lethal Dose),即殺死昆蟲(chóng)群體一半個(gè)體所需要的劑量,常以LD50表示;致死中濃(Median Lethal Concentration),即殺死昆蟲(chóng)群體一半所需要的藥劑濃度,以LC50表示;致死中時(shí)(Median Lethal Time)或擊倒中時(shí)(Median Knockdown Time),即殺死或擊倒昆蟲(chóng)群體一半個(gè)體所需要的時(shí)間,以LT50或KT50表示。同時(shí),在毒力比較時(shí)還常常使用LD95或LC95,即殺死昆蟲(chóng)群體95%的個(gè)體所需的藥劑劑量或濃度。二、影響殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的因素前已述及,殺
27、蟲(chóng)劑的生物測(cè)定是利用昆蟲(chóng)、螨類、溫血?jiǎng)游锏葘?duì)藥劑的反應(yīng)來(lái)鑒別殺蟲(chóng)劑的毒力或藥效的一種測(cè)定技術(shù)。而殺蟲(chóng)劑的毒效是對(duì)一定的生物范圍而言,一種殺蟲(chóng)劑可能對(duì)某些昆蟲(chóng)種群有效,而對(duì)另一種昆蟲(chóng)的效力很差甚至無(wú)效,因此采用不同的目標(biāo)昆蟲(chóng)作試驗(yàn)對(duì)象時(shí),測(cè)定的結(jié)果可能完全不同。同時(shí),在生物測(cè)定中昆蟲(chóng)對(duì)藥劑的反應(yīng)程度不僅決定于殺蟲(chóng)劑,而且還受到環(huán)境條件、昆蟲(chóng)群體中個(gè)體的生理狀態(tài)及其對(duì)殺蟲(chóng)劑的敏感性和處理方法等條件的影響。 (一)供試?yán)ハx(chóng)方面昆蟲(chóng)的種類、不同品種、個(gè)體發(fā)育階段、性別與生殖、生理狀態(tài)以及營(yíng)養(yǎng)條件等對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性有著明顯的差異。1不同種類的昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性不同 蚜蟲(chóng)、萊青蟲(chóng)、棉鈴蟲(chóng)等多種害蟲(chóng)對(duì)溴氰
28、菊酯的感受性較高而紅蜘蛛、介殼蟲(chóng)則對(duì)溴氰菊酯的感受性較低。蚜蟲(chóng)對(duì)樂(lè)果、氧樂(lè)果的感受性較高,但粘蟲(chóng)對(duì)樂(lè)果的感受性就低。如表1-1所示,稻褐飛虱同黑尾葉蟬、白背飛虱、灰褐虱比較,對(duì)馬拉松、稻豐散和苯硫磷的感受性低。不同種類的昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑感受性差異的原因可能是由于它們對(duì)殺蟲(chóng)劑的分解代謝不同,或體壁厚薄,附屬物的多少等有關(guān)。表1-1 三種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑尾葉蟬、稻褐飛虱、白背飛虱和灰稻虱的LD50(g/g雌成蟲(chóng)) (陳年春,1990)殺蟲(chóng)劑黑尾葉蟬稻褐飛虱白背飛虱灰褐虱馬拉松0.656.851.861.63稻豐散0.759.471.801.41苯硫磷4.9120.12.390.612同種昆蟲(chóng)不同品系對(duì)殺蟲(chóng)劑
29、的感受性不同 采自不同地區(qū)的煙蚜對(duì)同一殺蟲(chóng)劑的敏感性不同。如圖1-1,表明Greens-Ville 品系對(duì)甲胺磷、馬拉松的敏感性與Brunswick品系和Lunenburg 品系有明顯的差異。同種昆蟲(chóng)不同品系對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性不同可能與它們各自的用藥歷史背景及其生長(zhǎng)環(huán)境等因素有關(guān)。插圖3昆蟲(chóng)的不同發(fā)育階段對(duì)殺蟲(chóng)劑感受性的差異 昆蟲(chóng)在不同發(fā)育階段,由于體壁結(jié)構(gòu)和代謝生理有很大差別對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也存在差異。就完全變態(tài)的昆蟲(chóng)來(lái)說(shuō),如家蠅、玉米螟等對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性,一般以蛹期和卵期的感受性低,而以幼蟲(chóng)期和成蟲(chóng)期的感受性最高。蛹期對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性低是因?yàn)橛細(xì)ぞ哂幸欢ūWo(hù)作用,不易被藥劑滲入,同時(shí)蛹期的新
30、陳代謝及呼吸強(qiáng)度都特別低,因此對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性很低。但是蛹期在不同發(fā)育階段對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也不一致,以蛹的中期感受性最低,而以蛹的早期和晚期對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性高,因?yàn)榇藭r(shí)的新陳代謝及呼吸率都比中期要高,所以對(duì)殺蟲(chóng)劑也較敏感。昆蟲(chóng)的卵,通常對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也較低,雖然有的殺蟲(chóng)劑 (如1605)有時(shí)也噴灑卵,但其目的是為了殺死初孵幼蟲(chóng),而對(duì)卵本身并無(wú)作用。卵期對(duì)殺蟲(chóng)劑感受性低是由于其代謝強(qiáng)度與呼吸率比較弱之故,尤其是越冬卵對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性更低這可能是因卵黃體外包圍一層膜,與卵殼之間形成一個(gè)空隙,即使殺蟲(chóng)劑侵入卵殼,由于該層空氣阻隔,殺蟲(chóng)劑也難進(jìn)入卵內(nèi),所以一般殺蟲(chóng)劑對(duì)越冬卵是無(wú)效的。而夏季卵因無(wú)此空
31、氣層,對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性要高一些。在幼蟲(chóng) (或若蟲(chóng))期,隨著齡期的增加,對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也逐漸降低。在田間防治粘蟲(chóng)、菜青蟲(chóng)、蝗蟲(chóng)等害蟲(chóng)時(shí),常發(fā)現(xiàn)三齡以前的幼蟲(chóng)或若蟲(chóng)易被殺死,而老齡幼蟲(chóng)或若蟲(chóng)不易被殺死的現(xiàn)象,這是因?yàn)辇g期越大的幼蟲(chóng)或若蟲(chóng),表皮變厚,脂肪含量增加以及骨化程度加深等使殺蟲(chóng)劑不易滲入所致。即使在同一齡期幼蟲(chóng)中,其感受性與體重也有關(guān),隨著體重的增加,感受性也隨之降低。一般講體重大,脂肪含量就多,對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性就低,但是,表皮內(nèi)脂肪含量的多少卻與感受性成反比,即表皮內(nèi)脂肪含量越多,對(duì)殺蟲(chóng)劑就越敏感??梢?jiàn),表皮內(nèi)脂肪含量的多少,是直接影響殺蟲(chóng)劑滲入蟲(chóng)體的主導(dǎo)因子。此外老齡幼蟲(chóng)接觸殺蟲(chóng)劑時(shí),
32、可以立即化蛹而避免被殺死,而幼齡幼蟲(chóng)則無(wú)此能力。成蟲(chóng)期對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性,雖不像幼蟲(chóng)那樣有規(guī)律,但與日齡的關(guān)系很密切。例如稻飛虱、葉蟬類日齡為8一5 d 的個(gè)體對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性較一致。果蠅成蟲(chóng)剛羽化對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性高,但到5 d 的個(gè)體感受性就降低,5 d 以后其感受性又逐漸增高。蚜蟲(chóng)的各種變異型對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也存在差異。例如桃蚜赤色型對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性比黃色型高2一6倍 (如圖1-2)。插圖圖1-2 桃蚜的體色和殺蟲(chóng)劑的感受性4昆蟲(chóng)的性別與生殖對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性 同種昆蟲(chóng)因性別不同對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也有差異。一般講,雌性昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性比雄性昆蟲(chóng)低,這和體內(nèi)脂肪的含量與分布、個(gè)體大小、呼吸強(qiáng)度
33、等因子有關(guān),但對(duì)有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑來(lái)講,則雄性個(gè)體比雌性個(gè)體感受性低。試驗(yàn)證明,用辛硫磷處理家蠅群體,雌性家蠅死亡多,而雄性的死亡少,但用溴氰菊酯處理時(shí),雌性家蠅死亡少,而雄性家蠅死亡多,這是因?yàn)橛袡C(jī)磷殺蟲(chóng)劑的作用機(jī)制是抑制蟲(chóng)體神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酯酶的活性,而雌蟲(chóng)體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的含量比雄蟲(chóng)少,所以雌蟲(chóng)比雄蟲(chóng)更敏感。據(jù)報(bào)道,雌成蟲(chóng)在產(chǎn)卵前的感受性低,而產(chǎn)卵后則感受性高。5昆蟲(chóng)的代謝與生理特點(diǎn)對(duì)殺蟲(chóng)劑感受性的影響 昆蟲(chóng)的新陳代謝及呼吸率與昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性有關(guān)。當(dāng)新陳代謝與呼吸率增加時(shí),昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性就增高。越冬期昆蟲(chóng),由于新陳代謝、呼吸率都很低,體內(nèi)脂肪貯存又較多,因而對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性就低,
34、所以很難被殺死。但也有相反的事例,如果蠅的呼吸率增高,對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性就降低,當(dāng)然昆蟲(chóng)的新陳代謝及呼吸率也受到外界環(huán)境條件的影響。另外,供試?yán)ハx(chóng)的營(yíng)養(yǎng)條件對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也有影響。例如庫(kù)墳幼蟲(chóng)以奶粉為營(yíng)養(yǎng)與以藻類為營(yíng)養(yǎng)的對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性相差一倍。又如來(lái)源不同寄主植物的蚜蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性差異也很顯著。但也有相反的情況,不同作物上的小菜蛾對(duì)敵敵喪、甲胺磷等殺蟲(chóng)劑的感受性變化不大 (見(jiàn)表1-2)。表1-2 用甘藍(lán)葉和蘿卜嫩芽飼養(yǎng)的小菜蛾三齡幼蟲(chóng)對(duì)敵敵畏、甲胺磷和苯氰磷的 LC50(ppm,食葉浸漬法)(陳年春,1990)殺 蟲(chóng) 劑甘藍(lán)葉(a)蘿卜嫩芽(b)a/b敵 敵 畏2702651.0甲 胺
35、磷3.53.21.1苯 氰 磷48510.9(二)環(huán)境因素環(huán)境條件對(duì)生物測(cè)定有顯著的影響,在測(cè)定中,影響比較明顯的因素是溫度、濕度、光照、營(yíng)養(yǎng)、容器和密度等,因此在生物測(cè)定中,對(duì)環(huán)境條件要嚴(yán)格控制,并給予適宜的環(huán)境條件。1溫度 溫度的高低不僅直接影響生物體的新陳代謝,同時(shí)也影響到殺蟲(chóng)劑的化學(xué)活性。在高溫時(shí),昆蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育迅速,新陳代謝作用比較強(qiáng),對(duì)殺蟲(chóng)劑的解毒作用增強(qiáng),但是另一方面高溫可以增強(qiáng)殺蟲(chóng)劑的穿透性和作用速度,所以,一般講,用高劑量及作用迅速的殺蟲(chóng)劑時(shí),在一定溫度范圍內(nèi),溫度越高,毒效越大,殺死昆蟲(chóng)所需時(shí)間愈短。而作用緩慢的殺蟲(chóng)劑或具有負(fù)溫度系數(shù)的殺蟲(chóng)劑,如擬除蟲(chóng)菊酯,溫度越低,毒效越
36、大,這可能是在低溫時(shí),解毒及代謝作用緩慢,更有利于殺蟲(chóng)劑的積累和毒效作用的發(fā)揮。這里應(yīng)區(qū)分開(kāi)處理時(shí)的溫度和處理后的溫度,一般講處理時(shí)溫度高,處理后恢復(fù)時(shí)的溫度低,則毒效高;反之,則毒效就低,但一般認(rèn)為處理后恢復(fù)時(shí)的溫度對(duì)殺蟲(chóng)劑毒效的發(fā)揮更重要。(1)處理前的溫度及飼養(yǎng)的溫度 生物測(cè)定一般采用室內(nèi)飼養(yǎng)的目標(biāo)昆蟲(chóng),因此,先介紹飼養(yǎng)時(shí)處理前的溫度對(duì)殺蟲(chóng)劑毒效的影響。Craufuvd-Benson(1938)把扁蟲(chóng) (Ahasverus advena)分別在20和25下飼養(yǎng),發(fā)現(xiàn)20中飼養(yǎng)的昆蟲(chóng)對(duì)魚(yú)藤酮更敏感。Sun(1947)把雜擬谷盜分別在25、30和35下飼養(yǎng),然后在25時(shí)熏蒸,發(fā)現(xiàn)在35中飼養(yǎng)
37、的雜擬谷盜對(duì)CS2更敏感。在進(jìn)行生物測(cè)定之前,把目標(biāo)昆蟲(chóng)置于一定溫度中適應(yīng)一段時(shí)間,這一溫度稱為處理前溫度,它的影響比飼養(yǎng)的溫度有時(shí)更顯著。如熏蒸介殼蟲(chóng)時(shí),處理前的溫度比熏蒸時(shí)的溫度低,則死亡率就高。但也有相反情況,Kjnght(1925)用 HCN 熏蒸瓢甲 (Hippodamia converyens),處理前的溫度比處理時(shí)的溫度高,死亡率反而增加??梢?jiàn),處理前溫度與處理時(shí)的溫度對(duì)殺蟲(chóng)劑毒效的影響似乎沒(méi)有一定規(guī)律,但一般認(rèn)為處理前經(jīng)低溫處理,可提高昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的耐藥力。(2)處理時(shí)的溫度 許多殺蟲(chóng)劑與處理時(shí)的溫度關(guān)系隨昆蟲(chóng)種類而不同。一般講,具有正溫度系數(shù)的殺蟲(chóng)劑,隨著處理溫度的增高而毒效
38、增加,如對(duì)硫磷、內(nèi)吸磷、熏蒸劑等。熏蒸劑在高溫時(shí),氣體揮發(fā)散布快,作用迅速。高溫還可能刺激或增加昆蟲(chóng)的活動(dòng),打開(kāi)氣門,促進(jìn)蟲(chóng)體接觸有利于進(jìn)人蟲(chóng)體更多的藥劑,所以高溫時(shí)毒效顯著。具有負(fù)溫度系數(shù)的殺蟲(chóng)劑隨著處理時(shí)溫度升高而毒效降低,如DDT、擬除蟲(chóng)菊酯等,據(jù)Guthrie(1950)報(bào)道,用 DDT、擬除蟲(chóng)菊酯處理德國(guó)蜚蠊,在14.5時(shí)的毒效比在32時(shí)要高。Vinson 和 Kearns(1952)研究了 DDT 在l5及35時(shí)對(duì)美洲蜚蠊的毒效,也證明了DDT具有負(fù)溫度系數(shù)。但是對(duì)不同的昆蟲(chóng),DDT的毒效與處理時(shí)的溫度關(guān)系也有不同的情況。例如用DDT處理乳草 (Qncopeltus fasciat
39、us)時(shí),在l0一22范圍內(nèi),死亡率逐漸上升,但在此范圍之外又再下降,表明前部分是正溫度系數(shù),后部分為負(fù)溫度系數(shù)。六六六有時(shí)表現(xiàn)具有正溫度系數(shù),有時(shí)具有負(fù)溫度系數(shù)。(3)處理后的溫度 從生物測(cè)定角度來(lái)看,處理后的溫度對(duì)測(cè)定結(jié)果影響最大,也最重要。一般講,處理后溫度越低,死亡率越大,毒效越高(表1-3)。但是,必須指出處理后的低溫,雖然使死亡率增加,但殺死害蟲(chóng)所需時(shí)間延長(zhǎng)。另一方面,殺蟲(chóng)劑的毒效雖然有所提高,但也有一定范圍 (10一30之間),這是因?yàn)樵诟邷貢r(shí)殺蟲(chóng)劑更容易被代謝解毒,所以低溫時(shí)毒效反而高。但過(guò)高溫度 (30以上),對(duì)昆蟲(chóng)會(huì)造成不利的影響。2濕度 一般處理時(shí)間短,濕度的影響不大,但
40、處理后不同相對(duì)濕度對(duì)毒效的影響較大。濕度不影響殺蟲(chóng)劑的穿透性及作用速度,也不影響解毒過(guò),通常它只影響昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的忍受力,在適宜的濕度時(shí),可以增強(qiáng)昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的忍受力,反之,就會(huì)降低昆蟲(chóng)表1-3 處理后溫度與死亡率的關(guān)系昆 蟲(chóng)殺蟲(chóng)藥劑處理后溫度及死亡率(%)作 者Eutettix除蟲(chóng)菊酯60 81-88100 29-33Harries,1945家蠅成蟲(chóng)除蟲(chóng)菊酯20 死亡率大38 死亡率小Eagleson,1947Plutella 幼蟲(chóng)0.0125%DDT70 7890 9Dustan,1947Ahasversus魚(yú)藤 20 死亡率大 25 死亡率小Crauford-Benson,1938Mac
41、rocentrusDDT 70 死亡率大 80 死亡率小Peterson,1946蜜蜂除蟲(chóng)菊酯及魚(yú)藤20 34.5101Bottcher,1939Tribolium除蟲(chóng)菊酯70 4-780 1Potter et al.,1946DDT70 2.580 1Lymantria幼蟲(chóng)除蟲(chóng)菊酯30 死亡率小20 死亡率大Klinger,1936Prodenia幼蟲(chóng)砷酸鉛70 280 1Ellisor et al.,1940對(duì)殺蟲(chóng)劑的忍受力,提高毒效。通常昆蟲(chóng)中毒后,往往不能控制體內(nèi)水分的蒸失,又不能繼續(xù)取食,從食物中獲取水分 或中毒后新陳代謝作用加速,體內(nèi)水分損失較抉,以致大量失水而致死。濕度過(guò)小時(shí),可
42、增強(qiáng)殺蟲(chóng)劑對(duì)昆蟲(chóng)的毒效,提高死亡率。例如用除蟲(chóng)菊酯油劑處理浮塵子(Euteffix),無(wú)論在16或37,相對(duì)濕度在20%時(shí)的死亡率比在90%時(shí)的高。又如Cranfard-Bonson(1938)用魚(yú)藤酮浸液處理半扁蟲(chóng),相對(duì)濕度為55%時(shí)的死亡率比90%時(shí)的高。但也有相反的情況,用DDT藥膜法處理雜擬谷盜,相對(duì)濕度為84%的死亡率反而比低濕度 (30%一50%)的要高。處理后的相對(duì)濕度確對(duì)殺蟲(chóng)劑毒效有顯著影響,但不同昆蟲(chóng)及不同殺蟲(chóng)劑的情況也不相同;相對(duì)濕度對(duì)熏蒸劑的影響更大,它能影響熏蒸劑在空氣中的分布與性質(zhì),往往濕度低時(shí),死亡率高,殺蟲(chóng)劑毒效增強(qiáng)。3光照 光照對(duì)昆蟲(chóng)的感受性一般影響不大,但光照
43、可促進(jìn)某些昆蟲(chóng)活動(dòng),增加新陳代謝及能的消耗,因而增強(qiáng)昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性。Meioch等 (1972)在六種不同的環(huán)境條件下(不同溫度、不同光照強(qiáng)度以及不同光照時(shí)間等)用馬拉硫磷和谷硫磷處理棉象甲的試驗(yàn),證明了這兩種殺蟲(chóng)劑在高溫時(shí)毒效都增加,但與光照無(wú)關(guān)。值得指出的是,光照對(duì)個(gè)別易發(fā)生光解作用的藥劑,以及近年來(lái)正在研究和開(kāi)發(fā)的光活性殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)的毒效有顯著的影響。4昆蟲(chóng)在藥劑處理前后的食物供應(yīng) 昆蟲(chóng)取食食物的種類及質(zhì)量直接影響蟲(chóng)體的營(yíng)養(yǎng)情況、健康程度及其個(gè)體重量,從而影響到昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的忍受性。例如取食棉鈴長(zhǎng)大的棉鈴象鼻蟲(chóng)比食棉蕾的對(duì)毒殺芬的抵抗力要強(qiáng);又如在玫瑰上長(zhǎng)大的紅蜘蛛比在豆類植物上長(zhǎng)
44、大的抗性要強(qiáng),而在番茄上長(zhǎng)大的抗性最低;又如用酵母的培養(yǎng)基飼喂的果蠅對(duì)煙堿的抵抗力要強(qiáng)。可見(jiàn)營(yíng)養(yǎng)對(duì)生物測(cè)定結(jié)果影響很大。因此,對(duì)室內(nèi)飼養(yǎng)的目標(biāo)昆蟲(chóng),應(yīng)使飼養(yǎng)條件標(biāo)準(zhǔn)化。除了測(cè)定前試蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)狀況影響生物測(cè)定的結(jié)果外,處理前后饑餓對(duì)殺蟲(chóng)劑的毒效也有明顯的影響,例如粘蟲(chóng)在藥劑處理前饑餓者比不饑餓的對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性高。為了獲得良好效果,一般在處理前饑餓l2h,可以促進(jìn)昆蟲(chóng)的進(jìn)食量及藥量,從而得到滿意的結(jié)果。但必須注意,處理前饑餓的時(shí)間應(yīng)經(jīng)過(guò)試驗(yàn)確定,以免造成昆蟲(chóng)在饑餓中死亡;而在處理后,應(yīng)及時(shí)飼喂。5蟲(chóng)口密度和容器 昆蟲(chóng)在飼養(yǎng)期間,蟲(chóng)口密度大小也直接影響個(gè)體重量,一般高密度飼養(yǎng)的幼蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性較
45、高,這是因?yàn)槊芏冗^(guò)大,蟲(chóng)體取食量及營(yíng)養(yǎng)情況受到影響,所以個(gè)體??;同時(shí),個(gè)體間彼此擾動(dòng)增加了接觸藥量和個(gè)體的新陳代謝,也有少數(shù)昆蟲(chóng)有自相殘殺或斗爭(zhēng)習(xí)性,所以不能使蟲(chóng)口密度過(guò)大。從圖1-3看出飼養(yǎng)密度大的夜盜蟲(chóng) (六齡)對(duì)苯硫磷的50%致死時(shí)間為2Omin,而飼養(yǎng)密度小的,致死時(shí)間為30min,表明高密度飼養(yǎng)的幼蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性有所提高。插圖生物測(cè)定用的容器種類、大小等對(duì)昆蟲(chóng)的死亡率也有較大影響,如用煙堿處理果蠅的試驗(yàn)表明,處理用的玻管直徑愈小,果蠅群體因活動(dòng)面過(guò)小,相互擾動(dòng)作用也愈大,則死亡率也愈高。又如,改變?cè)囼?yàn)容器時(shí),小菜蛾對(duì)敵敵畏、苯氰磷、甲胺磷和氰戊菊酯的感受性不同。從表1-4看出,使
46、用塑料培養(yǎng)皿時(shí),小菜蛾三齡幼蟲(chóng)對(duì)敵敵畏、苯氰磷、甲胺磷和氰戊菊酯的致死中濃度比使用塑料杯的要低,說(shuō)明使用塑料培養(yǎng)皿比使用塑料杯的感受性要高。 表1-4 不同試驗(yàn)容器中小菜蛾對(duì)敵敵畏、苯氰磷、甲胺磷和氰戊菊酯的LC50殺 蟲(chóng) 劑LC50 (ppm)(a)/(b)塑料培養(yǎng)皿(a)塑料杯(b)敵 敵 畏1902600.7苯 氰 磷33.70.8甲 胺 磷30350.9氰戊菊酯7.78.80.9注: 塑料培養(yǎng)皿(直徑90mm,高20mm);塑料杯(直徑60mm,高40mm)。 (三)生物測(cè)定技術(shù)方面在殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定中,的處理方法應(yīng)根據(jù)藥劑的作用方式和試蟲(chóng)危害特點(diǎn)而定。對(duì)多數(shù)藥劑而言,微量點(diǎn)滴法是毒力測(cè)
47、定的最精確可靠的方法。但不是所有的藥劑和昆蟲(chóng)都適合采用點(diǎn)滴法處理。對(duì)于內(nèi)吸性殺蟲(chóng)劑或殺蝸劑,要測(cè)定出藥劑對(duì)刺吸式門錨昆蟲(chóng)或蛹的毒力,還須采用植物漫漬法或噴霧法,這樣才能使藥劑的作用特點(diǎn)充分表達(dá)出來(lái)。測(cè)定以胃毒殺蟲(chóng)作用為主的藥劑時(shí),也需采用相應(yīng)的方法。具特異性作用或殺卵作用的藥劑,不但要考慮到處理方法,還應(yīng)注意選用適合測(cè)定的蟲(chóng)態(tài),不然,測(cè)得的結(jié)果就沒(méi)有應(yīng)用價(jià)值。此外,試驗(yàn)方法、處理時(shí)間及部位等對(duì)殺蟲(chóng)劑的感受性也有不同的影響,在生物測(cè)定技術(shù)中均應(yīng)加以注意。 (三)對(duì)殺蟲(chóng)劑的妻求 供毒力測(cè)定用的藥劑莊是標(biāo)準(zhǔn)品 (化學(xué)純),其工業(yè)品或制劑申因含雜質(zhì)或助劑,會(huì)影響到毒力。若確難獲得標(biāo)準(zhǔn)姑,也應(yīng)盡量選用高
48、含量 (卜90)工業(yè)品,最好不用商品制劑。因采用的毒力測(cè)娃方法不同,有時(shí)也需將原藥加T成制劑。如測(cè)定胃毒毒力,需用粉劑制備夾毒葉片,或作噴粉處理都要用粉劑,這可用醫(yī)用滑百粉作填料,以丙酮為媒溶劑,用浸潤(rùn)法加工。需用噴霧法或浸漬法處理時(shí),要將藥劑配成乳油,多用吐溫類乳化劑和溶解度大,毒副作用小的有機(jī)溶劑 (如二甲苯)配制。(四)對(duì)殺蟲(chóng)劑處理方法的妻求 殺蟲(chóng)劑的處理方法應(yīng)根據(jù)藥劑的作用方式和試蟲(chóng)危害特點(diǎn)而定。對(duì)多數(shù)藥劑而言,微量點(diǎn)滴法是毒力測(cè)定的最精確可靠的方法。但不是所有的藥劑和昆蟲(chóng)都適合采用點(diǎn)滴法處理。對(duì)于內(nèi)吸性殺蟲(chóng)劑或殺蝸劑,要測(cè)定出藥劑對(duì)刺吸式門錨昆蟲(chóng)或蛹的毒力,還須采用植物漫漬法或噴霧法
49、,這樣才能使藥劑的作用特點(diǎn)充分表達(dá)出來(lái)。測(cè)定以胃毒殺蟲(chóng)作用為主的藥劑時(shí),也需采用相應(yīng)的方法。具特異性作用或殺卵作用的藥劑,不但要考慮到處理方法,還應(yīng)注意選用適合測(cè)定的蟲(chóng)態(tài),不然,測(cè)得的結(jié)果就沒(méi)有應(yīng)用價(jià)值。無(wú)論采用何種處理方法都必須設(shè)有對(duì)照組,在測(cè)定及觀察期間,往往有自然死亡的情況,尤其對(duì)于引間來(lái)回的試蟲(chóng),會(huì)存有被天敵寄生或感病個(gè)體,如無(wú)對(duì)照,無(wú)法消除自然因素對(duì)藥劑效果的干擾。對(duì)照組的設(shè)置,有空白對(duì)照,即完全不處理!溶劑對(duì)照,即不含有藥劑有效成分,僅用溶劑 (丙酮、水處理,以比較藥劑的有效性。測(cè)定中多采用溶劑對(duì)照,對(duì)照組試蟲(chóng)的其他條件應(yīng)同處理組一致。測(cè)定中,如發(fā)現(xiàn)對(duì)照組死亡率大于10,則所測(cè)定的
50、全部?jī)?nèi)容應(yīng)重做。這說(shuō)明試蟲(chóng)本身個(gè)體間生活力差異較大,會(huì)直接影響到測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。三、生物測(cè)定技術(shù)的一般原則殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定的基本原理是研究殺蟲(chóng)劑與生物(主要是昆蟲(chóng))的相關(guān)性,因此對(duì)殺蟲(chóng)劑及生物的要求比較嚴(yán)格,使用的殺蟲(chóng)劑應(yīng)當(dāng)是純品(或原藥),至少有效成分含量要準(zhǔn)確,供試?yán)ハx(chóng)應(yīng)該齡期一致、個(gè)體差異很小、生理狀態(tài)較一致。在一定的環(huán)境條件下,殺蟲(chóng)劑與昆蟲(chóng)的相互關(guān)系如圖1-1所示。因此,在生物測(cè)定中應(yīng)遵循以下幾個(gè)原則。環(huán)境條件 毒性昆蟲(chóng)生理狀態(tài)殺蟲(chóng)劑理化特性耐藥性(一)影響因素如前所述,外界環(huán)境條件的變化,如溫度、濕度、光照等對(duì)殺蟲(chóng)劑的理化性狀和昆蟲(chóng)的生理狀態(tài)都有影響;而 殺蟲(chóng)劑理化性能的變化,能影響
51、對(duì)昆蟲(chóng)的毒效;昆蟲(chóng)的生理狀態(tài),如發(fā)育階段、齡期、性別等的不同對(duì)殺蟲(chóng)劑有不同的耐藥力。然而,在測(cè)定中,要求只有兩個(gè)變數(shù),一個(gè)是殺蟲(chóng)劑的劑量(或濃度)作為自變數(shù)(x),另一個(gè)是死亡率作為應(yīng)變數(shù)(y)。死亡率(y)是殺蟲(chóng)劑的劑量(或濃度)(x)的函數(shù),可用y=f(x)表示,而其它因素應(yīng)盡可能穩(wěn)定一致,使影響因素力求穩(wěn)定。否則,我們所測(cè)得的死亡率(y)不只是由殺蟲(chóng)劑劑量(x)的改變而引起的,還會(huì)因昆蟲(chóng)的大小、齡期、性別、發(fā)育階段或環(huán)境條件以及處理方法等的不一致,使得測(cè)得的劑量對(duì)數(shù)死亡率機(jī)率值的關(guān)系不是y=a+bx的直線回歸式,而變成y=a+b1x1+b2x2+b3x3+bnxn的復(fù)雜的偏回歸式。其中x
52、2可能表示昆蟲(chóng)不同生理狀態(tài)的影響,x3可能表示溫度的影響,x4可能表示營(yíng)養(yǎng)或食物的影響等等。顯然,這樣做是不合適的,而且造成了分析上的困難,得到的結(jié)果不可靠,因此在毒力測(cè)定中要用目標(biāo)昆蟲(chóng)的一致性和相對(duì)控制環(huán)境條件,盡可能減少或消除處理間的相互干擾,才能提高試驗(yàn)結(jié)果的精確度,獲得比較穩(wěn)定可靠的結(jié)果。主要條件有:(1)發(fā)育階段 如測(cè)定幼蟲(chóng)或若蟲(chóng)應(yīng)該用同一齡期,體重大小一致。如用成蟲(chóng),要用同一日齡的,以羽化后3-5天的為好。(2)性別 所用成蟲(chóng)應(yīng)雌雄一致,一般以雌成蟲(chóng)較好。 (3)營(yíng)養(yǎng) 在室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)條件下飼養(yǎng)的試蟲(chóng),才能達(dá)到營(yíng)養(yǎng)條件一致。從野外采集低齡幼蟲(chóng)(或若蟲(chóng)),也應(yīng)在室內(nèi)飼養(yǎng)一段時(shí)間后,再用來(lái)測(cè)
53、試。 (4)溫度 溫度對(duì)試蟲(chóng)的活動(dòng)性、代謝率、體內(nèi)生理生化的變化等,以及對(duì)殺蟲(chóng)劑的穿透性、轉(zhuǎn)化率都有較大影響。如唐振華等(1977)在室內(nèi)20和28測(cè)定氧樂(lè)果、樂(lè)果、磷胺和西維因等對(duì)棉蚜的毒力時(shí)發(fā)現(xiàn),供試藥劑對(duì)棉蚜的毒力均屬于正溫度系數(shù)。即毒力隨溫度升高而升高,尤以樂(lè)果更突出,溫度從20升至28時(shí),LD50值從4.7g/蚜降低至0.7g/蚜,毒力提高6.7倍。因此,在測(cè)定前溫度和處理后恢復(fù)時(shí)的溫度一致是很重要的,一般在25左右。(5)世代 常因世代不同,試蟲(chóng)對(duì)藥劑的敏感性不同,所以要選用同一世代的試蟲(chóng)進(jìn)行測(cè)試或比較。 (6)溶劑 不同溶劑對(duì)昆蟲(chóng)表皮穿透率不同,單位時(shí)間內(nèi)滲入蟲(chóng)體內(nèi)的藥量也不同,
54、在體內(nèi)的代謝速率也不同,最后到達(dá)靶標(biāo)部位的藥量也不同,測(cè)得結(jié)果就有明顯差異,因此配制藥液的溶劑要一致,一般以丙酮為宜。 (7)藥劑含量 殺蟲(chóng)劑有效含量可直接影響到測(cè)得結(jié)果是否正確,所以一般要求純度95%以上,至少是含量較高的原藥,并應(yīng)符合質(zhì)量要求才行。(8)藥劑處理部位 如點(diǎn)滴法,常因點(diǎn)滴部位不同,得到的毒力結(jié)果不同,點(diǎn)滴部位離作用部位遠(yuǎn)則毒力低,以點(diǎn)滴于足或腹部末端毒力最低。一般以點(diǎn)滴胸背面或腹背部為宜。另外,濕度、光照、蟲(chóng)口密度等對(duì)殺蟲(chóng)劑的毒力也有影響,應(yīng)控制恒定。(二)必須設(shè)立對(duì)照在生物測(cè)定中,設(shè)立對(duì)照是很重要的,無(wú)論是采自田間的還是室內(nèi)飼養(yǎng)的目標(biāo)昆蟲(chóng),有些個(gè)體因生活力弱,或天敵寄生、感
55、病等原因,在試驗(yàn)期間往往有自然死亡情況,因此藥劑處理組的死亡蟲(chóng)數(shù)也包括自然死亡數(shù),顯然這不完全是藥劑作用的效果,故應(yīng)設(shè)立對(duì)照加以校正,以消除自然因素所造成的死亡對(duì)藥劑效果的干擾。一般有3種對(duì)照:空白對(duì)照,即完全不處理(在自然狀態(tài)下);溶劑對(duì)照,即不含有效成分的溶劑、乳化劑等。如以丙酮配制的藥液進(jìn)行點(diǎn)滴試驗(yàn),那么對(duì)照組就應(yīng)點(diǎn)滴丙酮,這是為了消除溶劑對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響;標(biāo)準(zhǔn)藥劑對(duì)照,標(biāo)準(zhǔn)藥劑是指在生產(chǎn)中對(duì)某中目標(biāo)昆蟲(chóng)常用的有效藥劑,不僅可以同新農(nóng)藥對(duì)比,還可以消除一些偶然因素的造成的誤差。上述三種對(duì)照可以根據(jù)具體情況和試驗(yàn)要求來(lái)設(shè)立,一般至少設(shè)兩種對(duì)照。(三)必須設(shè)重復(fù)生物測(cè)定技術(shù)所測(cè)試的對(duì)象不是昆蟲(chóng)個(gè)體,而是昆蟲(chóng)群體,在一個(gè)昆蟲(chóng)群體中個(gè)體之間對(duì)殺蟲(chóng)劑的敏感性有顯著的差異,因此取樣的代表性很重要。如果取樣少了,就有可能由于取樣不夠全面或不是隨機(jī)取樣而造成結(jié)果的片面性。取樣越多,試驗(yàn)結(jié)果雖然越可靠,但工作量太大。從生物統(tǒng)計(jì)理論上講,增加重復(fù)次數(shù)減少每個(gè)重復(fù)的生物個(gè)體是減少試驗(yàn)誤差的一種方法。但也應(yīng)根據(jù)具體情況而定,一般重復(fù)三次,每個(gè)重復(fù)20-50頭試蟲(chóng)。但如果是作初
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