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1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備 染色體是生物遺傳基因的載體。在物種進(jìn)化、作物育種、性別鑒定、基因定位以及癌癥和遺傳性疾病的診斷中,有時(shí)需要制備染色體標(biāo)本。動(dòng)物的骨髓中存在大量活躍的進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞,是染色體制備的理想材料。給動(dòng)物注射了特異作用于微管系統(tǒng)的秋水仙素后,可以抑制紡錘體的形成,使分裂細(xì)胞阻斷于有絲分裂中期。收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體的分散。細(xì)胞經(jīng)固定后,于預(yù)冷的載玻片上滴片,使染色體散開,再用姬姆薩染色,便可以制成染色體標(biāo)本。2022/10/42二、實(shí)驗(yàn)原理 染色體是生物遺傳基因的載體。在物種進(jìn)化、作物育種2022/10/432022/10
2、/23人外周血淋巴細(xì)胞染色體(Giemse 染色)2022/10/44人外周血淋巴細(xì)胞染色體(Giemse 染色)2022/10/2022/10/452022/10/25三、實(shí)驗(yàn)用品試劑:0.65生理鹽水,甲醇冰醋酸(3:1)固定液, 蒸餾水,Giemsa染液。器材:顯微鏡,離心機(jī),搪瓷盤,剪刀,骨剪,離心管,注射器,染色缸。材料:肉用成體牛蛙2022/10/46三、實(shí)驗(yàn)用品試劑:0.65生理鹽水,甲醇冰醋酸(3:1)動(dòng)物的藥物處理(課前已經(jīng)完成) 牛蛙稱重,按每克體重2 g的劑量腹腔注射秋水仙堿溶液(用065生理鹽水配制)。注射后3.5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。2022/10/47四、實(shí)驗(yàn)
3、步驟動(dòng)物的藥物處理(課前已經(jīng)完成) 牛蛙稱重,按每克體重2畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。細(xì)胞經(jīng)固定后,于預(yù)冷的載玻片上滴片,使染色體散開,再用姬姆薩染色,便可以制成染色體標(biāo)本。不使用油鏡的情況下不需要蓋玻片。牛蛙稱重,按每克體重2 g的劑量腹腔注射秋水仙堿溶液(用065生理鹽水配制)。細(xì)胞經(jīng)固定后,于預(yù)冷的載玻片上滴片,使染色體散開,再用姬姆薩染色,便可以制成染色體標(biāo)本。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。此3ml的生理鹽水
4、要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。細(xì)胞經(jīng)固定后,于預(yù)冷的載玻片上滴片,使染色體散開,再用姬姆薩染色,便可以制成染色體標(biāo)本。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。動(dòng)物的骨髓中存在大量活躍的進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞,是染色體制備的理想材料。取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。注意:沖洗時(shí)動(dòng)作要徐緩,以免溶液噴出,損失骨髓細(xì)胞。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備 1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。剪去骨兩端膨大部的
5、半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。每組保證有1根后肢長骨,或者2根前肢長骨。 2在小燒杯中加入3 ml的0.65生理鹽水,取帶針頭的注射器,吸入1 ml 0.65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。注意:沖洗時(shí)動(dòng)作要徐緩,以免溶液噴出,損失骨髓細(xì)胞。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。將骨髓沖出物中大塊白色脂肪組織用針頭挑出棄去。2022/10/48四、實(shí)驗(yàn)步驟畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。 2022/10/49四、實(shí)驗(yàn)步驟2022/10/29四、實(shí)驗(yàn)步驟取后肢:剪開牛蛙
6、后肢與軀干接合部的肌肉,可看到膨大的關(guān)節(jié)部。2022/10/410四、實(shí)驗(yàn)步驟取后肢:剪開牛蛙后肢與軀干接合部的肌肉,可看到膨大的關(guān)節(jié)部。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。取后肢:剪開牛蛙后肢與軀干接合部的肌肉,可看到膨大的關(guān)節(jié)部。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射
7、器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。取骨髓前,為什么要給牛蛙注射秋水仙素?剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。注意:沖洗時(shí)動(dòng)作要徐緩,以免溶液噴出,損失骨髓細(xì)胞。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體的分散。在載玻
8、片上滴1滴蒸餾水,然后滴加2滴第2步獲得的骨髓細(xì)胞懸液。在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。細(xì)胞經(jīng)固定后,于預(yù)冷的載玻片上滴片,使染色體散開,再用姬姆薩染色,便可以制成染色體標(biāo)本。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。2022/10/411四、實(shí)驗(yàn)步驟65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。2022/10/412四、實(shí)驗(yàn)步驟取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。2022/1
9、0/212四、實(shí)驗(yàn)步取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。2022/10/413四、實(shí)驗(yàn)步驟取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。2022/10/213四、實(shí)驗(yàn)步驟取前肢2:剪開肌肉,順著關(guān)節(jié)外圍剪開。2022/10/414四、實(shí)驗(yàn)步驟取前肢2:剪開肌肉,順著關(guān)節(jié)外圍剪開。2022/10/2142022/10/415四、實(shí)驗(yàn)步驟2022/10/215四、實(shí)驗(yàn)步驟3.在載玻片上滴1滴蒸餾水,然后滴加2滴第2步獲得的骨髓細(xì)胞懸液。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。18-20下靜置,低滲處理20-30分鐘。注意防止水分蒸發(fā)。4.在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(
10、無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。5.吸走固定液,換入無水乙醇,蒸汽固定10-20分鐘。6.取出載玻片,緩緩倒去低滲液,用吸管將固定液II(無水乙醇:冰醋酸=1:2)自載玻片的一端緩慢滴下形成水幕,固定3-4次,直立載玻片空氣干燥。注意,每組做2片452022/10/416蒸汽固定法四、實(shí)驗(yàn)步驟3.在載玻片上滴1滴蒸餾水,然后滴加2滴第2步獲得的骨髓細(xì)胞7.在干凈的培養(yǎng)皿中放入兩垛蓋玻片(每垛3片),將固定并充分干燥的載玻片有細(xì)胞的一面向下,放置于蓋玻片上,將Giemsa染料用吸管注入載玻片和培養(yǎng)皿底的間隙中,扣染20-30分鐘。8.用蒸餾水稍
11、洗使脫去浮色,吸水紙吸干載玻片底面和周圍的水分,空氣干燥后在顯微鏡下觀察。不使用油鏡的情況下不需要蓋玻片。Giemsa染色改良苯酚品紅染色2022/10/417蒸汽固定法四、實(shí)驗(yàn)步驟7.在干凈的培養(yǎng)皿中放入兩垛蓋玻片(每垛3片),將固定并充分注意事項(xiàng) 1.骨髓染色體標(biāo)本的制備成敗決定于取材,若抽取的骨髓太少或太稀,細(xì)胞數(shù)目過少,不易獲得較多的中期分裂相。 2.低滲處理極為重要,低滲不夠,則染色體聚在一起,分散不好。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。2022/10/418注意事項(xiàng) 2022/10/218此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程
12、度以剛剛露出骨髓組織為宜。取骨髓前,為什么要給牛蛙注射秋水仙素?在干凈的培養(yǎng)皿中放入兩垛蓋玻片(每垛3片),將固定并充分干燥的載玻片有細(xì)胞的一面向下,放置于蓋玻片上,將Giemsa染料用吸管注入載玻片和培養(yǎng)皿底的間隙中,扣染20-30分鐘。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。不使用油鏡的情況下不需要蓋玻片。2在小燒杯中加入3 ml的0.不使用油鏡的情況下不需要蓋玻片。收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體
13、的分散。1找出最好的幾個(gè)分裂相,數(shù)出染色體條數(shù).取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。注意:沖洗時(shí)動(dòng)作要徐緩,以免溶液噴出,損失骨髓細(xì)胞。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體的分散。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。低滲處理極為重要,低滲不夠,則染色體聚在一起,分散不好。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。取前肢2:剪開肌肉,順著關(guān)節(jié)外圍剪開。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把
14、所有材料中的骨髓沖出為止。在物種進(jìn)化、作物育種、性別鑒定、基因定位以及癌癥和遺傳性疾病的診斷中,有時(shí)需要制備染色體標(biāo)本。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。取出載玻片,緩緩倒去低滲液,用吸管將固定液II(無水乙醇:冰醋酸=1:2)自載玻片的一端緩慢滴下形成水幕,固定3-4次,直立載玻片空氣干燥。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。
15、取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。取前肢2:剪開肌肉,順著關(guān)節(jié)外圍剪開。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。在干凈的培養(yǎng)皿中放入兩垛蓋玻片(每垛3片),將固定并充分干燥的載玻片有細(xì)胞的一面向下,放置于蓋玻片上,將Giemsa染料用吸管注入載玻片和培養(yǎng)皿底的間隙中,扣染20-30分鐘。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。在載玻片上滴1滴蒸餾水,然后滴加2滴第2步獲得的骨髓細(xì)胞懸液。1每組同學(xué)取
16、前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。18-20下靜置,低滲處理20-30分鐘。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染色體標(biāo)本的制備取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。牛蛙稱重,按每克體重2 g的劑量腹腔注射秋水仙堿溶液(用065生理鹽水配制)。在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。動(dòng)物的骨髓中存在大量活躍的進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞,是染色體制備的理想材料
17、。取前肢2:剪開肌肉,順著關(guān)節(jié)外圍剪開。畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。取骨髓前,為什么要給牛蛙注射秋水仙素?65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)
18、胞沖洗到10ml離心管中。18-20下靜置,低滲處理20-30分鐘。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體的分散。65生理鹽水,取帶針頭的注射器,吸入1 ml 0.將骨髓沖出物中大塊白色脂肪組織用針頭挑出棄去。在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體的分散。動(dòng)物的藥物處理(課前已經(jīng)完成)此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出
19、為止。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。65生理鹽水,取帶針頭的注射器,吸入1 ml 0.輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。骨髓染色體標(biāo)本的制備成敗決定于取材,若抽取的骨髓太少或太稀,細(xì)胞數(shù)目過少,不易獲得較多的中期分裂相。取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。牛蛙稱重,
20、按每克體重2 g的劑量腹腔注射秋水仙堿溶液(用065生理鹽水配制)。取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。動(dòng)物的骨髓中存在大量活躍的進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞,是染色體制備的理想材料。取骨髓前,為什么要給牛蛙注射秋水仙素?骨髓染色體標(biāo)本的制備成敗決定于取材,若抽取的骨髓太少或太稀,細(xì)胞數(shù)目過少,不易獲得較多的中期分裂相。取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。2在小燒杯中加入3 ml的0.收集骨髓細(xì)胞,低滲處理,使細(xì)胞質(zhì)膜破裂,以利染色體的分散。取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。取后肢3:剪開后的
21、后腿關(guān)節(jié)。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。在物種進(jìn)化、作物育種、性別鑒定、基因定位以及癌癥和遺傳性疾病的診斷中,有時(shí)需要制備染色體標(biāo)本。低滲處理極為重要,低滲不夠,則染色體聚在一起,分散不好。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。取后肢2:用剪刀順著關(guān)節(jié)外圍剪開。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。在物種進(jìn)化、作物育種、性別鑒定、基因定位以及癌癥和遺傳性疾病的診斷中,有時(shí)需要制備染色體標(biāo)本。輕輕晃動(dòng)載玻片,使液體混勻,并在載玻片上鋪展開。65生理鹽水,將針頭沿
22、骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。不使用油鏡的情況下不需要蓋玻片。取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。畫出兩個(gè)好的分裂相的顯微圖。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取
23、出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。取前肢2:剪開肌肉,順著關(guān)節(jié)外圍剪開。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。低滲處理極為重要,低滲不夠,則染色體聚在一起,分散不好。剪去骨兩端膨大部的半透明軟骨,程度以剛剛露出骨髓組織為宜。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。此3ml的生理鹽水要反復(fù)使用,直到把所有材料中的骨髓沖出為止。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。取前肢2:剪開肌肉,順
24、著關(guān)節(jié)外圍剪開。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入骨中,緩慢推動(dòng)注射器活塞,將骨髓細(xì)胞沖洗到10ml離心管中。取后肢3:剪開后的后腿關(guān)節(jié)。取前肢1:找到關(guān)節(jié)所在。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。在培養(yǎng)皿中放入兩根竹簽,將滴有骨髓細(xì)胞的載玻片放在竹簽上,緩慢向培養(yǎng)皿中加入固定液I(無水乙醇:冰醋酸:蒸餾水=1:2:3)室溫下利用揮發(fā)的蒸汽固定100-120min。細(xì)胞經(jīng)固定后,于預(yù)冷的載玻片上滴片,使染色體散開,再用姬姆薩染色,便可以制成染色體標(biāo)本。畫圖里用鉛筆,對(duì)照著顯微鏡視野來畫,不要畫“想象圖”。在物種進(jìn)化、作物育種、性別鑒定、基因定位以及癌癥和遺傳性疾病的診斷中,有時(shí)需要制備染色體標(biāo)本。5-4小時(shí),雙毀髓法處死牛蛙。1每組同學(xué)取前肢、后肢各一,取出肱骨、股骨和脛腓骨等長骨。太過,則造成細(xì)胞破碎,染色體丟失。65生理鹽水,將針頭沿骨的長軸方向從骨的一端刺入
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