滅菌制劑與無菌制劑

關于滅菌制劑與無菌制劑第1頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五教學內(nèi)容

第一節(jié)概述

第二節(jié)滅菌制劑與無菌制劑的相關技術和理論

第三節(jié)注射劑

第四節(jié)輸液

第五節(jié)注射用無菌粉末

第六節(jié)眼用制劑第2頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五第一節(jié)概述一、滅菌制劑與無菌制劑的定義和類型滅菌制劑：指采用某一物理、化學方法殺滅或除去所有活的微生物的一類藥物制劑。無菌制劑：采用某一無菌操作方法或技術制備的不含任何活的微生物的一類藥物制劑。第3頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

3、滅菌制劑和無菌制劑的分類注射用制劑：注射劑、輸液、注射粉針等；眼用制劑：滴眼劑、眼用膜劑、軟膏劑、凝膠劑等；植入型制劑：植入片等；局部用外用制劑：潰瘍、燒傷及外傷用溶液、軟膏劑、氣霧劑等。手術用制劑：止血海綿劑和骨蠟等。第4頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五二、滅菌制劑與無菌制劑的質量要求無菌無熱原靜脈注射、脊椎腔注射、一次用量超過5ml的注射劑可見異物和不溶性微粒，應符合藥典規(guī)定。安全性非水溶劑和附加劑，須經(jīng)動物實驗證實無刺激性和毒性滲透壓等滲和等張pH與血液和組織相近穩(wěn)定性物理、化學和生物穩(wěn)定性降壓物質須符合規(guī)定第5頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五第二節(jié)滅菌制劑與無菌制劑

的相關技術和理論一、水處理技術概述制藥用水包括：飲用水、純化水、注射用水及注射用水各種水的來源和質量要求原水不能直接用于制藥飲用水用于藥材的漂洗、制藥用具的粗洗純化水用作配制普通制劑的溶劑或試驗用水、滅菌或非滅菌制劑所用藥材的提取溶劑、非滅菌制劑用器具的精洗。注射用水又稱重蒸餾水滅菌注射用水無菌五熱原?？芍苯佑糜谂R床。第6頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五三、原水處理技術初濾和精濾石英砂濾、活性炭濾器及細過濾器而成的過濾器。電滲析法常用于原水處理。除去帶電荷的某些離子或雜質，對不帶電荷的物質除去能力差。常用于離子交換前的水處理。第7頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五依據(jù)：在電場作用下離子定向遷移及交換膜的選擇性透過當原水含鹽量高達3000mg/L時，不宜采用離子交換法制備純化水，但電滲析法仍適用。它不用酸堿處理，較離子交換法經(jīng)濟。電滲析法常用于原水預處理，供離子交換法使用，以減輕離子交換樹脂的負擔。陰極陽離子膜淡水區(qū)陰離子膜陽極濃水區(qū)+——+++————++濃水區(qū)第8頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

③反滲透法什么是反滲透？反滲透的結果是使水從濃溶液中分離出來有機物的排除率與其分子量有關，分子量大于300的化合物幾乎全部除盡，故可除去熱原。

除去有機物微粒、膠體物質和微生物的原理，一般認為是機械過篩作用。耗能低、水質好、設備使用語保養(yǎng)方便第9頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五離子交換法：利用陽、陰離子樹脂可以除去絕大部分陽、陰離子，對熱原、細菌也有一定的清除作用。優(yōu)點：水質化學純度高，所需設備簡單，耗能小，成本低。對熱原、細菌也有一定的去除作用。缺點：除熱原效果不可靠，樹脂需定期更換或再生。離子交換法制得的離子交換水主要供蒸餾法制備注射用水使用，也可用于洗瓶，但不得用來配制注射液。陽離子交換樹脂：氫型：RSO3-H+鈉型（穩(wěn)定）Na+

陰離子交換樹脂：氫氧型：RN+(CH3)3OH-氯型（穩(wěn)定）：Cl-陽床脫氣塔（CO2）陰床混合床第10頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

大型離子設備圖第11頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五1.蒸餾法制備注射有水最經(jīng)典的方法。（1）蒸餾水器種類：塔式和亭式蒸餾水器、多效蒸餾水器和氣壓式蒸餾水器。構成：蒸發(fā)鍋（塔）、隔沫裝置和冷凝器缺點：耗能高，

效率低。

基本被淘汰。四、注射用水的制備技術第12頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

②多效蒸餾水機特點：耗能低、產(chǎn)量高、質量優(yōu)。③氣壓式蒸餾水器它是以輸入部分外界能量而將低溫熱能轉化為高溫熱能的原理來生產(chǎn)蒸餾水。第13頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五2.反滲透法(reverseosmosis)

一般情況下，一級反滲透裝置能除去一價離子90-95%，二價離子98-99%，同時能除去微生物和病毒，但除去氯離子的能力達不到藥典要求；二級反滲透裝置能徹底除去氯離子。第14頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

3、綜合法制備注射用水自來水

砂濾過器活性碳過濾器細濾過器電滲析裝置（或反滲透裝置）陽離子樹脂床脫氣塔陰離子樹脂床混合樹脂床蒸餾水機熱貯水器80C注射用水第15頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五4.注射用水的收集保存2009年GMP規(guī)定采用70℃保溫循環(huán)。注射用水的貯藏和輸送系統(tǒng)的清潔：80℃以上的注射用水在系統(tǒng)中循環(huán)0.5h以上，并同時開啟各用水點及排放閥門3次以上，每次15s，一周一次。5.注射用水的檢查第16頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五二、液體的過濾技術（一）過濾是利用過濾介質截留液體中混懸的固體顆粒而達到固液分離的操作。（二）過濾機制與影響因素過濾機制介質過濾和濾餅過濾介質過濾過濾作用：依靠截介質的攔截作用過濾方式：表面過濾→顆粒被截留在介質表面上

深層過濾→顆粒被截留在介質孔道內(nèi)第17頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五濾餅過濾過濾時，固體粒子聚集在過濾介質表面形成濾餅。濾餅：起攔截作用過濾介質：支撐濾餅的作用目標物：濾餅層或濾液第18頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五影響過濾的因素過濾速度：單位時間通過單位面積的濾液量。V=Pπr4t/8L影響濾速（v＝V/t）的因素：P↑，v↑；r↓，v↓；↑，v↓；L↑，v↓增加濾速的方法：介質上方加壓或介質下方減壓；升溫；預濾；使雜質顆粒變粗等。第19頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（三）過濾器和過濾裝置根據(jù)所施加的外加力分為重力過濾器、真空過濾器、壓力過濾器根據(jù)操作方式分為間歇和連續(xù)過濾器根據(jù)過濾介質分為砂濾棒、垂熔玻璃、微孔濾膜、板框過濾器等。①砂濾棒(硅藻土濾棒和多孔素瓷濾棒)特點：適于低粘度藥液；價廉易得，但易脫砂，對藥液的吸附性強，難清洗，適用于大生產(chǎn)中的脫炭。第20頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五②垂熔玻璃濾器(垂熔玻璃漏斗、濾器和濾棒)

使用完畢用水抽洗，并以1%-2%硝酸鈉硫酸液浸泡處理。

③微孔濾膜過濾器理化性質：熱穩(wěn)定性和化學性能穩(wěn)定。膜材質：：醋酸纖維濾膜、硝酸纖維濾膜、聚酰胺濾膜、聚四氟乙烯濾膜等用途：注射劑精濾和除菌過濾優(yōu)點：孔徑小，截留能力強；孔徑大小均勻，不易泄漏；濾速快；濾膜無介質的遷移；無交叉污染。缺點：易堵塞，有些濾膜化學性質不理想。規(guī)格：孔徑0.220.450.8μm應用：一般注射液的過濾：0.65~0.8μm

除菌過濾0.22μm第21頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五其他過濾器如超濾裝置、鈦濾器、多孔聚乙烯燒管過濾器等。在注射液生產(chǎn)中，一般采用二級過濾：

預濾(砂濾棒、垂熔玻璃漏斗、板框式壓濾機或預濾膜)→精濾(濾膜)。第22頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五板框式壓濾機(多用于注射劑預濾)面積大，截留量多，可用于粘性大、濾餅可壓縮的各種物料的過濾，特別適用于含少量微粒的待濾液，在注射劑生產(chǎn)中多用于預濾，缺點是裝配和清洗麻煩，容易滴漏。第23頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（四）常見的過濾方式高位靜壓過濾適用于生產(chǎn)量不大、缺乏加壓或減壓設備的情況。壓力穩(wěn)定濾速慢減壓過濾過濾介質下部減壓的操作，稱抽濾加壓過濾壓力穩(wěn)定、濾速快、質量好、產(chǎn)量高，多用于藥廠大量生產(chǎn)。第24頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五1.熱原熱原（pyrogens）：注射后能引起人體特殊致熱反應的物質，是微生物產(chǎn)生的一種內(nèi)毒素。

產(chǎn)生來源：大多數(shù)細菌（革蘭氏陰性桿菌致熱能力最強）、霉菌、病毒。

組成：熱原=內(nèi)毒素（endotoxin）=脂多糖(lipopolysaccharide)、磷脂、蛋白質

致熱反應：產(chǎn)生發(fā)冷、寒戰(zhàn)、體溫升高、惡心嘔吐等不良反應，有時體溫可升至40℃，嚴重者出現(xiàn)昏迷、虛脫，甚至有生命危險。三、熱原的去除技術第25頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五2.熱原的性質(1)耐熱性

60℃1h無影響，100℃不降解，180℃3～4h、200℃60min、250℃30-45min或650℃1min可使熱原徹底破壞。在通常注射劑的熱壓滅菌中不易被破壞。(2)濾過性體積1～5nm之間，一般濾器均不可通過，但活性炭可以吸附熱原。(3)吸附性多孔性活性炭可吸附熱原(4)水溶性磷脂結構上連接有多糖，熱原可溶。(5)不揮發(fā)性熱原本身不揮發(fā)，但在蒸餾時，可隨水蒸汽霧滴帶入蒸餾水。（6）其它能被強酸強堿、強氧化劑、某些表面活性劑、超聲波破壞。第26頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五3.熱原的主要污染途徑(1)注射用水：是熱原污染的主要來源(蒸餾器結構不合理，操作不當，注射用水貯藏時間過長都會污染熱原。)；(2)原輔料,如葡萄糖因貯存年久包裝損壞致污染熱原。(3)由于室內(nèi)衛(wèi)生條件差，操作時間長，裝置不密閉，均增加污染細菌的機會，而可能產(chǎn)生熱原；(4)從容器、用具、管道和裝置等帶入，因此在生產(chǎn)中對這些容器用具等物要認真處理，合格后方能使用。(5)有時輸液本身不含熱原，但仍發(fā)現(xiàn)熱原反應。這往往是由于輸液器具(如輸液吊瓶、膠皮管等)污染所致。第27頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五4.熱原的去除方法1.高溫法：根據(jù)熱原的熱不穩(wěn)定性。對于注射用的針筒或其他玻璃器皿，在洗滌干燥后，于250℃加熱30分鐘以上，可以破壞熱原2.酸堿法：玻璃容器、用具還可用重鉻酸鉀硫酸清潔液或稀氫氧化鈉處理，可將熱原破壞3.吸附法：常用的吸附劑有活性炭，活性炭對熱原有較強的吸附作用，同時有助濾脫色作用，故在注射劑中使用較廣。常用量0.1%～0.5%;還可用活性炭與白陶土合用除去熱原4.蒸餾法利用熱原的不揮發(fā)性。第28頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五5.離子交換法：可靠性不強。國內(nèi)有用#301弱堿性陰離子交換樹脂10%與#122弱酸性陽離子交換樹脂8%成功地除去丙種胎盤球蛋白注射液中的熱原.6.凝膠過濾法：國內(nèi)有用二乙氨基乙基葡聚糖凝膠(分子篩)制備無熱原去離子水7.反滲透法：通過三醋酸纖維膜除去熱原.我國該技術還不成熟，只能用于原水處理。8.超濾法；3.0～15nm超濾膜。9.其他方法如二次以上濕熱滅菌，或適當提高滅菌溫度和時間，以及微波等。第29頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五四、滲透壓調節(jié)技術

1.等滲與等張的概念

(1)等滲溶液(isoosmoticsolution)：系指與血漿滲透壓相等的溶液，屬于物理化學概念。注入機體內(nèi)的液體一般要求等滲，否則易產(chǎn)生刺激性或溶血等。

低滲溶液——紅細胞破裂，溶血現(xiàn)象高滲溶液——紅細胞萎縮肌內(nèi)注射可耐受0.5～3個等滲度的溶液，靜脈輸液要求等滲，脊髓腔內(nèi)注射必須調節(jié)至等滲。

第30頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

(2)等張溶液(isotonicsolution)：系指滲透壓與紅細胞膜張力相等的溶液，屬于生物學概念。在等張溶液中既不會發(fā)生紅細胞體積改變，更不會發(fā)生溶血。等滲溶液不一定等張，等張溶液不一定等滲。在新產(chǎn)品的試制中，即使所配的溶液為等滲溶液，為了安全用藥，亦應進行溶血試驗，必要時加入氯化鈉、葡萄糖等調節(jié)成等張溶液。

第31頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五2.滲透壓的調節(jié)方法常用的滲透壓調節(jié)方法：冰點降低數(shù)據(jù)法和氯化鈉等滲當量法。(1)冰點降低數(shù)據(jù)法

一般情況下，血漿冰點值為-0.52℃，根據(jù)物理化學原理，任何溶液的冰點降到-0.52℃，即與血漿等滲。

W=(0.52-a)/b

式中，W為配制等滲溶液需加入等滲調節(jié)劑的百分含量；

a為藥物溶液的冰點下降度數(shù)；

b為用以調節(jié)的等滲劑1%溶液的冰點下降度數(shù)。第32頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五例1配制2%的鹽酸普魯卡因溶液100ml，用氯化鈉調節(jié)等滲，求所需氯化鈉的加入量。

查表可知，2%的鹽酸普魯卡因溶液的冰點下降度數(shù)a=0.12×2=0.24℃；1%氯化鈉溶液的冰點下降度數(shù)b=0.58℃，代入上式得：

W=(0.52-0.24)/0.58=0.48%

即配制2%的鹽酸普魯卡因溶液100ml，需加入氯化鈉0.48g調節(jié)等滲。第33頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五例3下列處方欲制成等滲溶液需加多少NaCl?氯霉素20gNaCl適量注射用水加至1000ml(已知：1%（g/ml）氯霉素水溶液的冰點下降值為0.06℃)第34頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五例4配制2％鹽酸普魯卡因溶液500ml,用氯化鈉調節(jié)等滲，求所需氯化鈉的加入量。（已知1％普魯卡因溶液的冰點下降度為0.12℃）第35頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五例5配制含2％鹽酸普魯卡因和1％利多卡因溶液500ml,用氯化鈉調節(jié)等滲，求所需氯化鈉的加入量。（已知1％普魯卡因溶液的冰點下降度為0.12℃，1％利多卡因溶液的冰點下降度為0.15℃）第36頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

(2)氯化鈉等滲當量法

系指與1g藥物呈等滲的氯化鈉質量。

例配制2%的鹽酸麻黃堿溶液200ml，欲使其等滲，求需加入的氯化鈉或葡萄糖的量。

查表可知，1g鹽酸麻黃堿的氯化鈉等滲當量0.28；無水葡萄糖的氯化鈉等滲當量0.18，則：

氯化鈉的量=（0.9-0.28×2）×200/100=0.68g

葡萄糖的量=0.68/0.18=3.78g,

或=(5%/0.9%)×0.68=3.78g

即配制2%的的鹽酸麻黃堿溶液200ml，需加入氯化鈉0.68g或無水葡萄糖3.78g調節(jié)等滲。第37頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五例1已知1％普魯卡因溶液的氯化鈉等滲當量為0.18，配制2％普魯卡因溶液500ml,需加入多少克氯化鈉？（1g鹽酸普魯卡因=0.18gNaCl，0.9%NaCl=血漿滲透壓）

w=(0.92*0.18)*500/100=(0.90.36)*5

第38頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五基本概念：

滅菌與無菌制劑：主要是指直接注入體內(nèi)或直接接觸創(chuàng)傷面、粘膜等的一類制劑。

滅菌(sterilization)：應用物理或化學等方法殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽孢的手段。無菌(sterility)：指在任一指定的物體、介質或環(huán)境中，不得存在任何活的微生物。五、滅菌與無菌技術第39頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五無菌操作法(aseptictechnique)：指在整個操作過程中利用或控制一定的條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一種操作方法或技術。

防腐(antisepsis)：用物理或化學方法抑制微生物的生長與繁殖的手段，亦稱抑菌。對微生物的生長與繁殖具有抑制作用的物質稱防腐劑或抑菌劑。消毒(disinfection)：用物理或化學方法殺滅或除去病原微生物的手段。對病原微生物具有殺滅或除去作用的物質消毒劑。第40頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五熱力滅菌法包括干熱和濕熱滅菌法。

1）、干熱滅菌法（熟悉）

火焰滅菌法：指用火焰直接灼燒滅菌的方法。適用范圍：此法滅菌迅速、可靠、簡便，適用于耐火焰材質(如金屬、玻璃及瓷器等)的物品與用具，不適合于藥物的滅菌。（一）物理滅菌法第41頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五干熱空氣滅菌法：指用高溫干熱空氣滅菌的方法。(1)干熱滅菌條件：一般規(guī)定為160-170℃，2-4h；170-180℃，1h以上或250℃滅菌45min（從滅菌物品全達到特定溫度后開始計時）。(2)適用范圍：耐高溫的玻璃和金屬制品以及不允許濕氣穿透的油脂類(如油性軟膏基質、注射用油等)和耐高溫的粉末化學藥品等的滅菌。(3)缺點：在干燥狀態(tài)下，熱穿透力弱，溫度不易均勻，由于滅菌溫度過高，不適用橡膠、塑料及大部分藥品。

第42頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五2）、濕熱滅菌法定義：指用在高溫高濕環(huán)境中滅菌的方法。如，利用飽和蒸汽、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法。優(yōu)點：由于蒸氣比熱大，穿透力強，容易使蛋白變性，同時還有滅菌效率高，操作簡便等優(yōu)點，濕熱滅菌法是應用最廣泛的一種滅菌方法。類別：包括熱壓滅菌法、流通蒸氣滅菌法、煮沸滅菌法和低溫間歇滅菌等方法，根據(jù)藥品性質進行選用合適的方法。第43頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（1）熱壓滅菌法（掌握）

定義：指用高壓飽和水蒸汽加熱殺滅微生物的方法。本法一般公認為最可靠的濕熱滅菌法。滅菌條件：熱壓滅菌所需的溫度及與溫度相當?shù)膲毫皶r間如下:

1)116℃，1.7atm(67kPa，7.1kg/cm2)，40min；2)121℃，2.0atm(97kPa，11kg/cm2)，30min；3)126℃，2.4atm(139kPa，14.1kg/cm2)，15min。

適用范圍：耐高溫和耐高壓蒸氣的所有藥物制劑、玻璃和金屬容器、瓷器、橡皮塞、濾膜過濾器等。第44頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（2）流通蒸氣滅菌法定義：指在常壓下，采用100℃流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法。滅菌條件：常壓下（1.0atm），100℃流通蒸氣，時間30-60min。

適用范圍：用于消毒及不耐高熱制劑的滅菌。

缺點：不能保證殺滅所有的芽孢，如破傷風等厭氣性菌的芽孢，是非可靠的滅菌法。一般作為不耐熱無菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。

制備過程中要盡可能避免污染，這點必須充分注意。目前我國藥廠生產(chǎn)注射劑，特別是1-2ml注射劑及不耐高熱的品種，可考慮采用這種滅菌法。第45頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（3）煮沸滅菌法定義：指將待滅菌物置沸水中加熱滅菌的方法。滅菌條件：沸水，時間30-60min。適用范圍：常用于安瓿、注射器、注射針頭等器皿的消毒。缺點：此法滅菌效果差，必要時加入抑菌劑，如三氯叔丁醇、甲酚等。第46頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（4）低溫間歇滅菌法定義：指將待滅菌物置60-80℃的水或流通蒸汽中加熱60min，殺滅微生物繁殖體后，在室溫條件下放置24h，讓待滅菌物中的芽孢發(fā)育成繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復多次，直至殺滅所有芽孢。適用范圍：適合于不耐高溫、熱敏感物料和制劑。缺點：費時、工效低、滅菌效果低。加適量抑菌劑，以增加滅菌效力。應用本法滅菌的制劑或藥品，除本身具有抑菌能力者外，須加適量抑菌劑，以增加滅菌效力。第47頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五5）影響濕熱滅菌的因素1)微生物的種類和數(shù)量：芽孢＞繁殖體＞衰老體每個容器的細菌數(shù)，控制在10個以內(nèi)為宜；最初菌數(shù)愈少，達到滅菌時間愈短。整個生產(chǎn)過程應盡可能避免微生物污染，盡可能縮短生產(chǎn)過程，并力求在灌封后立即菌。2)蒸氣性質：蒸氣有飽和、濕飽和、過熱三種。。。第48頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五3)滅菌時間與溫度：滅菌溫度增高，化學反應速度增加；滅菌時間愈長，起反應的藥物愈多。因此，滅菌需要考慮殺死細菌和保證藥物有效性兩個方面。在能達到滅菌的前提下，盡可能降低滅菌溫度和縮短滅菌時間。4)介質pH：藥液pH對細菌的活性也有影響：一般微生物在中性液中耐熱性最大，在堿性溶液中次之，酸性不利于微生物的發(fā)育。所以，一般在生物堿鹽類的注射液，因pH較低，用流通蒸氣滅菌即可。第49頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五定義：指采用過濾法除去微生物的方法。即藥物溶液通過無菌的除菌過濾器，除去活的或死的微生物而得到不含微生物的濾液。屬于機械除菌方法。濾膜的材質分親水性和疏水性兩種，根據(jù)過濾物品的性質及過濾目的來選材質。適用范圍：適于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水等物品的滅菌。2、過濾除菌第50頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五定義：采用輻射、微波和紫外線殺滅微生物和芽孢的方法。（1）紫外線滅菌法定義：采用紫外線（能量）照射殺滅微生物和芽孢的方法。屬于表面滅菌。滅菌條件：一般用于滅菌的紫外線波長是200-300nm，滅菌力最強的是波長為254nm的紫外線。適用范圍：紫外線進行直線傳播，其強度與距離平方成比例地減弱，并可被不同的表面反射。適合于照射物表面滅菌、無菌室空氣及蒸餾水的滅菌；不適合于藥液的滅菌及固體物料深部的滅菌。3、射線滅菌法第51頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五普通玻璃可吸收紫外線，因此安瓿中藥物不能用此法滅菌。紫外線對人體如照射過久，能產(chǎn)生結合膜炎及皮膚燒灼等現(xiàn)象。一般均在操作前開啟紫外線燈約半小時至一小時，然后進行操作。第52頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（2）微波滅菌法定義：系采用微波(頻率為300MHz-300kMHz)照射產(chǎn)生的熱能殺滅微生物和芽孢的方法。適用范圍：適合于液體和固體物料，對固體物料具有干燥作用。特點：微波能穿透到介質和物料的深部，表里加熱一致，且具有低溫、常壓、高效、快速(2-3min)、低能耗、無污染、易操作、易維護，產(chǎn)品保質期長(可延長1/3以上)等。第53頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五（3）輻射滅菌法

定義：系采用放射性同位素(60Co和137Cs)放射的射線殺滅微生物和芽孢的方法。適用范圍：適合于熱敏物料和制劑，常用于維生素、抗生素、激素、生物制品、中藥材和中藥制劑、醫(yī)療器械、藥用包裝材料及藥用高分子材料等物質的滅菌。特點：不升高產(chǎn)品溫度，穿透力強，滅菌效率高，但設備貴，有潛在危險性，對某些藥物(特別是溶液型)可能產(chǎn)生藥效降低或產(chǎn)生毒性物質和發(fā)熱物質等。第54頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五定義：是指用化學藥品直接作用于微生物而將其殺滅的方法，同時不應損害制品的質量。殺菌劑：對微生物具有觸殺作用的化學藥品。分為氣體殺菌劑和液體殺菌劑。不能殺死芽孢，僅對繁殖體有效。影響殺菌效果的因素：微生物的種類與數(shù)量、物體表面狀況、殺菌劑的性質。。化學殺菌的目的：減少微生物的數(shù)目以控制一定的無菌狀態(tài)。常用的方法：（1）氣體滅菌法和（2）藥液滅菌法。（二）化學滅菌法第55頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五(1)氣體滅菌法

定義：指采用氣態(tài)殺菌劑進行滅菌的方法。適用范圍：適合環(huán)境消毒以及不耐加熱滅菌的醫(yī)用器具、設備和設施等的消毒，粉末注射劑。應注意殺菌劑的殘留量和與藥物的相互作用。品種：環(huán)氧乙烷、甲醛、過氧乙酸等第56頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五1)環(huán)氧乙烷性質：沸點10.9℃，室溫下為氣體，水中溶解度為1ml水中可溶195ml(20℃，760mmHg)，易穿透塑料，紙板及固體粉末。暴露于空氣中，環(huán)氧乙烷就可從這些物質消散，對大多數(shù)固體呈惰性。殺菌作用：由于其為烷化劑的性質，使菌體蛋白的-COOH、-NH2、-SH、-OH的H，被-CH2-CH2-OH所取代，從而變性失活。第57頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五適用范圍：可用于塑料容器、對熱敏感的固體藥物、紙或塑料包裝的藥物、橡膠制品、注射筒、注射針頭、衣著敷料及器械等的滅菌。但是，一些塑料、皮革及橡膠與環(huán)氧乙烷有強親和力，故需長達12-24h通空氣驅除。環(huán)氧乙烷具可燃可爆，用時需用惰性氣體二氧化碳或氟利昂稀釋。環(huán)氧乙烷的吸入毒性較大，與氨相近，但無氨樣的剌激嗅味，損害皮膚及眼粘膜，可產(chǎn)生水泡或結膜炎，故應用時要注意。第58頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五2)甲醛

加熱熏蒸甲醛溶液，每立方米空間用40％甲醛溶液30m1，室內(nèi)相對濕度宜高，以增進甲醛氣體滅菌效果。3)丙二醇

丙二醇用于室內(nèi)空氣滅菌具有不揮發(fā)性和無引火性等特點，滅菌用量為1ml/m3。4)乳酸

滅菌用量為2ml/m3，殺菌力不及甲醛，但對人無害。5)過氧乙酸

過氧乙酸用于車間滅菌，效力比相同濃度的甲醛大兩倍半，對粘膜，眼部無剌激性，對木制品、金屬制品、醫(yī)療器械均無影響。第59頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五(2)藥液滅菌法定義：指采用殺菌劑溶液進行滅菌的方法。適用范圍：常應用于其他滅菌法的輔助措施，適合于皮膚、無菌器具和設備的消毒。常用品種：0.1％-0.2％新潔爾滅溶液、75％乙醇、1％聚維酮碘溶液、酚或煤酚皂溶液等。使用注意：由于化學殺菌劑常施用于物體表面，也要注意其濃度不要過高，以防其化學腐蝕作用。

第60頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五定義：指整個過程控制在無菌條件下進行的一種操作方法，該方法在技術上并非滅菌操作。適用范圍：適用于一些不耐熱藥物的注射劑、眼用制劑、皮試液、海綿劑和創(chuàng)傷制劑的制備。避箘操作：盡量避免微生物污染。（三）無菌操作法第61頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五(1)無菌操作室的滅菌無菌操作室的滅菌采用滅菌和除菌相結合的方式流動空氣：采用過濾介質除菌法靜止環(huán)境空氣：采用氣體和液體滅菌法、紫外線空氣滅菌法。甲醛溶液加熱熏蒸法氣體滅菌法之一紫外線滅菌法用于間歇和連續(xù)操作過程。液體滅菌法輔助滅菌方法臭氧滅菌法

《GMP驗證指南》推薦的方法。特點：1.不增加消毒設備；2.可使臭氧迅速擴散到每個角落；3.殺滅空氣凈化系統(tǒng)滋生的霉菌；4.滅菌時間短、操作簡便、效果好。第62頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五(2)無菌操作無菌操作場所：①無菌操作室②層流潔凈工作臺③無菌操作柜無菌操作室要求達到100級空氣凈化的條件。無菌操作所用的一切用具、材料以及環(huán)境均需按前述滅菌法滅菌。操作人員進入操作之前要洗澡并換上已經(jīng)滅菌的工作服和清潔的鞋子，不使頭發(fā)等露出來，以免造成污染機會。第63頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五(3)無菌檢查藥劑或藥品經(jīng)滅菌或無菌操作法處理后，需經(jīng)無菌檢驗證實已無微生物生存，方能使用。滅菌效果，應以殺死芽孢為標準(細菌的芽孢具有較強的抗熱力，不易殺死)。法定的無菌檢查法：包括試管接種法和薄膜過濾法。第64頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五滅菌效力？主要原因：①滅菌溫度多是測量滅菌器內(nèi)的溫度，不是滅菌物體內(nèi)的溫度；②無菌檢驗方法也在局限性，難以用現(xiàn)行的無菌檢驗法檢出微量的微生物。

（四）滅菌效力的檢查方法和F0值第65頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

1、D值（單位：時間）D值：在一定溫度下殺死被滅菌物品中90％微生物所需的滅菌時間；也可定義為降低微生物一個十位數(shù)或一個對數(shù)值（如log100降低到log10）所需的時間。殺滅微生物速度-時間過程符合一級動力學過程：

dN/dt=-kt，即lgNt=lgN0-kt/2.303

令D=2.303/k＝t/（lgN0-lgNt）

當lgN0-lgNt＝lg100-lg10＝1時，D=t/(lg100-lg10)

D值因待滅微生物的種類、藥液的配方及性質、用作生物指示劑的微生物種類；微生物所接觸的表面的性質、滅菌工序（如溫度）等不同而各異。

第66頁，共73頁，2022年，5月20日，7點11分，星期五

2、Z值（單位溫度）Z值：為D值降低一個對數(shù)值所需升高的溫度數(shù)，即滅菌時間減少到原來的1/10時所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅90%的微生物所需要提高的溫度。滅菌溫度升高，速度常數(shù)k值增大，D值減少。

Z=(T2-T1)/(lgD2-lgD1)即D2/D1=10(T2-T1)/Z

當lgD2-lgD1＝1時，即Z＝T2-T1在不同溫度下對特定的微生物在特定介質或環(huán)境中求得