腫瘤的生物治療-惡性腫瘤的免疫和基因治療課件

1、惡性腫瘤的免疫和基因治療復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤內(nèi)科 李 進(jìn) Edward Jenner現(xiàn)代免疫學(xué)奠基人牛痘的發(fā)明者(1796)細(xì)胞免疫的基本概念Tumor cell腫瘤免疫反應(yīng)免疫系統(tǒng)能夠識別腫瘤抗原并產(chǎn)生免疫反應(yīng)。體液免疫在腫瘤病人普遍存在，但不起主要作用。細(xì)胞免疫:殺傷性T細(xì)胞(CD8+) 輔助性T細(xì)胞(CD4+) 。免疫治療的主要分類非特異性主動免疫治療 細(xì)胞因子（白介素2，干擾素，腫瘤壞死因子） 胞壁佳 短小棒狀桿菌 卡介苗 高聚金葡素 單克隆抗體(美羅華、赫賽叮、西妥昔、貝伐） 過繼免疫治療(TIL細(xì)胞、CIK細(xì)胞、LAK細(xì)胞)特異性主動免疫治療 核酸疫苗(DNA,RNA) 腫瘤細(xì)

2、胞疫苗 抗原蛋白疫苗或多肽疫苗（包括基因重組蛋白） 樹突狀細(xì)胞疫苗免疫治療的主要分類干擾素用法：300-900萬單位， 每周2-3次，連續(xù)使用8周 抑制腫瘤細(xì)胞的增殖；誘導(dǎo)NK細(xì)胞、CTL，并協(xié)同IL-2增強(qiáng)LAK的活性；誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHC-類抗原，增加對殺傷細(xì) 胞的敏感性。適應(yīng)癥：聯(lián)合化療治療毛細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、腎癌、惡性黑色素瘤和淋巴瘤的治療有效。腹腔灌注IL-2治療卵巢癌（II期臨床）方法：IL-2 60萬單位/m2 1/周 共十六周病人：泰素、順鉑抗拒的卵巢癌病人31例副作用：可耐受，無IL-2相關(guān)的3/4級毒性結(jié)果：24 可評價病人中 4 CR, 2 PR, 7 SD,

3、11 PD 總有效率 25.0% R. P. Edwards,et al ASCO2003單克隆抗體又稱之為生物導(dǎo)彈技術(shù)，通過補(bǔ)體系統(tǒng)和自然殺傷細(xì)胞起抗腫瘤作用。 嵌合型單抗達(dá)到95以上 人源化,減少了免疫原性 美羅華治療惡性淋巴瘤 赫賽汀治療乳癌，聯(lián)合 化療增強(qiáng)療效MAb NameTrade NameUsed to Treat:Approved in:RituximabRituxanNon-Hodgkin lymphoma1997TrastuzumabHerceptinBreast cancer1998Gemtuzumab ozogamicin*MylotargAcute myelogeno

4、us leukemia (AML)2000AlemtuzumabCampathChronic lymphocytic leukemia (CLL)2001Ibritumomab tiuxetan*ZevalinNon-Hodgkin lymphoma2002Tositumomab*BexxarNon-Hodgkin lymphoma2003CetuximabErbituxColorectal cancer2004BevacizumabAvastinColorectal cancer2004*conjugated monoclonal antibodies 美國FDA批準(zhǔn)的單克隆抗體過繼免疫治療

5、Rosenberg八十年代首創(chuàng)了LAK細(xì)胞，TIL取自浸潤淋巴細(xì)胞在LAK細(xì)胞的基礎(chǔ)上得到進(jìn)一步提高迄今為止在臨床上應(yīng)用最為廣泛的過繼免疫治療特點：繁瑣的制備過程和嚴(yán)重的副作用限制了臨床上推廣治療療效有限CD3AK和CIK的問世沒有產(chǎn)生新的局面對惡性黑色素瘤、腎癌、癌性胸腹水的治療效果比較好特異性主動免疫治療腫瘤疫苗細(xì)胞瘤苗：最常采用轉(zhuǎn)基因腫瘤制備；分子疫苗：單獨的分子抗原性弱，需要佐劑；多肽疫苗： 8-10個氨基酸的多肽是T細(xì)胞識別的基礎(chǔ)；重組蛋白疫苗：與細(xì)胞因子、毒素等重組形成融合蛋；病毒疫苗：用病毒作為載體進(jìn)行蛋白的表達(dá)；樹突狀細(xì)胞疫苗：抗原需要被提呈并致敏原始T-淋巴細(xì)胞，需要樹突狀細(xì)

6、胞，是獲得有效免疫反應(yīng)的關(guān)鍵。體內(nèi)最強(qiáng)大抗原遞呈細(xì)胞樹突狀細(xì)胞樹突狀細(xì)胞的分離培養(yǎng)激活血細(xì)胞分離細(xì)胞培養(yǎng)抗原沖擊細(xì)胞回輸抗原沖擊DC治療乳腺癌（I/II期臨床）病人： 高表達(dá)HER2的轉(zhuǎn)移性乳腺癌病人 16例方法： HER500沖擊的自體APC 2108 to 5 109 ， 二周一次，共三次。 副作用：主要為寒戰(zhàn)和發(fā)熱，沒有 級的毒副反應(yīng)結(jié)果： 12個可評價的病人 1例PR 結(jié)論： HER500沖擊的自體DC使用安全，有一定 療效，但效率仍不夠高。 J. W. Kylstra, et al. ASCO2003CEA病毒感染的DC（I期臨床）方法：表達(dá)CEA禽痘病毒感染的DC（5106）， 每

7、周二 次，一個月一個療程，13療程病例數(shù)：6個病人副作用：沒有明顯的毒副作用結(jié)果：一個病人CEA水平從46降低到6.8，并有鎖骨上 淋巴結(jié)的部分退縮。5/6個病人外周血淋巴細(xì)胞 對CEA表達(dá)的載體有增殖反應(yīng)。 M. A. Morse, ASCO 2003蛋白分子靶向疫苗的優(yōu)勢特異性與DC結(jié)合與病毒體外激活具同樣效率。費用低廉，可大規(guī)模生產(chǎn)，制作比病毒更簡單。為重組蛋白，不存在安全性問題。皮下給藥，使用方便?？芍貜?fù)使用。熱休克蛋白疫苗臨床試驗 III期：腎癌惡性黑色素瘤全球有150 醫(yī)學(xué)中心在收集病例進(jìn)行腫瘤抗原熱休克蛋白復(fù)合物疫苗臨床實驗 I 、II期：慢性髓性白血病淋巴瘤胰腺癌胃癌、大腸癌D

8、Cs疫苗對惡性黑色素瘤和腎癌，總有效率大約在 30-40；其它腫瘤方面有效率在10-30左右；是所有方案中比較理想的疫苗；需要很高的技術(shù)要求，離推廣應(yīng)用還有一段距離；目標(biāo)是預(yù)防術(shù)后復(fù)發(fā)，使40%的病人得到根治。免疫治療的臨床地位免疫治療是最有前途的抗腫瘤手 段之一目前尚未起主導(dǎo)作用定位于手術(shù)、放化療后清除殘留病灶目標(biāo)是預(yù)防復(fù)發(fā)關(guān)鍵是抗原在體內(nèi)有效地被遞呈并激 活T淋巴細(xì)胞基因治療(Gene therapy)用正?；蛐Ｕ蛑脫Q致病基因過程是將目的基因?qū)氲桨屑?xì)胞內(nèi)并使之表達(dá)目標(biāo)是直接或間接消滅腫瘤細(xì)胞概念的擴(kuò)展：采用分子生物學(xué)的方法和原理，在核酸水平上開展的疾病治療方法都可稱為基因治療?；蛑?/p>

9、療的途徑 體外途徑 ：安全，但操作煩瑣，設(shè)備要求比較高體內(nèi)途徑 ：基因?qū)胨褂玫妮d體的安全性需要進(jìn)行復(fù)雜的論證。自殺基因治療HSV-TK/GCV系統(tǒng) tk基因多為單純皰疹病毒（HSV）和水痘皰疹病毒（VZV）中的胸苷激酶基因。毒性效應(yīng)來自于GCV磷酸化其通過抑制DNA聚合酶的活性，阻斷DNA的合成VZV-TK激酶能將6甲氧嘌呤阿拉伯糖苷（ara-M）轉(zhuǎn)化為6甲氧嘌呤阿糖苷腺苷三磷酸（ara-MTP）CD-5-FC 系統(tǒng) 人及其他哺乳動物中不表達(dá)CD酶可將胞嘧啶脫氨基轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏じ邉┝康?-FC在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)?-FU從而將細(xì)胞殺傷作用。自殺基因治療的缺點只對處于分裂期的腫瘤細(xì)胞有殺傷作用,而瘤體

10、內(nèi)有相當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞群體處于非增殖分裂狀態(tài)。腫瘤細(xì)胞的異質(zhì)性使得有些細(xì)胞克隆對自殺基因系統(tǒng)的敏感性不同。基因轉(zhuǎn)移的效率還很低，無法使所有的腫瘤細(xì)胞均能被導(dǎo)入相應(yīng)的目的基因。某些腫瘤特異的表達(dá)元件的活性較低，不足以表達(dá)足夠的自殺基因產(chǎn)物。復(fù)制型病毒治療利用病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的增殖作用裂解腫瘤細(xì)胞已經(jīng)取得了可喜的進(jìn)步特異性啟動子使病毒靶向性復(fù)制主要方式：單純皰疹病毒和腺病毒基因治療的臨床定位載體或病毒的轉(zhuǎn)染效率應(yīng)得到進(jìn)一步提高。減少免疫原性，避免被體內(nèi)免疫系統(tǒng)清除。基因治療的安全性仍然受到關(guān)注。除了溶瘤病毒外,其它基因治療在臨床上的實用性還有待提高。直接腫瘤基因治療有著良好的應(yīng)用前景。 西妥昔-聯(lián)合一線方案治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌西妥昔+ FOLFOX41西妥昔+ IFL2 西妥昔+ FOLFIRI3西妥昔+ FUFIRI4 可評價病人42252219RR (CR + PR)81% 44% 46%74%(CR+PR+SD)98% N/A 87% N/AM TTP (月)N/AN/A10.9N/A1Tabernero, et al. ASCO 2004, Abstract 3512 (updated data from ASCO presentation).2Rosenberg AH, et al. ASCO 2