2021年大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院306臨床醫(yī)學(xué)綜合能力(西醫(yī))考研核心題庫(kù)之生物化學(xué)論述題精編_第1頁(yè)
2021年大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院306臨床醫(yī)學(xué)綜合能力(西醫(yī))考研核心題庫(kù)之生物化學(xué)論述題精編_第2頁(yè)
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1、 4/42021年大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院306臨床醫(yī)學(xué)綜合能力(西醫(yī))考研核心題庫(kù)之生物化學(xué)論述題精編 特別說(shuō)明 本書(shū)根據(jù)歷年考研大綱要求并結(jié)合歷年考研真題對(duì)該題型進(jìn)行了整理編寫(xiě),涵蓋了這一考研科目該題型??荚囶}及重點(diǎn)試題并給出了參考答案,針對(duì)性強(qiáng),考研復(fù)習(xí)首選資料。 版權(quán)聲明 青島掌心博閱電子書(shū)依法對(duì)本書(shū)享有專有著作權(quán),同時(shí)我們尊重知識(shí)產(chǎn)權(quán),對(duì)本電子書(shū)部分內(nèi)容參考和引用的市面上已出版或發(fā)行圖書(shū)及來(lái)自互聯(lián)網(wǎng)等資料的文字、圖片、表格數(shù)據(jù)等資料,均要求注明和來(lái)源。但由于各種原因,如資料引用時(shí)未能聯(lián)系上或者無(wú)法確認(rèn)內(nèi)容來(lái)源等,因而有部分未注明或來(lái)源,在此對(duì)原或權(quán)利人表示感謝。若使用過(guò)程中對(duì)本書(shū)有任何異議

2、請(qǐng)直接聯(lián)系我們,我們會(huì)在第一時(shí)間與您溝通處理。 因編撰此電子書(shū)屬于首次,加之水平和時(shí)間所限,書(shū)中錯(cuò)漏之處在所難免,懇切希望廣大考生讀者批評(píng)指正。 重要提示 本書(shū)由本機(jī)構(gòu)編寫(xiě)組多位高分在讀研究生按照考試大綱、真題、指定參考書(shū)等公開(kāi)信息潛心整理編寫(xiě),僅供考研復(fù)習(xí)參考,與目標(biāo)學(xué)校及研究生院官方無(wú)關(guān),如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系我們立即處理。一、2021年大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院306臨床醫(yī)學(xué)綜合能力(西醫(yī))考研核心題庫(kù)之生物化學(xué)論述題精編 1如何理解生物體內(nèi)的能量代謝是以ATP為中心的? 【答案】可以從能量的生成、利用、貯存、轉(zhuǎn)換與ATP的關(guān)系來(lái)說(shuō)明。 (1)生成:底物水平磷酸化和氧化磷酸化,都以生成高能物質(zhì)ATP為主

3、。 (2)利用:絕大多數(shù)的合成反應(yīng)需要A TP直接提供能量,僅少數(shù)情況下利用其他三磷酸核苷酸供能。在一些生理活動(dòng)中,如肌肉收縮、分泌吸收、神經(jīng)傳導(dǎo)和維持體溫等,也需ATP參與。 (3)貯存:由ATP和肌酸可生成CP貯存,需要時(shí)再轉(zhuǎn)換成ATP。 (4)轉(zhuǎn)換:在相應(yīng)的酶催化下,ATP可供其他二磷酸核苷酸轉(zhuǎn)變成三磷酸核苷酸,參加有關(guān)反應(yīng)。 2魚(yú)藤酮是來(lái)自植物的一種天然毒素,強(qiáng)烈抑制昆蟲(chóng)和魚(yú)類線粒體NADH脫氫酶;抗霉素A 也是一種毒性很強(qiáng)的抗生素,強(qiáng)烈抑制電子傳遞鏈中泛酸的氧化。 (1)為什么某些昆蟲(chóng)和魚(yú)類攝入魚(yú)藤酮會(huì)致死? (2)為什么抗霉素A是一種毒藥? (3)假設(shè)魚(yú)藤酮和抗霉素A封閉它們各自的

4、作用部位是等同的,那么哪一個(gè)毒性更厲害? 【答案】(1)NADH脫氫酶被魚(yú)藤酮抑制,降低了電子流經(jīng)呼吸鏈的速度,因此也就減少了A TP的合成。如果在這種情況下生成的ATP不能滿足生物體對(duì)ATP的需求,生物體將死掉。 (2)因?yàn)榭姑顾谹強(qiáng)烈抑制泛醌的氧化,同樣會(huì)發(fā)生(1)的情形。 (3)由于抗霉素A封閉了所有電子流向氧的路徑,而魚(yú)藤酮只是封閉來(lái)自NADH,而不是來(lái)自的電子的流動(dòng),所以抗霉素A的毒性更強(qiáng)。 3有一個(gè)七肽,經(jīng)分析它的氨基酸組成為L(zhǎng)ys、Gly、Arg、Phe、Ala、Tyr和Ser。此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理時(shí),與FDNB反應(yīng)不產(chǎn)生氨基酸。經(jīng)糜蛋白酶作用后,此肽斷裂成兩個(gè)肽段,其氨基酸組成

5、分別為Ala、Tyr、Ser和Gly、Phe、LyS、Arg。這兩個(gè)肽段分別與FDNB反應(yīng),可分別產(chǎn)生DNP-Ser和DNP-Lys。此肽與胰蛋白酶反應(yīng),同樣能生成兩個(gè)肽段,它們的氨基酸組成分別是Arg、Gly和Phe、Tyr、Lys、Ser、Ala。試問(wèn)此七肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣的?給出分析過(guò)程。 【答案】(1)此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理,與DNFB反應(yīng)不能給出任何有用的信息,表明該肽沒(méi)有游離的氨基末端,系一環(huán)狀多肽,由7個(gè)氨基酸組成。 (2)當(dāng)用糜蛋白酶處理這個(gè)環(huán)狀分子時(shí)產(chǎn)生兩個(gè)小肽,與DNFB反應(yīng)后水解可得到DNP-Ser 和DNP-Lys。從給出的條件可知這兩個(gè)小肽是: (3)當(dāng)用胰蛋白酶處理這

6、個(gè)七肽時(shí),產(chǎn)生的兩個(gè)小肽是: 考慮到(2)給出的結(jié)果,用胰蛋白酶處理后所得到的五肽的氨基酸順序應(yīng)為; 。又由于(3)給出了的順序,進(jìn)而可知糜蛋白酶處理環(huán)狀分子后所 得到的四肽的氨基酸順序是:。 上述總的結(jié)果是: 用糜蛋白酶處理:。 用胰蛋白酶處理:。 由于該物質(zhì)是一個(gè)環(huán)狀多肽,所以它的氨基酸順序如下: 。 4何謂甲硫氨酸循環(huán),有何生理意義? 【答案】甲硫氨酸與ATP在腺苷轉(zhuǎn)移酶催化下生成SAM,SAM在甲基轉(zhuǎn)移酶作用下可將甲基轉(zhuǎn)移給另一物質(zhì),使其甲基化后轉(zhuǎn)變成腺苷同型半胱氨酸,后者進(jìn)一步脫去腺苷,生成同型半胱氨酸。同型半胱氨酸可以接受甲基四氫葉酸提供的甲基,以維生素為輔酶,重新生成甲硫氨酸的循

7、環(huán)過(guò)程。這個(gè)循環(huán)的生理意義是: 為機(jī)體的某些甲基化反應(yīng)提供活性甲基; 使甲基四氫葉酸的甲基得到利用,提高四氫葉酸的利用率。 5論述基因重組技術(shù)中常用的篩選方法及其作用原理。 【答案】重組克隆的篩選和鑒定是基因工程中的重要環(huán)節(jié)之一。不同的克隆載體和相應(yīng)的宿主系統(tǒng),其重組克隆的篩選和鑒定方法不盡相同。從理論上說(shuō),重組克隆的篩選是排除自身環(huán)化的載體、未酶解完全的載體及非目的DNA片段插入的載體所形成的克隆。常用的篩選方法有兩類:一類是針對(duì)遺傳表型改變篩選法,以半乳糖苷酶系統(tǒng)篩選法為代表;另一類是分析重組子結(jié)構(gòu)特征的篩選法,包括快速裂解菌落鑒定質(zhì)粒大小、限制酶圖譜鑒定、Southern印跡雜交、PCR

8、 法、菌落(或噬菌斑)原位雜交等方法。 (1)半乳糖苷酶系統(tǒng)篩選法(藍(lán)白斑篩選法)。使用本方法的載體包括M13噬菌體、pUC 質(zhì)粒系列、pGEM質(zhì)粒系列等。這些載體的共同特征是載體上攜帶一段細(xì)菌的基因LacZ。LacZ 編碼半乳糖苷酶的一段146個(gè)氨基酸的肽,載體轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞為基因型。重組子由于外源片段的插入使肽基因失活不能形成互補(bǔ)作用,也就是說(shuō),宿主細(xì)胞表現(xiàn)為半乳糖苷酶失活。因此,在X-gal平板上,重組克隆為無(wú)色噬菌斑或菌落,非重組克隆為藍(lán)色噬菌斑或菌落。這種篩選方法操作簡(jiǎn)單,但當(dāng)插入片段較短(小于500bp),且插入片段沒(méi)有影響LacZ基因的讀框時(shí),有假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。 (2)快速裂解

9、菌落鑒定質(zhì)粒大小。從平板中挑取菌落,過(guò)夜培養(yǎng)后裂解,直接進(jìn)行凝膠電泳,與載體DNA比較,根據(jù)遷移率的減小初步判斷是否有插入片段存在。本方法適用于插入片段較大的重組子的初步篩選。 (3)限制酶圖譜鑒定。對(duì)于初步篩選具有重組子的菌落,提純重組質(zhì)?;蛑亟M噬菌體DNA,用相應(yīng)的限制性內(nèi)切核酸酶(一種或兩種)切割重組子釋放出的插入片段,對(duì)于可能存在雙向插入的重組子還可用適當(dāng)?shù)南拗菩詢?nèi)切核酸酶消化鑒定插入方向,然后用凝膠電泳檢測(cè)插入片段和載體的大小。 (4)Southern印跡雜交。為確定DNA插入片段的正確性,在限制性內(nèi)切核酸酶消化重組子、凝膠電泳分離后,通過(guò)Southern印跡轉(zhuǎn)移,將DNA移至硝酸纖

10、維膜上,再用放射性同位素或非放射性標(biāo)記的相應(yīng)外源DNA片段作為探針,進(jìn)行分子雜交,鑒定重組子中的插入片段是否是所需的靶基因片段。 (5)PCR法。用PCR對(duì)重組子進(jìn)行分析,不但可以迅速擴(kuò)增插入片段,而且可以直接進(jìn)行DNA序列分析。因?yàn)閷?duì)于表達(dá)型重組子,其插入片段的序列的正確性是非常關(guān)鍵的。PCR法既適用于篩選含特異目的基因的重組克隆,也適用于從文庫(kù)中篩選含感興趣的基因或未知的功能基因的重組克隆。前者采用特異目的基因的引物,后者采用載體上的通用引物。 (6)菌落(或噬菌斑)原位雜交。菌落或噬菌斑原位雜交技術(shù)是將轉(zhuǎn)化菌DNA轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上,用放射性同位素或非放射性標(biāo)記的特異DNA或RNA探針進(jìn)

11、行分子雜交,然后挑選陽(yáng)性克隆。這種方法能進(jìn)行大規(guī)模操作,是篩選基因文庫(kù)的首選方法。 6簡(jiǎn)述基因工程的主要過(guò)程。 【答案】(1)目的基因的獲?。和ㄟ^(guò)化學(xué)合成或PCR的方法獲取,也可從基因組DNA文庫(kù)或cDNA文庫(kù)篩選。 (2)克隆載體的選擇與構(gòu)建:常用載體有質(zhì)粒、噬菌體、病毒DNA。 (3)目的基因與載體的連接:利用DNA連接酶將目的基因與載體DNA進(jìn)行共價(jià)連接形成重組DNA分子。 (4)重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞:目的基因與載體連接成重組DNA分子后,需將其導(dǎo)入受體菌,隨受體菌生長(zhǎng)、繁殖,重組DNA分子也復(fù)制、擴(kuò)增。導(dǎo)入的方法有轉(zhuǎn)化和感染等。 (5)重組體的篩選:篩選出含重組DNA的受體菌,常用篩選方法有遺傳學(xué)方法如耐藥性標(biāo)志選擇、分子雜交和免疫化學(xué)方法。 (6)克隆基因的表達(dá):包括原核表達(dá)和真核表達(dá)兩種體系。可以生成有藥用價(jià)值的蛋白質(zhì)或多肽。 7試總結(jié)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離及純化的相關(guān)技術(shù)。 【答案】蛋白質(zhì)分

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