生物化學(xué)和分子生物學(xué)人衛(wèi)DNA合成市公開課金獎(jiǎng)市賽課一等獎(jiǎng)?wù)n件

1、 作者 : 齊煒煒 高國(guó)全單位 : 中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院第十二章 DNA合成第1頁(yè)第一節(jié) DNA復(fù)制基本規(guī)律第二節(jié) DNA復(fù)制酶學(xué)和拓?fù)鋵W(xué)第三節(jié) 原核生物DNA復(fù)制過程第四節(jié) 真核生物DNA復(fù)制過程第五節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄第2頁(yè)重點(diǎn)難點(diǎn)熟悉了解掌握掌握DNA復(fù)制體系組成、半保留復(fù)制特點(diǎn)及其意義；掌握DNA復(fù)制基本規(guī)律， DNA聚合酶類型及功效特點(diǎn)DNA復(fù)制過程，原核DNA復(fù)制與真核DNA復(fù)制主要區(qū)分；真核生物DNA端粒及端粒酶非染色體DNA復(fù)制其它形式；了解逆轉(zhuǎn)錄發(fā)覺發(fā)展了中心法則第3頁(yè)DNA復(fù)制基本規(guī)律The basic law of DNA replication第一節(jié)第4頁(yè)DNA復(fù)制主要特征: 半保

2、留復(fù)制(semi-conservative replication)雙向復(fù)制(bidirectional replication)半不連續(xù)復(fù)制(semi-discontinuous replication)第5頁(yè)在復(fù)制時(shí)，親代雙鏈DNA解開為兩股單鏈，各自作為模板，依據(jù)堿基配對(duì)規(guī)律，合成序列互補(bǔ)子鏈DNA雙鏈一、DNA以半保留方式進(jìn)行復(fù)制半保留復(fù)制概念: 第6頁(yè)子鏈繼承母鏈遺傳信息幾個(gè)可能方式: 全保留式 半保留式 混合式 第7頁(yè)密度梯度試驗(yàn):含15N-DNA細(xì)菌培養(yǎng)于普通培養(yǎng)液 第一代繼續(xù)培養(yǎng)于普通培養(yǎng)液 第二代第8頁(yè)依據(jù)半保留復(fù)制方式，子代DNA中保留了親代全部遺傳信息，親代與子代DNA之

3、間堿基序列高度一致遺傳保守性，是物種穩(wěn)定性分子基礎(chǔ)，但不是絕正確半保留復(fù)制意義: 第9頁(yè)TCCATGACGGTGACCAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCAGGTACTGCCACTGGTCCATGACGGTGACCCCACTGGAGGTACTGTCCATGACAGGTACTGTCCATGACGGTGACCAGGTACTGCCACTGG+母鏈DNA復(fù)制過程中形成復(fù)制叉子代DNA第10頁(yè)二、DNA復(fù)制從起始點(diǎn)雙向進(jìn)行原核生物基因組是環(huán)狀DNA，只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)（origin）。復(fù)制從起點(diǎn)開始，向兩個(gè)方向進(jìn)行解鏈，進(jìn)行是單點(diǎn)起始雙向復(fù)制復(fù)制中放射自顯影圖象第11頁(yè)A. 環(huán)狀雙

4、鏈DNA及復(fù)制起始點(diǎn)B. 復(fù)制中兩個(gè)復(fù)制叉C. 復(fù)制靠近終止點(diǎn)(termination, ter)oriterA B C第12頁(yè)真核生物每個(gè)染色體又有多個(gè)起點(diǎn)，呈多起點(diǎn)雙向復(fù)制特征。每個(gè)起點(diǎn)產(chǎn)生兩個(gè)移動(dòng)方向相反復(fù)制叉，復(fù)制完成時(shí)，復(fù)制叉相遇并匯合連接。從一個(gè)DNA復(fù)制起點(diǎn)起始DNA復(fù)制區(qū)域稱為復(fù)制子（replicon）。復(fù)制子是含有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)獨(dú)立完成復(fù)制功效單位53oriorioriori53第13頁(yè)53oriorioriori535533553復(fù)制3第14頁(yè)三、DNA復(fù)制以半不連續(xù)方式進(jìn)行3535解鏈方向35335領(lǐng)頭鏈(leading strand)后隨鏈(lagging strand)

5、第15頁(yè)沿著解鏈方向生成子鏈DNA合成是連續(xù)進(jìn)行，這股鏈稱為前導(dǎo)鏈（leading strand）另一股鏈因?yàn)閺?fù)制方向與解鏈方向相反，不能連續(xù)延長(zhǎng)，只能伴隨模板鏈解開，逐段地從53生成引物并復(fù)制子鏈。模板被打開一段，起始合成一段子鏈；再打開一段，再起始合成另一段子鏈，這一不連續(xù)復(fù)制鏈稱為后隨鏈（lagging strand）沿著后隨鏈模板鏈合成新DNA片段被命名為岡崎片段（Okazaki fragment）第16頁(yè)四、DNA復(fù)制含有高保真性“半保留復(fù)制”確保親代和子代DNA分子之間信息傳遞絕對(duì)保真性高保真度DNA聚合酶利用嚴(yán)格堿基配對(duì)標(biāo)準(zhǔn)是確保復(fù)制保真性機(jī)制之一；體內(nèi)復(fù)制叉復(fù)雜結(jié)構(gòu)提升了復(fù)制準(zhǔn)

6、確性；DNA聚合酶核酸外切酶活性和校讀功效以及復(fù)制后修復(fù)系統(tǒng)對(duì)錯(cuò)配加以糾正第17頁(yè)DNA復(fù)制酶學(xué)和拓?fù)鋵W(xué)Enzymology and topology of DNA replication第二節(jié)第18頁(yè)參加DNA復(fù)制物質(zhì):底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP聚合酶(polymerase): 依賴DNADNA聚合酶，簡(jiǎn)寫為 DNA-pol模板(template): 解開成單鏈DNA母鏈引物(primer): 提供3-OH末端使dNTP能夠依次聚合其它酶和蛋白質(zhì)因子第19頁(yè)(dNMP)n + dNTP (dNMP)n+1 + PPi第20頁(yè)一、DNA聚合酶催化

7、脫氧核苷酸間聚合全稱：依賴DNADNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase)簡(jiǎn)稱：DNA-pol活性： 1. 53聚合活性 2. 核酸外切酶活性第21頁(yè)核酸外切酶活性: 5 A G C T T C A G G A T A 3 | | | | | | | | | | |3 T C G A A G T C C T A G C G A C 5?35外切酶活性: 能識(shí)別錯(cuò)配堿基對(duì)，并將其水解53外切酶活性: 能切除突變 DNA片段第22頁(yè)（一）原核生物有3種DNA聚合酶DNA-pol DNA-pol DNA-pol 第23頁(yè)DNA-pol DNA-pol DNA-pol

8、分子量（kD）109120250組成單肽鏈？多亞基不對(duì)稱二聚體分子數(shù)/細(xì)胞400？2053核酸外切酶活性有無(wú)無(wú)基因突變后致死性可能不可能可能原核生物DNA聚合酶第24頁(yè)個(gè)關(guān)鍵酶1個(gè)-復(fù)合物（、 6種亞基）1對(duì)-亞基（可滑動(dòng)DNA夾子）全酶結(jié)構(gòu)包含：DNA聚合酶全酶結(jié)構(gòu):第25頁(yè)亞基（130 000）主要功效是合成DNA亞基含有35外切酶活性（復(fù)制保真性所必需）亞基可增強(qiáng)其活性亞基可能起組裝作用關(guān)鍵酶由、和亞基組成：兩側(cè)亞基發(fā)揮夾穩(wěn)DNA模板鏈，并使酶沿模板滑動(dòng)作用第26頁(yè)2個(gè)-亞基分別和1個(gè)關(guān)鍵酶相互作用，其柔性連接區(qū)能夠確保在復(fù)制叉1個(gè)全酶分子2個(gè)關(guān)鍵酶能夠相對(duì)獨(dú)立運(yùn)動(dòng)，分別負(fù)責(zé)合成前導(dǎo)鏈和

9、后隨鏈功效：有促進(jìn)全酶組裝至模板上及增強(qiáng)關(guān)鍵酶活性作用 -復(fù)合物由6種亞基組成：、第27頁(yè)對(duì)復(fù)制中錯(cuò)誤進(jìn)行校讀，對(duì)復(fù)制和修復(fù)中出現(xiàn)空隙進(jìn)行填補(bǔ)功效：DNA-pol （109kD）:第28頁(yè)323個(gè)氨基酸小片段5 核酸外切酶活性大片段/Klenow 片段 604個(gè)氨基酸DNA聚合酶活性 5 核酸外切酶活性N 端C 端木瓜蛋白酶DNA-pol Klenow片段是試驗(yàn)室合成DNA，進(jìn)行分子生物學(xué)研究中慣用工具酶 第29頁(yè)DNA-pol （120kD）:DNA-pol II基因發(fā)生突變，細(xì)菌依然能存活DNA-pol 對(duì)模板特異性不高，即使在已發(fā)生損傷DNA模板上，它也能催化核苷酸聚合。所以認(rèn)為，它參加

10、DNA損傷應(yīng)急狀態(tài)修復(fù)第30頁(yè)（一）常見真核細(xì)胞DNA聚合酶有5種DNA-pol 起始引發(fā)，有引物酶活性DNA-pol 參加低保真度復(fù)制 DNA-pol 在線粒體DNA復(fù)制中起催化作用DNA-pol 合成后隨鏈DNA-pol 合成前導(dǎo)鏈第31頁(yè)E.Coli真核細(xì)胞 功效填補(bǔ)復(fù)制中DNA空隙，DNA修復(fù)和重組復(fù)制中校對(duì)，DNA修復(fù)DNA修復(fù)線粒體DNA合成前導(dǎo)鏈合成DnaG引物酶后隨鏈合成真核生物和原核生物DNA聚合酶比較 第32頁(yè)DNA-pol 分子量（kD）16.54.014.012.525.553聚合活性中？高高高35核酸外切酶活性-+功效起始引發(fā)，引物酶活性低保真度復(fù)制線粒體DNA復(fù)制合

11、成后隨鏈合成前導(dǎo)鏈真核生物DNA聚合酶第33頁(yè)二、DNA聚合酶堿基選擇和校對(duì)功效DNA復(fù)制保真性最少要依賴三種機(jī)制:恪守嚴(yán)格堿基配對(duì)規(guī)律聚合酶在復(fù)制延長(zhǎng)時(shí)對(duì)堿基選擇功效復(fù)制犯錯(cuò)時(shí)有即時(shí)校對(duì)功效第34頁(yè)（一）復(fù)制保真性依賴正確堿基選擇利用“錯(cuò)配”試驗(yàn)發(fā)覺，DNA pol 對(duì)核苷酸參入（incorporation）含有選擇功效 DNA pol 對(duì)不一樣構(gòu)型糖苷鍵表現(xiàn)不一樣親和力，所以實(shí)現(xiàn)其選擇功效 第35頁(yè)（二）聚合酶中核酸外切酶活性在復(fù)制中識(shí)別切除錯(cuò)配堿基并加以校正核酸外切酶(exonuclease)是指能從核酸鏈末端把核苷酸依次水解出來(lái)酶，外切酶是有方向性 A：DNA-pol外切酶活性切除錯(cuò)配

12、堿基；并用其聚合活性摻入正確配正確底物B：堿基配對(duì)正確， DNA-pol不表現(xiàn)活性DNA pol 校讀功效第36頁(yè)三、復(fù)制中DNA 分子拓?fù)鋵W(xué)改變DNA分子堿基埋在雙螺旋內(nèi)部，只有把DNA解成單鏈，它才能起模板作用。 第37頁(yè)蛋白質(zhì)（基因）通用名功能DnaA（dnaA）識(shí)別復(fù)制起始點(diǎn)DnaB（dnaB）解旋酶解開DNA雙鏈DnaC（dnaC）運(yùn)輸和協(xié)同DnaBDnaG（dnaG）引發(fā)酶催化RNA引物生成SSB單鏈結(jié)合蛋白/DNA結(jié)合蛋白穩(wěn)定已解開單鏈DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶又稱促旋酶解開超螺旋原核生物復(fù)制中參加DNA解鏈相關(guān)蛋白質(zhì)（一）各種酶參加DNA解鏈和穩(wěn)定單鏈狀態(tài)第38頁(yè)解螺旋酶(he

13、licase) 利用ATP供能，作用于氫鍵，使DNA雙鏈解開成為兩條單鏈引物酶(primase) 復(fù)制起始時(shí)催化生成RNA引物酶單鏈DNA結(jié)合蛋白(single stranded DNA binding protein, SSB) 在復(fù)制中維持模板處于單鏈狀態(tài)并保護(hù)單鏈完整第39頁(yè)解鏈過程中正超螺旋形成第40頁(yè)復(fù)制過程正超螺旋形成：ABCDNA只固定一端DNA兩端固定解開10個(gè)堿基對(duì)（一個(gè)螺旋）DNA將會(huì)旋轉(zhuǎn)一圈DNA形成一個(gè)超螺旋解開10個(gè)堿基對(duì)（一個(gè)螺旋）蛋白分子DNA負(fù)超螺旋開口易化正超螺旋開口受阻第41頁(yè)拓?fù)洚悩?gòu)酶作用特點(diǎn):既能水解 、又能連接磷酸二酯鍵拓?fù)洚悩?gòu)酶分類及作用機(jī)制： 拓?fù)?/p>

14、異構(gòu)酶：切斷DNA雙鏈中一股鏈，使DNA解鏈旋轉(zhuǎn)不致打結(jié)；適當(dāng) 時(shí)候封閉切口，DNA變?yōu)樗沙跔顟B(tài)。反應(yīng)不需ATP 拓?fù)洚悩?gòu)酶：切斷DNA分子兩股鏈，斷端經(jīng)過切口旋轉(zhuǎn)使超螺旋松弛 利用ATP供能，連接斷端， DNA分子進(jìn)入負(fù)超螺旋狀態(tài)第42頁(yè)拓?fù)涿缸饔梅绞剑旱?3頁(yè)四、DNA連接酶連接復(fù)制中產(chǎn)生單鏈缺口連接DNA鏈3-OH末端和相鄰DNA鏈5-P末端，使二者生成磷酸二酯鍵，從而把兩段相鄰DNA鏈連接成一條完整鏈DNA連接酶(DNA ligase)作用方式：第44頁(yè)DNA連接酶作用：第45頁(yè)功效:DNA連接酶在復(fù)制中起最終接合缺口作用在DNA修復(fù)、重組及剪接中也起縫合缺口作用也是基因工程主要工具酶

15、之一第46頁(yè)DNA聚合酶，拓?fù)涿负瓦B接酶催化3,5-磷酸二酯鍵生成比較 提供核糖3-OH提供5-P結(jié)果DNA聚合酶引物或延長(zhǎng)中新鏈游離dNTP去PPi(dNTP)n+1連接酶復(fù)制中不連續(xù)兩條單鏈不連續(xù)連續(xù)鏈拓?fù)涿盖袛?、整理后兩鏈改變拓?fù)錉顟B(tài)第47頁(yè)原核生物DNA復(fù)制過程DNA replication in prokaryotes第三節(jié)第48頁(yè)起始是復(fù)制中較為復(fù)雜步驟，在此過程中，各種酶和蛋白因子在復(fù)制起始點(diǎn)處裝配引發(fā)體，形成復(fù)制叉并合成RNA引物 需要處理兩個(gè)問題：1. DNA解開成單鏈，提供模板2. 形成引發(fā)體，合成引物，提供3-OH末端一、復(fù)制起始第49頁(yè)原核生物復(fù)制起始部位及解鏈 （此圖

16、有誤需修改）（此圖錯(cuò)誤部分包含文字和少了一個(gè)9bp重復(fù)序列已在圖中標(biāo)注，請(qǐng)編輯幫忙修改）第50頁(yè) Dna A Dna B、 Dna CDNA拓?fù)洚悩?gòu)酶引物酶SSB3535（二）引物合成和起始復(fù)合物形成含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA復(fù)制起始區(qū)域復(fù)合結(jié)構(gòu)稱為起始復(fù)合物第51頁(yè)起始復(fù)合物和復(fù)制叉生成第52頁(yè)3535引物是由引物酶催化合成短鏈RNA分子引物3 HO5引物酶第53頁(yè)二、DNA鏈延長(zhǎng)復(fù)制延長(zhǎng)指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP方式逐一加入引物或延長(zhǎng)中子鏈上，其化學(xué)本質(zhì)是磷酸二酯鍵不停生成 第54頁(yè) 5 35dATPdGTPdTTPdCTPdTTPdGTPdATPdCTP

17、OH 33DNA-pol第55頁(yè)領(lǐng)頭鏈合成：領(lǐng)頭鏈子鏈沿著53方向能夠連續(xù)地延長(zhǎng)第56頁(yè)后隨鏈合成第57頁(yè) 在復(fù)制叉同時(shí)合成前導(dǎo)鏈和后隨鏈第58頁(yè)第59頁(yè)原核生物基因是環(huán)狀DNA，雙向復(fù)制復(fù)制片段在復(fù)制終止點(diǎn)(ter)處匯合oriter E.coli8232 ori terSV40500三、復(fù)制終止第60頁(yè)555DNA-pol OHP5DNA-pol dNTP55PATP ADP+Pi55DNA連接酶子鏈中RNA引物被取代第61頁(yè)第62頁(yè)真核生物DNA復(fù)制過程Eukaryotic DNA replication process第四節(jié)第63頁(yè)真核生物與原核生物DNA復(fù)制差異：真核生物復(fù)制子多、岡

18、崎片段短、復(fù)制叉前進(jìn)速度慢等DNA復(fù)制從引發(fā)進(jìn)入延伸階段發(fā)生DNA聚合酶轉(zhuǎn)換切除岡崎片段RNA引物是核酸酶RNAse H和FEN1等 第64頁(yè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞周期DNA合成期G1G2SM細(xì)胞能否分裂，決定于進(jìn)入S期及M期這兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。G1S及G2M調(diào)整，與蛋白激酶活性相關(guān) 蛋白激酶經(jīng)過磷酸化激活或抑制各種復(fù)制因子而實(shí)施調(diào)控作用 第65頁(yè)真核生物每個(gè)染色體有多個(gè)起始點(diǎn)，是多復(fù)制子復(fù)制。復(fù)制有時(shí)序性，即復(fù)制子以分組方式激活而不是同時(shí)開啟 復(fù)制起始需要DNA-pol （引物酶活性）、pol 和pol 參加。還需解螺旋酶活性、拓?fù)涿负蛷?fù)制因子(replication factor, RF) 一、真核生物復(fù)

19、制起始與原核基本相同第66頁(yè)酵母復(fù)制起點(diǎn)為自主復(fù)制序列（autonomously replicating sequences，ARS）： 酵母染色體含有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。元件A(富含A/T共有序列)：結(jié)合一個(gè)特異蛋白質(zhì)復(fù)合物復(fù)制起點(diǎn)識(shí)別復(fù)合物(ORC) 3個(gè)序列(B1、B2和B3)能夠增加復(fù)制起點(diǎn)效率，其中B29個(gè)堿基與上述ARS共有序列相同酵母復(fù)制起始點(diǎn)第67頁(yè)拓?fù)洚悩?gòu)酶，去除負(fù)超螺旋（使解旋酶輕易解旋），去除復(fù)制叉前方產(chǎn)生正超螺旋Tol和TolDNA雙螺旋解鏈，參加組裝引發(fā)體DNA解旋酶連接岡崎片段DNA連接酶核酸酶，切除RNA引物RNAse H核酸酶，切除RNA引物FEN1DNA復(fù)制，核苷酸

20、切除修復(fù)，堿基切除修復(fù)Pol /合成RNA-DNA引物Pol /引發(fā)酶有依賴DNAATPase活性，結(jié)合于引物-模板鏈，激活DNA聚合酶， 促使PCNA結(jié)合于引物-模板鏈RFC激活DNA聚合酶和RFCATPase活性PCNA單鏈DNA結(jié)合蛋白，激活DNA聚合酶，使解旋酶輕易結(jié)合DNARPA功 能蛋白質(zhì)真核DNA復(fù)制叉主要蛋白質(zhì)功效第68頁(yè)現(xiàn)在認(rèn)為pol 主要催化合成引物，然后快速被含有連續(xù)合成能力DNA pol 和DNA pol 所替換，這一過程稱為聚合酶轉(zhuǎn)換。DNA pol 負(fù)責(zé)合成后隨鏈，DNA pol 負(fù)責(zé)合成前導(dǎo)鏈。二、真核生物復(fù)制延長(zhǎng)發(fā)生DNA聚合酶轉(zhuǎn)換第69頁(yè)前導(dǎo)鏈：出現(xiàn)在引發(fā)后期

21、后隨鏈：發(fā)生于每個(gè)岡崎片段合成之際發(fā)生DNA聚合酶轉(zhuǎn)換原因是Pol 不具備連續(xù)合成能力DNA聚合酶轉(zhuǎn)換關(guān)鍵蛋白是RFCDNA聚合酶/轉(zhuǎn)換第70頁(yè)真核DNA聚合酶轉(zhuǎn)換和后隨鏈合成第71頁(yè)3553前導(dǎo)鏈3535親代DNA后隨鏈引物核小體三、真核生物DNA合成后馬上組裝成核小體第72頁(yè)染色體DNA呈線狀，復(fù)制在末端停頓復(fù)制中岡崎片段連接，復(fù)制子之間連接染色體兩端DNA子鏈上最終復(fù)制RNA引物，去除后留下空隙四、端粒酶參加處理染色體末端復(fù)制問題第73頁(yè)切除引物兩種機(jī)制第74頁(yè)線性DNA復(fù)制一次端?？s短 第75頁(yè)53355335+5333355第76頁(yè)端粒（telomeres）由富含TG重復(fù)序列組成人端

22、粒重復(fù)序列為5-(TnGn)x-3這些重復(fù)序列多為雙鏈，但每個(gè)染色體3端比5端長(zhǎng)，形成單鏈ssDNA。這一特殊結(jié)構(gòu)可處理染色體末端復(fù)制問題第77頁(yè)組成：端粒酶RNA (human telomerase RNA, hTR)端粒酶協(xié)同蛋白(human telomerase associated protein 1, hTP1)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse transcriptase, hTRT) 端粒酶(telomerase)第78頁(yè)端粒酶（telomerase）是一個(gè)核糖核蛋白（RNP），由RNA和蛋白質(zhì)組成端粒酶以自己RNA組分作為模板，以染色體3端ssDN

23、A（后隨鏈模板）為引物，將端粒序列添加于染色體3端。這些新合成DNA為單鏈第79頁(yè)端粒酶催化作用爬行和端粒延長(zhǎng)過程 第80頁(yè)真核全部染色體DNA復(fù)制僅僅出現(xiàn)在細(xì)胞周期S期，而且只能復(fù)制一次五、真核生物染色體DNA在每個(gè)細(xì)胞周期中只能復(fù)制一次第81頁(yè)前復(fù)制復(fù)合物在G1期形成而在S期被激活真核細(xì)胞DNA復(fù)制起始分兩步進(jìn)行，即復(fù)制基因選擇和復(fù)制起點(diǎn)激活復(fù)制基因（replicator）是指DNA復(fù)制起始所必需全部DNA序列第82頁(yè)ORC最少募集兩種解旋酶加載蛋白Cdc6和Cdt1復(fù)制起點(diǎn)識(shí)別復(fù)合物（originrecognition complex，ORC）識(shí)別并結(jié)合復(fù)制基因三種蛋白質(zhì)一起募集真核細(xì)胞

24、解旋酶Mcm2-7前復(fù)制復(fù)合物（pre-RC）形成第83頁(yè)pre-RC激活和組裝真核DNA復(fù)制叉第84頁(yè)激活pre-RC，以起始DNA復(fù)制抑制形成新pre-RCCDK控制pre-RC形成和激活真核細(xì)胞經(jīng)過依賴細(xì)胞周期蛋白蛋白激酶（cyclin-dependent kinases，CDK）嚴(yán)格控制pre-RC形成和激活Cdk功效：第85頁(yè)D-環(huán)復(fù)制（D-loop replication）是線粒體DNA復(fù)制形式六、真核生物線粒體DNA按D環(huán)方式復(fù)制dNTPDNA-pol 第86頁(yè)逆轉(zhuǎn)錄reverse transcription第五節(jié)第87頁(yè)逆轉(zhuǎn)錄酶(reverse transcriptase) 逆轉(zhuǎn)錄(reverse transcription) 逆轉(zhuǎn)錄酶一、逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組RNA以逆轉(zhuǎn)錄機(jī)制復(fù)制RNADNA第88頁(yè)逆轉(zhuǎn)錄病毒細(xì)胞內(nèi)逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象:RNA 模板逆轉(zhuǎn)錄酶DNA-RNA雜化雙鏈RNA酶單鏈DNA逆轉(zhuǎn)錄酶雙鏈DNA第89頁(yè)RNA病毒在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制成雙鏈DNA前病毒(provirus)。前病毒保留了RNA病毒全部遺傳信息，并可在細(xì)胞內(nèi)獨(dú)立繁殖。在一些情況下，前病毒