心血管疾病動物模型模型建立培訓(xùn)課件

1、心血管疾病動物模型模型建立心血管疾病動物模型模型建立 人和實(shí)驗(yàn)動物在解剖、生理及代謝方面的相似點(diǎn)動 物相 似 點(diǎn)小鼠老齡肝變化大鼠脾臟，老齡胰變化，老齡脾變化兔脾臟血管，脾臟，免疫，神經(jīng)分布，鼓膜張肌豚鼠脾臟、免疫貓脾臟血管，蝶骨竇，表皮，鎖骨，硬膜外，脂肪分布，鼓膜張肌狗垂體血管，腎動脈，脾臟，脾臟血管，蝶骨竇，腎臟血管，肝臟，表皮，核酸代謝，腎上腺神經(jīng)分布，精神變化豬心血管分支，紅細(xì)胞成熟，視網(wǎng)膜血管，胃腸道，肝臟，牙齒，腎上腺，皮膚，雄性尿道綿羊脾臟血管，汗腺山羊靜脈管靈長類腦血管，腸循環(huán)（猩猩），胎盤循環(huán)，胰管，牙齒，腎上腺，神經(jīng)分布，核酸代謝，坐骨區(qū)（新世界猴），腦（大猩猩），生殖行

2、為，胎盤，精子牛升結(jié)腸馬肺血管，胰管，肝臟 心血管疾病動物模型模型建立2 人和實(shí)驗(yàn)動物在解剖、生理及代謝方面的相似點(diǎn)動 物相 似 一、高血脂及動脈粥樣硬化癥動物模型二、高血壓動物模型三、心肌梗死動物模型四、心力衰竭動物模型五、心率失常動物模型六、休克動物模型心血管疾病動物模型模型建立3一、高血脂及動脈粥樣硬化癥動物模型心血管疾病動物模型模型建立高血脂脂肪代謝或運(yùn)轉(zhuǎn)異常使血漿一種或多種脂質(zhì)高于正常稱為高血脂癥。高血脂癥是一種全身性疾病，指血中總膽固醇(TC)和/或甘油三酯(TG)過高或高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)過低，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱之為血脂異常。脂質(zhì)不溶或微溶于水，必須與蛋白質(zhì)結(jié)合以脂蛋白形式存

3、在，因此，高血脂癥通常也稱為高脂蛋白血癥心血管疾病動物模型模型建立4高血脂脂肪代謝或運(yùn)轉(zhuǎn)異常使血漿一種或多種脂質(zhì)高于正常稱為高血動脈粥樣硬化動脈粥樣硬化是動脈硬化的一種，大、中動脈內(nèi)膜出現(xiàn)含膽固醇、類脂肪等的黃色物質(zhì)，多由脂肪代謝紊亂、神經(jīng)血管功能失調(diào)引起。常導(dǎo)致血栓形成、供血障礙等。 動脈粥樣硬化多見于40歲以上的男性和絕經(jīng)期后的女性。本病常伴有高血壓、高膽固醇血癥或糖尿病等。腦力勞動者較多見，對人民健康危害甚大，為老年人主要病死原因之一。 心血管疾病動物模型模型建立5動脈粥樣硬化動脈粥樣硬化是動脈硬化的一種，大、中動脈內(nèi)膜出現(xiàn)一、高血脂及動脈粥樣硬化癥動物模型1.高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥

4、樣硬化癥模型2.非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型心血管疾病動物模型模型建立6一、高血脂及動脈粥樣硬化癥動物模型1.高脂飼料誘發(fā)高血脂及動高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模機(jī)制：動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時間后，其主動脈及冠狀動脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥。高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥-甲基硫氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶可進(jìn)一步加速病變的形成。 心血管疾病動物模型模型建立7高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型心血管疾病動物模型模型造模方法: 1.小型豬： 選用Gottigen系小型豬較為理想，用12高脂食物飼喂

5、6個月即可形成動脈粥樣硬化病變。 評價：形成動脈粥樣硬化病變特點(diǎn)及分布都與人類近似。 2.猴： 選用3.510.5kg，36歲的恒河猴飼喂高脂飼料(50麥粉、8玉米粉、8麥麩、1膽固醇、8蛋黃、8豬油、17白糖及適量的小蘇打和食鹽)。1個月后造成猴的實(shí)驗(yàn)性高血脂癥。血清膽固醇較正常時升高3.13.2倍。 評價：猴的膽固醇代謝、血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相似，是較理想的模型。 心血管疾病動物模型模型建立8造模方法: 心血管疾病動物模型模型建立8 3. 兔： 選用2kg左右體重，每天膽固醇0.3g，4個月后形成主動脈粥樣硬化斑塊；劑量增至0.5g，3個月出現(xiàn)斑塊；增至1.0g，可縮為2個月。在飼

6、料中加人15蛋黃粉、0.5膽固醇和5%豬油，3周后，將膽固醇減去再喂3周，可使斑塊發(fā)生率達(dá)100，血清膽固醇可升高至2000mg。 評價：對喂飼膽固醇非常敏感，在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變。因?yàn)橥脤ν庠葱阅懝檀嫉奈章士筛哌_(dá)7590，對高血脂的清除能力低(靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)34天)。 但兔作模型不夠理想，主要表現(xiàn)為血源性泡沫細(xì)胞增多，且病變分布與人的病變也有差異。心血管疾病動物模型模型建立9 3. 兔：心血管疾病動物模型模型建立9 4.大鼠： 配方一飼料(1-4膽固醇、10豬油，0.2%甲基硫氧嘧啶、89-86基礎(chǔ)飼料)，喂服710天?？尚纬筛吣懝檀佳Y。 配方二飼料(10蛋黃粉、

7、5豬油、0.5膽鹽、85基礎(chǔ)飼料)，喂服7天可形成高膽固醇血癥。 評價：飼養(yǎng)方便、抵抗力強(qiáng)、食性與人相近。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變，較易形成血栓。心血管疾病動物模型模型建立10 4.大鼠：心血管疾病動物模型模型建立10 5.小鼠： 雄性小鼠飼以1膽固醇及10豬油的高脂飼料，7天后血清膽固醇即升為34315mg；若在飼料中再加入0.3的膽酸，連飼7天，血清膽固醇可高達(dá)53036mg 評價：容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點(diǎn)，但是取血不便，難做動態(tài)觀察，所以較少采用。心血管疾病動物模型模型建立11 5.小鼠：心血管疾病動物模型模型建立11 6.雞： 48周的萊克亨雞，在飼料中

8、加入1-2膽固醇或15蛋黃粉，再加510豬油，經(jīng)過610周，血膽固醇即升至1000mg4000mg，胸主動脈斑塊發(fā)生率達(dá)100。 評價：雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。病變發(fā)生較快，在斑塊中有時伴有鈣化和形成潰瘍。心血管疾病動物模型模型建立12 6.雞：心血管疾病動物模型模型建立12非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型 造模方法: 1.免疫法： 將大鼠主動脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇、脂蛋白及甘油三酯升高。給兔注射馬血清10ml/kg/次，共4次，每次間隔17天。 評價: 動脈內(nèi)膜損傷率為88，冠狀動脈亦有粥樣硬化的病變，若同時給予高膽固醇飼料，病變更加明

9、顯。心血管疾病動物模型模型建立13非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型心血管疾病動物模型模型 2.兒茶酚胺法： 給兔靜脈滴注去甲腎上腺素lmg/24h，時間為30min。一種方法是先滴15min，休息5min后再滴15min。另一種方法是每次點(diǎn)滴5min和休息5min，反復(fù)6次。 評價: 持續(xù)兩周，均可引起主動脈病變，呈現(xiàn)血管壁中層弱性纖維拉長、劈裂或斷裂，病變中出現(xiàn)壞死及鈣化。心血管疾病動物模型模型建立14 2.兒茶酚胺法：心血管疾病動物模型模型建立14 3.半胱氨酸法： 給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天2025mg/kg(以5葡萄糖溶液配成lmg/ml的濃度)，連續(xù)2025天。 評價

10、： 成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型病變。冠狀動脈管腔變窄、動脈壁內(nèi)膜肌細(xì)胞增生、纖維狀異物質(zhì)。如同時在飲料中加入20的膽固醇，則出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變。心血管疾病動物模型模型建立15 3.半胱氨酸法：心血管疾病動物模型模型建立15 4.表面活化劑法： 給大鼠腹腔注射Troton WRl339 300mg/kg體重。 評價: 給藥9h后可使血清膽固醇升高34倍；20h后雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的3-4倍，而雌性大鼠卻為6倍左右。用藥后24h左右升脂作用達(dá)最高點(diǎn)，48h左右恢復(fù)正常。其中以甘油三酯升高最強(qiáng)，其次是磷脂、游離膽固醇，對膽固醇酯沒有影響。心血管疾病動物模型模型建立16 4

11、.表面活化劑法：心血管疾病動物模型模型建立16高血壓是一種以動脈血壓持續(xù)升高為主要表現(xiàn)的慢性疾病，常引起心、腦、腎等重要器官的病變并出現(xiàn)相應(yīng)的后果，是人類死亡和致殘的主要危險因素。根據(jù)血壓升高的不同，高血壓分為3級：1級高血壓（輕度） 收縮壓140159mmHg；舒張壓9099mmHg。2級高血壓（中度） 收縮壓160179mmHg；舒張壓100109mmHg。3級高血壓（重度）收縮壓180mmHg；舒張壓110mmHg。 心血管疾病動物模型模型建立17高血壓是一種以動脈血壓持續(xù)升高為主要表現(xiàn)的慢性疾病，常引起心二、高血壓動物模型1、神經(jīng)源性高血壓動物模型2、應(yīng)激性高血壓動物模型3、腎性高血壓

12、動物模型心血管疾病動物模型模型建立18二、高血壓動物模型1、神經(jīng)源性高血壓動物模型心血管疾病動物模1、神經(jīng)源性高血壓動物模型方法：在影像成像技術(shù)指導(dǎo)下利用球囊固定法，在延髓左側(cè)腹外側(cè)舌咽神經(jīng)、迷走神經(jīng)根入腦干區(qū)(REZ)形成神經(jīng)血管壓迫來建立了犬神經(jīng)源性高血壓動物模型。本動物模型為高血壓的病因研究提供了接近生理狀態(tài)的動物模型。但是需要先進(jìn)的設(shè)備和技術(shù)。心血管疾病動物模型模型建立191、神經(jīng)源性高血壓動物模型心血管疾病動物模型模型建立192、應(yīng)激性高血壓動物模型方法：采用電、聲波等慢性刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)可引起動物高級神經(jīng)活動高度緊張，導(dǎo)致血壓明顯升高。噪音、冷刺激、熱刺激等等。心血管疾病動物模型模

13、型建立202、應(yīng)激性高血壓動物模型心血管疾病動物模型模型建立203、腎性高血壓動物模型方法： 兩腎一夾法用絲線或銀夾狹窄左側(cè)腎動脈，狹窄程度在50一80之間，此方法復(fù)制率高，術(shù)后2周血壓開始升高，至45周可形成穩(wěn)定高血壓，并長期維持下去。心血管疾病動物模型模型建立213、腎性高血壓動物模型心血管疾病動物模型模型建立21 腎源性高血壓在高血壓的發(fā)病中占有比例相當(dāng)高，且腎素血管緊張素系統(tǒng)的激活引發(fā)高血壓中的發(fā)病機(jī)制已得到舉世公認(rèn)。實(shí)驗(yàn)性腎動脈狹窄，能非常相似地復(fù)制出高血壓模型，為臨床高血壓的研究奠定了基礎(chǔ)。心血管疾病動物模型模型建立22 腎源性高血壓在高血壓的發(fā)病中占有比例相當(dāng)高，且腎素血管心肌梗

14、塞是由冠狀動脈粥樣硬化引起血栓形成、冠狀動脈的分支堵塞，使一部分心肌失去血液供應(yīng)而壞死的病癥。多發(fā)生于中年以后。發(fā)病時有劇烈而持久的性質(zhì)類似心絞痛的前胸痛、心悸、氣喘、脈搏微弱、血壓降低等癥狀，發(fā)病后應(yīng)立即進(jìn)行監(jiān)護(hù)救治 心血管疾病動物模型模型建立23心肌梗塞是由冠狀動脈粥樣硬化引起血栓形成、冠狀動脈的分支堵塞三、心肌梗死動物模型1、結(jié)扎冠狀動脈法2、介入法3、化學(xué)法4、人工培育的自發(fā)性冠狀動脈硬化模型心血管疾病動物模型模型建立24三、心肌梗死動物模型1、結(jié)扎冠狀動脈法心血管疾病動物模型模型1、結(jié)扎冠狀動脈法方法：在開胸直視下分離冠狀動脈，結(jié)扎點(diǎn)一般選擇在冠狀動脈左前降支 （LAD）第一對角支下

15、方。優(yōu)點(diǎn)：（1）有助于對結(jié)扎點(diǎn)的識別； （2）同時又可保證不同動物間具有相同的梗塞部位，梗塞面積較大； （3）人類心肌梗死50發(fā)生于左前降支供血區(qū)域。缺點(diǎn)：（1）手術(shù)復(fù)雜，創(chuàng)傷大，對動物影響大； （2）沒有血脂升高，冠狀動脈粥硬化病變；心血管疾病動物模型模型建立251、結(jié)扎冠狀動脈法方法：在開胸直視下分離冠狀動脈，結(jié)扎點(diǎn)一般2、介入法方法：應(yīng)用帶球囊導(dǎo)管經(jīng)頸內(nèi)動脈插入犬主動脈根部冠脈起始部水平，擴(kuò)張球囊完全封閉主動脈，然后經(jīng)導(dǎo)管迅速注入混有不同直徑微球的混懸液，可以使微球隨心臟搏動進(jìn)入冠狀動脈 優(yōu)點(diǎn)：與結(jié)扎法相比，創(chuàng)傷小。 缺點(diǎn)：技術(shù)要求高，動物容易死。心血管疾病動物模型模型建立262、介入法

16、方法：應(yīng)用帶球囊導(dǎo)管經(jīng)頸內(nèi)動脈插入犬主動脈根部冠脈3、化學(xué)法 方法：對兔、鼠等小動物應(yīng)用異丙腎上腺素靜脈滴注或腹腔注射，靜滴一般取異丙腎上腺素加入500 mL生理鹽水，4h 內(nèi)兔耳緣靜脈勻速滴入，分別為1mgkg體重、10mgkg體重、20mg/kg體重、30mgkg體重；腹腔注入給藥分上、下午兩次，直接注入腹腔，劑量分別為10mgkg和20mgkg，即可以造成明顯的心肌損害，完成模型復(fù)制。優(yōu)點(diǎn)：簡單方便。缺點(diǎn)：此法復(fù)制模型對冠狀動脈選擇性差，引起心肌彌漫性損傷，而且以心內(nèi)膜下病變?yōu)橹?，與人類疾病差異大。 心血管疾病動物模型模型建立273、化學(xué)法 方法：對兔、鼠等小動物應(yīng)用異丙腎上腺素靜脈滴注

17、或心血管疾病動物模型模型建立培訓(xùn)課件心力衰竭心力衰竭又稱“心肌衰竭”，是指心臟當(dāng)時不能搏出同靜脈回流及身體組織代謝所需相稱的血液供應(yīng)。往往由各種疾病引起心肌收縮能力減弱，從而使心臟的血液輸出量減少，不足以滿足機(jī)體的需要，并由此產(chǎn)生一系列癥狀和體征。 心血管疾病動物模型模型建立29心力衰竭心力衰竭又稱“心肌衰竭”，是指心臟當(dāng)時不能搏出同靜脈四、心力衰竭動物模型造模方法: 手術(shù)法 (1)手術(shù)方法造成主動脈狹窄； (2)手術(shù)方法造成肺動脈狹窄； (3)手術(shù)方法造成房間隔缺損、主動脈與前腔靜脈相通等評價: 手術(shù)方法在3周左右即能形成穩(wěn)定的心衰，與臨床心衰十分相似，便于研究藥物干預(yù)的病理模型。心血管疾病

18、動物模型模型建立30四、心力衰竭動物模型造模方法: 評價: 心血管疾病動物模型模心率失常是指心臟沖動的起源部位、心搏頻率和節(jié)律以及沖動傳導(dǎo)的任一異常?？捎筛鞣N氣質(zhì)性心血管病、藥物中毒、電解質(zhì)和酸堿平衡失調(diào)等因素引起，部分心率失常也可因植物神經(jīng)功能紊亂所致。 臨床上按心率失常發(fā)作時心率的快慢分為快速性和緩慢性心率失常兩大類，前者見于過早搏動、心動過速、心房顫動和心室顫動等；后者以竇性緩慢性心率失常和各種傳導(dǎo)阻滯為常見。 心血管疾病動物模型模型建立31心率失常是指心臟沖動的起源部位、心搏頻率和節(jié)律以及沖動傳導(dǎo)的五、心率失常動物模型1.靜脈注射烏頭堿誘發(fā)大鼠心率失常模型2.甲醛誘發(fā)家兔竇性心律不齊模

19、型3.無水乙醇誘發(fā)犬房室傳導(dǎo)阻滯模型心血管疾病動物模型模型建立32五、心率失常動物模型1.靜脈注射烏頭堿誘發(fā)大鼠心率失常模型心 造模方法：1.靜脈注射烏頭堿誘發(fā)大鼠心率失常模型 體重200g大鼠，用3%戊巴比妥鈉（30mg/kg）腹腔注射麻醉，仰臥，安裝心電導(dǎo)聯(lián)，記錄正常心電圖。經(jīng)舌下靜脈一次注入烏頭堿30g/kg。機(jī)制：烏頭堿能加速心肌細(xì)胞鈉離子內(nèi)流，促進(jìn)細(xì)胞膜除極，誘發(fā)心在異位節(jié)律，導(dǎo)致心律失常。 評價：（1）模型為急性實(shí)驗(yàn)，沒有心臟形態(tài)改變； （2）可用于抗心律失常藥物的實(shí)驗(yàn)研究。心血管疾病動物模型模型建立33 造模方法： 評價：（1）模型為急性實(shí)驗(yàn)，沒有心 造模方法：2.甲醛誘發(fā)家兔竇

20、性心律不齊模型機(jī)制：竇房結(jié)部位淺表，當(dāng)其表面接觸甲醛后，對組織造成損害，對竇房結(jié)功能起到抑制作用。 方法：成年雄兔，用10%水合氯醛500mg/kg耳緣靜脈注射麻醉，仰臥，安裝心電導(dǎo)聯(lián)，記錄正常心電圖。常規(guī)打開胸腔，暴露心臟，用少量40%甲醛于前腔靜脈根部與右心房交界處，1 min即出現(xiàn)心電圖改變，可持續(xù)5h。 評價：本模型屬于緩慢型心律失常模型，與臨床竇綜合癥有一些類似。模型較穩(wěn)定，重復(fù)性好，可用于藥物篩選。心血管疾病動物模型模型建立34 造模方法： 方法：成年雄兔，用10%水合氯醛500m 造模方法：3.無水乙醇誘發(fā)犬房室傳導(dǎo)阻滯模型機(jī)制：在犬心臟房室結(jié)部位注射一定量的無水乙醇可損害心臟傳

21、導(dǎo)組織，從而造成傳導(dǎo)阻滯。方法：15kg左右的犬，呼吸麻醉機(jī)麻醉，仰臥固定，安裝心電圖裝置。常規(guī)打開胸腔，暴露心臟，用普通注射器將無水乙醇注入房室結(jié)。評價：模型損傷小，動物較易耐受，成功率高。心血管疾病動物模型模型建立35 造模方法：評價：模型損傷小，動物較易耐受，成功率高。休克系各種強(qiáng)烈致病因素作用于機(jī)體，使循環(huán)功能急劇減退，組織器官微循環(huán)灌流嚴(yán)重不足，以至重要生命器官機(jī)能、代謝嚴(yán)重障礙的全身危重病理過程。休克是一急性的綜合征。在這種狀態(tài)下，全身有效血流量減少，微循環(huán)出現(xiàn)障礙，導(dǎo)致重要的生命器官缺血缺氧。即是身體器官需氧量與得氧量失調(diào)。 可分為：心源性、感染性、低血容量性、過敏性、神經(jīng)源性休克等。 心血管疾病動物模型模型建立36休克系各種強(qiáng)烈致病因素作用于機(jī)體，使循環(huán)功能急劇減退，組織器六、休克動物模型1、