藥物定量分析-PPT課件(PPT 121頁)

1、 藥品檢驗工作的基本程序一般為取樣、藥物的鑒別、藥物的檢查、藥物含量的測定、檢驗報告。 回顧：藥品檢驗工作的基本程序11大家好第1頁，共121頁。取樣的基本原則？ 均勻、合理。藥物鑒別的目的？ 判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?。藥物檢查的目的？ 純度藥物含量測定？ 主要有效成分的含量。 22大家好第2頁，共121頁。鑒別試驗(identification test)：根據(jù)藥物的分子結(jié)構、理化性質(zhì)，采用化學、物理化學或生物學方法來判斷藥物的真?zhèn)嗡幬锏蔫b別試驗包括：性狀和鑒別一般鑒別實驗：是指依據(jù)某一類藥物的共同的化學結(jié)構或相同的理化特性，通過化學反應來鑒別藥物的真?zhèn)?。專屬鑒別實驗：是證實某一種藥物的依據(jù)。

2、根據(jù)一類藥物中每一種藥物化學結(jié)構的差異及理化特性，選用某些特有的靈敏的定性反應，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?大家好第3頁，共121頁。取樣的基本原則？ 均勻、合理。藥物鑒別的目的？ 判斷藥物及其制劑的真?zhèn)巍Ｋ幬餀z查的目的？ 純度44大家好第4頁，共121頁。藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來？3、雜質(zhì)如何分類？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計算?55大家好第5頁，共121頁。什么是雜質(zhì)？1.有毒副作用的物質(zhì) 2. 本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)3.本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學管理的物質(zhì) 藥物純度藥物的純凈程度66大家好第

3、6頁，共121頁。藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來？3、雜質(zhì)如何分類？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計算?77大家好第7頁，共121頁。雜質(zhì)的來源 生產(chǎn)中引入原料中間體副產(chǎn)物降解產(chǎn)物 兩大來源 貯藏過程中產(chǎn)生水解氧化分解異構化88大家好第8頁，共121頁。藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來？3、雜質(zhì)如何分類？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計算?99大家好第9頁，共121頁。雜質(zhì)的分類依雜質(zhì)來源分類：一般雜質(zhì)：含義，品種特殊雜質(zhì)：含義依雜質(zhì)毒性分類：依雜質(zhì)理化性質(zhì)分類：信號雜質(zhì)毒性雜質(zhì)有機雜質(zhì)無機雜質(zhì)殘留溶劑1010大家好第1

4、0頁，共121頁。藥物檢查需要解決以下四個問題？1、什么是雜質(zhì)？2、藥物中雜質(zhì)從哪里來？3、雜質(zhì)如何分類？4、雜質(zhì)的檢查方法有哪些？如何計算?1111大家好第11頁，共121頁。雜質(zhì)限量：指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表示雜質(zhì)量 雜質(zhì)限量 雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格1212大家好第12頁，共121頁。13藥物的雜質(zhì)檢查法1.限量檢查法 （Limit Test） 對照法2.定量檢查法13大家好第13頁，共121頁。雜質(zhì)限量的計算1414大家好第14頁，共121頁。練習題：1.臨床所用藥物的純度與化學品及試劑純度的主要區(qū)別是A. 所含雜質(zhì)的生理效應不同B. 所含

5、有效成分的量不同 C. 所含雜質(zhì)的絕對量不同D. 化學性質(zhì)及化學反應速度不同E. 所含有效成分的生理效應不同1515大家好第15頁，共121頁。2在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為 A. 原料不純或部分未反應完全的原料造成 B. 合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成 C. 需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D. 所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì) E. 由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì) 討論1616大家好第16頁，共121頁。3.檢查維生素C中的重金屬時，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得過百萬分之十，問應吸取標準鉛溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？A.

6、 0.2ml B. 0.4ml C2mlD. 1ml E. 20ml1717大家好第17頁，共121頁。1818大家好第18頁，共121頁。4.谷氨酸鈉中重金屬的檢查取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查，與標準鉛溶液(10g Pb/ml)所呈顏色相比較，不得更深，重金屬限量為百萬分之十，求取標準鉛溶液多少毫升？1919大家好第19頁，共121頁。討論5.藥物純度符合規(guī)定系指（）。A.含量符合藥典的規(guī)定B.純度符合優(yōu)級純試劑的規(guī)定C.絕對不存在的雜質(zhì)D.對患者無不良反應E.雜質(zhì)含量不超過限度規(guī)定2020大家好第20頁，共121頁。阿司匹林的質(zhì)量標準阿司

7、匹林AsipilinAspirinC9H8O4 180.1621大家好第21頁，共121頁。本品為2-(乙酰氧基)苯甲酸。含C9H8O4不得少于99.5。【性狀】 本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分解。22大家好第22頁，共121頁?！捐b別】 （1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。（2）取本品約0.5g，加碳酸鈉試液10ml，煮沸2分鐘后，放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。（3)本品的紅外光

8、吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集209圖)一致。23大家好第23頁，共121頁?！緳z查】溶液的澄清度 取本品0.50g，加溫熱至約45的碳酸鈉試液10ml溶解后，溶液應澄清。 24大家好第24頁，共121頁。游離水楊酸 取本品0.10g，加乙醇lml溶解后，加冷水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液取鹽酸溶液(9100)1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml后，再加水適量使成100m11ml，搖勻；30秒鐘內(nèi)如顯色；與對照液(精密稱取水楊酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻；精密量取lml，加乙醇lml、水48ml與上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻)比較

9、，不得更深(0.1)。 25大家好第25頁，共121頁。易炭化物 取本品0.5g，依法檢查(附錄 K)，與對照液(取比色用氯化鈷液0.25ml、比色用重鉻酸鉀液0.25ml、比色用硫酸銅液0.40ml，加水使成5m1)比較，不得更深。熾灼殘渣 不得過0.1(附錄 N)。重金屬 取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查(附錄 H第一法)，含重金屬不得過百萬分之十。26大家好第26頁，共121頁?！竞繙y定】取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇(對酚酞指示液顯中性)20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1molL)滴定。每lml氫氧化鈉

10、滴定液(0.1molL)相當于18.02mg的C9H8O4。【類別】 解熱、消炎鎮(zhèn)痛藥?！举A藏】 密封，在干燥處保存?！局苿浚?）阿司匹林片 （2）阿司匹林腸溶片 （3）阿司匹林栓27大家好第27頁，共121頁。取樣的基本原則？ 均勻、合理。藥物鑒別的目的？ 判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?。藥物檢查的目的？ 純度藥物含量測定？ 主要有效成分的含量。 2828大家好第28頁，共121頁。藥物的含量測定29大家好第29頁，共121頁?；緝?nèi)容一、概述二、容量分析法三、光譜分析法四、色譜分析法 練習與思考30大家好第30頁，共121頁。一、概 述 藥品的含量測定是指準確測定藥品有效成分或指標性成分的含量。

11、 含量測定是評價藥品質(zhì)量、判斷藥物優(yōu)劣和保證藥品療效的重 要手段。 含量測定需在鑒別無誤和雜質(zhì)檢查符合規(guī)定的基礎上進行。除個別品種不收載含量測定外，原則上均按藥品質(zhì)量標準進行含量測定。應根據(jù)所測成分的物理化學性質(zhì)選擇相應的測定方法。 31大家好第31頁，共121頁。測定藥物含量的方法(1)容量分析法： 儀器設備簡單、易于操作、不需要使用化學對照品，成本低、速度較快，其準確度和精密度都較高。(2)儀器分析法： 當組分復雜、干擾成分較多難于用容量分析法測定含量時，選用專屬性較高的儀器分析方法。32大家好第32頁，共121頁。二、容量分析法（滴定分析法）（一）概念及特點將已知濃度的標準溶液由滴定管滴

12、加到被測藥物的溶液中，至與被測藥物反應完全（通過適當方法指示），然后根據(jù)標準溶液的濃度和被消耗的體積，按化學計量關系計算出被測藥物的含量 33大家好第33頁，共121頁。指示劑顯示終點到達C滴定B+ B（標準物） A（被測物）A傳統(tǒng)分析方法；主要用于主成分含量較高的試樣分析；特點：簡單、準確、費用低。34大家好第34頁，共121頁。幾個基本術語滴定液(標準溶液)：已知準確濃度的試劑化學計量點：被測物與標準物按化學計量關系完全反應的點。指示劑：用以指示滴定終點的試劑 滴定終點：指示劑顏色變化的點。終點誤差：由于滴定終點和化學計量點的差異所引起的相對誤差.35大家好第35頁，共121頁。按藥典規(guī)定

13、，精密標定的滴定液（如鹽酸及其濃度）正確表示為A.鹽酸滴定液（0.152mol/L）B.鹽酸滴定液（0.1524mol/L）C.鹽酸滴定液（0.152M/L）D.0.1524M/L鹽酸滴定液E.0.152mol/L鹽酸滴定液 答案：B36大家好第36頁，共121頁。例題：滴定分析中，一般利用指示劑的突變來判斷化學計量點的到達，在指示劑變色時停止滴定，這一點為：A.化學計量點B.滴定分析C.滴定等當點D.滴定終點E.滴定誤差 答案：D37大家好第37頁，共121頁。（二）容量分析法的分類按化學反應類型分類1.酸堿滴定法:測定物質(zhì)酸堿度計算酸堿的含量。2.沉淀滴定法:主要測定鹵素及銀的含量。3.配

14、位滴定法（絡合滴定法）:測定金屬離子的含量。4.氧化還原滴定法：測定氧化還原性物質(zhì)的含量。 非水滴定法38大家好第38頁，共121頁。（三）滴定分析的方式1.直接滴定:2.返滴定法：3.置換滴定法：4.間接滴定法：39大家好第39頁，共121頁。2.返滴定法： 待測物質(zhì)與滴定劑反應很慢，或待測物是固體時，反應不能立刻完成。可以先準確加入過量的標準溶液，使之與待測物質(zhì)反應完全后，再用另一種標準溶液滴定剩余的標準溶液。例：Al3+ 過量EDTA Zn2+或Cu 2+標液返滴定。例：CaCO3 過量HCl NaOH標液返滴定。40大家好第40頁，共121頁。3.置換滴定法： 沒有定量關系或有副反應時

15、，可以先用適當試劑與待測物反應，使其定量地置換為另一種物質(zhì)，再用適當?shù)臉藴嗜芤旱味ㄟ@種物質(zhì)。例：K2Cr2O7 滴定NaS2O3K2Cr2O3 過量KI I2 NaS2O3 滴定。41大家好第41頁，共121頁。4.間接滴定法： 不能與滴定劑反應，可以通過另外的化學反應以滴定法間接完成。例：Ca2+ 的測定。 Ca2+ CaC2O4 H2SO4溶解 C2O42- 用KMnO4滴定42大家好第42頁，共121頁。例：TVc/I2=8.806mg/mL即：中國藥典規(guī)定，每1mL碘滴定液（0.05 mol/L）相當于8.806 mg的維生素C。（四）容量分析法的計算問題 1.滴定度（T）： 每1ml

16、規(guī)定濃度的滴定液相當于被測物質(zhì)的質(zhì)量(mg)43大家好第43頁，共121頁。 2.滴定度的計算 aA（待測物） + bB（滴定液） cC + dD a b T/M 1cT = ca/bMc：滴定液濃度 (mol/L)M：被測物分子量44大家好第44頁，共121頁。例：用碘量法測定維生素CM(C6H8O6)176.13的含量時，碘滴定液的摩爾濃度為0.05mol/L（以I2為單元），化學反應式如下：滴定度(T )=? T = 8.806mg/mL C6H8O6I2C6H6O6+2HI45大家好第45頁，共121頁。3.百分含量的計算 W：供試品取樣量 設至終點時，消耗滴定液體積為V ml則藥物理

17、論質(zhì)量為VT濃度校正因數(shù)（1）直接滴定法（用滴定液直接滴定被測藥物）46大家好第46頁，共121頁。例題：非那西丁含量測定：精密稱取本品0.3630g加稀鹽酸回流1小時后，放冷，用亞硝酸鈉液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00m1。每1ml亞硝酸鈉液（0.1mol/L）相當于17.92mg的C10H13O2N。計算非那西丁的含量為？47大家好第47頁，共121頁。例：精密稱取青霉素鉀供試品0.4021g，按藥典規(guī)定用剩余堿量法測定含量。先加入氫氧化鈉液(0.1mol/L)25.00ml，回滴時消耗0.1015mol/l的鹽酸液14.20ml，空白試驗消耗0.1015mol/l的鹽酸液

18、24.68ml。求供試品的含量，每1ml氫氧化鈉液(0.1mol/L)相當于37.25mg的青霉素鉀。 48大家好第48頁，共121頁。（2）間接滴定法1）生成物滴定法 藥物 + A B 滴定滴定劑 2）剩余滴定法（回滴法） 藥物 + A（定、過量） 剩余的 A + B （回滴）V 空白試驗V049大家好第49頁，共121頁。W司可巴比妥鈉=0.1022g，cBr2=0.05mol/L，cNa2S2O30.1mol/L；V1=15.73ml，V0=23.21ml；MC12H17N2NaO3=260.27，F(xiàn)Na2S2O31.038。司可巴比妥鈉的含量測定1.計算滴定度；2.計算百分含量。50大

19、家好第50頁，共121頁。51大家好第51頁，共121頁。光譜分析法 紫外可見分光光度法 UVVis 原子吸收分光光度法 AAS 熒光分析法 二、光譜分析法52大家好第52頁，共121頁。（一）紫外-可見分光光度法 靈敏度高，可達10-4g/ml 10-7g/ml 1. 特點 準確度高，RSD（%）為2% 5% 儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應用廣泛 2. 朗伯-比耳定律 A = ECL 吸收系數(shù)：摩爾吸收系數(shù) 研究分子結(jié)構 百分吸收系數(shù) 含量測定吸收光譜范圍：紫外：200400nm 可見：400760nm 53大家好第53頁，共121頁。3.儀器的校正和檢定 吸收度準確性的檢定：重鉻酸鉀的

20、硫酸溶液，規(guī)定波 長處測定 ，應符合P91表1中規(guī)定 波長的校正：汞燈中的幾根較強的譜線或用儀器自身 所帶的氘燈的特定譜線為參照進行校正雜散光的檢查：一定濃度的碘化鈉和亞硝酸鈉溶液， 規(guī)定波長處測定透光率，應符合P91表2 中規(guī)定54大家好第54頁，共121頁。4. 對溶劑的要求: 含雜原子的有機溶劑通常具有很強的末端吸收它們的使用范圍均不能小于截止使用波長 石英吸收池、空氣為空白 (nm) 溶劑 + 吸收池A 220240 0.40 241250 0.20 251300 0.10 300以上 0.0555大家好第55頁，共121頁。5. 測定方法確定波長 要求供試品溶液的A應在0.30.7

21、狹縫調(diào)整 56大家好第56頁，共121頁。供試品溶液的吸光度對照品溶液的吸光度供試品溶液的濃度對照品溶液的濃度5. 測定方法1）對照品比較法：條件：A. 待測物與對照品在相同條件下測定B. 待測物與對照品濃度相近57大家好第57頁，共121頁。制劑：原料藥：稀釋倍數(shù)取樣量平均片重片粉量58大家好第58頁，共121頁。2）吸收系數(shù)法（絕對法）吸光度百分吸收系數(shù)液層厚度，cm，如無特別注明，L=1cm可在手冊或文獻中查到59大家好第59頁，共121頁。鹽酸氯丙嗪（規(guī)格1ml:10mg，E1%1cm915)的含量測定：精密量取本品5ml，置200ml量瓶中，用鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻；

22、精密量取2ml，置100ml量瓶中，用鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，在254nm波長處測定吸光度為0.469。計算其百分含量。60大家好第60頁，共121頁。3）計算分光光度法： 多種，具體按每種藥物規(guī)定的方法進行 如：VA的三點校正法4）比色法 加入顯色劑后，按照對照品比較法測定。 影響顯色因素很多，故需注意平行操作。 空白溶劑：溶劑+顯色劑，同法處理61大家好第61頁，共121頁。三、色譜分析法 特點：高靈敏度、 高效能、高速度、應用廣泛 按分離原理：吸附；分配；離子交換；排阻色譜分類 按分離方法：PC；TLC；柱色譜；GC；HPLC 根據(jù)混合物中各組分的色譜行為差異，先行分離后

23、再在線或離線對各組分逐一進行分析的方法，是分離分析混合物的最有力手段。62大家好第62頁，共121頁。 1. 對儀器一般要求 固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變 其他均可適當改變 色譜圖20分鐘內(nèi)記錄完畢 2. 系統(tǒng)適用性試驗 色譜柱的理論板數(shù)：n = 5.54(tR /Wh/2)2 分離度：R = 2（tR2 tR1)/(W1 + W2); 應大于1.5 重復性：對照液連續(xù)進樣5次，峰面積RSD2.0 拖尾因子：T = W0.05h/2 應在0.9 5 1.05 流出方向（一）HPLC法63大家好第63頁，共121頁。（1）內(nèi)標法加校正因子測定供試品中主成分含量對照品+內(nèi)標物對照

24、溶液，進樣，測定，計算校正因子 3. 在含量測定中的應用供試品+內(nèi)標供試品溶液，進樣，測定供試品和內(nèi)標物質(zhì)的峰面積或峰高，計算含量64大家好第64頁，共121頁。 （2）外標法測定供試品主成分含量供試品供試品溶液對照品對照品溶液進樣，測定，計算含量 缺點：不易準確控制進樣量，宜用定量環(huán)進樣65大家好第65頁，共121頁。1. 對GC儀器一般要求 載 氣：氮氣 色譜柱：填充柱或毛細管柱 填充柱：內(nèi)徑24mm，長110m，內(nèi)裝吸附劑 高分子多孔小球或涂漬固定液的載體 毛細管柱：內(nèi)徑0.20.5mm，長10100m，一 般為空心柱，內(nèi)壁或載體經(jīng)涂漬或交聯(lián) 固定液檢測器：氫火焰離子化檢測器色譜圖：30

25、分鐘內(nèi)記錄完畢 （二）GC法色譜適用性實驗、測定法：同HPLC66大家好第66頁，共121頁。 第二節(jié) 樣品分析的前處理方法 第一節(jié) 定量分析樣品的前處理方法 一、概述 1.結(jié)構特征與分析方法之間的關系(2)含金屬有機藥物 (1)含鹵素有機藥物 R-X （F，Cl, Br, I ）鹵素與脂肪鏈相連 R-X 結(jié)合較不牢固，不需有機破壞含金屬有機藥物 R-O-Me，有機酸或酚的金屬鹽/配位化合物； 結(jié)合不牢固，可直接測定 有機金屬藥物 R-Me ，結(jié)合牢固，適當處理后測定 鹵素與芳環(huán)相連 Ar-X 結(jié)合牢固， 需/不需有機破壞泛影酸三氯叔丁醇富馬酸亞鐵硬脂酸鎂醋酸苯汞67大家好第67頁，共121頁

26、。2. 藥物分析中常用的分析方法經(jīng)有機破壞的分析方法不經(jīng)有機破壞的分析方法68大家好第68頁，共121頁。二、不經(jīng)有機破壞的分析方法 終點： 鄰二氮菲(+Fe3+)溶于熱稀礦酸Fe2+鈰量法Ce4+Fe3+指示劑:鄰二氮菲(+Fe2+)紅色淡藍色（一）直接測定法 例如：富馬酸亞鐵的含量測定69大家好第69頁，共121頁。（二）經(jīng)水解后測定法 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH (CH3)2CO +3NaCl + HCOONa +2H2O NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN + NH4NO3 Mg(C17H35COO)2 +

27、H2SO4 MgSO4 + 2C17H35COOH H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O 1. 堿水解后測定法適用于X與脂肪鏈相連的鹵代烷烴例如：三氯叔丁醇的含量測定 2. 酸水解后測定法 例如：硬脂酸鎂的含量測定 70大家好第70頁，共121頁。（三）經(jīng)還原分解后測定法 指示劑：曙紅鈉終點：黃紅適用于Ar-I的藥物 例如：泛影酸的含量測定71大家好第71頁，共121頁。三、經(jīng)有機破壞的分析方法凱氏定氮法 金屬原子、鹵素等與C結(jié)合牢固者，必須有機破壞藥物分析中常用的有機破壞的方法有 干法破壞濕法破壞 (一)濕法破壞H2SO4-HNO3法H2SO4-HClO4法H2SO4-硫酸

28、鹽法H2SO4-H2O2,HNO3-KMnO4法等72大家好第72頁，共121頁。（二）干法破壞 2.氧瓶燃燒法適用于含鹵素、S、P等有機藥物分析的前處理，也用于某些藥物中Se及砷鹽的檢查1. 高溫熾灼法 加無水Na2CO3、硝酸鎂、氫氧化鈣或ZnO以助灰化73大家好第73頁，共121頁。 1） 儀器裝置 500ml, 1000ml, 2000ml, 磨口、硬質(zhì) 玻璃錐形瓶 2）稱樣 固體樣；液體樣；軟膏類樣品要求3） 燃燒分解操作法 4） 吸收液的選擇 用于X、S、Se等的鑒別、檢查、含量測定時多數(shù)是H2O或H2O-NaOH；少數(shù)為H2O-NaOH-H2O2.74大家好第74頁，共121頁。

29、應用示例：碘苯酯的測定返 回75大家好第75頁，共121頁。第三節(jié) 藥品質(zhì)量標準分析方法驗證均需對分析方法進行驗證驗證內(nèi)容：準確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性目的：證明采用的方法適合于相應檢測要求。起草藥品質(zhì)量標準生產(chǎn)工藝變更制劑組分改變原分析方法修訂76大家好第76頁，共121頁。一、準確度是指用該方法測定結(jié)果與真實值接近的程度，用回收率表示（一）含量測定方法的準確度 1. 原料藥：可用已知純度對照品或供試品進行測定；或與已知準確度的另一方法測定的結(jié)果進行比較77大家好第77頁，共121頁。2. 制劑：考察其他組分和輔料對回收率的影響用含已知量被測物的制劑各組分混合物

30、（包括制劑輔料）進行測定，回收率計算同原料藥向制劑中加入已知量的被測物進行測定與已知準確度的另一方法測定的結(jié)果進行比較78大家好第78頁，共121頁。（二）具體做法：測定高、中、低三個濃度，n=3, 共9個數(shù)據(jù)來評價回收率；用UV和HPLC法時，一般回收率可達98.0%102.0%；容量法可達99.7%100.3%79大家好第79頁，共121頁。回收率試驗精密稱取鹽酸小檗堿約40mg ，按處方比例加入其它組分和輔料，用適量沸騰的 0. 05mol/L H2SO4 溶解。放冷置室溫，定量轉(zhuǎn)移至250ml 量瓶中，并稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液 5.00ml 于100ml 量瓶中并稀釋至

31、刻度，按所選定的方法計算回收率。測定結(jié)果見下表。三波長分光光度法測定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量 80大家好第80頁，共121頁?；厥章试囼炄∵B蒲雙清片粉適量（約相當于鹽酸小檗堿40mg)，精密稱取，精密加入鹽酸小檗堿約40mg ，用0.05mol/L H2SO4 溶解。放冷置室溫，定量轉(zhuǎn)移至250ml 量瓶中，并稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液 5.00ml 于100ml 量瓶中定容，按所選定的方法計算回收率。測定結(jié)果見下表。三波長分光光度法測定連蒲雙清片中鹽酸小檗堿的含量 81大家好第81頁，共121頁。2. 相對標準偏差(RSD) 1. 標準偏差（SD或S） 二、精密度（一）精密度

32、表示方法82大家好第82頁，共121頁。（二）驗證內(nèi)容 1. 重復性 在相同條件下,由一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度. 2. 中間精密度 在同一個實驗室，不同時間由不同分析 人員用不同設備測定結(jié)果的精密度。 3. 重現(xiàn)性 在不同實驗室由不同分析人員測定結(jié)果的精 密度。（三）數(shù)據(jù)要求均應報告標準偏差、相對標準偏差和可信限83大家好第83頁，共121頁。三、專屬性指在其他成分(如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等)可能存在下，采用的方法能準確測定出被測物的特性 鑒別、雜質(zhì)檢查、含量測定方法，均應考察其專屬性 （一）鑒別反應 應能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分，不含被測組分的樣品均應呈現(xiàn)負反應。84大家好第

33、84頁，共121頁。（二）含量測定和雜質(zhì)測定 色譜法和其他分離法，應附代表性的圖譜，以說明專屬性。 圖中應注明各組分的位置，色譜法中分離度應符合要求。 在能獲得雜質(zhì)的情況下，可加到試樣中，考察對結(jié)果的干擾。 在雜質(zhì)和降解物不能獲得的情況下，可用已驗證方法或藥典方法進行對照；也可用對試樣加速破壞的方法，比較兩種方法。85大家好第85頁，共121頁。 四、檢測限（LOD) 是指試樣中被測物能被檢測出的最低濃度或量，是限度檢驗指標。它無需準確定量，只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可。1.目視法 用含已知濃度被測物的試樣進行分析，目視確定能被可靠地檢測出的被測物的最低濃度或量，常用于顯色鑒別法，T

34、LC 2.當用GC和HPLC法時，一般以S/N2或3時的相應濃度來確定檢測限。86大家好第86頁，共121頁。 五、定量限（LOQ) 是指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應具一定準確度和精密度。 雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進行定量測定時，要求LOQ。常用信噪比法確定定量限，一般以S/N=10時相應的濃度進行測定。87大家好第87頁，共121頁。 六、線性是指在設計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度或量直接呈正比關系的程度。 回歸方程的相關系數(shù)（r）越接近1，表明線性越好 可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列（至少5份）供試液進行測定，以響應值對濃度作圖，建立回歸方程，求出r。

35、如UV：制備一個標準系列，濃度點n =5 A=0.3-0.7 建立回歸方程C = aA + b， r0.999988大家好第88頁，共121頁。七、范圍 如原料藥和制劑含量測定：應為測試濃度的80%120%制劑含量均勻度檢查：應為測試濃度的70%130%。溶出度或釋放度中的溶出量測定：應為限度的20%。是指達到一定精密度、準確度和線性、測試方法適用的高低限度或量的區(qū)間。89大家好第89頁，共121頁。 八、耐用性是指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。典型的變動因素有：被測溶液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時間等。HPLC變動因素有：流動相組成與pH，色譜柱，柱溫，流速等。GC變動因

36、素有：色譜柱，固定相，擔體、柱溫、進樣口和檢測器溫度等。 90大家好第90頁，共121頁。 分析方法效能指標的具體應用：1. 用于鑒別試驗：只要求專屬性、耐用性2. 用于原料藥中雜質(zhì)測定和制劑中降解產(chǎn)物測定的方法： 用于定量：除檢測限不要求外，其余指標均要求。 限度檢查：只要求檢測限、專屬性、耐用性3. 原料、制劑的含量測定及溶出度測定：不要求檢測限和 定量限，其余均要求。91大家好第91頁，共121頁。練習與思考A型題 1相對標準偏差表示的應是A準確度 B回收率 C精密度 D純凈度 E限度92大家好第92頁，共121頁。2表示兩變量指標A與C之間線性相關程度常用A相關規(guī)律 B比例常數(shù) C相關

37、常數(shù) D相關系數(shù) E精密度93大家好第93頁，共121頁。 14A空白試驗 B對照試驗 C回收試驗 D鑒別試驗 E檢測試驗1以同量的溶劑替代供試品同法進行測定試驗2在供試液中加入已知量的標準物或已知量的被測物后，同法進行測定試驗3用已知量的純物質(zhì)作為試樣，同法進行測定試驗4取少許水楊酸，加水溶解，加三氯化鐵試液，顯紫堇色ACDBB型題94大家好第94頁，共121頁。X型題1藥物分析方法的效能指標有 A檢測限 B耐用性 C準確度 D專屬性 E代表性2對藥物中雜質(zhì)進行檢查時，要求所用的檢查方法應具有 A耐用性 B專屬性 C檢測限 D準確度 E線性與范圍95大家好第95頁，共121頁。3用信噪比表示

38、檢測限時，信噪比一般應為 A11 B21 C31 D41 E51返 回96大家好第96頁，共121頁。.在設計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度稱為（） A.精密度B.耐用性C.準確度D.線性E.范圍2.用HPLC測得兩組分的保留時間分別為8.0min和10.0min，峰寬分別為2.8mm和3.2mm，記錄紙速為5.0mm/min，則兩峰的分離度為（） A.3.4 B.3.3 C.4.0 D.1.7 E.6.897大家好第97頁，共121頁。3.用直接滴定法測定阿司匹林原料藥的含量，若供試品的稱樣質(zhì)量為m(g)，氫氧化鈉滴定液的濃度為c(mol/l)，消耗氫氧化鈉滴定液的

39、體積為V(ml)，1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l)相當于18.02mg的阿司匹林，則含量的計算公式為（）98大家好第98頁，共121頁。. 準確度是指用某分析方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般以（）A.百分回收率表示B.偏差表示C.標準偏差表示D.相對標準偏差表示E.重現(xiàn)性表示. 回收率屬于藥物分析方法驗證指標中的（） A.精密度B.準確度C.檢測限D(zhuǎn).定量限E.線性與范圍99大家好第99頁，共121頁。. 中國藥典規(guī)定紫外分光光度法測定中，溶液的吸收度應控制在（） A.0.002.00B.0.3 1.0C.0.2 0.8 D.0.1 1.0E. 0.3 0.77. GC、

40、HPLC法中的分離度（）的計算公式為() 100大家好第100頁，共121頁。. 選擇氧瓶燃燒法所必備的實驗物品包括（） A. 磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B.鉑絲C.氫氣 D.無灰濾紙E.凱氏燒瓶多項選擇題. 有機鹵素藥物常用的測定方法有（） A.直接回流后測定法B.堿性還原后測定法C.氧瓶燃燒分解后測定法 D.直接絡合滴定法E.硝酸銀標準液直接滴定法101大家好第101頁，共121頁。. 含鹵素及含金屬有機藥物，測定前預處理的方法可以采用（） A.堿性還原法B. 堿性氧化法C. 氧瓶燃燒法 D. 堿熔融法E. 直接回流法102大家好第102頁，共121頁。. 干法破壞應注意的是（） A. 加熱溫度應

41、在420以下，以防止被測金屬化合物的揮發(fā)B.應灰化完全C.樣品應先大火加熱炭化后，小火加熱使樣品灰化 D.破壞后不溶的灰分，不應棄去E.可加入高錳酸鉀、H2O2多項選擇題103大家好第103頁，共121頁。一、最佳選擇題1含溴有機化合物經(jīng)氧瓶燃燒后生（）。A.紫色煙霧B.棕色煙霧C.黃色煙霧D.白色煙霧E.紅色煙霧2測定鹵素原子與脂肪碳鏈相連的含鹵素有機藥物（如三氯叔丁醇）的含量時，通常選用的方法是（）。A.直接回流后測定法B.直接溶解后測定法C.堿性還原后測定法 D.堿性氧化后測定法E.原子吸收分光光度法104大家好第104頁，共121頁。三氯叔丁醇的含量測定是含鹵素藥物測定鹵素的代表性方法

42、，這種方法是（）。A.酸水解法B.堿水解法C.堿氧化法D.堿熔法E.堿還原法105大家好第105頁，共121頁。含金屬有機藥物亞鐵鹽的含量測定一般采用（）。A.氧化后測定B.直接容量法測定C.比色法測定D.灼燒后測定 E.重量法測定106大家好第106頁，共121頁。7有機鹵素藥物中的鹵原子為芳環(huán)的取代基時，為使其轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機鹵素離子，應該采用的方法是（）。A.將藥物溶于溶劑，加堿后，回流使其溶解B.將藥物溶于堿溶液，加強還原劑，加熱回流，使其裂解C.將藥物溶于堿溶液，加強氧化劑，加熱回流，使其裂解D.氧瓶燃燒法E.凱氏定氮法107大家好第107頁，共121頁。8三氯叔丁醇的含量測定，采用氧瓶燃

43、燒后剩余銀量法，以稀硫酸鐵銨為指示劑，用硫氰酸銨滴定剩余的硝酸銀，在滴定之前加鄰苯二甲酸二丁酯的作用是（）。A.防止AgCl轉(zhuǎn)化為AgSCNB.促使AgCl轉(zhuǎn)化為AgSCNC.防止Fe3水解D.防止其他陰離子（如）的干擾E.使終點易于辨認108大家好第108頁，共121頁。10三氯叔丁醇采用銀量法測定含量，其樣品前處理方法為（）。A.堿性條件下回流B.堿性條件下還原C.酸性條件下還原 D.酸性條件下水解E.以上都不是11測定碘與苯相連的含鹵素有機藥物（如碘苯酯）的含量時，通常選用方法是（）。A.直接回流后測定法B.直接溶解后測定法C.氧瓶燃燒后測定法 D.堿性氧化后測定法E.原子吸收分光光度法109大家好第109頁，共121頁。12測定氧與金屬鍵相連的含金屬有機藥物（如富馬酸亞鐵）的含量時，通常選用方法是（）。A.直接測定法B.汞齊化測定法C.堿性、酸性還原后測定法 D.堿性氧化后測定法E.原子吸收分光光度法13在設計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度稱為（）。A.精密度B.耐用性C.準確度D.線性E.范圍11