細(xì)胞化學(xué)染色課件

1、關(guān)于細(xì)胞化學(xué)染色課件第一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 一、概述 二、細(xì)胞化學(xué)染色的基本方法 三、臨床應(yīng)用 2第二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 1、概念： 細(xì)胞化學(xué)染色是細(xì)胞學(xué)和化學(xué)相結(jié)合而成的一門科學(xué)，以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)（包括酶類、脂類、蛋白質(zhì)、糖類、鐵、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。3一、概 述第三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.細(xì)胞化學(xué)染色的目的 （1）輔助判斷急性白血病的類型 （2）輔助血液系統(tǒng)等疾病的診斷與鑒別診斷第四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3.細(xì)胞化學(xué)染色的基本步

2、驟：包括固定、顯色反應(yīng)、復(fù)染。（1）固定：為了保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分的穩(wěn)定性而選用的方法。根據(jù)染色的目的，最常用的固定劑有甲醛、甲醇、乙醇等。 5第五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （2）顯色：通過(guò)不同的化學(xué)反應(yīng)，最終形成穩(wěn)定的有色沉淀，使被監(jiān)測(cè)的化學(xué)物質(zhì)顯示出來(lái)。包括 偶氮偶聯(lián)法：如NAP、ACP及各種脂酶染色 普魯氏藍(lán)反應(yīng)：如鐵染色 雪夫（shiff）反應(yīng)：如PAS染色 聯(lián)苯胺法：如POX染色 （3）復(fù)染：使各種目的細(xì)胞能顯示出來(lái)更便于觀察 6第六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月過(guò)氧化物酶染色中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色糖 原 染 色非特異性酯酶染色特異性酯酶染色骨髓鐵染

3、色7二、細(xì)胞化學(xué)染色的基本方法第七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 1、原理： pox H2O2 O 聯(lián)苯胺 聯(lián)苯胺藍(lán) + 亞硝基鐵氰化鈉8藍(lán)黑色顆粒（一)過(guò)氧化物酶(POX)染色第八張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.試劑 (1)聯(lián)苯胺酒精溶液： 取0.3g聯(lián)苯胺加亞硝基鐵氰化鈉飽合液（36%）1ml,再加95%乙醇至100ml，存在于棕色瓶中，可存一年。 (2) 稀過(guò)氧化氫（新鮮配制）：取50ml蒸餾水加30%H2O21滴。 （3）瑞吉氏復(fù)染液 9第九張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3、染色方法 1、新鮮干燥涂片加聯(lián)苯胺酒精溶液10滴，覆蓋整個(gè)髓膜，固定1

4、-2min。 2、再加等量的稀H2O2，混勻后染色45min,勿倒去染液直接流水沖洗。 3、瑞氏染液復(fù)染。10第十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 4、注意事項(xiàng) （1）H2O2要新鮮配制，注意有效性 （2）標(biāo)本要新鮮，最長(zhǎng)不超過(guò)一周，時(shí)間長(zhǎng)了酶活性減弱。 （3）POX染色后，一定要沖洗干凈，否則染料堆積或浮于表面，影響瑞氏染色結(jié)果觀察。11第十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 5、結(jié)果判定：中性粒細(xì)胞桿狀及分葉核呈強(qiáng)陽(yáng)性是染色成功的標(biāo)志(設(shè)對(duì)照片）。 在細(xì)胞的胞漿中出現(xiàn)藍(lán)綠色或藍(lán)棕色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)。12第十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1.中性成熟粒細(xì)胞，呈

5、強(qiáng)陽(yáng)性；2.晚幼紅細(xì)胞，呈陰性；3.單核細(xì)胞，呈弱陽(yáng)性；4.漿細(xì)胞，呈陰性 第十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月14第十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月急性粒細(xì)胞白血?。∕2a) 的POX染色原始粒細(xì)胞均呈陽(yáng)性 第十五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月急性淋巴細(xì)胞白血病的POX染色1.中性成熟粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽(yáng)性；其他原始淋巴細(xì)胞均呈陰性 第十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月急性早幼粒細(xì)胞白血病的POX染色.原始紅細(xì)胞，呈陰性；其他早幼粒細(xì)胞均呈強(qiáng)陽(yáng)性 第十七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月急性單核細(xì)胞白血病的POX染色1.中性成熟粒細(xì)胞，呈強(qiáng)

6、陽(yáng)性；2.原始單核細(xì)胞，呈陽(yáng)性；3.原始單核細(xì)胞，呈弱陽(yáng)性；其他原幼單核細(xì)胞呈陰性 第十八張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 6、臨床意義 （1）正常分布 粒系:早期原粒陰性，晚期原粒及以下各階段呈不同程度陽(yáng)性。 單核系:早期原單陰性，其它階段皆呈弱陽(yáng)性。 淋巴、紅系、漿細(xì)胞、巨核均呈陰性。19第十九張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （2）急性白血病的鑒別診斷 幼稚細(xì)胞POX陽(yáng)性率3% ：急非淋（AML) 幼稚細(xì)胞POX陽(yáng)性率3% ：急淋（ALL) 20第二十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （二）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色 （偶氮偶聯(lián)法）1.原理磷酸奈酚鈉 磷酸+萘

7、酚 偶聯(lián)萘酚+重氮鹽 不溶性有色沉淀物定位于胞漿 (堅(jiān)固藍(lán)RR鹽) 21NAPPH9.29.8第二十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月22 2.試劑 （1）固定劑：10甲醛甲醇溶液 （2）Tris-Hcl緩沖液的配制：Tris粉三胺基甲烷4.85克溶于200ml蒸餾水中,加濃HCL1-2滴，PH調(diào)至9.2，4保存！ （3）作用(基質(zhì)液): 磷酸萘酚鈉 5mg N-N二甲基酰胺 1ml Tris-Hcl液 4ml 堅(jiān)固藍(lán)RR鹽 5mg （4）復(fù)染液：1%中性紅第二十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3.操作步驟 1、新鮮、干燥的外周血或骨髓涂片（標(biāo)本片及對(duì)照片）加固定劑作用

8、30秒（染缸），水洗待干； 2、滴加作用液，室溫染色15min，水洗待干； 3、1%中性紅復(fù)染1min23第二十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 4.注意事項(xiàng) (1) 重氮鹽以堅(jiān)固藍(lán)RR鹽為最佳； (2) 堅(jiān)固藍(lán)RR鹽應(yīng)適量：過(guò)多易造成染色失敗，過(guò)少使反應(yīng)減弱； (3) 每次都要做陽(yáng)性對(duì)照； (4) 作用液新鮮配制，配好后要立即使用24第二十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 5.結(jié)果觀察:(對(duì)照片成熟中性粒細(xì)胞中出現(xiàn)棕黑色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，說(shuō)明染色成功) 正常人除成熟中性粒細(xì)胞NAP可見(jiàn)陽(yáng)性外，其它血細(xì)胞均為陰性。且正常陽(yáng)性率40%，積分值30130分。 25第二十五張，

9、PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月6.NAP陽(yáng)性結(jié)果及積分判斷標(biāo)準(zhǔn)“” 0分，胞漿中無(wú)陽(yáng)性顆?！?” 1分，胞漿中含有少量顆?！?+” 2分，胞漿中含有中等量顆?！?+” 3分，胞漿中含有豐富的顆粒，但胞核清楚“4+” 4分，胞漿中含有豐富粗大的顆粒，但胞核不清楚第二十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色1.中性成熟粒細(xì)胞（+）；2.中性成熟粒細(xì)胞（+）；3.中性成熟粒細(xì)胞（+）；4.中性成熟粒細(xì)胞（+）；5.淋巴細(xì)胞 （-）第二十七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月28第二十八張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月29 NAP分級(jí)第二十九張，P

10、PT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 7.臨床意義 增高：細(xì)菌感染、類白、AA、急淋、慢粒急變、骨髓增殖性疾病，惡性淋巴瘤。 降低：慢粒、急粒、PNH、MDS、惡組30第三十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 8.鑒別診斷 慢粒與類白：前；后。 PNH與AA：前；后。 急粒與急淋：前；后。 MDS與慢性再障：前；后。病毒感染與細(xì)菌感染：前者無(wú)明顯變化，后者。惡組與反應(yīng)性組織細(xì)胞增多：前；后。 31第三十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）酯酶染色概述特異性酯酶染色非特異性酯酶染色第三十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 概 述 根據(jù)各類細(xì)胞所含酯酶特異性高低分為

11、特異性酯酶(SE)和非特異性酯酶(NSE)；特異性酯酶是指氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）；非特異性酯酶根據(jù)水解基質(zhì)液的PH不同，又分為中性NSE（-醋酸萘酚酯酶 ），酸性NSE（酸性-醋酸萘酚酯酶），堿性NSE（-丁酸萘酚酯酶）。 目前常用的是氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色NAS-DCE和-醋酸萘酚酯酶（-NAE）+ NaF抑制試驗(yàn)。第三十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1.原理（偶氮偶聯(lián)法）氯乙酸ASD萘酚 ASD萘酚 + 重氮鹽(堅(jiān)固藍(lán)B鹽)34NAS-DCE不溶性有色沉淀物定位于胞漿內(nèi)酶所在位特異性酯酶(CE)染色基質(zhì)液基質(zhì)液第三十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022

12、年6月 2.試劑： （1）固定液：10甲醛甲醇溶液 （2）作用液（基質(zhì)液） 氯乙酸ASD萘酚 5mg 丙酮 5-8ml 磷酸鹽緩沖液 19ml 堅(jiān)固藍(lán)B鹽 10mg （3）復(fù)染液：1%中性紅 35第三十五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3.染色方法（1）固定：10%甲醛甲醇液固定30秒，水洗晾干（2）滴加作用液37孵育30min，水洗（3）1%中性紅復(fù)染1min，水洗晾干鏡檢。36第三十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 4. 注意事項(xiàng)： 1.氯乙酸AS-D萘酚溶液應(yīng)避光，4冰箱 保存，變黃或混濁即失效。 2.染色溫度37效果最好37第三十七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2

13、022年6月 5.結(jié)果判斷 中性分葉核粒細(xì)胞胞漿中見(jiàn)細(xì)小，彌漫分布的藍(lán)色顆粒為染色成功的標(biāo)志。 6.臨床意義 粒系除早期原粒外，其余階段細(xì)胞均為陽(yáng)性，其它各系均為陰性。CE染色對(duì)粒細(xì)胞白血病有特異性的診斷價(jià)值。38第三十八張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月39CE第三十九張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 非特異性酯酶染色（-NAE）1. 原理： -醋酸萘酚 -萘酚 重氮鹽40-NAE形成不溶性有色沉淀定位于胞漿內(nèi)酶所在位置7.47.6(堅(jiān)固鹽B)第四十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.試劑 （1）固定液：甲醛 （2）作用液: -醋酸萘酚 5mg 丙酮 5-8ml

14、 磷酸鹽緩沖液 10ml 固藍(lán)B鹽 10mg （3）復(fù)染液：10g/L甲基綠水溶液41第四十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月42 3.染色步驟 （1）甲醛蒸氣固定5-10min，流水沖洗5min晾干 （2）放入作用液371h,流水沖洗。 （3）10g/L的甲基綠溶液復(fù)染5min,水洗待干鏡檢 （4）NaF抑制試驗(yàn)：在40ml作用液中加NaF15mg同樣染色后，油鏡計(jì)數(shù)100個(gè)被檢細(xì)胞，分別計(jì)算出抑制前和抑制后的陽(yáng)性率和積分，按公式計(jì)算出抑制率，正常小于50%。第四十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 A圖：急性單核細(xì)胞白血病-NAE染色 原始、幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性 B圖

15、：急性單核細(xì)胞白血病 -NAE氟化鈉抑制染色原始、幼稚單核細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)被氟化鈉抑制（與A圖為同一標(biāo)本） A B 第四十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 4.結(jié)果判斷：胞漿內(nèi)有棕色或棕黑色沉淀物為陽(yáng)性 染色成功指標(biāo)：正常部分原始、幼稚及成熟單核細(xì)胞呈陽(yáng)性；部分粒細(xì)胞為弱陽(yáng)性反應(yīng)；部分成熟淋巴或個(gè)別中、晚幼紅呈陽(yáng)性。 44第四十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月45第四十五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 5.臨床意義：鑒別急性白血病 （1）急單時(shí)，原始至成熟單核大多為-NAE陽(yáng)性，且易被NaF抑制，抑制率正常大于50%。 （2）急粒時(shí)，白血病細(xì)胞多呈陰性或弱陽(yáng)性，

16、M3呈陽(yáng)性，但均不被NaF抑制。 酯酶雙染：同一張血涂片上的細(xì)胞分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時(shí)間，復(fù)染鏡檢。主用于鑒別診斷AML-M4亞型。46第四十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月骨髓涂片特異性酯酶（CE）和非特異性酯酶（NAE）的雙酯酶染色顯示，原始粒細(xì)胞胞漿呈藍(lán)色CE陽(yáng)性反應(yīng)；而原始單核細(xì)胞胞漿呈棕色的NAE陽(yáng)性反應(yīng)。第四十七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（四）糖 原 染 色(PAS)細(xì)胞內(nèi)糖原中的乙二醇基48氧化過(guò)碘酸二醛基 1.原理（過(guò)碘酸-雪夫氏反應(yīng)）二醛基經(jīng)過(guò)加成和縮合使無(wú)色亞硫酸品紅恢復(fù)品紅的紅色失去亞硫酸定位于含有糖原的細(xì)胞內(nèi)第四十八張，PPT共八

17、十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.試劑 （1）10g/L的過(guò)碘酸氧化劑 雪夫氏試劑（schiff）：紅色品紅與偏重亞硫酸鈉，變成了無(wú)色品紅。 20/L甲基綠復(fù)染液49第四十九張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3.操作 （1）新鮮髓片放在95乙醇中固定10分鐘；蒸餾水沖洗待干； （2）10g/L過(guò)碘酸氧化15分鐘；蒸餾水沖洗； （3）置雪夫氏試劑浸泡45分鐘，水洗后涼干； （4）甲基綠復(fù)染15分鐘 ，水洗待干鏡檢。 50第五十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 4.注意事項(xiàng) （1）所用染色缸及器具應(yīng)十分清潔、干燥。 （2）雪夫氏染液應(yīng)避光密封保存，變紅則失效。 （3）放入雪夫氏

18、溶液之前，用蒸餾水洗涂片， 而且一定要完全干燥，若有水，試劑變色失效。51第五十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （4）染色時(shí)間和溫度應(yīng)相對(duì)恒定，一般37效果最好。 （5）染好的標(biāo)本不能久放，8天后漸退色，因此應(yīng)及時(shí)觀察。52第五十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 5.結(jié)果觀察 陽(yáng)性：細(xì)胞漿內(nèi)的紅色陽(yáng)性物呈彌散狀、顆粒狀或塊狀，胞核染綠色。 陰性：胞漿無(wú)色或無(wú)紅色顆粒。 53第五十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 6.臨床意義 正常血細(xì)胞的染色反應(yīng) （1）粒系：原始細(xì)胞多為陰性，隨著細(xì)胞成 熟，陽(yáng)性逐漸增強(qiáng)。 （2）淋系：正常人陽(yáng)性率10-50%之間，多為

19、20%以下。 （3）紅系：PAS呈陰性反應(yīng) （4）巨核：PAS呈陽(yáng)性反應(yīng) （5）單核系:呈陰性或細(xì)顆粒狀弱陽(yáng)性。54第五十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月正常血細(xì)胞PAS染色1.原始粒細(xì)胞（-） 2.早幼粒細(xì)胞（+）3.中性中幼粒細(xì)胞（+）4.中性晚幼粒細(xì)胞（+）5.中性桿狀核粒細(xì)胞（+）6.中性分葉核粒細(xì)胞（+）7.嗜堿性粒細(xì)胞（+）8.嗜酸性粒細(xì)胞（+）9.單核細(xì)胞（） 10.淋巴細(xì)胞（+） 第五十五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 疾病鑒別 （1）紅細(xì)胞系統(tǒng)疾病：M6、MDS呈陽(yáng)性（均勻或塊狀紅色）；巨幼貧、再障呈陰性。 （2）白血?。?急淋及慢淋：粗顆粒或塊狀陽(yáng)性

20、 急粒：陰性或弱陽(yáng)性（彌散細(xì)顆粒） 急單：陽(yáng)性，多為細(xì)顆粒有時(shí)可見(jiàn)粗顆粒 急性巨核細(xì)胞白血?。宏?yáng)性（塊狀） 56第五十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月PASAML-M6幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)MA幼紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng)第五十七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月急性淋巴細(xì)胞白血病PAS染色原始、幼稚淋巴細(xì)胞均陽(yáng)性，呈粗顆粒狀陽(yáng)性 第五十八張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月59急淋PAS陽(yáng)性細(xì)胞第五十九張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月60PAS陽(yáng)性的幼紅細(xì)胞第六十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 1.原理(普魯氏藍(lán)反應(yīng)) 4Fe3+ + K4Fe(CN)6 F

21、e4Fe(CN)63 +12K+ (亞鐵氰化鉀) (藍(lán)色亞鐵氰化鐵) 61（六）骨髓鐵染色 稀鹽酸細(xì)胞外鐵：主要存在于骨髓小粒的巨噬細(xì)胞中細(xì)胞內(nèi)鐵：主要存在于有核紅細(xì)胞中第六十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.試劑 （1）固定液：甲醇 （2）酸性亞鐵氰化鉀溶液：200g/L亞鐵氰化鉀5份，濃鹽酸1份。取200g/L亞鐵氰化鉀溶液置于試管中，緩慢加入濃鹽酸，邊滴邊搖由開(kāi)始的白色沉淀消失為至。 （3）復(fù)染劑：0.5%沙黃 62第六十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 3.操作步驟 （1）選片做標(biāo)記，甲醇固定10min （2）37滴加酸性亞鐵氰化鉀溶液染色30min （3）

22、蒸餾水沖洗2min后沙黃復(fù)染1min，待干鏡檢。 63第六十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 4.注意事項(xiàng) （1）所用的玻片及器具必須清潔，無(wú)鐵污染。 （2）應(yīng)選有骨髓小粒的髓片做鐵染色，以便觀察細(xì)胞外鐵。 （3）作用液必須新鮮配制。 （4）亞鐵氰化鉀暴露于空氣中，易氧化變質(zhì)， 貯于棕色瓶中，避光密封保存。 64第六十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （5）復(fù)染前應(yīng)充分沖洗，否則鐵粒狀結(jié)晶過(guò)多，影響觀察。（6）計(jì)數(shù)時(shí)要不停地旋轉(zhuǎn)細(xì)螺旋器，因?yàn)殍F粒在細(xì)胞內(nèi)的高低度不一致，每看一個(gè)中、晚幼紅細(xì)胞要旋轉(zhuǎn)幾次，直到看清為止。 （7）觀察內(nèi)鐵時(shí)，幼紅及淋巴細(xì)胞要分清，幼紅細(xì)胞核為

23、鮮紅色，淋巴細(xì)胞核為淡紅色，（8）與污染鐵的鑒別：污染鐵不在髓小粒和細(xì)胞內(nèi)，而是浮在上邊，而且藍(lán)中帶黑。65第六十五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 5.結(jié)果觀察： （1）正常幼紅細(xì)胞核呈鮮紅、漿淡黃、鐵顆粒呈藍(lán)綠色 （2）低倍鏡觀察細(xì)胞外鐵：涂片尾部和髓小粒附近 陰性：無(wú)藍(lán)綠色鐵粒。 陽(yáng)性：含有不同程度的鐵粒、鐵小珠、鐵小塊。 根據(jù)陽(yáng)性程度不同分四級(jí)。 66第六十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月67細(xì)胞外鐵幼紅細(xì)胞外的骨髓鐵 ( + ) 少量鐵粒 偶見(jiàn)鐵小珠 （2） 較多鐵粒較多鐵小珠 (3+) 許多鐵粒許多鐵小珠少量小塊狀。 (4+) 極多的鐵顆粒 鐵小珠 許多小塊密

24、集 成堆。第六十七張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞外鐵觀察陽(yáng)性為藍(lán)綠色沉淀第六十八張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（3）細(xì)胞內(nèi)鐵：油鏡計(jì)數(shù)100個(gè)中晚幼紅細(xì)胞；并記 錄含有藍(lán)色顆粒的鐵粒幼紅細(xì)胞百分率。 型 胞漿內(nèi)1-2個(gè)鐵小粒 型 胞漿內(nèi)3-5個(gè)鐵小粒 型 胞漿內(nèi)6-10個(gè)鐵小?；?-4粗大顆粒 型 含鐵小粒10個(gè)以上或5個(gè)以上粗大顆粒 環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞：含鐵粒在6粒以上，其中2/3以上鐵粒圍繞核排列，超過(guò)1/2周。69第六十九張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月骨髓細(xì)胞內(nèi)鐵染色1.環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞；2.鐵粒幼紅細(xì)胞 第七十張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年

25、6月71第七十一張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 5.正常參考值 細(xì)胞外鐵：+（2/3為+，1/3為+） 細(xì)胞內(nèi)鐵：20%40%（正常人型多見(jiàn)，少數(shù)為型）72第七十二張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 7.臨床意義： (1)缺鐵性貧血:外鐵或()，內(nèi)鐵 15% 。 此方法是診斷IDA及指導(dǎo)鐵劑治療的一種輔助方 法；經(jīng)鐵劑治療后細(xì)胞內(nèi)外鐵迅速增多。 (2)鐵粒幼細(xì)胞性貧血：內(nèi)鐵陽(yáng)性率高于40%，可達(dá)70%以上，鐵粒數(shù)目增多，顆粒粗大，可見(jiàn)環(huán)鐵；外鐵多為+2，可達(dá)+3+4。 （3）MDS-RAS：內(nèi)鐵陽(yáng)性率，環(huán)鐵15%。73第七十三張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 （4

26、）感染性貧血：外鐵，內(nèi)鐵 （5）地中海貧血：內(nèi)鐵，外鐵 （6）巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障、白 血病：外鐵 、內(nèi)鐵正常或升高。74第七十四張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、臨床應(yīng)用第七十五張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 對(duì)于貧血病例鐵染色應(yīng)作為常規(guī)染色 外鐵或(-)，內(nèi)鐵：在缺鐵性貧血。 內(nèi)、外鐵正常或增多：巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血。 外鐵增多，內(nèi)鐵減少：感染性貧血、肝病性貧血、腎病性貧血。 內(nèi)、外鐵均增多： 增生異常綜合癥（MDS）、鐵粒幼細(xì)胞性貧血。76一、在貧血診斷中的應(yīng)用第七十六張，PPT共八十三頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 在巨幼細(xì)胞性貧血和紅血病或紅白血病，作PAS染色。 陣發(fā)性睡眠