藥物分析實驗指導

1、藥物分析實驗指導懷化學院化學化工系藥學教研室二O二年十二月目錄實驗一氯化鈉的雜質檢査實驗二匍萄糖注射液的質量分析實驗三苯甲酸鈉的含量測定實驗四阿司匹林片的分析實驗五異煙聃片的含量測定實驗六片劑的刖解度和脆碎度的檢測實驗七附錄3蒸飾水的雜質檢查藥品檢驗操作標準原料藥檢驗報告書成品檢驗報告書標準液配制及標左記錄實驗一氯化鈉的雜質檢查目的了解藥物雜質檢査的意義。掌握雜質檢査的原理和方法。掌握雜質限量的計算方法。二、實驗內容酸堿度取本品5. Og,加水50ml溶解后，加浪麝香草酚藍指示液2滴。如顯黃色，加氫氧化鈉 液（0.02mol/L） 0. 10ml ,應變?yōu)樗{色：如顯藍色或綠色，加鹽酸液（0.0

2、2mol/L）0. 2ml ,應變?yōu)辄S色。溶液的澄淸度取本品5. 0g,加水25ml溶解后，溶液應澄淸。碘化物取本品的細粉5. 0g,置瓷蒸發(fā)皿內，滴加新配制的淀粉混合液取可溶性淀粉0.25g, 加水2ml ,攪勻，再加沸水至25ml,隨加隨攪拌，放冷，加硫酸液（0. 025mol/L） 2ml , 亞硝酸鈉試液3滴與水25ml ,混勻適量使晶粉濕潤，曹日光下（或日光燈下）觀察， 5分鐘內晶粒不得顯藍色痕跡。浪化物取本品2. 0g,加水10ml使溶解，加鹽酸3滴與氯仿1ml ,邊振搖邊滴加2%氯胺T 溶液（臨用新制）3滴，氯仿層如顯色，與標準浪化鉀溶液（精密稱取在105C燥至恒 重的浪化鉀0.

3、 1485g,加水使溶解成100ml ,搖勻）1.0ml用同一方法制成的對照液比 較，不得更深。硫酸鹽取本品5. 0g,加水溶解成約40ml （溶液如顯堿性，可滴加鹽酸使成中性），溶液如不 澄淸，應濾過，置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml ,搖勻，即得供試溶液。另取標準硫 酸鉀溶液1.0ml置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml ,加稀鹽酸2ml搖勻，即得對 照溶液。于供試溶液與對照溶溶中，分別加入25%氯化頓溶液oml,用水稀釋使成50ml , 充分搖勻，放置10分鐘，同星黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較、供試品管濁度不得更濃。領鹽取本品4. 0g,加水20ml ,溶解后,濾過

4、，濾液分為兩等份，1份中加稀硫酸2nd,另 一份中加水2ml ,靜置15分鐘，兩液應同樣澄淸。鈣鹽取本品2. 0g,加水10ml使溶解，加氨試液lml ,搖勻，加草酸錢試液lml, 5分鐘內 不得發(fā)生渾濁。鎂鹽取本品l.Og,加水20ml使溶解，加氫氧化鈉試液2. 5ml與0. 05%太坦黃溶液0. 5ml ,搖勻，產(chǎn)生的顏色與標準鎂溶液（精密稱取在800C熾灼至恒重的氧化鎂16. 58mg,加鹽酸2.5ml與水適量使溶解成1000ml,搖勻）1.0ml ,用同一方法制成的對 照液比較，不得更深。鉀鹽取本品5. 0g,加水20ml溶解后，加稀醋酸2滴，加四苯硼鈉溶液（取四苯硼鈉1.5g,置乳缽

5、中，加水10ml研磨后，再加水40ml ,研勻，用質密的濾紙濾過，即得） 2ml,加水使成50ml ,如濕渾濁，與標準硫酸鉀溶液12.3ml用同一方法制成的對照液比較， 不得更濃。干燥失重取供試品，混合均勻（如為較大的結晶，應先迅速搗碎，使成2mm以下的小粒）。分取 約lg，平鋪在130CT-燥至恒重的扁形稱瓶中，厚度不超過5mm，精密稱立。將瓶蓋取下， 置稱瓶旁，或將瓶蓋半開，置烘箱內于130C r燥約23小時后，將稱瓶蓋好，取出，置燥器中放置40分鐘后，精密稱定重量。再按上述方法自“將瓶蓋取下”起，繼續(xù)I：燥（規(guī)左不12小時，依法操作，至恒重為止。從減失重量和取樣量計算供試品的干燥失重 得

6、超過0.5% ）。（規(guī)左不鐵鹽取本品5. Og,加水溶解成25ml ,置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸錢 50mg, 用水稀釋成35ml后，加30%硫亂酸鞍溶液3ml ,再加水適量稀釋成50ml,搖勻。如顯色， 立即與標準鐵溶液1.5ml用同一方法制成的對照液比較，不得更深。重金屬取本品5. 0g,加水20ml溶解后，置25ml納氏比色管中，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5） 2ml與水適量使成2oml ,加硫代乙酰胺試液（臨用前取5. 0ml混合液，加4%硫代乙酰胺 溶液lml,水浴加熱20秒，冷卻，立即使用）2ml ,搖勻，放置2分鐘，置白紙上，自上 向下透視。如顯色，立即與標準鉛

7、溶液1.0ml用同一方法的對照液比較，不得更深。碑鹽儀器裝置：如圖1，A為100ml標準磨口錐形瓶，B為中空的標準磨口塞，上連導氣管 C （外徑8. 0mm.內徑6. 0mm）,全長約180mm. D為具孔的有機玻璃旋塞，其上部為圓形平 而，中央有一圓孔，孔徑與導氣管C的內徑一致，其下部孔徑與導氣管C的外徑相適應。將 導氣管C的頂端導入旋塞下部孔內，并使管壁與旋塞的圓孔恰相吻合，粘合固定，E為中 央具有圓孔（孔徑6. 0mm）的有機玻璃旋塞蓋，與D緊密吻合。測試時，于導氣管C中裝入醋酸鉛棉花60mg （裝管高度約6080mm）,再于旋塞D的頂 端平而上放一片渙化汞試紙（試紙大小以能覆蓋孔徑而不

8、露出平而外為宜），蓋上旋塞E 并旋緊， 即得。標準0申斑的制備：精密量取標準0申溶液2ml ,置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml,再加碘化 鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g,立即照上法裝妥 的導氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540C水浴中，反應45分鐘后，取出渙化汞試 紙，即得。i-sB-條件，嚴格遵守平行原則。 下進行反應與比較。即應盡 同一光源、同襯底上，以相 試藥種類、用量、加入順序檢査法，取本品5. 0g.置A瓶中，加水23ml溶解后，加鹽酸5ml ,照標準碑斑的制備，自 “加碘化鉀試液5ml”起，依法操作，將生成的碑斑與標準側斑比較，不得更深。i

9、-sB-條件，嚴格遵守平行原則。 下進行反應與比較。即應盡 同一光源、同襯底上，以相 試藥種類、用量、加入順序三、說明藥物雜質檢査必須注意按規(guī)定 的檢査平行原則是指樣品與標準必須在同一 條件量選擇容積、口徑和色澤相同的比色 管，在同的方式（一般是自上而下）觀 察，所加入的和反應時間等也應一致。四、思考題雜質檢査的意義是什么？藥物中雜質來源主要有哪些途徑？什么是一般雜質？什么是特殊雜質？藥物雜質檢查應嚴格遵循什么原則實驗二葡萄糖注射液的質量分析一、目的掌握匍萄糖注射液雜質檢查的原理和方法。掌握雜質限量的計算方法。二、實驗內容本品為匍萄糖或無水匍萄糖的滅菌水溶液。含匍萄糖（C6H1206.H20）

10、應為標示量的95. 0 %105. 0 %。、性狀本品為無色或幾乎無色的澄明液體；味甜。、鑒別取本品，緩緩滴入溫熱的堿性酒石酸銅試液中，即生成氧化亞銅的紅色沉淀。、檢查pH值應為3.25. 5 （附錄VI H）。5-疑甲基糠醛精密量取本品適量（約相當于匍萄糖l.Og ），置100ml量瓶中，加水稀 釋至刻度，搖勻，照分光光度法（附錄IV A）,在284nm的波長處測定，吸收度不得大于 0. 32。重金屬取本品適量（約相當于衙萄糖3g）,必要時，蒸發(fā)至約20ml ,放冷，加醋酸 鹽緩沖液（pH3.5） 2ml與水適量使成25ml,依法檢查（附錄Vffl H第一法），按簡萄糖含量 計算，含重金屬不

11、得過百萬分之五。不溶性微粒取裝量為100ml或100ml以上的本品1瓶，依法檢查（附錄IX C），應 符合規(guī)定。細菌內毒素取本品，依法檢查（附錄XI E）,每1ml中含內毒素量應小于0. 5EU。其 他應符合注射劑項下有關的各項規(guī)定（附錄I B）。4、含量測定精密量取本品適量（約相當于匍萄糖75mg）,置碘量瓶中，加水稀釋至 ml ,加含碳酸鈉14.3%及碘化鉀4.0%的緩沖液25ml,再精密加入0. 05mol/L碘滴立液 25ml ,密塞，在20C下 暗處準確放置30min后，加2mol/L鹽酸35ml ,并立即用0. lmol/L硫代硫酸鈉滴定液 進行滴定，至終點時，加淀粉指示劑，繼續(xù)滴

12、定至藍色消失，并將滴定結果用空白試驗校正。 每lml碘滴定液（0. 05mol/L ）相當于9. 008mg的無水匍萄糖（C6H12O6）或相當于9. 909mg的 匍萄糖（C6H12O6出0）.實驗三苯甲酸鈉的含量測定目的掌握雙相滴怎法測怎苯甲酸鈉含量的原理和操作二操作取本品l.og,精密稱定，置分液漏斗中，加水約25ml ,乙瞇50ml與甲基橙指示液 2滴，用鹽酸滴定液(0. omol/L)滴立，隨滴隨振搖，至水層顯持續(xù)橙紅色，分取水層，曹具 塞錐形瓶中，乙瞇層用水oml洗滌，洗滌液并入錐形瓶中，加乙瞇20ml ,繼續(xù)用鹽酸滴立 液(0. omol/L)滴定，隨滴隨振搖，至水層顯持續(xù)橙紅色

13、，即得，每1ml的鹽酸滴定液 (0. 5mol/L)相當于 72. 06mg 的 UHsChNa。本品按干燥品計算,含C?H5O2Na不得少于99. 0%說明1.苯甲酸鈉為有機酸的堿金屬鹽，顯堿性,可用鹽酸標準液滴定。CCOH NaCl1.苯甲酸鈉為有機酸的堿金屬鹽，顯堿性,可用鹽酸標準液滴定。CCOH NaCl在水溶液中滴怎時，由于堿性較弱(Pkb二980)突躍不明顯，故加入與水不相溶混的溶劑在水溶液中滴怎時，由于堿性較弱乙碰提除反應生成物苯甲酸，使反應左量完成，同時也避免了苯甲酸在瓶中析岀影響終點的觀 察。滴左時應充分振搖，使生成的苯甲酸轉入乙駆層。在振搖和分取水層時，應避免樣品的損失，滴

14、宦前，應用乙瞇檢查分液漏斗是否嚴四、思考題乙碰為?為什乙碰為?為什什么要分兩次加入？第一次滴定至水層顯持續(xù)橙紅色時，是否已達終點么？分取水層后乙瞇層用5ml水洗滌的目的是什么？實驗四阿司匹林片的分析一、目的掌握片劑分析的特點及賦形劑的擾與排除方法。掌握阿司匹林片鑒別、檢查、含量測立的原理及方法。二、操作（一）鑒別1取本品的細粉適量（約相當于阿司匹林0. lg）,加水10ml煮沸，放冷，加三氯化 鐵試液1滴，即顯紫堇色。2.取本品的細粉（約相當于阿司匹林0. 5g）,加碳酸鈉試液10ml,振搖后，放置5分 鐘，濾過，濾液煮沸2分鐘，放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。（二）檢

15、查1、游離水楊酸取本品的細粉適量（約相當于阿司匹林0. lg）,加無水氯仿3ml,不斷攪拌2分鐘， 用無水氯仿濕潤的濾紙濾過，濾渣用無水氯仿洗滌2次，每次1ml ,合并濾液與洗液，在室 溫下通風揮發(fā)至干：殘渣用無水乙醇4ml溶解后，移至100ml量瓶中，用少量5%乙醇洗 滌容器、洗液并入量瓶中，加5%乙醇稀釋至刻度，搖勻，分取50ml,立即加新制的稀硫酸 鐵錢溶液取鹽酸液（lmol/L） lml ,加硫酸鐵錢指示液2ml后，再加水適量使成 100ml lml ,搖勻：30秒鐘內如顯色，與對照液（精密稱取水楊酸0. lg，置1000ml 瓶中，加冰醋酸lml,搖勻，再加水適量至刻度，搖勻，精密疑

16、取1.5ml ,加無水乙醇2ml 與5%乙醇使成50ml,再加上述新制的稀硫酸鐵錢溶液lml,搖勻）比較，不得更深。2、溶出度取本品1片，照溶出度測定法第一法（2000年藥典二部附錄）,以稀鹽酸24ml加水 至1000ml為溶劑，轉藍轉速為每分鐘100土5轉，依法操作，經(jīng)30分鐘時，取溶液10ml濾 過，精密量取續(xù)濾液3ml置50ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉液5ml,置水浴中煮沸5 分鐘，放冷，加硫酸液2. 5ml :并加水稀釋至刻度，搖勻。照分光光度法，在303nm的波 長處測定吸收度，按CvHeOs的吸收系數(shù)E嚴丿為265計算，再乘以1.304 ,計算 出每片的溶出量：不得少于標示量的8

17、0%。英他應符合片劑項下有關的各項規(guī)定（2000 年中國藥典二 部）。（三）含量測定取本品10片，精密稱左，研細，精密稱出適量（約相當于阿司匹林0. 3g）,置錐形瓶中， 加中性乙醇（對酚瞰指示液顯中性）20ml ,振搖，使阿司匹林溶解，加酚瞰指示液 3滴， 滴加氫氧化鈉滴定液（0. lmol/L）至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴左液（0. lmol/L）40ml ,置水浴上加熱15分鐘并時時振搖，迅速放冷至室溫，有硫酸滴定液(005mol/L) 滴定，并將滴定的結果用空白試臉校正。每1ml氫氧化鈉滴定液(0. lmol/L)相當于18. 02mg 的 C9Hs0 io本品含阿司匹林(C9H

18、s0i)應為標示量的95.0-105.0%。三、說明1 楊酸與三氯化鐵試液顯紫堇色。+ Fe3+ Fe3-32檢查溶岀度是利用在堿性條件下，加熱，使阿司匹林水解，測宦水解產(chǎn)物水楊酸的吸收度，按為265計算水楊酸的含量，故用阿司匹林的含量表示溶出度時應乘以換算因 數(shù)。換算因數(shù)二M asp/ M sa =1. 304為消除阿司匹林水解產(chǎn)物水楊酸，醋酸及穩(wěn)左劑枸椽酸、酒石酸對含量測左的影響故采 用兩步滴定法。第一次滴NaOH第二次滴四、思考題NaOHH20CH sCOOH + NaOH-CH3C00N&+ H2Oh第一次滴NaOH第二次滴四、思考題NaOHH20CH sCOOH + NaOH-CH3

19、C00N&+ H2Oh2o1 簡述鑒別試臉的原理。2.檢查游離的水楊酸時，為防止阿司匹林水解，操作中應注總哪些問題？計算供試品中 阿司匹林的限量。含量測左時，為什么要作空白試臉？空白試臉的操作3.含量測左時，為什么要作空白試臉？空白試臉的操作如何進行？為什么加中性乙醇溶 解供試品？如何制備中性乙醇？4.哪些問題才可以獲得準確的結果4.哪些問題才可以獲得準確的結果你認為含量測左時，應注意9實驗五異煙腓片的含量測定一、目的掌握氧化還原滴左法的原理及方法。掌握渓酸鉀法測定異煙臍片含量的方法。二、實驗內容性狀本品為白色片。鑒別取本品的細粉適量（約相當于異煙腓0. lg ）,加水10ml,振搖，濾過，濾

20、液照 異煙腓項下的鑒別（2）項試驗，顯相同的反應。檢查溶岀度取本品，照溶出度測定法（附錄XC第一法）,以水1000ml為溶劑，轉速為每分鐘100轉，依法操作，經(jīng)30分鐘時，取溶液5ml濾過，精密量取續(xù)濾液適量， 用水宦量稀釋制成每1ml中含1020 Pg的溶液，照分光光度法（附錄IV A）,在263nm 的波長處測定吸收度，按C6H7N3O的吸收系數(shù)（E 1% lcm）為307計算出每片的溶出 量，限度為標示量的60%,應符合規(guī)定。其他應符合片劑項下有關的各項規(guī)定（附錄I A）。含量測定取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于異煙腓0. 2g ）,置100ml量瓶中，加水適量，振搖

21、使異煙月井溶解并稀釋至刻度，搖勻，用V燥濾紙 濾過，精密量取續(xù)濾液25ml,照異煙腓項下的方法，自“加水50ml、鹽酸20ml與甲基橙指 示劑1滴，用滉酸鉀滴定液緩緩滴定，至粉紅色消失。平行滴定3次。每1ml浪酸鉀滴定液 （0.016 67mol/L） 相當于 3. 429mg 的 C6H7N30.三、思考題1.寫出滉酸鉀法測左異煙腓含量的反應式和滴左度計算過程。實驗六 片劑的崩解時限及脆碎度檢查一、目的1.片劑的削解時限及脆碎度檢查的原理和方法。二、實驗內容（-）削解時限檢查法削解系指固體制劑在檢查時限內全部削解溶散或成碎粒，除不溶性包 衣材料或破碎的膠囊殼外，應通過篩網(wǎng)。本法系用于檢查固體

22、制劑在規(guī)左條件下的削解情況。凡規(guī)左檢查溶出度、釋放度或融變時 限的制劑，不再進行崩解時限檢查。儀器裝置采用升降式削解儀，主要結構為一能升降的金屬支架與下端鑲有篩網(wǎng)的吊籃， 并附有擋板。升降的金屬支架上下移動距離為55mm2mm,往返頻率為每分鐘3032次。吊籃玻璃管6根，管長77. 5mm 2.5mm：內徑21.5mm,壁厚2mm：透明塑料板2 塊，直徑90mm,厚6mm,板而有6個孔，孔徑26mm：不銹鋼板1塊（放在上而一塊塑料 板上），直徑90mm,厚1mm,板面有6個孔，孔徑22mm：不銹鋼終篩網(wǎng)1張（放在下 而一塊塑料板下），直徑90mm,篩孔內徑2.0mm：以及不銹鋼軸1根（固定在上

23、而一塊塑 料板與不銹鋼板上），長80mm。將上述玻璃管6根垂直于2塊塑料板的孔中，并用3只 螺絲將不銹鋼板、塑料板和不銹鋼絲篩網(wǎng)固定，即得。擋板為一平整光滑的透明塑料塊，相對密度 1. 181.20 ,直徑20. 7mm0. 15mm,厚9. 5mm 0. 15mm：擋板共有5個孔，孔徑2mm,中央1個孔，其余4個孔距中心6mm,各 孔間距相等：擋板側邊有4個等距離的V形槽，V形槽上端寬9.5mm,深2. 55mm,底部開口 處的寬與深度均為1. 6mm。檢查法將吊籃通過上端的不銹鋼軸懸掛于金屬支架上，浸入1000ml燒杯中，并調節(jié)吊 籃位置使英下降時篩網(wǎng)距燒杯底部25mm,燒杯內盛有溫度為3

24、7C1C的水，調節(jié)水位高度 使吊籃上升時篩網(wǎng)在水而下15mm處。除另有規(guī)定外，取藥片6片，分別置上述吊籃的玻璃管中，啟動削解儀進行檢查，各片 均應在15分鐘內全部崩解。如有1片削解不完全，應另取6片，按上述方法復試，均應符 合規(guī)定。薄膜衣片，按上述裝置與方法檢查，并可改在鹽酸溶液（9 一 1000）中進行檢查，應在30 分鐘內全部削解。如有1片不能完全削解，應另取6片，按上述方法復試，均應符合規(guī)定。糖衣片，按上述裝置與方法檢查，應在1小時內全部削解。如有1片不能完全削解，應 另取6片，按上述方法復試，均應符合規(guī)定。腸溶衣片，按上述裝置與方法，先在鹽酸溶液（9 一 1000）中檢查2小時，每片均

25、不得 有裂縫、削解或軟化現(xiàn)象；繼將吊籃取出，用少量水洗滌后，每管各加入擋板1塊，再按上述方法在磷酸鹽緩沖液（PH6.8）中進行檢查，1小時內應全部崩解。如有1片不能完全崩 解，應另取6片，按上述方法復試，均應符合規(guī)定。泡騰片，取1片，置250ml燒杯中，燒杯內盛有200ml水，水溫為1525C,有許多 氣泡放出，當片劑或碎片周圍的氣體停止逸出時，片劑應崩解、溶解或分散在水中，無聚集 的顆粒剩留。除另有規(guī)定外，按上述方法檢查6片，各片均應在5分鐘內削解。（-）片劑脆碎度檢查法本法用于檢查非包衣片的脆碎情況及其他物理強度，如壓碎強度等。裝置內徑約為286mm，深度為39mm,內壁拋光，一邊可打開的

26、透明耐磨塑料圓筒，筒 內有一自中心向外壁延伸的弧形隔片（內徑為80mm 1mm,）使圓筒轉動時，片劑產(chǎn)生 滾動（見圖）。圓筒直立固定于水平轉軸上，轉軸與電動機相連，轉速為每分鐘25轉 土 1轉。每轉動 一圈，片劑滾動或滑動至筒壁或其他片劑上。檢查法片重為0. 65g或以下者取若干片，使其總重約為6.5g :片重大于0. 65g者取 10片。用吹風機吹去脫落的粉末，精密稱重，置圓筒中，轉動100次。取出，同法除去粉 末，精密稱重，減失重量不得過1%,且不得檢出斷裂、龜裂及粉碎的片。本試臉一般僅作1 次。如減失重量超過1 %時，可復檢2次，3次的平均減失重量不得過1%,并不得檢出 斷裂、龜裂及粉碎

27、的片。如供試品的形狀或大小使片劑在圓筒中形成不規(guī)則滾動時，可調節(jié)圓的底座，使與桌而 成約10。的角，試驗時片劑不再聚集，能順利下落。對泡騰片及口嚼片等易吸水的制劑，操作時應注總防止吸濕（通?？刂葡鄬穸刃∮?40%） o實驗七、蒸憎水的雜質檢查一、目的了解藥物雜質檢查的意義。掌握雜質檢查的原理和方法。掌握雜質限量的計算方法。、實驗內容酸堿度取本品10ml,加甲基紅指不液2滴，不得顯紅色；另取10ml, 加澳麝香草酚藍指示液5滴，不得顯藍色。氯化物、硫酸鹽與鈣鹽取本品，分置3支試管中，每管各50mlo第一管中，加硝酸5 滴與硝酸銀試液lml；第二管中，加氯化頓試液2ml,第三管中，加 草酸鞍試液2nd,均不得發(fā)生渾濁。硝酸鹽與亞硝酸鹽取本品15ml,加醋酸液(6mol/L)18ml ,對氨基苯磺酸- a -茶胺 試液2ml,鋅粉O.Olg,搖勻，放置15分鐘，不得顯粉紅色。氨取本品50ml,加堿性碘化汞鉀試液2ml,放置15分鐘；如顯 色，與氯化鞍溶液(取氯化鞍31.5mg,加無氨蒸憎水適量使溶解并稀 釋成1000ml) 2. 0ml,加無氨蒸憎水48ml與堿性碘化汞鉀試液2ml制 成的對照液比較，不得更深。二氧化碳取本品25ml,置50ml具塞量筒中，加氫氧化鈣試液25ml,密塞 振搖，放置，1小時內不得發(fā)生渾濁。易氧化物取本品100ml,加稀硫酸10ml,煮沸后，加咼孟