MTT法分析含藥血清對體外培養(yǎng)肺癌細(xì)胞增殖的影響

1、MTT法闡發(fā)含藥血清對體外造就肺癌細(xì)胞增殖的影響趙婷秀陳振發(fā)邱幸凡由江峰許湘王秀蓮姜霞劉凌琪【關(guān)鍵詞】莪術(shù)瓜蔞湯摘要:目的:TT法不雅察莪術(shù)瓜蔞湯含藥血清對人肺癌細(xì)胞增殖的影響。要領(lǐng):家兔灌胃制備高、中、低劑量莪術(shù)瓜蔞湯血清別離作用于人肺癌細(xì)胞，接納TT法不雅察莪術(shù)瓜蔞湯含藥血清對細(xì)胞增殖的按捺作用。效果:高劑量血清組與比較血清組之間的吸光度差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義P0.01，隨著作用時間的延伸，其吸光度漸漸低落，按捺率漸漸增高。結(jié)論:莪術(shù)瓜蔞湯含藥血清具有必然的抗肺癌作用，并存在必然的量效干系，為莪術(shù)瓜蔞湯的臨床應(yīng)用提供了科學(xué)的實行根據(jù)。關(guān)鍵詞:莪術(shù)瓜蔞湯;人肺癌細(xì)胞;血清藥理學(xué);TT法為進(jìn)一步

2、研究中醫(yī)藥治療肺癌的作用機(jī)理，本實行接納TT法不雅察莪術(shù)瓜蔞湯含藥血清對人肺癌細(xì)胞增殖的影響，挑選出符合的血清濃度。1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1實行質(zhì)料1.2實行要領(lǐng)1.3統(tǒng)計學(xué)闡發(fā)數(shù)據(jù)處置懲罰接納方差闡發(fā)。2效果10%的含藥血清作用PGLH7細(xì)胞24h、48h和72h的吸光度值見表1。由表1可以看出:莪術(shù)瓜蔞湯低、中劑量血清組與比較血清組之間的PGLH7細(xì)胞吸光度差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而莪術(shù)瓜蔞湯高劑量血清組那么與比較血清組之間的吸光度差異有明顯統(tǒng)計學(xué)意義P0.01;同時可以看到高劑量血清組隨著作用時間的延伸，其吸光度漸漸低落，按捺率漸漸增高，但無統(tǒng)計學(xué)差異。上述效果提示，10%莪術(shù)瓜蔞湯高劑量血清組對P

3、GLH7細(xì)胞的增殖大概具有顯著的按捺作用，并有隨時間延伸而作用愈顯著的趨勢。表1莪術(shù)瓜蔞湯含藥血清作用差異時間對PGLH7細(xì)胞增殖的影響注:*與同一時點(diǎn)比較血清組比力，P0.01。3討論“莪術(shù)瓜蔞湯是名老中醫(yī)邱幸凡傳授治療肺癌的重要方劑，是按照“痰瘀濁氣凝聚于肺的病理特點(diǎn)而立法、組方、用藥的，臨床治療肺癌獲得了必然療效。中藥復(fù)方多數(shù)是通過口服而起作用的，用中藥粗制劑直接參加離體反響體系中舉行實行研究，在要領(lǐng)學(xué)上存在許多題目，如中藥中的雜質(zhì)身分、種種電解質(zhì)或鞣質(zhì)、以及差異酸堿度的影響等，都市對實行效果造成必然的影響。中藥血清藥理學(xué)實現(xiàn)了體外實行和體內(nèi)實行的較好結(jié)合，在要領(lǐng)學(xué)上具有創(chuàng)新性，可以去除

4、以上種種因素的影響，比力靠近藥物體內(nèi)情況中產(chǎn)生藥理效應(yīng)的歷程，如今是研究中藥藥理學(xué)的一種較為抱負(fù)的要領(lǐng)4。為了淘汰因種屬差異而造成的免疫反響，實行動物應(yīng)只管選用與人類生物學(xué)特性近似的物種，以家兔和大鼠為首眩李儀奎等3提出中藥血清藥理研究的通用給藥方案通法并給出增大給藥劑量以部門地補(bǔ)充含藥血清被稀釋，較好地操縱現(xiàn)實參加反響體系中含藥血清的藥量。在體外造就體系中宜接納同種單一血清，且含藥血清在造就液中的濃度一樣平常不克不及凌駕20%，此中以10%的濃度為最正確條件。TT顯色法5是近幾年評價腫瘤細(xì)胞保存狀態(tài)較受推許的要領(lǐng)之一。當(dāng)腫瘤細(xì)胞在光鏡下尚未出現(xiàn)顯著形狀變革時，其活細(xì)胞的線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可

5、復(fù)原TT而形成難溶的藍(lán)紫色結(jié)晶物，死細(xì)胞那么無此成效。用酶聯(lián)免疫檢測儀測定其汲取值在必然數(shù)目的細(xì)胞范疇內(nèi)，間接反響活細(xì)胞的數(shù)目。TT法反響差異腫瘤細(xì)胞對種種抗腫瘤藥物的敏感性差異，并且與別的藥敏要領(lǐng)及臨床療效都有很好的相干性，對付臨床公正用藥、實現(xiàn)腫瘤病人個別化治療具有緊張代價。為了研究差異劑量含藥血清對吸光度的影響，本實行選用家兔制備莪術(shù)瓜蔞湯含藥血清，以家兔的臨床等效用藥劑量為中劑量，其1/3倍和3倍別離為低、高劑量，然后按通法方案，以上述三種劑量別離給家兔灌胃給藥，制備濃度為10%的差異劑量含藥血清。效果表白，差異劑量的莪術(shù)瓜蔞湯血清組處置懲罰PGLH7細(xì)胞差異時間后，癌細(xì)胞的生長受到差

6、異程度的影響，此中高劑量莪術(shù)瓜蔞湯血清組對付人肺癌細(xì)胞的增殖按捺作用顯著優(yōu)于別的各組含藥血清，并與其藥物劑量呈正相干。我們以為在制備中藥含藥血清時得當(dāng)增長臨床等效用藥劑量是需要的。王力倩等6在研究苦參、仙鶴草的抗癌作用時表現(xiàn)，以臨床常用量盤算給藥劑量所制得的含藥血清對腫瘤細(xì)胞體外生長有按捺作用，而比該藥量小1倍的含藥血清那么無顯著作用。本實行也表現(xiàn)高劑量含藥血清組對PGLH7細(xì)胞的作用明顯。所謂低、中、高劑量含藥血清是指以賜與相應(yīng)劑量的藥物制得的血清，絕不該與由一種劑量的藥物制備的血清予以相應(yīng)稀釋的濃度凹凸相殽雜，由于兩者是截然差異的兩個觀點(diǎn)。但我們也應(yīng)看到，在中藥含藥血清的制備歷程中，由于受到動物選擇、給藥劑量、采血時間以及含藥血清的滅活、除菌、保存等諸多因素的影響，血清中所含簡直切藥效身分尚未十明白了，其要領(lǐng)在技能上尚需探究、范例和美滿。為研究中藥血清對體外人肺癌細(xì)胞的藥理作用，最正確血清濃度另有待多方面驗證。參考文獻(xiàn)5sannT.Rapidlrietriassayfrellulargrthandsurivalap-pliatintprlif