診斷學(xué)-骨髓細(xì)胞學(xué)檢查課件

1、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查骨髓細(xì)胞學(xué)檢查目的和要求掌握骨髓穿刺的適應(yīng)證血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律了解骨髓檢查的方法和內(nèi)容細(xì)胞免疫分型熟悉骨髓檢查的臨床應(yīng)用常見細(xì)胞化學(xué)染色目的和要求掌握骨髓穿刺的適應(yīng)證了解骨髓檢查的方法和內(nèi)容熟悉骨血象分析我們該做什么檢查？血象分析我們該做什么檢查？特殊的臨床檢驗(yàn) -骨髓液制成涂片染色,觀察細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài) -結(jié)合臨床和血象等資料 -明確診斷、協(xié)助診斷、觀察療效、判斷預(yù)后 或排除某些疾病血液系統(tǒng)疾病診斷和鑒別診斷的重要手段之一骨髓細(xì)胞學(xué)檢查特殊的臨床檢驗(yàn)骨髓細(xì)胞學(xué)檢查 骨髓檢查 診斷、輔助 診診斷血液 系統(tǒng)疾病 診斷、輔助骨髓穿刺適應(yīng)證外周血象成分及形態(tài)異常不明原因發(fā)熱,肝、脾、淋巴

2、結(jié)腫大骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯增加等化療后療效觀察骨髓活檢、免疫分型、染色體核型分析、微生物及寄生蟲學(xué)檢查骨髓穿刺適應(yīng)證外周血象成分及形態(tài)異常骨髓？骨髓？ 骨髓:位于骨松質(zhì)腔隙中的一種海綿樣、膠狀組織 骨髓分類：紅骨髓（造血細(xì)胞）、黃骨髓（脂肪細(xì)胞） 骨髓組成：結(jié)締組織、血管、神經(jīng)及造血實(shí)質(zhì)細(xì)胞 造血微環(huán)境：由血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、基質(zhì)細(xì)胞（血管外膜細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞等）和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,造血干細(xì)胞賴以生存的場所。 骨髓:位于骨松質(zhì)腔隙中的一種海綿樣、膠狀組織 骨髓膠狀、海綿樣組織紅骨髓各種造血細(xì)胞微環(huán)境骨髓組成及細(xì)胞生成骨髓膠狀、海

3、紅骨髓各種造血細(xì)胞微環(huán)境骨髓組成及細(xì)胞生成多能（向）造血干細(xì)胞髓系干細(xì)胞淋巴系干細(xì)胞紅系祖 細(xì)胞粒-單系祖細(xì)胞巨核系祖細(xì)胞嗜酸粒系祖細(xì)胞原紅細(xì)胞早幼紅 細(xì)胞中幼紅 細(xì)胞晚幼紅細(xì)胞網(wǎng)熾紅細(xì)胞嗜堿粒系祖細(xì)胞原粒細(xì)胞T-淋巴系祖細(xì)胞B-淋巴系祖細(xì)胞原漿細(xì)胞原單細(xì)胞原巨核細(xì)胞原粒細(xì)胞原粒細(xì)胞原淋巴 細(xì)胞幼淋巴 細(xì)胞淋巴細(xì)胞早幼粒 細(xì)胞晚幼粒細(xì)胞中幼粒細(xì)胞桿狀細(xì)胞幼單細(xì)胞單核細(xì)胞幼巨核細(xì)胞顆粒巨核細(xì)胞產(chǎn)版巨核細(xì)胞裸核巨核細(xì)胞血小板嗜酸早幼粒嗜酸中幼粒嗜酸晚幼粒嗜酸桿狀 細(xì)胞嗜酸桿狀 細(xì)胞嗜酸分葉 細(xì)胞嗜堿性早幼細(xì)胞嗜堿中幼細(xì)胞嗜堿晚幼細(xì)胞嗜堿桿狀細(xì)胞嗜堿桿狀細(xì)胞嗜堿分葉細(xì)胞淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞漿細(xì)胞單核細(xì)胞

4、單核細(xì)胞桿狀細(xì)胞分葉細(xì)胞網(wǎng)熾紅 細(xì)胞紅細(xì)胞幼漿細(xì)胞多能（向）造血干細(xì)胞髓系干細(xì)胞淋巴系干細(xì)胞紅系祖粒-單系祖細(xì)血細(xì)胞發(fā)育演變圖原始細(xì)胞幼稚細(xì)胞成熟細(xì)胞原幼成原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞及成熟細(xì)胞基本特點(diǎn)診斷學(xué)骨髓細(xì)胞學(xué)檢查課件 胞體:較大 核仁:清晰,易見; 胞核:大、圓形、類圓形或不規(guī)則形；胞漿：少、藍(lán)色（嗜堿性） 核染色質(zhì)：細(xì)致，呈顆粒狀； 顆粒：無或少許粒），核漿比增大。原始細(xì)胞 胞體:較大 幼稚細(xì)胞 胞體:中等大小; 核染色質(zhì)：較粗； 胞核：圓形或類圓形； 核仁：多數(shù)無 胞質(zhì)：增多,呈嗜堿性（藍(lán)色）；顆粒：多數(shù)有顆粒 （有核紅細(xì)胞例外） 幼稚細(xì)胞 胞體:中等大小; 核染色成熟細(xì)胞胞體:較小;胞核

5、：分葉、扭曲或有切跡（紅細(xì)胞和血小板無核）胞質(zhì)：多,淡藍(lán)色、淡紅色，核質(zhì)比?。ㄐ×馨图?xì)胞除外）核仁：無 ；染色質(zhì)：粗；顆粒：有成熟細(xì)胞胞體:較小;血細(xì)胞發(fā)育成熟的一般規(guī)律項(xiàng)目原始幼稚成熟備注細(xì)胞大小胞質(zhì)量胞質(zhì)嗜堿性胞質(zhì)顆粒胞核大小核形態(tài)核染色質(zhì)核仁核質(zhì)比例大小少多強(qiáng)弱無少多大小圓形凹陷分葉細(xì)致粗糙，疏松致密有無大小早幼粒細(xì)胞比原粒細(xì)胞大，巨核細(xì)胞由小變大小淋巴細(xì)胞除外紅系從深藍(lán)灰藍(lán)灰紅淡紅色紅系小淋巴無顆粒，粒系三種顆粒成熟紅細(xì)胞核消失有的成熟細(xì)胞呈類圓形、不規(guī)則形小淋巴細(xì)胞核質(zhì)比大血細(xì)胞發(fā)育成熟的一般規(guī)律項(xiàng)目原始幼稚成熟備注細(xì)胞大小大骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用診斷造血系統(tǒng)疾病 白血病、惡組、M

6、M、AA、MA、戈謝病、尼曼病、海藍(lán)組織細(xì)胞增生癥、MDS等。輔助診斷某些疾病 惡性腫瘤細(xì)胞骨髓轉(zhuǎn)移、淋巴瘤骨髓浸潤,骨髓增生異常綜合征、骨髓增生性疾病、IDA、溶血性貧血、脾亢、ITP提高某些疾病的診斷率 瘧原蟲、黑熱病、噬血細(xì)胞綜合征、SLE骨髓細(xì)胞學(xué)檢測的臨床應(yīng)用常見血液系統(tǒng)疾病各種貧血:IDA、MA、HA、AA、MDS各種類型的白血?。篈L(AML,ALL),慢性白血病（慢粒,慢淋等）多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤類脂質(zhì)疾?。焊曛x病，尼曼-匹克病，海藍(lán)組織細(xì)胞綜合征白血?。汗撬柚性技?xì)胞20%常見血液系統(tǒng)疾病各種貧血:IDA、MA、HA、AA、MDSM1M3M2M4M1M3M2M4L2M5L1L

7、3L2M5L1L3戈謝病MMM6尼曼-匹克病戈謝病MMM6尼曼-匹克病CLLCMLITPM7CLLCMLITPM7AAIDAMAHAAAIDAMAHA 骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)的方法和內(nèi)容低倍鏡觀察-取材、涂片、染色-有核細(xì)胞增生程度-計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞-有無異常細(xì)胞油鏡觀察-分類計(jì)數(shù)-形態(tài)變化結(jié)果計(jì)算-各類細(xì)胞%-粒紅比值描述-骨髓象-血象分析與報(bào)告-增生程度-粒紅比值-各系數(shù)量、形態(tài)-綜合分析-出具報(bào)告病例歸檔-申請單-涂片-報(bào)告單 骨髓細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)的方法和內(nèi)容低倍鏡觀察油鏡觀察結(jié)果計(jì)1、低倍鏡觀察 (1)判斷骨髓涂片質(zhì)量:觀察涂片厚薄、骨髓小粒多少、油滴、色澤等,選擇滿意的區(qū)域進(jìn)行有核細(xì)胞分類、計(jì)數(shù)涂片和

8、取材A-涂片比較:上下兩張?zhí)袒蛱L,不符 合要求;中間的涂片長短厚薄適宜且片 膜居中，符合要求。B-下面的涂片取材較好，有較多骨髓小粒染色比較A-偏酸,細(xì)胞核、顆粒結(jié)構(gòu)不清楚，紅細(xì) 胞染色偏紅B-較好，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)、顆粒、胞漿染色好 、紅細(xì)胞染粉紅色C-偏堿，細(xì)胞核、胞漿染色太深，細(xì)胞不 易辨認(rèn)，紅細(xì)胞染成藍(lán)色觀察部位的選擇A-涂片頭部細(xì)胞密集、細(xì)胞染色差,結(jié)構(gòu)不 清，不能識別B-涂片體尾交界處細(xì)胞分布均勻、細(xì)胞染色 較好，是合適的細(xì)胞形態(tài)觀察部位C-涂片尾部細(xì)胞破損、變形，不合適觀察1、低倍鏡觀察涂片和取材A-涂片比較:上下兩張?zhí)袒蛱L, (2)判斷骨髓增生程度 -骨髓中有核細(xì)胞的多少反映

9、出骨髓增生程度 -采用五級分類法 分級有核細(xì)胞有核細(xì)胞數(shù) 臨床意義 紅細(xì)胞一個(gè)高倍鏡視野 增生極度活躍 增生明顯活躍 增生活躍 增生減低 增生極度減低 1: 1 1：10 1：20 1：50 1：200 100 50100 2050 510 3+ 4+-RAS:環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞15%常用骨髓細(xì)胞化學(xué)染色SE染色AE染色PAS染色Fe染色M1-POXM2-POXALL-POXM5-POXALL-POXM4-POXM5-POXM3-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXM5-POXALL-CEM3-CEM1-CEM3-CEM1-AE+NaFM1-AEM5-AE+NaFM5

10、-AEM1-POXM2-POXALL-POXM5-POXALL-PNAP化膿菌感染-NAPCML-NAPALL-NAPNAP化膿菌感染-NAPCML-NAPALL-NAPL2-ACPc單核細(xì)胞-PASb巨核細(xì)胞-PASa成熟粒細(xì)胞-PASALL-PAST急淋-ACPCLL-PAS紅色粗顆粒狀陽性M6-PASMA-PASd幼紅細(xì)胞-PASL2-ACPc單核細(xì)胞-PASb巨核細(xì)胞-PASa成熟粒細(xì)胞IDA鐵染色:細(xì)胞內(nèi)鐵陰性,幼紅細(xì)胞內(nèi)未見鐵顆粒鐵粒幼紅細(xì)胞環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞鐵粒幼紅細(xì)胞IDA鐵染色:細(xì)胞外鐵陰性,IDA鐵染色:細(xì)胞內(nèi)鐵陰性,幼紅細(xì)胞內(nèi)未見鐵顆粒鐵粒幼紅細(xì)胞急性白血病細(xì)胞化學(xué)染色特點(diǎn)

11、細(xì)胞化學(xué)染色 急淋 急粒 急單 紅白血病 M7POX - -/+ -+ +(粒細(xì)胞） -SB - + -+ +(粒細(xì)胞） -AS-D NCE - + -+ +(粒細(xì)胞） -NAE - -+ + +(單核細(xì)胞） -NAE+NaF - 不被NaF抑制 被NaF抑制NAP N或PAS + 粗顆粒狀/塊狀 - /+彌漫紅色 -/+彌漫紅色 +（幼紅細(xì)胞 ） +急性白血病細(xì)胞化學(xué)染色特點(diǎn)細(xì)胞化學(xué)染色 細(xì)胞免疫分型 用單克隆抗體及免疫學(xué)技術(shù)對細(xì)胞膜表面和（或）細(xì)胞質(zhì)存在的特異性抗原進(jìn)行檢測,借以分析細(xì)胞所屬系列，分化程度和功能狀態(tài)的一種方法。檢測方法1、免疫熒光法用熒光素標(biāo)記的單克隆抗體,在一定條件下與細(xì)

12、胞表面的分化抗原結(jié)合，經(jīng)激發(fā)光照射產(chǎn)生熒光。借助流式細(xì)胞儀觀察熒光抗原。有熒光者為陽性，無熒光者為陰性2、免疫酶染色法細(xì)胞免疫分型 用單克隆抗體及免疫學(xué)技術(shù)檢測方法細(xì)胞免疫分型的臨床應(yīng)用T淋巴細(xì)胞亞群檢測全T細(xì)胞-CD3、CD4和CD8T細(xì)胞 -TH(CD4+、CD8-） -TS(CD4-、CD8+)CD4+/CD8+:機(jī)體免疫狀態(tài)、疾病診斷、病情分析、監(jiān)測治療和判斷預(yù)后白血病免疫分型1、明確診斷ALL和AMLALL-CD2CD5CD7CD10CD19CD20AML-CD13CD33MPOCD15CD14HLA-DR2、確定ALL的細(xì)胞類型（B細(xì)胞或T細(xì)胞）和ALL的分化階段3、鑒定AML的特

13、征4、少見類型的白血病,M6、M7、M0、雙表型、CLL、毛白、MM白血病微小殘留病檢測完全緩解的白血病,出現(xiàn)CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34等任何一種抗原陽性同時(shí)伴有TdT+可診斷微小殘留存在。敏感性達(dá)10-4細(xì)胞免疫分型的臨床應(yīng)用T淋巴細(xì)胞亞群檢測白血病免疫分型白血病ALL與AML的免疫表型特點(diǎn) CD19 CD7 CD33 CD13 HLA-DR TdTB-ALL + - - - + +/-T-ALL - + - - -/+ +AML - -/+ + + + -ALL與AML的免疫表型特點(diǎn) CD19 急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型特點(diǎn) 系列 亞型 主要的蛋白標(biāo)記B系列 早期B型 CD19+,CD10- 普通型 CD19+,CD10+ 前B型 CD19+，胞質(zhì)鏈+ 系列 亞型 主要的蛋白標(biāo)記T系列 B細(xì)胞型 CD19+，胞膜Ig+ 前T型 CD7+,CD2- T細(xì)胞型 CD7+,CD2-急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型特點(diǎn) 系列 亞型 急性髓細(xì)胞白血病的免疫分型亞型 典型的