高效液相色譜法測定克感利咽口服液中梔子苷的含量

1、高效液相色譜法測定克感利咽口服液中梔子苷的含量秦春梅，黃曉丹，馮沖，冼建民【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；,克感利咽口服液；,梔子苷摘要：目的創(chuàng)立高效液相色譜(HPL)法測定克感利咽口服液中梔子苷的含量。要領(lǐng)接納高效液相色譜法，以Diansil(鉆石)18柱為結(jié)實相，甲醇-水(29：71)為活動相，流速1l/in，檢測波長241n，柱溫30。效果在0.23641.773g范疇內(nèi)，梔子苷的量與峰面積積分值呈精良的線性干系，r0.9999，均勻接納率98.96，RSD2.31。結(jié)論所創(chuàng)立的要領(lǐng)能正確、快速地舉行定量檢測，可用于克感利咽口服液的質(zhì)量操縱。關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；克感利咽口服液；梔子苷Det

2、erinatinfGenipsideinKeganLiyanralSlutinbyHPLKeyrds:HPL；KeganLiyanralSluti；Genipside克感利咽口服液是王老吉藥業(yè)股份和中國中醫(yī)研究院廣安門病院互助研制的原三類中藥新藥，臨床上重要用于治療風(fēng)熱外侵，邪熱內(nèi)擾之癥引起的呼吸道熏染，療效確切，是我公司的主流產(chǎn)物之一，2022年被容許為中藥庇護(hù)品種。原質(zhì)量尺度接納薄層色譜法測定梔子苷含量，樣品接納屢次萃取制備供試品溶液，該要領(lǐng)較繁鎖，測定要領(lǐng)也較為龐大。根據(jù)國度中藥庇護(hù)品種委員會心見和我單元現(xiàn)實環(huán)境，確定修改質(zhì)量尺度梔子苷的含量測定要領(lǐng)，接納高效液相色譜法測定梔子苷含量，測

3、定效果表白，該測定要領(lǐng)輕便可行，重現(xiàn)性好。梔子苷(genipside)是梔子化學(xué)身分中一種緊張的環(huán)烯醚萜類化合物，?中國藥典?2022年版部以梔子苷作為梔子的薄層色譜區(qū)分、高效液相色譜含量測定的比較品1。根據(jù)文獻(xiàn)報道，梔子的含量測定要擁有薄層色譜紫外分光光度法2，薄層色譜掃描法35，高效液相色譜法67等。本實行接納高效液相色譜法測定梔子苷含量，闡發(fā)速率快，敏捷度高，專屬性強，應(yīng)用范疇廣，重現(xiàn)性與正確性均優(yōu)于薄層色譜紫外分光光度法、薄層色譜掃描法。1儀器與試藥1.1儀器aters600高效液相色譜儀600低壓梯度泵、717主動進(jìn)樣器、2996DAD檢測器,柱溫箱，；Eper事情站；Bp211-D

4、型電子天平十萬分之一，德國Sartrus公司。1.2藥品與試劑梔子苷比較品中國藥品生物成品檢定所，供含量測定用，批號110749-202209；甲醇為色譜純，水為高純水，別的試劑均為闡發(fā)純；克感利咽口服液由廣州王老吉藥業(yè)股份消費提供；缺梔子陰性制劑廉價。2要領(lǐng)與效果2.2供試品溶液的制備細(xì)密移取克感利咽口服液批號0304022l，置25l量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。用0.45濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。2.3陰性比較溶液的制備撤除梔子，根據(jù)克感利咽口服液的制備要領(lǐng)制備陰性樣品，按供試品溶液的制備要領(lǐng)制備成梔子陰性比較溶液。最大汲取波長簡直定經(jīng)紫外光譜檢測，梔子苷在241n處有紫外最大汲取，應(yīng)選

5、擇該波長為檢測波長。與?中國藥典?2022年版部梔子項下的劃定同等，光譜圖如圖1。a梔子苷b克感利咽樣品梔子藥材d梔子陰性光譜圖圖1光譜圖略2.4色譜條件及體系實用性實行色譜柱：Diansil(鉆石)18柱，5，2504.6，活動相：甲醇水(2971)，流速：1l/in，柱溫：30；檢測波長：241n。別離取比較品溶液、樣品溶液、陰性比較溶液各10l注入液相色譜儀，按上述色譜條件記載色譜圖，理論塔板數(shù)按梔子苷峰面積盤算不低于3000，梔子苷峰與之相鄰峰的分散度不低于2.0。梔子苷的保存時間約為14.7in，梔子苷與供試溶液中別的組分到達(dá)基線分散，陰性比較液圖譜在梔子苷峰位置無汲取峰，別離見圖2

6、。2.5線性干系及尺度曲線細(xì)密汲取梔子苷比較品溶液0.1182g/l)2，4，6，8，10，15l進(jìn)樣，按上述色譜條件測定，以梔子苷的量g為橫坐標(biāo)，其峰面積汲取度積分值A(chǔ)rea為縱坐標(biāo)，繪制尺度曲線,盤算回歸方程為：Y=1563686X-36413相干系數(shù)r=0.9999，梔子苷的量在0.23641.773g范疇內(nèi)與峰面積積分值呈精良的線性干系。繪制尺度曲線圖，效果見圖3。圖2專屬性實行圖略圖3梔子苷尺度曲線圖略2.6要領(lǐng)細(xì)密度實行取同一供試品溶液批號0304024l，重復(fù)進(jìn)樣5次，測定峰面積積分值別離為706504，709353，713770，708032，705146，均勻值為708561

7、，RSD為0.47。2.7不變性實行取同一供試品溶液批號030402，別離于0，2，4，8，10h各進(jìn)樣4l，測定梔子苷峰面積積分值為705146，708032，704623，712556，696685，均勻值為705408，RSD為0.82%，表白樣品在10h內(nèi)不變性較好。2.8要領(lǐng)重現(xiàn)性實行取同一批號克感利咽口服液樣品批號0304025份，細(xì)密稱定，照供試品溶液的制備要領(lǐng)制備5份供試液，別離注入液相色譜儀，測定梔子苷含量，效果均勻含量6.79g/支，RSD為1.52%。效果表白，重現(xiàn)性精良。2.9接納率實行細(xì)密移取梔子苷含量按6.79g/支的克感利咽口服液樣品批號0304021l，細(xì)密稱定

8、，共6份，別離加梔子苷比較品0.652g/l0.8，0.8，1.0，1.0，1.2，1.2l，照供試品溶液的制備要領(lǐng)制備供試液，用0.45濾膜濾過，細(xì)密汲取續(xù)濾液10l，別離注入液相色譜儀，測定，盤算。效果見表1。接納率梔子苷測得量樣品中梔子苷的量梔子苷參加量1002.10成品中含量測定及限量劃定按本品格量尺度項下克感利咽口服液的含量測定要領(lǐng)，對20批克感利咽口服液樣品舉行含量測定，效果見表2。表1加樣接納試驗效果表略效果表白，該要領(lǐng)加樣接納率在95%105%之間，滿意劃定要求。表2成品中梔子苷的含量測定效果略*為每支中含量根據(jù)上述20批克感利咽口服液樣品的數(shù)據(jù)舉行闡發(fā)，含量根本不變，這與投料

9、前操縱了藥材質(zhì)量有嚴(yán)密干系，在一連積聚數(shù)據(jù)的底子上，為有用操縱質(zhì)量，發(fā)起梔子苷含量限度為不少于4.5g/支。3結(jié)論接納HPL法測定克感利咽口服液中梔子苷的含量，樣品前處置懲罰要領(lǐng)簡樸，色譜條件成熟不變，測定效果重現(xiàn)性好，完全可以交換原質(zhì)量尺度中薄層色譜法測定梔子苷含量。通過以上實行，我公司按中藥增補申請要求，申報SFDA修訂質(zhì)量尺度要領(lǐng)，為以后我公司克感利咽口服液產(chǎn)物的查驗事情提供便利，同時為該產(chǎn)物的進(jìn)一步開拓提供實行根據(jù)。參考文獻(xiàn)：1國度藥典委員會.中國藥典，部S.北京：化學(xué)產(chǎn)業(yè)出書社：173.2許良,王青虎,特木爾巴根.薄層紫外法測定如達(dá)六散中梔子苷含量J.時珍國醫(yī)國藥,1999,10(9):662.3方肇年,熊義濤,葉小川,等.薄層掃描法測定石淋止痛劑中梔子苷的含量J.中國中醫(yī)藥科技,1997,4(4):227.4梁生旺,張廣強,李永軍,等.薄層掃描法測定清肝利膽注射液中4種有用身分的含量J.藥物闡發(fā)雜志,1995,15(1):24.5郜迎晨.用薄層掃描法測定清