檢驗(yàn)方法驗(yàn)證、檢驗(yàn)方法確認(rèn)實(shí)例

1、檢驗(yàn)方法確認(rèn)報(bào)告檢驗(yàn)方法確認(rèn)-產(chǎn)品名稱確認(rèn)報(bào)告編號人工牛黃甲硝唑膠囊批號：、R-TS-VP-4001-00驗(yàn)證工作組工作組職務(wù)姓名部門及職務(wù)職責(zé)組長黃漢新質(zhì)量負(fù)責(zé)人/質(zhì)量受權(quán)人負(fù)責(zé)確認(rèn)方案及報(bào)告的批準(zhǔn)副組長曾鳳敏質(zhì)量部QC組長負(fù)責(zé)確認(rèn)方案起草、實(shí)施、匯總報(bào)告及培訓(xùn)工作副組長胡建新質(zhì)量部QA組長審核確認(rèn)方案、審核驗(yàn)證報(bào)告并協(xié)調(diào)工作組員劉紅華質(zhì)量部QC參加確認(rèn)方案實(shí)施、匯總報(bào)告工作概述確認(rèn)目的和范圍組織及職責(zé)確認(rèn)起止日期方法確認(rèn)所需要的儀器設(shè)備及相關(guān)文件的確認(rèn)方法確認(rèn)所需要的對照品、原輔料、檢驗(yàn)樣品的確認(rèn)確認(rèn)項(xiàng)目和確認(rèn)方法、確認(rèn)結(jié)果【鑒別（1）】人工牛黃薄層色譜鑒別方法確認(rèn)【鑒別（2）】甲硝唑紫外

2、光譜鑒別方法確認(rèn)【鑒別（3）】人工牛黃膽紅素液相色譜鑒別方法確認(rèn)甲硝唑含量測定方法專屬性確認(rèn)甲硝唑含量測定方法線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)甲硝唑含量測定方法準(zhǔn)確度確認(rèn)甲硝唑含量測定方法精密度確認(rèn)甲硝唑含量測定方法耐用性確認(rèn)膽紅素含量測定方法系統(tǒng)適用性確認(rèn)膽紅素含量測定方法專屬性確認(rèn)膽紅素含量測定方法線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)膽紅素含量測定方法準(zhǔn)確度確認(rèn)膽紅素含量測定方法精密度確認(rèn)膽紅素含量測定方法耐用性確認(rèn)三批產(chǎn)品按本檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)的結(jié)果確認(rèn)偏差與漏項(xiàng)控制確認(rèn)報(bào)告會審概述我公司生產(chǎn)的品種人工牛黃甲硝唑膠囊，執(zhí)行國家藥監(jiān)局頒布的法定藥品標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)號為：WS-10001-(HD-0204)-2002。本公司前

3、身(原廣東華衛(wèi)藥業(yè)有限公司)按該標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)、檢驗(yàn)人工牛黃甲硝唑膠囊已有多年的歷史。根據(jù)GMP(2010版)第二百二十三條規(guī)定，對收入藥典和其它法定標(biāo)準(zhǔn)的分析方法，應(yīng)通過檢驗(yàn)方法確認(rèn)來證明該方法在本實(shí)驗(yàn)室條件下的適用性。故本公司依照法定標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0204)-2002以及中國藥典2015版四部附錄9101：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則的規(guī)定，制定本檢驗(yàn)方法確認(rèn)方案，由質(zhì)量部按制定的方法進(jìn)行試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果判斷檢驗(yàn)方法在本公司是否適用。本產(chǎn)品的微生物限度檢查方法驗(yàn)證，另行制定驗(yàn)證方案進(jìn)行驗(yàn)證，不包括在本次確認(rèn)。確認(rèn)目的和范圍確認(rèn)該產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法在本公司檢驗(yàn)室的適用性，保證檢驗(yàn)

4、結(jié)果的可靠性。本確認(rèn)方案采用3批按GMP要求組織生產(chǎn)的人工牛黃甲硝唑膠囊，進(jìn)行檢驗(yàn)方法的確認(rèn)。確認(rèn)項(xiàng)目包括【鑒別】、【甲硝唑含量測定】、【膽紅素含量測定】等。組織及職責(zé)確認(rèn)方案和確認(rèn)報(bào)告的起草、審核、批準(zhǔn)確認(rèn)方案由質(zhì)量部QC組負(fù)責(zé)起草，由質(zhì)量部審核，最終由質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。確認(rèn)方案實(shí)施完成后，由QC組負(fù)責(zé)匯總各個(gè)項(xiàng)目確認(rèn)的結(jié)果、撰寫報(bào)告，由質(zhì)量部審核，最終由質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)報(bào)告。確認(rèn)方案的培訓(xùn)確認(rèn)方案在經(jīng)質(zhì)量負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后，由QC組組長對本次確認(rèn)實(shí)施的相關(guān)人員組織培訓(xùn)工作，并將該次的培訓(xùn)記錄歸檔。確認(rèn)方案實(shí)施過程中的變更和偏差確認(rèn)方案實(shí)施過程中如有變更和偏差，質(zhì)量負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)組織進(jìn)行評估并采取相應(yīng)的控

5、制措施。確認(rèn)工作小組成員表姓名部門及職務(wù)職責(zé)黃漢新質(zhì)量負(fù)責(zé)人/質(zhì)量受權(quán)人負(fù)責(zé)確認(rèn)方案及報(bào)告的批準(zhǔn)曾鳳敏質(zhì)量部QC組長負(fù)責(zé)方案制定、實(shí)施、報(bào)告及培訓(xùn)工作胡建新質(zhì)量部QA組長審核確認(rèn)方案、審核確認(rèn)報(bào)告并協(xié)調(diào)工作劉紅華質(zhì)量部QC參加確認(rèn)方案實(shí)施、匯總報(bào)告工作4.確認(rèn)起止日期用于本次檢驗(yàn)方法確認(rèn)的三批產(chǎn)品是人工牛黃甲硝唑膠囊批號：、實(shí)施確認(rèn)工作的起止時(shí)間是：-方法確認(rèn)所需要的儀器設(shè)備及相關(guān)文件的確認(rèn).主要檢驗(yàn)儀器設(shè)備確認(rèn)表序號儀器設(shè)備名稱型號編號校準(zhǔn)單位校準(zhǔn)日期有效期至1電子天平BSA124SJY-102數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱GZX-9076MBEJY-193紫外可見分光光度計(jì)UV-2401-PCJY-034

6、高效液相色譜儀LC-10ATJY-015液相色譜儀LC-20ADJY-02檢查人/日期：復(fù)核人/日期：.確認(rèn)所需文件的確認(rèn)表文件名稱文件編碼是否有效版本文件保存處人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)TS-QS-4002-00是口否質(zhì)量部人工牛黃甲硝唑膠囊檢驗(yàn)操作規(guī)程SOP-QC-4002-00是口否質(zhì)量部取樣操作規(guī)程SOP-QA-0001-00是口否質(zhì)量部紫外可見分光光度法檢驗(yàn)操作規(guī)程SOP-QC-0008-00是口否質(zhì)量部高效液相色譜法檢驗(yàn)操作規(guī)程SOP-QC-0009-00是口否質(zhì)量部薄層色譜法操作規(guī)程SOP-QC-0030-00是口否質(zhì)量部UV-2401-PC紫外可見分光光度計(jì)操作規(guī)程SOP-

7、QC-5006-00是口否質(zhì)量部LC-10AT高效液相色譜儀操作規(guī)程SOP-QC-5005-00是口否質(zhì)量部LC-20AD高效液相色譜儀操作規(guī)程SOP-QC-5007-00是口否質(zhì)量部BSA124S電子天平操作規(guī)程SOP-QC-5017-00是口否質(zhì)量部檢查人/日期：復(fù)核人/日期：方法確認(rèn)所需要的對照品、原輔料、檢驗(yàn)樣品的確認(rèn).對照品、原輔料檢查表序號旦品名來源批號備注1膽酸對照品中國藥品生物制品檢定所2豬去氧膽酸對照品中國藥品生物制品檢定所3膽紅素對照品中國藥品生物制品檢定所含量4甲硝唑原料藥湖北省宏源藥業(yè)科技股份有限公司標(biāo)定含量為5人工牛黃原料藥武漢百草園生化藥業(yè)有限公司6淀粉輔料東莞市東

8、岳葡萄糖廠有限公司7二氧化硅輔料湖州展望藥業(yè)有限公司檢查人/日期：復(fù)核人/日期：.檢驗(yàn)樣品確認(rèn)表序號旦品名生產(chǎn)廠家批號規(guī)格是否按GMP要求生產(chǎn)1人工牛黃甲硝唑膠囊佛山市華普生藥業(yè)有限公司甲硝唑人工牛黃5mg是口否2人工牛黃甲硝唑膠囊佛山市華普生藥業(yè)有限公司甲硝唑人工牛黃5mg是口否3人工牛黃甲硝唑膠囊佛山市華普生藥業(yè)有限公司甲硝唑人工牛黃5mg是口否檢查人/日期：復(fù)核人/日期：確認(rèn)項(xiàng)目及確認(rèn)方法【鑒別（1）】人工牛黃薄層色譜鑒別方法確認(rèn)鑒別方法的專屬性確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【鑒別（1）】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)行鑒別方法專屬

9、性的確認(rèn)：（1）膽酸、豬去氧膽酸對照品溶液：取膽酸、豬去氧膽酸對照品，加乙醇制成每1ml各含的溶液，作為對照品溶液；（2）3批人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液:分別取本品3批的內(nèi)容物約（約相當(dāng)于人工牛黃20mg），研細(xì)，加氯仿15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；（3）人工牛黃陰性樣品溶液：按照人工牛黃甲硝唑膠囊工藝處方的比例，除人工牛黃不稱取外，稱取甲硝唑原料，淀粉，二氧化硅共置量瓶中，加氯仿15ml,超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為人工牛黃陰性樣品溶液。試驗(yàn)方法：照薄層色譜法(中國藥典2015年版四部05

10、02)試驗(yàn)，吸取上述溶液各4口l,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-醋酸-甲醇(20：25：2：3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105加熱數(shù)分鐘至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下或置紫外光燈(365nm)下檢視。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：(1)膽酸、豬去氧膽酸對照品溶液：顯2個(gè)主斑點(diǎn)；(2)3批人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯同顏色斑點(diǎn)；(3)人工牛黃陰性樣品溶液：在與對照品色譜相應(yīng)位置上，不顯斑點(diǎn)。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號,數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱型號編號硅膠G薄層板批號,來源(2)膽酸對照品稱樣量,稀釋倍數(shù)豬去氧膽酸對照品稱樣

11、量,稀釋倍數(shù)(3)人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)容物稱樣量：批號，稱樣量;批號，稱樣量;批號，稱樣量;(4)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果【鑒別(1)】人工牛黃薄層色譜鑒別-方法專屬性確認(rèn)結(jié)果測試樣品膽酸、豬去氧膽酸對照品溶液人工牛黃甲硝唑膠囊人工牛黃陰性樣品批批批薄層色譜顯2個(gè)主斑點(diǎn)與對照品色譜相應(yīng)位置顯同顏色斑點(diǎn)與對照品色譜相應(yīng)位置顯同顏色斑點(diǎn)與對照品色譜相應(yīng)位置顯同顏色斑點(diǎn)與對照品色譜相應(yīng)位置不顯斑點(diǎn)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期：【鑒別(2)】甲硝唑紫外光譜鑒別方法確認(rèn)鑒別方法的專屬性確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0204)-2002【鑒別(2)】項(xiàng)下規(guī)

12、定，分別制備以下溶液，進(jìn)行鑒別方法專屬性的確認(rèn)：(1)甲硝唑?qū)φ掌啡芤海喝〖紫踹驅(qū)φ掌芳s，精密稱定，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)溶解，稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻即得。3批人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：分別精密取本品3批的內(nèi)容物約59mg(約相當(dāng)于甲硝唑50mg),置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)約80ml,微溫使甲硝唑溶解，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml,置200ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻即得。(3)甲硝唑陰性樣品溶液：

13、按照人工牛黃甲硝唑膠囊工藝處方的比例,除甲硝唑不稱取外,稱取淀粉10mg,二氧化硅5mg、人工牛黃3mg置200ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)160ml微溫，放冷后稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml,置200ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻即得。試驗(yàn)方法：照分光光度法，取上述各種溶液掃描紫外吸收光譜方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：(1)甲硝唑?qū)φ掌啡芤海涸?772nm的波長處有最大吸收；在2412nm的波長處有最小吸收；(2)3批人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：在2772nm的波長處有最大吸收；在2412nm的波長處有最小吸收；(3)甲硝唑陰性樣品溶液：在277

14、2nm的波長處無最大吸收；在2412nm的波長處無最小吸收。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號，紫外分光光度計(jì)型號編號(2)甲硝唑?qū)φ掌贩Q樣量jmg(3)人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)容物稱樣量：批號，稱樣量;批號，稱樣量;批號，稱樣量;(4)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果【鑒別(2)】甲硝唑紫外光譜鑒別-方法專屬性確認(rèn)結(jié)果測試樣品甲硝唑?qū)φ掌啡斯づ｜S甲硝唑膠囊甲硝唑陰性樣品批批批最大吸收2772nm2772nm2772nm2772nm2772nm無最大吸收最小吸收2412nm2412nm2412nm2412nm2412nm無最小吸收項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期【鑒別(3)】人工牛黃膽

15、紅素液相色譜鑒別方法確認(rèn)鑒別方法的專屬性確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0204)-2002【鑒別(3)】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)行鑒別方法專屬性的確認(rèn)：(1)膽紅素對照品溶液：取膽紅素對照品約，精密稱定，置100ml量瓶中，加氯仿溶解，定容至刻度，搖勻，精密量取置25ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-水-鹽酸(90：10：混合液稀釋至刻度，制成每1ml中含膽紅素約4Ug的溶液，即得。(2)樣品提取溶劑：氯仿-甲醇-水-鹽酸(90：10:)的混合液(3)人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：取批本品的內(nèi)容物約(約相當(dāng)于膽紅素)，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加氯仿-

16、甲醇-水-鹽酸(90：10:)混合液約40ml,超聲提取15分鐘，取出，迅速冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。(4)人工牛黃陰性樣品溶液：按照人工牛黃甲硝唑膠囊工藝處方的比例,除人工牛黃不稱取外，稱取甲硝唑，淀粉，二氧化硅共置50ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-10%鹽酸(50：50:)混合液約40ml,超聲提取15分鐘，取出，冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。試驗(yàn)方法：精密吸取上述溶液各20口1,注入液相色譜儀，記錄色譜圖。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液主峰保留時(shí)間與膽紅素對照品溶液主峰保留時(shí)間一致（相對偏差不超過%）；（2）人工牛黃陰性

17、樣品溶液、樣品提取溶劑在膽紅素峰保留時(shí)間處均應(yīng)為平直基線，無吸收峰。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果（1）電子天平型號編號，高效液相色譜儀型號編號（2）膽紅素對照品稱樣量：（3）人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)容物稱樣量：批號，稱樣量（4）項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果【鑒別（3）】人工牛黃膽紅素液相色譜鑒別-方法專屬性確認(rèn)結(jié)果測試樣品膽紅素對照品成品樣品提取溶劑人工牛黃陰性樣品膽紅素峰保留時(shí)間在膽紅素峰保留時(shí)間處為平直基線，無色譜峰。在膽紅素峰保留時(shí)間處為平直基線，無色譜峰。項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期甲硝唑含量測定方法專屬性確認(rèn)甲硝唑含量測定方法的專屬性確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-100

18、01-（HD-0204）-2002【含量測定甲硝唑】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)行方法專屬性的確認(rèn)：（1）甲硝唑?qū)φ掌啡芤海喝〖紫踹驅(qū)φ掌芳s，精密稱定，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）溶解，稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）稀釋至刻度，搖勻即得。（2）3批人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：分別精密取本品3批的內(nèi)容物約59mg（約相當(dāng)于甲硝唑50mg），置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）約80ml，微溫使甲硝唑溶解，加鹽酸溶液（9T1000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（9

19、T1000）稀釋至刻度，搖勻即得。（3）甲硝唑陰性樣品溶液：按照人工牛黃甲硝唑膠囊工藝處方的比例，除甲硝唑不稱取外，稱取淀粉10mg，二氧化硅5mg、人工牛黃3mg置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）160ml微溫，放冷后稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）稀釋至刻度，搖勻即得。試驗(yàn)方法：照分光光度法，取上述各種溶液掃描紫外吸收光譜，并讀取吸收峰處的吸收度。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）甲硝唑?qū)φ掌啡芤海涸?772nm的波長處有最大吸收；（2）3批人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：在2772nm的波長處有最大吸收；（3）甲硝唑陰性

20、樣品溶液：在2772nm的波長處基本無吸收，吸收度A值接近0。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號，紫外分光光度計(jì)型號編號(2)甲硝唑?qū)φ掌贩Q樣量jpg(3)人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)容物稱樣量：批號，稱樣量;批號，稱樣量;批號，稱樣量(4)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果甲硝唑含量測定-方法專屬性確認(rèn)結(jié)果測試樣品甲硝唑?qū)φ掌啡斯づ｜S甲硝唑膠囊甲硝唑陰性樣品批批批最大吸收在2772nm有最大吸收S2772nm有最大吸收S2772nm有最大吸收S2772nm有最大吸收在2772nm基本無吸收，吸收度A=0項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期甲硝唑含量測定方法的線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)甲硝唑含量測定

21、方法的線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0204)-2002【含量測定甲硝唑】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)行線性關(guān)系與線性范圍的確認(rèn)：(1)甲硝唑?qū)φ掌焚A備液：取甲硝唑?qū)φ掌芳s，精密稱定，置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)溶解，稀釋至刻度，搖勻。精密量取6ml置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻即得。(2)線性關(guān)系測試溶液：分別精密量取甲硝唑?qū)φ掌焚A備液4ml、5ml、6ml、7ml、10ml置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻得系列濃度的測試溶液。試驗(yàn)方法：照紫外-可見分光光度

22、法，在277nm的波長處測定上述系列溶液的吸收度。計(jì)算出各個(gè)測試溶液的甲硝唑濃度，以濃度為橫坐標(biāo)，吸收度為縱坐標(biāo)，計(jì)算線性回歸方程、回歸系數(shù)R2、線性范圍。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：(1)測試溶液的甲硝唑濃度與吸收度之間呈良好線性關(guān)系，回歸系數(shù)R2：WR2W1；(2)甲硝唑濃度線性范圍：應(yīng)涵蓋人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0204)-2002【含量測定甲硝唑】項(xiàng)下樣品溶液中甲硝唑濃度Ug/ml的80%120%,即結(jié)果的線性范圍應(yīng)涵蓋口g/mlug/ml。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號，紫外分光光度計(jì)型號編號(2)甲硝唑?qū)φ掌贩Q樣量工g(3)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果甲硝唑含量測定

23、方法線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)對照品濃度(ug/ml)277nm的A值線性回歸方程y二回歸系數(shù)R2R2二線性范圍甲硝唑濃度ug/mlug/ml項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期甲硝唑含量測定方法準(zhǔn)確度確認(rèn)（回收率試驗(yàn)）甲硝唑含量測定方法的準(zhǔn)確度確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【含量測定甲硝唑】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)行方法準(zhǔn)確度的確認(rèn)：（1）甲硝唑陰性樣品溶液：按照人工牛黃甲硝唑膠囊工藝處方的比例，精密稱取人工牛黃，淀粉，二氧化硅共置100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）稀釋至刻度，搖勻即得。（2）回收率測試溶液

24、：精密稱取甲硝唑工作對照品約50mg,置100ml量瓶中，精密加入甲硝唑陰性樣品溶液5ml,再加鹽酸溶液（9T1000）約75ml，微溫使甲硝唑溶解，加鹽酸溶液（9T1000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml,置200ml量瓶中，加鹽酸溶液（9T1000）稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法，在277nm的波長處測定吸收度，按C6H9N3O3的吸收系數(shù)為377計(jì)算甲硝唑加入量，計(jì)算加樣回收率。(3)甲硝唑工作對照品：采用依照中國藥典2015年版“甲硝唑”項(xiàng)下進(jìn)行全檢合格，標(biāo)定純度的甲硝唑原料藥。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：AX40(1)計(jì)算公式：工作對照品回收率%=X100%377XWR

25、式中：A為回收率測試溶液的吸收度；WR為工作對照品加入量也)(2)工作對照品回收率限度為%，回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)限度為方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號，紫外分光光度計(jì)型號編號(2)甲硝唑工作對照品(湖北省宏源藥業(yè)科技股份有限公司，批號：028,標(biāo)定結(jié)果純度為)。(3)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果甲硝唑含量測定方法準(zhǔn)確度確認(rèn)結(jié)果試驗(yàn)編號工作對照品加入量58)測得吸收度A值測得甲硝唑量(mg)工作對照品回收%平均回收率回收率的RSD1%23456項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期甲硝唑含量測定方法精密度確認(rèn)甲硝唑含量測定方法的精密度確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)W

26、S-10001-(HD-0204)-2002【含量測定甲硝唑】項(xiàng)下方法，進(jìn)行方法精密度的確認(rèn)：(1)人工牛黃甲硝唑膠囊成品甲硝唑含量測定溶液：精密取本品批成品的內(nèi)容物約59mg(約相當(dāng)于甲硝唑50mg),置100ml量瓶中，加鹽酸溶液(9T1000)約80ml,微溫使甲硝唑溶解，加鹽酸溶液(9T1000)稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5ml,置200ml量瓶中，加鹽酸溶液(9+000)稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法，在277nm的波長處測定吸收度，按明必的吸收系數(shù)為377計(jì)算甲硝唑含量。(2)儀器吸收度讀數(shù)重復(fù)性：取同一份含量測定溶液,在紫外分光光度上連續(xù)測定吸收度。(3)甲

27、硝唑含量測定的重復(fù)性：取批成品,由同一人分別稱取6份樣品,進(jìn)行含量測定。(4)甲硝唑含量測定的中間精密度：取批成品,由甲實(shí)驗(yàn)人員稱取6份樣品,進(jìn)行測定(即上述甲硝唑含量測定的重復(fù)性)；再由乙實(shí)驗(yàn)人員在不同的日期稱取6份樣品,進(jìn)行測定。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：AX40（1）計(jì)算公式：甲硝唑的絕對百分含量%=X100%377XW式中：A為溶液的吸收度；W為樣品稱樣量（g）（2）儀器吸收度讀數(shù)重復(fù)性：讀數(shù)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）限度為（3）甲硝唑含量測定的重復(fù)性：結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）限度為（4）甲硝唑含量測定的中間精密度：結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）限度為方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果（1）電子天平型號編

28、號，紫外分光光度計(jì)型號編號（2）儀器吸收度讀數(shù)重復(fù)性：同一份溶液讀數(shù)6次，結(jié)果如下：測定次數(shù)1#2#3#4#5#6#RSD吸收度A%確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期（3）甲硝唑含量測定的重復(fù)性：成品批號測定次數(shù)1#2#3#4#5#6#含量均值含量測定的RSD稱樣量W（g）%吸收度A百分含量%確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期：(4)甲硝唑含量測定的中間精密度成品批號試驗(yàn)次數(shù)甲1甲2甲3甲4甲5甲6乙1乙2乙3乙4乙5乙6平均值含量測定的RSD稱樣量W(g)吸收度A百分含量%確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期：甲硝唑含量測定方法耐用性確認(rèn)將項(xiàng)下成

29、品溶液、對照品溶液放置于室溫，每隔一段時(shí)間測定吸收度，吸收度至少應(yīng)在8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。甲硝唑含量測定-方法耐用性確認(rèn)溶液吸收度A、時(shí)間成品溶液對照品溶液0hr24hr48hr96hr確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期：膽紅素含量測定方法系統(tǒng)適用性確認(rèn)膽紅素含量測定方法系統(tǒng)適用性確認(rèn)方法參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【含量測定膽紅素】項(xiàng)下方法，進(jìn)行高效液相色譜系統(tǒng)適用性確認(rèn)：（1）人工牛黃甲硝唑膠囊成品膽紅素含量測定溶液：精密稱取批號的人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)容物約（約相當(dāng)于膽紅素），置50ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-水-鹽酸（90：10:

30、）混合液約40ml，超聲提取15分鐘，取出，迅速冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。（2）色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-氯仿-1%磷酸溶液（81:13:6），檢測波長449nm。（3）取上述同一份含量測定溶液，連續(xù)6次進(jìn)樣測定，每次進(jìn)樣量均為20Ul，記錄色譜圖。膽紅素含量測定方法系統(tǒng)適用性確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)（1）主峰（膽紅素峰）保留時(shí)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）限度為（3）主峰（膽紅素峰）面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）限度為（4）主峰（膽紅素峰）的理論板數(shù)應(yīng)大于1500（5）主峰（膽紅素峰）的分離度應(yīng)大于（6）主峰（膽紅素峰）的拖尾因子應(yīng)在之間方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)

31、果（1）電子天平型號編號，高效液相色譜儀型號編號（2）系統(tǒng)適用性確認(rèn)結(jié)果如下：試驗(yàn)次數(shù)1#2#3#4#5#6#RSD保留時(shí)間%峰面積532540531838527900529822527145526771%理論板數(shù)205020352043203720412042膽紅素峰分離度單峰（溶劑峰除外）單峰（溶劑峰除外）單峰（溶劑峰除外）單峰（溶劑峰除外）單峰（溶劑峰除外）單峰（溶劑峰除外）膽紅素峰拖尾因子確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期膽紅素含量測定方法專屬性確認(rèn)膽紅素含量測定方法的專屬性確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【含量測定

32、膽紅素】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)行含量測定方法專屬性的確認(rèn)：（1）膽紅素對照品溶液：取膽紅素對照品約，精密稱定，置100ml量瓶中，加氯仿溶解，定容至刻度，搖勻，精密量取置25ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-水-鹽酸（90：10：混合液稀釋至刻度，制成每1ml中含膽紅素約4Ug的溶液，即得。（2）樣品提取溶劑：氯仿-甲醇-水-鹽酸（90：10:）的混合液（3）人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液：取批本品的內(nèi)容物約（約相當(dāng)于膽紅素），精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-水-鹽酸（90：10:）混合液約40ml,超聲提取15分鐘，取出，迅速冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

33、（4）人工牛黃陰性樣品溶液：按照人工牛黃甲硝唑膠囊工藝處方的比例，除人工牛黃不稱取外，稱取甲硝唑，淀粉，二氧化硅共置50ml棕色量瓶中，加氯仿-甲醇-10%鹽酸（50：50:）混合液約40ml,超聲提取15分鐘，取出，冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。試驗(yàn)方法：精密吸取上述溶液各20Ul,注入液相色譜儀，記錄色譜圖。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）人工牛黃甲硝唑膠囊成品溶液主峰保留時(shí)間與膽紅素對照品溶液主峰保留時(shí)間一致（相對偏差不超過%）；（2）人工牛黃陰性樣品溶液、樣品提取溶劑在膽紅素峰保留時(shí)間處均應(yīng)為平直基線,無吸收峰。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果（1）電子天平型號編號,高效液相色譜儀

34、型號編號（2）膽紅素對照品稱樣量：（3）人工牛黃甲硝唑膠囊內(nèi)容物稱樣量：批號，稱樣量（4）項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果膽紅素含量測定-方法專屬性確認(rèn)結(jié)果膽紅素含量測定方法-線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)結(jié)果測試樣品膽紅素對照品成品樣品提取溶劑人工牛黃陰性樣品膽紅素峰保留時(shí)間在膽紅素峰保留時(shí)間處為平直基線，無色譜峰。在膽紅素峰保留時(shí)間處為平直基線，無色譜峰。項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期膽紅素含量測定方法線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)膽紅素含量測定方法的線性關(guān)系與線性范圍確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【含量測定膽紅素】項(xiàng)下規(guī)定，分別制備以下溶液，進(jìn)

35、行線性關(guān)系與線性范圍的確認(rèn)：（1）膽紅素對照品貯備液：取膽紅素對照品10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加氯仿溶解，定容至刻度，搖勻即得。（2）線性關(guān)系測試溶液：分別精密量取膽紅素對照品貯備液、置50ml量瓶中，加氯仿稀釋至刻度，搖勻得系列濃度的測試溶液。試驗(yàn)方法：取上述每種濃度的線性關(guān)系測試溶液連續(xù)進(jìn)樣2針，測定膽紅素峰面積平均值。液相色譜儀：LC-10AT，色譜條件：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-氯仿-1%磷酸溶液（81:13:6），檢測波長449nm，每次進(jìn)樣量為20”。計(jì)算出各個(gè)測試溶液的膽紅素濃度，以濃度為橫坐標(biāo)，膽紅素峰面積平均值為縱坐標(biāo)，計(jì)算線性回歸方程、回歸系數(shù)

36、R2、線性范圍。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：（1）測試溶液的膽紅素濃度與峰面積之間呈良好線性關(guān)系，回歸系數(shù)R2：WR2W1；（2）膽紅素濃度線性范圍：應(yīng)涵蓋人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【含量測定膽紅素】項(xiàng)下對照品溶液膽紅素濃度4Ug/ml（進(jìn)樣量20Ul）的80%120%，即結(jié)果的線性范圍應(yīng)涵蓋Ug/mlUg/ml。方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果（1）電子天平型號，編號，高效液相色譜儀型號編號（2）膽紅素對照品稱樣量g含量：%（3）項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果對照品濃度（ug/ml）膽紅素峰面積253200253705392493388857535260531376806465802

37、53511067591103640膽紅素峰面積均值2534533906755333188045001105200線性回歸方程Y=144980X-32906回歸系數(shù)R2線性范圍膽紅素濃度mlug/ml（進(jìn)樣量為20Ul）項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期膽紅素含量測定方法準(zhǔn)確度確認(rèn)（回收率試驗(yàn)）膽紅素含量測定方法的準(zhǔn)確度確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-（HD-0204）-2002【含量測定膽紅素】項(xiàng)下規(guī)定，進(jìn)行方法準(zhǔn)確度的確認(rèn)：（1）膽紅素對照品貯備溶液：取膽紅素對照品10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加氯仿溶解，定容至刻度，搖勻即得。（2

38、）膽紅素對照品溶液：精密取膽紅素對照品貯備溶液置25ml棕色量瓶中，加氯仿稀釋至刻度，搖勻制成每1ml中含膽紅素約4ug的溶液，即得。（3）回收率測試溶液：取批人工牛黃甲硝唑膠囊（按照項(xiàng)下方法測得其膽紅素平均含量為）的內(nèi)容物，研細(xì)，充分混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于膽紅素），置50ml棕色量瓶中，精密加入膽紅素對照品貯備溶液，加氯仿-甲醇-水-鹽酸(90：10：混合液約40ml,超聲提取15分鐘，取出，迅速冷卻至室溫，加上述溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得回收率試驗(yàn)溶液。精密吸取對照品溶液、回收率試驗(yàn)溶液各20口1,注入液相色譜儀，記錄色譜圖及膽紅素峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算回收率測試溶液中膽紅素

39、的量。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：AtXWs(1)計(jì)算公式：回收率測試溶液中膽紅素總量(mg)=AsX50式中：At為回收率測試溶液的峰面積；As為對照品溶液的峰面積；Ws為對照品稱樣量(mg)測得膽紅素總量-樣品本底膽紅素量膽紅素對照品回收率()=X100%回收率測試溶液中膽紅素對照品加入量(2)膽紅素對照品回收率限度為%，回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)限度為方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號，高效液相色譜儀型號編號(2)膽紅素對照品稱樣量含量：%(3)項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果膽紅素含量測定方法方法準(zhǔn)確度確認(rèn)結(jié)果試驗(yàn)編號樣品本底膽紅素百分含量樣品稱樣量(g)樣品本底膽紅素量(mg)對照品加入量mg試驗(yàn)溶

40、液峰面積對照品溶液峰面積測得膽紅素總量mg測得對照品加入量mg對照品回收率%平均回收率RSD1537158534125488116489280%25416165379024881164892803555002554775488116489280453641653574748811648928055388765338344881164892806534445530255488116489280項(xiàng)目確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期膽紅素含量測定方法精密度確認(rèn)膽紅素含量測定方法的精密度確認(rèn)方法：參照人工牛黃甲硝唑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10001-(HD-0204)-2002【含量測定膽

41、紅素】項(xiàng)下方法測定含量，進(jìn)行方法精密度的確認(rèn)：(1)液相色譜系統(tǒng)重復(fù)性：取批成品的同一份含量測定溶液,在液相色譜儀上連續(xù)6次進(jìn)樣測定峰面積；(2)膽紅素含量測定的重復(fù)性：取批成品，由同一人分別稱取6份樣品，用LC-10AT液相色譜儀進(jìn)行含量測定。(4)膽紅素含量測定的中間精密度：取批成品，由甲實(shí)驗(yàn)人員稱取6份樣品，進(jìn)行測定(即上述膽紅素含量測定的重復(fù)性)；再由乙實(shí)驗(yàn)人員在不同的日期稱取6份樣品，用另一臺液相色譜儀LC-20AD進(jìn)行測定。方法確認(rèn)接受標(biāo)準(zhǔn)：AtXWsXVt(1)計(jì)算公式：膽紅素的絕對百分含量%=X100%AsXVsXWt式中：At、As分別為樣品、對照品的峰面積；Wt、Ws為分別

42、為樣品、對照品的稱樣量(mg)Vt、Vs為分別為樣品、對照品的稀釋倍數(shù)(2)液相色譜系統(tǒng)重復(fù)性：同一份樣品溶液連續(xù)6次進(jìn)樣，峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差限度為%(3)膽紅素含量測定的重復(fù)性：結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差限度為%(4)膽紅素含量測定的中間精密度：結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差限度為%方法確認(rèn)記錄與確認(rèn)結(jié)果(1)電子天平型號編號，高效液相色譜儀型號編號(2)液相色譜系統(tǒng)重復(fù)性：同一份含量測定溶液，連續(xù)6次進(jìn)樣測定峰面積;，結(jié)果如下：測定次數(shù)1#2#3#4#5#6#RSD閭峰面積532540531838527900529822527145526771%確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期(3)膽紅素含

43、量測定的重復(fù)性：成品批號，平均裝量粒；液相色譜儀：LC-10AT,進(jìn)樣量20”膽紅素含量測定的重復(fù)性：測定次數(shù)1#2#3#4#5#6#平均值含量RSD樣品稱樣量Wt(g)樣品稀釋倍數(shù)505050505050樣品峰面積532540531838522293523387524638522605522318525242522604517359527574523622樣品峰面積平均值532189522840523622523780519982525598對照品稱樣量Ws(mg)對照品稀釋倍數(shù)250025002500250025002500對照品峰面積488116489280488116489280488

44、116489280488116489280488116489280488116489280百分含量%每粒含膽紅素，mg/粒%確認(rèn)結(jié)果：口通過口不通過檢查人/日期：復(fù)核人/日期(4)膽紅素含量測定中間精密度：批號，平均裝量粒；甲測定液相色譜儀：LC-10AT；乙測定液相色譜儀：LC-20AD；進(jìn)樣量20”膽紅素含量測定的中間精密度測定次數(shù)甲1甲2甲3甲4甲5甲6乙1乙2乙3乙4乙5乙6平均值含量RSD樣品稱樣量Wt(g)樣品稀釋倍數(shù)505050505050505050505050樣品峰面積532540531838522293523387524638522605522318525242522604

45、517359527574523622209822207081203969203167252983251623248304247846248100247796245919248381樣品峰面積平均值532189522840523622523780519982525598208452203568252303248074247948247150對照品稱樣量Ws(mg)對照品稀釋倍數(shù)250025002500250025002500250025002500250025002500對照品峰面積488116489280488116489280488116489280488116489280488116489