揮發(fā)油成分的提取和鑒別

1、揮發(fā)油成分的提取和鑒別一、實驗目的掌握水蒸汽蒸餾法從中藥材中提取揮發(fā)油的原理和操作技術;熟悉陳皮、丁香藥材中揮發(fā)油的化學組成和一般鑒別方法；熟悉揮發(fā)油的單向二次薄層層析方法。二、儀器與試藥(一)儀器揮發(fā)油提取器電熱套玻璃儀器氣流烘干器電熱恒溫干燥箱圓底燒瓶(500mL)移液管(10mL、5mL)(二)試藥陳皮 丁香三氯化鐵氨性硝酸銀2,4-二硝基苯肼堿性高錳酸鉀陳皮油和丁香油對照品茴香醛 濃硫酸石油醚(60-90 C)乙酸乙酯 硅膠 CMC-Na三、主要成分的結構與性質陳皮：為蕓香科植物橘Citrus reticulata Bianco的果皮。性溫，味苦、辛。能理氣健脾， 燥濕化痰。用于胸脘脹

2、滿、食少吐瀉、咳嗽多痰。橘的栽培變種的果皮亦作陳皮入藥；其未成熟 果實的外層果皮亦入藥，藥材稱為青皮，能疏肝破氣、消積化滯?；瘜W成分含橙皮苷(hesperidin)、 川陳皮素(nobiletin)、檸檬烯、a-蒎烯、B-蒎烯、B-水芹烯(B-phellandrene)等。含揮發(fā)油 2%以上，油中主成分為檸檬烯，含少量鄰氨基苯甲酸甲酯、芳樟醇和川陳皮素陳皮油外觀：淡黃色液體，氣味獨特的陳皮香氣，比重0.8381-0.8431。丁香：為桃金娘科植物丁香Eugenia caryophllata Thunb.的干燥花蕾，又名丁子香，支解香、 雄丁香。辛，溫。入胃、脾、腎經(jīng)。能溫中，暖腎，降逆。治呃逆

3、，嘔吐，反胃，瀉痢，心腹冷 痛，痃癖，疝氣，癬疾?；ɡ俸瑩]發(fā)油即丁香油。中國藥典規(guī)定含揮發(fā)油不得少于16%，油中 主要為丁香油酚(Eugenol)、乙酰丁香油酚(Acetyleugenol)及少量a-與0-丁香烯(Caryo- phyllene)；其 次為葎草烯(Humulene)、胡椒酚(Chavicol)、a-衣蘭烯(a-Ylangene)，其中丁香油酚約占總揮發(fā)油的 64-85%。花蕾中尚含有4種黃酮衍生物，皆為黃酮甙元，其中兩種為鼠李素(Rhamnetin)及山萘酚 (Kaempferol)；另有齊墩果酸(Oleanolic acid)、番櫻桃素、番櫻桃素亭(Eugenitin)、異番

4、櫻桃素亭 (Isoeugenitin)等。丁香油外觀：淡黃或澄明油狀物，有丁香的特殊香氣，置空氣中或貯存日久，則漸濃厚而色 變棕黃，不溶于水，易溶于醇、醚，比重為1.038-1.060。rha-gluO檸檬烯丁香油酚橙皮苷四、實驗原理：提?。豪脫]發(fā)油具有揮發(fā)性，可隨水蒸汽同時蒸出來的性質，進行提取。油水易分層者， 可直接分出油層；油水不易分層者，可用鹽析或用低沸點有機溶劑進行萃取得到揮發(fā)油；鑒別：揮發(fā)油所含成分復雜，為一混合物。利用揮發(fā)油中各種成分具有的特征官能團，用 各種特性反應試劑進行化學檢識和層析薄層鑒別；單項二次層析：不含氧烴、萜、烯類極性小于含氧的烴、萜、烯類，單用石油醚(60-9

5、0C) 進行層析，則極性大的成分不易展開，再用石油醚與乙酸乙酯的混合溶劑進行層析，則極性小的 成分與極性大的成分則能較好的展開。五、實驗內容：(一)提取丁香的提?。喝《∠闳?，每份20g，分別放入揮發(fā)油提取裝置的圓底燒瓶中，分別加入 下表2中的水量，浸泡30分鐘，直火加熱共水蒸餾1.5小時，記錄揮發(fā)油提出量及揮發(fā)油顏色， 小心分出油層，將油裝在小燒瓶中，備用。表7 1 丁香提取時不同加水量對揮發(fā)油提取量的影響加水量(mL)506070丁香油體積(mL)揮發(fā)油顏色陳皮的提取：取陳皮三份，每份100g，分別放入揮發(fā)油提取裝置的圓底燒瓶中，分別加入 下表3中的水量，浸泡30分鐘，直火加熱共水蒸餾1.

6、5小時，記錄揮發(fā)油提出量及揮發(fā)油顏色， 小心分出油層，將油裝在小燒瓶中，備用。表72陳皮提取時不同加水量對揮發(fā)油提取量的影響加水量(mL)300350400陳皮油體積(mL)揮發(fā)油顏色注：(1)正確操作揮發(fā)油提取裝置；油水不易分離時，可采用鹽析或低沸點有機溶劑(乙醚、石油醚等)萃取等方法分離揮 發(fā)油；揮發(fā)油提取過程中，加水量和溫度對實驗結果的影響較大。(二)鑒別薄層點滴檢識：取適量揮發(fā)油樣品加5-10倍量無水乙醇溶解，分別加入下述(1)-(5)項試劑，觀察并 記錄實驗結果于表4。三氯化鐵：檢查酚性成分；氨性硝酸銀：檢查醛基；2,4-二硝基苯肼：檢查醛基、酮基；堿性高錳酸鉀：檢查不飽和化合物；香草醛-濃硫酸：105C烘烤10分鐘，揮發(fā)油中各成分顯不同的顏色。表7 3薄層點滴鑒別實驗結果丁香油對照品樣品丁香油陳皮油對照品樣品陳皮油試劑空白(1)(2)(3)(4)(5)薄層鑒定一一單向二次層析吸附劑：青島硅膠G以0.4%CMC-Na水液制板，105C活化1小時。展開劑：(1)石油醚(60-90C)(2)石油醚-醋酸乙酯(85:15)樣品：自制丁香油醇液，自制陳皮油醇液對照品：丁香油酚對照品醇液，檸檬烯對照品醇液顯色劑：噴香草醛-濃硫酸溶液結果：與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。六、實驗結果比較不同加水量對藥