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1、支原體專題知識(shí)講座第一節(jié) 概述定義缺乏細(xì)胞壁形態(tài)上呈高度多形性能通過(guò)除菌濾器在無(wú)生命培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)繁殖最小的原核細(xì)胞型微生物能形成有分支的長(zhǎng)絲,故稱支原體 2支原體專題知識(shí)講座柔膜體綱支原體目肺炎支原體,人型支原體,生殖支原體,穿透支原體,發(fā)酵支原體,梨支原體脲脲原體支原體分類支原體科無(wú)膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬3支原體專題知識(shí)講座一、生物學(xué)性狀(一)形態(tài) 0.30.5 m、無(wú)細(xì)胞壁 高度多形性:球、桿、絲狀和分枝狀等 一般Giemsa染色較好,染為淡紫色 4支原體專題知識(shí)講座(二)結(jié)構(gòu) 內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類,中層為脂類(磷脂為主),凡作用于膽固醇的物質(zhì),如皂素、毛地黃甙、二性霉素B
2、等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。 特殊的頂端結(jié)構(gòu): 粘附宿主上皮 細(xì)胞表面,與支原 體的致病有關(guān)。5支原體專題知識(shí)講座(三)培養(yǎng)特性 營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基: 10%20%人或動(dòng)物血清(膽固醇與其 它長(zhǎng)鏈脂肪酸),多數(shù)還需添加酵母浸液、組 織浸液、核酸提取物和輔酶。 pH:適宜7.68.0(7.0易死亡),但解脲脲 原體最適pH5.56.5 兼性厭氧: 繁殖方式多樣:二分裂繁殖外,還有分節(jié)、斷 裂、出芽或分枝等方式6支原體專題知識(shí)講座固體培養(yǎng)基: 27天典型的“荷包蛋樣”菌落:低倍鏡下見(jiàn)菌落呈圓形,心致密隆起,深入瓊脂,外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基: 清亮,用顏色變化單位(CCU)表示。需用放大鏡/低倍顯微
3、鏡觀察7支原體專題知識(shí)講座支原體典型菌落8支原體專題知識(shí)講座 鑒別點(diǎn) 支原體 細(xì)菌L型細(xì)胞壁缺失原因 在遺傳上與細(xì)菌無(wú)關(guān) 與原菌相關(guān),可以回復(fù)細(xì)胞膜 含高濃度固醇 細(xì)胞膜不含固醇 培養(yǎng)特性 需要膽固醇 大多需要高滲培養(yǎng) 菌落大小 生長(zhǎng)慢,菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液體培養(yǎng) 液體培養(yǎng)混濁度極低 有一定混濁度,可附壁支原體與細(xì)菌L型的異同點(diǎn) 不同點(diǎn)缺乏細(xì)胞壁,形態(tài)多樣,能通過(guò)濾菌器。固體培養(yǎng)菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等 相同點(diǎn)9支原體專題知識(shí)講座 支原體 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附細(xì)胞 致病性 肺炎支原體 + 紅細(xì)胞 肺炎、支氣管炎人型支原體
4、+ 泌尿生殖道感染生殖器支原體 + 泌尿生殖道感染穿透支原體 + + 紅細(xì)胞 條件感染 CD4+T細(xì)胞 多見(jiàn)于艾滋病 巨噬細(xì)胞 溶脲脲原體 + 泌尿生殖道感染 流產(chǎn)及不孕不育 生化反應(yīng)10支原體專題知識(shí)講座(四)抗原結(jié)構(gòu) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可檢測(cè)糖脂類抗原 ELISA試驗(yàn)可檢測(cè)蛋白質(zhì)類抗 血清抗體可用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)(GIT)和代謝抑制試驗(yàn)(MIT)以鑒定11支原體專題知識(shí)講座(五)抵抗力 對(duì)化學(xué)消毒劑敏感,對(duì)結(jié)晶紫、 醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力; 對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青 霉素類天然耐受,但對(duì)干擾蛋白 質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素、交 沙霉素等敏感。12支原體專題知識(shí)講座二、致病性與免疫性(一)致病機(jī)制
5、 莢膜或微莢膜:抗吞噬作用 毒性代謝產(chǎn)物:神經(jīng)毒素等均能引起宿主黏膜上皮細(xì)胞或紅細(xì)胞的病理?yè)p傷 超抗原:免疫調(diào)節(jié) 其它:如穿透支原體粘附侵入CD4 T細(xì)胞引起損傷 粘附素:粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細(xì)胞13支原體專題知識(shí)講座(三)免疫性 體液免疫:抗膜蛋白的抗體包括 IgM、IgG和SIgA 細(xì)胞免疫:主要是特異性CD4Th1 細(xì)胞分泌細(xì)胞因子 二、致病性與免疫性15支原體專題知識(shí)講座0.20.3m,高度多形性,如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀;初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中,一般10天左右長(zhǎng)出菌落;多次傳代后生長(zhǎng)加快,菌落呈“油煎蛋”狀;能發(fā)酵葡萄糖,不能利用精氨酸與尿素;對(duì)
6、美藍(lán)、醋酸鉈、青霉素不敏感。第二節(jié) 主要致病性支原體 肺炎支原體一、生物學(xué)性狀16支原體專題知識(shí)講座(一)致病性 1.主要經(jīng)飛沫傳播,但大多數(shù)發(fā)生于夏 末秋初,515歲青少年發(fā)病率最高。 2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu):使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原體具有超抗原作用,能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子(如TNF-、IL-1、IL-6)引起組織損傷。二、致病性與免疫性17支原體專題知識(shí)講座(二)所致疾病 原發(fā)性非典型性肺炎,臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主,有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。二、致病性與免疫性18支原體專題知識(shí)講座(三)免疫性 血清特異性IgM、
7、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞; 呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用; 出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng),促使哮喘病急性發(fā)作 19支原體專題知識(shí)講座三、微生物學(xué)檢查法(二)血清學(xué)檢查 冷凝集試驗(yàn): 即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合,4過(guò)夜時(shí)可發(fā)生凝集,而在37時(shí)這種凝集又分散解離開(kāi),但僅50左右的患者才出現(xiàn) 陽(yáng)性。此反應(yīng)為非特異性。 快速診斷 ELISA:檢測(cè)P1和P30蛋白mAbs PCR:從痰標(biāo)本中檢測(cè)16S rRNA或 P1蛋白基因20支原體專題知識(shí)講座大環(huán)內(nèi)酯類藥物:羅紅霉素、阿奇霉素 喹諾酮類藥物:氧氟沙星四、防治原則21支原體專題知識(shí)講座解脲脲原體形態(tài)
8、:0.50.3 m,單個(gè)或成雙排列固體培養(yǎng):48 h后長(zhǎng)出直徑1530 m “油煎蛋”狀菌落。最適pH為5.56.5。生化反應(yīng):分解尿素,不分解糖類和精氨酸抵抗力:對(duì)1:2000醋酸鉈不敏感抗原:MB抗原是其主要膜抗原,將解脲脲原 體分為A、B兩大群,14個(gè)血清型一、生物學(xué)性狀22支原體專題知識(shí)講座二、致病性與免疫性 (二)所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病,還與自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和男性不孕有關(guān)。23支原體專題知識(shí)講座核酸檢測(cè) PCR檢測(cè): 檢測(cè)尿素酶基因、多帶抗原(MB-Ag)基因和16S rRNA基因。此法快速、特異,適宜于大批量標(biāo)本檢測(cè)。三、微生物學(xué)檢查法24支
9、原體專題知識(shí)講座加強(qiáng)宣傳教育,注意性衛(wèi)生,切斷傳播途徑。四環(huán)素類、喹諾酮類藥物治療,但有耐藥株產(chǎn)生。四、防治原則25支原體專題知識(shí)講座 人型支原體-分解精氨酸,不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.27.4。固體培養(yǎng)基上形成200300 m的較大菌落,呈典型的“油煎蛋”狀。-寄居于泌尿生殖道,通過(guò)性接觸傳播,可引起附睪炎、盆腔炎、產(chǎn)褥熱等。-微生物學(xué)檢測(cè)和防治原則同解脲脲原體。人型支原體對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素不敏感,對(duì)1:2000醋酸鉈與紅霉素(100 mg/L)不敏感。26支原體專題知識(shí)講座 生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀,能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基變酸,不分解尿素和精氨酸。-培養(yǎng)基上不生長(zhǎng),須在無(wú)醋酸鉈SP-4培養(yǎng)基生長(zhǎng)但緩慢,菌落呈典型的“油煎蛋”狀。-頂端結(jié)構(gòu)有粘附素MgPa,140 kDa,與肺炎支原,能粘附在人泌尿生殖道上皮,主要引起尿道炎。-較難培養(yǎng),生長(zhǎng)慢,不適宜于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室最好的診斷方法是核酸檢測(cè)。27支原體專題知識(shí)講座穿透支原體 1991年Lo首次從1例艾滋病患者尿中分離出一種新支原體,其形態(tài)為
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