生物安全柜的正確使用和維護（行業(yè)經(jīng)驗）

1、生物安全柜的正確使用和維護浙江省疾病預防控制中心翁景清 1智囊經(jīng)驗第一節(jié) 選型原則1、根據(jù)工作性質病原微生物危害程度有無毒揮發(fā)性氣體是否涉及放射性物質2、具備醫(yī)療器械注冊證3、產(chǎn)品質量與品牌2智囊經(jīng)驗醫(yī)療器械分類3智囊經(jīng)驗醫(yī)療器械注冊證4智囊經(jīng)驗BIBASE 生物安全柜(B2型)5智囊經(jīng)驗前言生物安全柜（Biosafety Cabinet, BSC)：在生物因子操作過程中用來保護操作人員、環(huán)境和（或）實驗物品，防止其暴露于實驗中（可能）產(chǎn)生的危險性或潛在危險性生物氣溶膠或濺出物的負壓通風裝置。是微生物實驗室的重要設備，保護操作者和環(huán)境，有些保護物品， 屬一級安全隔離屏障，關系人體生命安全，要求

2、非常嚴格。在SARS后，大量使用安全柜。6智囊經(jīng)驗安全柜標準EN12469:2000Biotechnology-Performance criteria for microbiological safety cabinets (生物技術 微生物安全柜性能標準)NSF/ANSI49:2004 Class(laminar flow) biosafety cabinetry(級（層流）生物安全柜)制定我國的標準:國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的生物安全柜YY 0569-2005(行業(yè)標準) 發(fā)布:2005-07-18 實施:2006-06-01生物安全柜（170-2005）中華人民共和國建設部發(fā)布（建筑

3、工業(yè)行業(yè)標準）（2006-06-01實施）7智囊經(jīng)驗 第二節(jié) 中國標準和歐美標準比較2006年6月1日，中國醫(yī)藥行業(yè)標準YY0569-2005正式實施了，這是國家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）于2005年7月18日發(fā)布的醫(yī)藥行業(yè)關于生物安全柜的強制性標準，據(jù)行業(yè)人士認為，這個標準的實施將會引發(fā)中國生物安全柜行業(yè)的重新洗牌。8智囊經(jīng)驗標準YY0569-2005正式實施，是國家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）于2005年7月18日發(fā)布的醫(yī)藥行業(yè)關于生物安全柜的強制性標準，不同于2005年6月1日實施的由建設部編制的生物安全柜JG170-2005的建設工業(yè)行業(yè)標準。醫(yī)藥行業(yè)的YY0569-2005標準

4、的編制是參照歐洲標準化委員會(CEN)頒布的生物安全柜歐洲標準EN12469:2000和由美國國家標準學會（American National Standard Institute, ANSI）官方認可的美國NSF49生物安全柜標準。 9智囊經(jīng)驗YY0569-2005的行業(yè)標準積極吸收采納了EN12469和NSF49這兩個生物安全柜標準中的重要部分，并將這兩個標準中相對薄弱的部分作出了提高修改，使中國的YY0569-2005標準成為世界上生物安全柜領域最權威的標準。10智囊經(jīng)驗一安全柜型號方面，中國YY0569-2005采取了和美國NSF49-2002相同的規(guī)定：將二級安全柜細分成四個型號首先

5、，這三個標準對生物安全柜的大分類以及性能要求方面都有相同的規(guī)定：對于二級生物安全柜的分類標準方面，中國YY0569-2005標準和美國NSF49標準一樣，不同于歐洲EN12469標準：11智囊經(jīng)驗從最基本的方面來說，三種類型安全柜都可以提供對操作人員、試驗品和工作環(huán)境的保護；工作原理也相同。最大的區(qū)別是EN12469只對“二級生物安全柜”有一個基本的定義，而YY0569同NSF49一樣，將二級生物安全柜依照前窗操作口流入氣流風速、排氣方式和循環(huán)方式等分為4個類型：A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型。12智囊經(jīng)驗二對于安全柜的柜體結構、性能和測試方面，中國標準充分吸收了歐美標準的優(yōu)點，采

6、用的是兩者中最嚴格的測試標準。13智囊經(jīng)驗對于柜體結構，EN12469和NSF49都是以規(guī)范性能為基礎，不是通過細節(jié)規(guī)格要求去規(guī)定生產(chǎn)商如何制作安全柜；相反，生產(chǎn)商擁有很大的自由去設計自己的安全柜，只要能符合性能測試標準就可以。14智囊經(jīng)驗而中國的YY0569則明確規(guī)定了安全柜的柜體結構的設計標準：II級A2、 B1 、B2 型安全柜的工作區(qū)均應該采用四面（左右兩面、后部、底部）雙層結構。三個類型安全柜的所有污染部位均應處于負壓狀態(tài)或被負壓通道和負壓通風系統(tǒng)包圍。II、III級安全柜裸露工作區(qū)內(nèi)三面?zhèn)缺诎鍛獮橐惑w成型結構，內(nèi)表面的拼接處必須做密封處理等等。可以看出中國的YY0569標準相比歐美

7、的標準更加明確規(guī)范了安全柜的柜體結構設計，更符合現(xiàn)在生物、化學等方面的實驗要求。15智囊經(jīng)驗三物理性能測試和合格標準YY0569、EN12469和NSF49都詳細規(guī)定了安全柜的各項測試方法和合格標準，三者的區(qū)別和聯(lián)系介紹如下：16智囊經(jīng)驗1. 人員、試驗品和環(huán)境保護的微生物挑戰(zhàn)測試在對人員、產(chǎn)品和環(huán)境以及產(chǎn)品的防交叉污染保護項目測試中，三個標準的測試方法、合格標準基本相同，即用微生物挑戰(zhàn)法來測試。但在人員保護測試中，中國的YY0569標準采用了同歐洲EN12469標準一樣的，被認為是常規(guī)微生物挑戰(zhàn)測試基礎上更為方便快捷的物理測試方案(KI-Discus測試)。17智囊經(jīng)驗這種測試方法可以在1分

8、鐘內(nèi)完成檢測結果，遠遠低于微生物法的48小時以上的培養(yǎng)所需要的時間，這就使得安全柜的生產(chǎn)廠家對出廠前的每臺安全柜都進行檢測變成了可能，保證了每臺出廠產(chǎn)品的安全性，遠遠優(yōu)于采用微生物挑戰(zhàn)法對產(chǎn)品抽檢的廠家。18智囊經(jīng)驗2. 下降氣流流速測試下降氣流流速對安全柜試驗樣品保護和交叉感染防護性能起到重要的影響，例如氣流流速太小將導致試驗樣品失去保護。YY0569和EN12469都規(guī)定了二級安全柜下降氣流流速的許可范圍為0.25-0.5m/s，而NSF49沒有給出任何下降氣流速率要求。19智囊經(jīng)驗在下降氣流流速的測試方法上，YY0569則采用了和NSF49相似的方法（原理是一致的）。YY0569和NSF

9、49都規(guī)定了多個測試點，這代表更高的測量精度要求；其中YY0569使用的的熱式風速儀，NSF49使用的是溫差式風速儀，而EN12469則沒有對測量儀器的準確度和類型進行規(guī)定。20智囊經(jīng)驗同時，YY0569和NSF49都通過規(guī)范有關測試儀器的精度和型號來提高測試的精度，并且YY0569還把安全柜的下降氣流分為更細的均勻下降和非均勻下降兩種模式，比NSF49的要求又提高一步。這說明在氣流流速側測試方面YY0569要優(yōu)于美國的NSF49，更優(yōu)于歐洲的EN12469標準。21智囊經(jīng)驗3. 流入氣流流速測試在流入氣流測試方面，YY0569采用的標準同歐標EN12469一樣，通過外排氣流估算流入氣流流速，

10、美國標準采用的是直接流入氣流流速測試方法。這兩種方法測試的原理雖然不同但結果一樣。同時YY0569、EN12469和NSF49都對最低流入氣流流速有規(guī)定。在這里我們比較A2型二級生物安全柜和歐洲“普通型”二級生物安全柜的要求：YY0569和NSF49對A2型二級生物安全柜的最低流入氣流速率的要求是0.5m/s，而EN12469對二級安全柜的要求是0.4m/s。22智囊經(jīng)驗4. 工作舒適度有關標準： 噪音、光強和震動測試在這幾個方面測試上YY0569、NSF49和EN12469有類似的測試方法，這里就不再討論。23智囊經(jīng)驗5. 高效過濾器完整性測試YY0569-2005和NSF49都規(guī)定過濾器完

11、整性測試中使用的是氣溶膠噴發(fā)劑(例如DOP,PAO等)；歐洲EN12469標準（使用一樣的測試方法）使用另一種自然氣溶膠(自然空氣)的測試方法。大量的研究表明使用自然氣溶膠測試方法不能確保檢測到所有漏隙。因為使用氣溶膠發(fā)生器噴發(fā)產(chǎn)生的氣溶膠顆粒，在發(fā)生器壓力的作用下能很容易的抵達和擴散到安全柜內(nèi)任何規(guī)定的位置，并且能使氣溶膠均勻分布在柜內(nèi)規(guī)定的位置，特別是能完全覆蓋到高效過濾器和柜體結合的部位。24智囊經(jīng)驗而靠自然空氣使氣溶膠在柜內(nèi)擴散的方法，由于柜內(nèi)自然空氣比較穩(wěn)定，流動性和動力很差，所以氣溶膠不會很均勻的擴散到柜內(nèi)規(guī)定的部位，從而就可能有過濾器和柜體結合的部位沒有被氣溶膠完全覆蓋的可能導致

12、測試結果不精確。25智囊經(jīng)驗6. 柜體泄漏的測試方法在柜體泄漏的測試方法上，YY0569采用了不同于歐美兩個標準的壓力衰減法，這個方法用到了壓力計或壓力傳感器系統(tǒng)來顯示柜內(nèi)壓力，可以定量的檢測安全柜柜體的密閉性，非常具有說服力。而NSF49規(guī)定用簡單的皂泡法泄漏測試為生產(chǎn)商對所有安全柜的例行檢測，EN12469規(guī)定為獨立的認證實驗室的檢測項目，而不是要求廠家在出廠時進行檢測。26智囊經(jīng)驗7. 其他各類測試在其他各個類型性能測試上，這三個標準基本采用了相同的測試方法，如馬達和風機性能測試、工作區(qū)溫升測試、柜體穩(wěn)定性測試（包括柜體抗翻倒、柜體抗變形、工作臺面抗變形、柜體抗向前傾倒）等，這里就不在過

13、多的描述。27智囊經(jīng)驗結論盡管這三種標準的實施時間和內(nèi)容不盡相同，但是在大體上擁有很大的相似性。在一些關鍵測試方法上，中國的標準在吸收了歐美標準中最佳方法的基礎上，又開發(fā)了更精確嚴密的測試方法，所以說中國安全柜檢測標準是目前世界上最嚴格的標準。正確的選擇生物安全柜，并且按照操作守則正確使用、維護安全柜是確保實驗室生物安全的基本原則。 28智囊經(jīng)驗第三節(jié) 凈化工作臺和生物安全柜 的差別是兩個不同的概念不能以凈化工作臺代替生物安全柜，反之則可。保護對象不同29智囊經(jīng)驗凈化工作臺類型水平層流垂直層流30智囊經(jīng)驗水平層流的“潔凈臺”原理圖31智囊經(jīng)驗一、水平層流的“潔凈臺”水平層流的潔凈臺不是生物安全

14、柜。 他們通過工作表面排放HEPA高效過濾的空氣并直接吹向操作者。這些設備僅僅提供產(chǎn)品保護。他們可以用于某些潔凈的工作，諸如無菌設備或電子設備的無塵組裝。當處理細胞培養(yǎng)材料或藥物合成時或當操作可能傳染的材料時，這些潔凈臺是絕對不能使用的。操作人員在使用潔凈臺操作這些材料時（包括蛋白抗原）可能暴露于這些材料中，它可能導致過敏。水平層流的潔凈臺決不能代替生物安全柜用在生物醫(yī)學或獸醫(yī)實驗室。 32智囊經(jīng)驗垂直層流“潔凈臺”原理圖33智囊經(jīng)驗二、垂直層流“潔凈臺” 垂直層流的潔凈臺同樣不是生物安全柜。微生物實驗室中使用，例如細胞培養(yǎng)時的無菌操作需要一個潔凈的區(qū)域。由于這些設備一般有一個觀察窗，空氣通常

15、從觀察窗下排放到房間。它和水平層流的潔凈臺一樣會導致同樣的潛在危險。 34智囊經(jīng)驗三、生物安全柜（BSCs）提供人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護 35智囊經(jīng)驗HEPA高效空氣過濾器 關鍵HEPA過濾器清除粒子等于和大于0.3 um粒子（這個粒徑基本上包括了所有的細菌、孢子和病毒）的效率為99.999%。典型的HEPA過濾器的介質是單層的硼硅酸鹽纖維。摺皺的濾材又用鋁蓋板分開。濾材被粘合到木頭、金屬或塑料框架上。粗心的處理濾器（例如，不合適的儲藏或摔落）能損壞粘接的濾材，或者造成漏洞或破裂導致破漏這就是安全柜在初次安裝和重新移位后必須進行濾器整體檢驗的原因。36智囊經(jīng)驗一）生物安全柜的分型： Class

16、I 級生物安全柜 Class II 級生物安全柜，其又具體分為： 1. Class II Type A1 型生物安全柜 2. Class II Type A2型生物安全柜 3. Class II Type B1型生物安全柜 4. Class II Type B2型生物安全柜 Class III 級生物安全柜37智囊經(jīng)驗生物安全柜的選擇及適用性表1 通過危害評估選擇生物安全柜 估計的生物危險級別提供的保護 應選用的生物安全柜級別人員產(chǎn)品環(huán)境BSL 1-3 是 不是IBSL 1-3 是是是II（A1，A2， B1，B2） BSL 4 是是是IIIB1，B238智囊經(jīng)驗I級生物安全柜 樣品沒有得到保

17、護操作者得到保護操作環(huán)境得到保護經(jīng)過樣品區(qū)的空氣，經(jīng)過高效過濾器的過濾之后，100%地排放到實驗室環(huán)境中用途：在許多情況下，I級生物安全柜被用作特殊的密封設備（例如，離心、收獲設備或小的發(fā)酵設備）或可能產(chǎn)生氣溶膠的操作過程（例如倒籠子的垃圾，通氣培養(yǎng)或組織攪拌）。相當于安全通風柜39智囊經(jīng)驗A前窗操作口 B觀察窗 C排氣過濾器 D負壓排氣系統(tǒng)(腔體產(chǎn)生亂流) 圖1級安全柜結構和氣流模式示意圖40智囊經(jīng)驗 I 級生物安全柜改進型反向的水平層流氣體流速:0.4m/sYY 0569-2005:0.71.0m/s41智囊經(jīng)驗有前窗操作口的安全柜，操作者可以通過前窗操作口在安全柜內(nèi)進行操作。操作口流入氣

18、流保護人員高效過濾器過濾的下降氣流保護產(chǎn)品被污染氣流經(jīng)高效過濾器過濾后排出保護環(huán)境級安全柜42智囊經(jīng)驗級安全柜的分類級安全柜根據(jù)結構特點和氣流模式的不同分為 A1、A2、B1、B2四種類型43智囊經(jīng)驗級A1型安全柜前窗操作口流入氣流的最低速率為0.40m/s；下降氣流為安全柜的部分流入氣流和部分下降氣流的混合氣體，經(jīng)過高效過濾器過濾后送至工作區(qū)；70%氣體循環(huán)使用;30%排到室內(nèi)或室外; 44智囊經(jīng)驗級A1型安全柜污染氣流經(jīng)過高效過濾器過濾后可以排到實驗室或經(jīng)安全柜的外排接口通過排風管道(軟連接)排到大氣中； 安全柜內(nèi)的污染部位可以處于正壓狀態(tài)，且這些正壓區(qū)域可以沒有負壓區(qū)域包圍。A1型安全柜

19、不能用于揮發(fā)性有毒化學品和揮發(fā)性放射性核素的實驗。45智囊經(jīng)驗A 前窗操作口 B觀察窗 C排氣過濾器 D 下降氣流過濾器 E 壓力排氣系統(tǒng) F風機圖2 級A1型安全柜結構和氣流模式示意圖（側視圖）46智囊經(jīng)驗級A2型安全柜操作口流入氣流的最低速率為0.50m/s。下降氣流為部分流入氣流和部分下降氣流的混合，經(jīng)過高效過濾器過濾后送至工作區(qū)。污染氣流經(jīng)過高效過濾器過濾后可以排到實驗室或經(jīng)安全柜的外排接口通過排風管道(軟連接)排到大氣中。氣流70%循環(huán)使用，30%外排47智囊經(jīng)驗級A2型安全柜安全柜內(nèi)所有污染部位均處于負壓狀態(tài)或者被負壓通道和負壓通風系統(tǒng)環(huán)繞。安全柜用于進行以微量揮發(fā)性有毒化學品和痕

20、量放射性核素為輔助劑的微生物實驗時，必須連接功能合適的排氣罩。48智囊經(jīng)驗 A前窗操作口 B觀察窗 C排氣過濾器 D下降氣流過濾器 E壓力排氣系統(tǒng) F風機圖3 級A2型安全柜結構和氣流模式示意圖49智囊經(jīng)驗級B1型安全柜操作口流入氣流的最低平均速率為0.5氣流循環(huán)提供，經(jīng)過高效過濾器過濾后送至工作區(qū)。大部分被污染的下降氣流經(jīng)過高效過濾器過濾后通過專用的排氣管道(硬連接)排入大氣中；70%氣流經(jīng)過濾后外排（要求排到室外）需要70%外界空氣補充30%氣流經(jīng)過濾后循環(huán)使用50智囊經(jīng)驗級B1型安全柜安全柜內(nèi)所有被污染部位均處于負壓狀態(tài)或者被負壓通道和負壓通風系統(tǒng)包圍。如果揮發(fā)性有毒化學品或放射性核素隨

21、空氣循環(huán)不影響實驗操作或實驗在安全柜的直接排氣區(qū)域進行，B1型安全柜可以用于以微量揮發(fā)性有毒化學品和痕量放射性核素為輔助劑的微生物實驗。51智囊經(jīng)驗 B觀察窗 C排氣過濾器 D下降氣流過濾器 E負壓排氣系統(tǒng) F風機 G下降氣流過濾器圖4 級B1型安全柜結構和氣流模式示意圖52智囊經(jīng)驗級B2型安全柜（全排式）前窗操作口流入氣流的最低平均速率為0.50m/s；下降氣流來自經(jīng)過高效過濾器過濾的實驗室或室外空氣(即安全柜排出的氣體不再循環(huán)使用)；流入氣流和下降氣流經(jīng)過高效過濾器過濾后通過專用排氣管道(硬連接)排到大氣中，不允許回到安全柜和實驗室中；100%氣流經(jīng)過濾后外排進入環(huán)境100%外界空氣補充無

22、循環(huán)使用的氣流53智囊經(jīng)驗級B2型安全柜所有污染部位均處于負壓狀態(tài)或者被直接排氣（不在工作區(qū)循環(huán)）的負壓通道和負壓通風系統(tǒng)包圍。B2型安全柜可以用于以揮發(fā)性有毒化學品和放射性核素為輔助劑的微生物實驗。適用于生物安全危害程度1、2、3級的樣品54智囊經(jīng)驗A前窗操作口 B觀察窗 C排氣過濾器D下降氣流過濾器 E負壓排氣系統(tǒng) F風機 G 散流氣圖5 級B2型安全柜結構和氣流模式示意圖55智囊經(jīng)驗Class II 級生物安全柜 A/B3型樣品得到保護操作者得到保護操作環(huán)境得到保護氣流經(jīng)過過濾，從操作區(qū)頂部，由上往下，垂直地流向操作臺面單向氣流減少工作區(qū)內(nèi)氣流的擾動并且使交叉污染的可能性降到最小。30%

23、氣流經(jīng)過濾后外排進入環(huán)境30%外界空氣補充70%氣流經(jīng)過濾后循環(huán)使用允許有微量揮發(fā)性有毒化學物質及痕量的揮發(fā)性放射核素適用于生物安全1、2、3級樣品56智囊經(jīng)驗III級生物安全柜（全排封閉式）樣品得到保護操作者得到保護（操作時戴全密封手套）操作環(huán)境得到保護氣流經(jīng)過過濾，從操作區(qū)頂部， 由上往下，垂直地流向操作臺面100%氣流經(jīng)過濾后外排進入環(huán)境100%外界空氣補充無循環(huán)使用的氣流風速：0.7m/s57智囊經(jīng)驗III級生物安全柜 III級生物安全柜是為操作4級生物安全水平的微生物病原體而設計的，對環(huán)境和操作者提供最大的保護。它是一個沒有開放式觀察窗的氣密性的結構。長臂耐磨的橡膠手套以一種氣密性的

24、方式安裝到安全柜的袖套孔上，可以在與內(nèi)部隔離的條件下對柜內(nèi)的材料進行操作，防止操作者與這些危險的材料直接接觸。III級安全柜通常只是在最高圍護功能的實驗室內(nèi)安裝，這些實驗室具有控制出入和特殊通風要求或其它支持系統(tǒng)（例如高壓蒸汽）。58智囊經(jīng)驗第四節(jié) 生物安全柜的使用 59智囊經(jīng)驗 一、操作程序60智囊經(jīng)驗一）II級生物安全柜內(nèi)的準備工作 在開始工作之前，準備一張?zhí)貏e的活動所需的材料檢查清單，在生物安全柜內(nèi)的放置必要的材料。因為安全柜的氣幕防護屏障是很脆弱的，做好充分的準備是為了在正式工作時減少手臂穿越氣幕的運動次數(shù)。操作者手臂橫向快速地進出安全柜會干擾氣幕，并損害安全柜所提供的局部防護屏障。手

25、臂垂直于安全柜的操作口，進出時緩慢的移動，將減少這種危險。房間其他人員的活動（例如，迅速運動，開、關房間門等）也同樣可以干擾安全柜的空氣保護屏障。61智囊經(jīng)驗在開始工作之前，操作者應該調整凳子高度，使自己的臉在前操作口之上。在手臂放進安全柜內(nèi)大約一分鐘之后，才能進行實驗操作。這樣可以使安全柜穩(wěn)定，并且能讓氣流“清掃”掉手和臂表面的微生物污染物。當操作者的胳膊橫放在前面的格柵上的時候，房間空氣可能直接流動到安全柜的工作區(qū)域，而不是通過前面的格柵進風。輕微地提高胳膊會緩和這個問題。前面的格柵絕對不能讓研究記錄、廢棄的塑料包裝和吸液裝置等阻擋。所有的操作應該在距離前面的格柵4英寸里面的工作面上進行。

26、 62智囊經(jīng)驗二）工作前的凈化在開始工作之前要讓安全柜的風機至少運行3-5分鐘使安全柜內(nèi)的空氣進行凈化。安全柜的工作臺面、內(nèi)壁（不包括送風濾器擴散板）和觀察窗的內(nèi)表面用消毒劑擦拭。再用無菌蒸餾水進行擦拭以清除殘余的消毒劑。 放到安全柜的容器和材料的表面應該以70%的乙醇擦拭，以減少將環(huán)境的雜菌帶到安全柜內(nèi)。定期的對孵箱和冰箱進行消毒63智囊經(jīng)驗三）生物安全柜內(nèi)部材料的放置在安全柜的工作臺面上可以放一塊塑料襯底的能吸水的毛巾。所有的材料應該放在離安全柜前面的格柵和后面工作臺面的邊緣盡可能遠的位置（圖11）。容易產(chǎn)生氣溶膠的設備（例如，旋轉攪拌器，臺式離心機）應該靠近安全柜的后部放置。操作時的動作

27、應該從工作臺面的清潔區(qū)到污染區(qū)。64智囊經(jīng)驗65智囊經(jīng)驗安全柜內(nèi)材料的放置潔凈培養(yǎng)物（左邊）可以進行接種（中心）；用過的污染吸管放在淺的平底盤里，而其它污染的材料可以放在生物危害包（右邊）中。這安排對于習慣于左手操作的人要顛倒過來。 潔凈污染66智囊經(jīng)驗四）II級生物安全柜內(nèi)的操作 在生物安全柜內(nèi)所進行的許多普通過程可能產(chǎn)生噴濺或氣溶膠。應該始終采用良好的微生物學技術，減少噴濺和氣溶膠產(chǎn)生。II級生物安全柜的設計可以使水平方向噴出的孢子在14英寸的傳播距離以內(nèi)被安全柜向下流動的氣流所俘獲。 因此，保持干凈的材料離開產(chǎn)生氣溶膠的活動至少1英尺以外將會減少交叉污染的可能性。67智囊經(jīng)驗68智囊經(jīng)驗

28、69智囊經(jīng)驗70智囊經(jīng)驗五）消毒 表面消毒 工作完成時，所有的容器和設備應該進行表面消毒并拿出安全柜。在每天工作結束時，應該對安全柜進行最后的表面消毒，包括工作臺面、安全柜的邊壁、后壁和觀察窗玻璃內(nèi)部的擦拭。如果必要，安全柜也應該進行放射性檢測并進行必要的消毒。作為安全的微生物學操作的最后步驟，操作者應該摘下手套、脫下工作服并且洗手。 71智囊經(jīng)驗72智囊經(jīng)驗六）發(fā)生少量的噴灑時的消毒在生物安全柜內(nèi)發(fā)生少量的噴灑時，應該用污染清除吸收紙巾立即進行處理，并將使用過的紙巾放到這個生物危害包里。對安全柜內(nèi)的所有物品和安全柜內(nèi)部，用浸滿消毒液的毛巾立即進行擦洗。 73智囊經(jīng)驗74智囊經(jīng)驗七）發(fā)生大量的

29、溢出當發(fā)生大量的溢出時，液體會通過前面或后部的格柵流到下面去，這時要求更廣泛的消毒。安全柜內(nèi)的所有的物品應該進行表面消毒并拿出安全柜。應該使消毒液維持20-30分鐘的適當接觸時間如果溢出的液體含有放射性材料，可采取類似的程序。并應該與輻射安全人員聯(lián)系，尋求特殊的指導。75智囊經(jīng)驗八）氣體消毒在更換HEPA過濾器或進行內(nèi)部維修之前，要對生物安全柜必須進行消毒。76智囊經(jīng)驗第五節(jié) 生物安全柜檢測根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準（WS 233-2002）微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則 的相關規(guī)定：有下列情況之一時，必須對級生物安全柜進行現(xiàn)場檢測 :1、實驗室施工時，級生物安全柜搬放到指定位置后

30、。 2、 級生物安全柜被移動位置后。 3、 對級生物安全柜進行檢修后。 4、 級生物安全柜更換高效過濾器后。 5、 級生物安全柜一年一度的常規(guī)現(xiàn)場檢測。 77智囊經(jīng)驗一、現(xiàn)場檢測的必測項目和方法 垂直氣流速度斷面測定 儀器：準確度為讀數(shù)3的熱風速計。 方法：測點位于柜內(nèi)送風口下方0.15m處，為均勻測點。測點間距不大于0.15m。測點布置不少于三行，靠內(nèi)壁的行距柜內(nèi)壁0.15 m，每行不少于7個測點。 判定：垂直氣流均勻區(qū)所測平均風速與生產(chǎn)廠給定值之差小于0.025 ms，且單點風速與所測平均風速之差不大于20為合格。 78智囊經(jīng)驗二、工作窗口進風風速測定 方法 ： 首先測定工作窗口進風風量，再除以生物安全柜工作窗口面積計算出進風風速。 工作窗口進風風量通過測定生物安全柜的排風風量而求出。對于僅從工作窗口進風的生物安全柜，生物安全柜的排風風量就等于工作窗口進風風量；對于除從工作窗口進風外，還有單獨的進風管的生物安全柜，則從排風管的總排風量扣除進風管進風風量即為工作窗口進風風量。 采用JGJ 7l1990中所規(guī)定方法測定生物安全柜的(進)排風管風量。 判定：所測進風風速與生產(chǎn)廠給定值之差小于0.025 ms為合格。 79智囊經(jīng)驗三、煙霧試驗：使用發(fā)煙物作直觀判斷。在工作表面中線上方高于工作窗口上沿0.15 m處從側板一端到另一端發(fā)煙，應為垂直流線，不得有死角