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文檔簡介
1、關(guān)于實驗一用生長譜法測定微生物的營養(yǎng)需求第1頁,共7頁,2022年,5月20日,22點8分,星期三一、目的要求 學(xué)習(xí)用生長譜法測定微生物營養(yǎng)需要(碳源)的基本原理和方法。第2頁,共7頁,2022年,5月20日,22點8分,星期三二、基本原理 為了使微生物生長、繁殖,必須供給所需要的碳源、氮源、無機鹽、生長因子等,如果缺少其中一種,微生物便不能生長。培養(yǎng)基的六大營養(yǎng)因素: 碳源 氮源 能源 無機鹽 生長因子 水第3頁,共7頁,2022年,5月20日,22點8分,星期三根據(jù)這一特性,可將微生物接種在一種只缺少某種營養(yǎng)物的完全合適的瓊脂培養(yǎng)基中,倒成平板,再將所缺的營養(yǎng)物(例如各種碳源)點植于平板上
2、,經(jīng)適溫培養(yǎng),該營養(yǎng)物便逐漸擴散于植點周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物,便在這種營養(yǎng)物擴散處生長繁殖,微生物繁殖之處便出現(xiàn)圓形落圈,即生長圖形,故稱此法為生長譜法。 這種方法可以定性的測定微生物對各種營養(yǎng)物質(zhì)的需要。在微生物育種和營養(yǎng)缺陷型的鑒定中也常用此法。 第4頁,共7頁,2022年,5月20日,22點8分,星期三三、實驗材料1培養(yǎng)基:基礎(chǔ)鹽合成培養(yǎng)基(無碳培養(yǎng)基),固體 NaCl 1g KH2PO4 0.5g K2HPO4 0.5g NH4SO4 2g MgSO47H2O 0.2g 瓊脂 20g pH 7.0 / 1L2. 糖類(10%,v/v ,115oC,30min高壓滅菌) 木糖,葡
3、萄糖,甘露醇,麥芽糖,蔗糖,乳糖 3. 實驗材料:無菌平板,無菌濾紙片,打孔器等4. 實驗菌種:大腸桿菌(E.coli) 第5頁,共7頁,2022年,5月20日,22點8分,星期三四、實驗內(nèi)容1、將無碳培養(yǎng)基溶化后冷卻至到50左右。2、用無菌吸管吸取0.5ml E.coli 懸液于直徑為12的無菌培養(yǎng)皿中,將上述冷卻的培養(yǎng)基傾倒于培養(yǎng)皿中,輕輕在桌面混勻。3、待培養(yǎng)基凝固后,在平板背面用記號筆劃分為六個區(qū),在平板背面邊緣處標(biāo)記要點植的各種糖類。4、在桌面酒精燈火焰處用鑷子分別加入蘸有不同糖類的濾紙片。5、待平板吸收干燥后,倒置于37溫室培養(yǎng)1824小時,觀察各種糖周圍有無生長圈。第6頁,共7頁,2022年,5月2
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