《生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)大綱

I04．課程代碼：34300205．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課程06．課程性質(zhì)：必修07．課程學(xué)時：6408．課程學(xué)分：209．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、藥物制劑、制藥工程、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)生物化學(xué)是研究生命的化學(xué)，是生物學(xué)科的重要專業(yè)基礎(chǔ)課，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)在整個生物化學(xué)教學(xué)中占有十分重要的地位。通過實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)，使學(xué)生了解和掌握生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本方法和技術(shù)，了解生物大分子（蛋白質(zhì)、糖、核酸等）的分離、制備、純化、分析和鑒定等技術(shù)，具備初步的知識應(yīng)用和科學(xué)研究能力。10.2教學(xué)要求從培養(yǎng)學(xué)生綜合實(shí)驗(yàn)技能的角度考慮，將本實(shí)驗(yàn)設(shè)定成綜合性大實(shí)驗(yàn)，由于涉及的學(xué)科知識比較廣泛，所需實(shí)驗(yàn)儀器比較復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)時間較長，處理因素多，因此課前充分的準(zhǔn)備工作是實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行和獲得真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要保證。這就要求學(xué)生在課前必須按照實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)要求認(rèn)真預(yù)習(xí)和準(zhǔn)備，實(shí)驗(yàn)過程中認(rèn)真掌握所需儀器的使用、所需實(shí)驗(yàn)技術(shù)的操作原理和方法。在實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)中應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，有序進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)格按照規(guī)定程序操作，全面觀察，準(zhǔn)確如實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，做好善后工作，清潔整理實(shí)驗(yàn)器具并清點(diǎn)歸還，經(jīng)指導(dǎo)教師檢查無誤后方可離開實(shí)驗(yàn)室；及時整理實(shí)驗(yàn)記錄和數(shù)據(jù)，按要求認(rèn)真獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)報告，并按時提交；積極參加課后討論。10.3教學(xué)目的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)作為生命科學(xué)研究的主要方法和技術(shù)，為其它學(xué)科的學(xué)習(xí)打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，同時在生命科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐方面也有較大的應(yīng)用價值。為此，加強(qiáng)綜合型實(shí)驗(yàn)的比例，減少了一般型(驗(yàn)證型)實(shí)驗(yàn)，按常規(guī)生化儀器的使用、生物活性物質(zhì)的測定、生物大分子分離制備技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、分光光度技術(shù)和生化分析技術(shù)等幾大系列進(jìn)行優(yōu)化和整合，使學(xué)生掌握組織制備、離心、層析、電泳和分光光度法等基本生化技術(shù)，掌握氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸、酶、定量分析及分離提純方法。強(qiáng)化學(xué)生基本實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練，強(qiáng)化綜合能力的培養(yǎng)。通過生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生熟練掌握所需儀器的使用、所需實(shí)驗(yàn)技術(shù)的操作原理和方法，鍛煉學(xué)生的動手能力和分析問題解決問題的能力，培養(yǎng)學(xué)生合作精神，有利于對學(xué)生實(shí)踐能力、綜合素質(zhì)和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰νㄟ^本課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生進(jìn)一步了解生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本原理，掌握生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本技能和方法，使學(xué)生熟練掌握掌握酶的分離、制備、純化、分析鑒定方法；通過蛋白質(zhì)的提取、含量測定及氨基酸組成分析，掌握蛋白質(zhì)分級、透析等技術(shù)；掌握Folin－酚法測蛋白濃度和柱層析（離子交換層析和分子篩層析）法純化蛋白質(zhì)等技術(shù)；掌握蛋白電泳技術(shù)；學(xué)會相關(guān)儀器設(shè)備的操作，培養(yǎng)學(xué)生動手能力和科學(xué)的思維能力，提高學(xué)生的創(chuàng)新意識、合作精神和解決實(shí)際問題的能力。培養(yǎng)學(xué)生學(xué)會正確地觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象、記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果、分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、撰寫實(shí)驗(yàn)報告的能力。在提高學(xué)生動手能力的同時，培養(yǎng)學(xué)生具有初步解決問題的能力。12．開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300201啤酒酵母蔗糖酶的提取、分離純化、性質(zhì)鑒定及反應(yīng)動力學(xué)綜合性必做51220060334300202親和層析法純化胰蛋白酶綜合性選做8219990334300203酶譜分析技術(shù)分析纖維素酶綜合性選做8220030334300204大豆蛋白的提取與含量測定綜合性選做8220100334300205DNS-Cl法測定蛋白質(zhì)及肽的N末端氨基酸綜合性選做8220050334300206細(xì)胞色素C的制備及測定綜合性選做8220090334300207氯化鈉的稱量和乙醇的移取驗(yàn)證性必做1120120434300208發(fā)酵液的離心分離驗(yàn)證性必做1120120434300209鉻酸鉀溶液吸光度的測定驗(yàn)證性必做1120120434300210DEAE52纖維素離子交換柱的制備驗(yàn)證性選做3220120434300211G75葡聚糖凝膠柱的制備驗(yàn)證性選做3220120434300212SDS-聚丙烯酰胺凝膠的制備驗(yàn)證性選做2220120434300213常用試劑及溶液（緩沖液）的配制驗(yàn)證性選做1120120434300214電泳凝膠的條帶分析驗(yàn)證性選做1420120434300215測定未知鉻酸鉀溶液的溶度驗(yàn)證性選做1120120434300216高效液相法測定中藥中有效成分的含量驗(yàn)證性選做2420120434300217氣相色譜法測定中藥活性成分的含量驗(yàn)證性選做2420120434300218紅外光譜分析化合物的組成結(jié)構(gòu)驗(yàn)證性選做2420120434300219酶與輔酶的純化與鑒定設(shè)計性選做2120130334300220蛋白質(zhì)類的純化與鑒定設(shè)計性選做21201303注：設(shè)計性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中，學(xué)生可以任選其一。啤酒酵母蔗糖酶的提取、分離純化、性質(zhì)鑒定及反應(yīng)動力學(xué)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括啤酒酵母蔗糖酶的提取及分離純化，考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白濃度，紫外分光光度法測定蛋白濃度，蔗糖酶活力測定，SDS電泳法測定蔗糖酶純度和相對分子質(zhì)量，用正交試驗(yàn)法測定幾種因素對蔗糖酶活性的影響，蔗糖酶米氏常數(shù)Km、最大反應(yīng)速度Vmax和抑制劑常數(shù)Ki的測定，測定并計算不同底物濃度時的反應(yīng)速率，反應(yīng)速率對底物濃度作圖，再用1/V對1/S作圖，計算出Km。親和層析法純化胰蛋白酶。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容為從豬胰臟的粗提液中分離純化胰蛋白酶。采用雞卵類黏蛋白作為配基合成親和吸附劑，從豬胰臟的粗提液中，通過親和層析直接獲得純度很高的豬胰蛋白酶。酶譜分析技術(shù)分析纖維素酶。酶譜技術(shù)是把纖維素酶的底物與丙烯酰胺共凝聚，經(jīng)過SDS電泳或者非變性PAGE電泳后，將凝膠放于酶作用的緩沖液之中，通過酶對凝膠中底物的催化反應(yīng)，從而檢測出樣品中的酶的催化作用，酶系、同工酶的分布、相對分子質(zhì)量、亞基的數(shù)量等技術(shù)指標(biāo)。大豆蛋白的提取與含量測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容為對大豆粉進(jìn)行水、堿兩步提??；分別采用Folin-酚法、微量凱氏定氮法、雙縮脲法測定兩步提取液提取的蛋白濃度；雙向紙層析法分析大豆蛋白的氨基酸組成。DNS-Cl法測定蛋白質(zhì)及肽的N末端氨基酸。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容為水解氨基酸，采用熒光試劑二甲氨基萘磺酰氯(DNS—Cl)在堿性條件下與氨基酸(肽或蛋白質(zhì))的氨基結(jié)合成帶有熒光的DNS—氨基酸(DNS—肽或DNS—蛋白質(zhì))，DNS—肽或DNS—蛋白質(zhì)進(jìn)行測定。采用聚酰胺薄膜層析法進(jìn)行分離和鑒定后，進(jìn)行定性及定量測定，識別蛋白質(zhì)的自由N末端氨基酸。細(xì)胞色素C的制備及測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容為以新鮮豬心為原料，經(jīng)過酸溶液抽取，人造沸石吸附及三氯乙酸沉淀得到細(xì)胞色素C粗品，然后再用離子交換層析法將粗品純化。采用分光光度法測定細(xì)胞色素C含量，用測壓法測定其生物活性。氯化鈉的稱量和乙醇的移取。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解稱量和微量移液技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，掌握固體稱量與液體量取的要點(diǎn)和方法。發(fā)酵液的離心分離。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解離心技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，學(xué)會液體離心的注意事項(xiàng)和操作方法。鉻酸鉀溶液吸光度的測定。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解光譜技術(shù)（Uvmini-1240紫外可見分光光度計）的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，學(xué)會測定樣品吸光度的操作方法。DEAE52纖維素離子交換柱的制備。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解離子交換層析技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，掌握如何制備DEAE52纖維素離子交換柱。G75葡聚糖凝膠柱的制備。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解凝膠過濾層析技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，掌握如何制備G75葡聚糖凝膠柱。SDS-聚丙烯酰胺凝膠的制備。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，學(xué)會制備SDS-聚丙烯酰胺凝膠。常用試劑及溶液（緩沖液）的配制。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解常用試劑及溶液（緩沖液）的配制方法，能夠熟練配置各種試劑。電泳凝膠的條帶分析。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解凝膠成像技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，學(xué)會對電泳凝膠進(jìn)行分析。測定未知鉻酸鉀溶液的溶度。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線制作技術(shù)，掌握未知濃度樣品的測定方法。高效液相法測定中藥中有效成分的含量。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解高效液相色譜技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，學(xué)會測定中藥有效成分含量的方法。氣相色譜法測定中藥活性成分的含量。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解氣相色譜技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，學(xué)會測定中藥活性成分含量的方法。紅外光譜分析化合物的組成結(jié)構(gòu)。主要內(nèi)容為學(xué)習(xí)并了解紅外光譜技術(shù)的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，掌握通過紅外譜圖分析化合物的結(jié)構(gòu)。酶與輔酶的純化與鑒定。主要內(nèi)容為通過利用已學(xué)過的理論、方法（含查資料獲得的新知識）,以動植物組織、發(fā)酵菌體等為原料，分離純化酶與輔酶，并進(jìn)行性質(zhì)鑒定。蛋白質(zhì)類的純化與鑒定。主要內(nèi)容為結(jié)合已學(xué)過的知識，根據(jù)蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)、分子大小與形狀、溶解性質(zhì)及其與配體親和性等特性，分離純化某一特定蛋白質(zhì)，并對其性質(zhì)進(jìn)行分析鑒定。13.實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅱ(第三版)，科學(xué)出版社，2008年2）滕利榮等，生命科學(xué)儀器實(shí)用技術(shù)教程，科學(xué)出版社，2008年3）周俊宜等，分子生物學(xué)基本技能與策略，科學(xué)出版社，2003年4）王鏡巖等，生物化學(xué)（第三版），高等教育出版社，2003年5）朱厚礎(chǔ)等譯，蛋白質(zhì)純化與鑒定實(shí)驗(yàn)指南，科學(xué)出版社

，1999年6）張龍翔等，生化實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)，高等教育出版社，1997年7）汪家政等，蛋白質(zhì)技術(shù)手冊，科學(xué)出版社，2000年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，40%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人鄭良玉教授呂紹武副教授王磊副教授閆國棟工程師16．制定日期2013102017．審核人滕利榮教授18．審核日期2013112019．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）”》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）”》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131130生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)Ⅱ（343003）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)Ⅱ04．課程代碼：34300305．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課06．課程性質(zhì)：必修07．課程學(xué)時：3208．課程學(xué)分：109．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門專業(yè)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的必修課，本教學(xué)大綱是根據(jù)生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物藥學(xué)、藥物制劑等專業(yè)人才的培養(yǎng)目標(biāo)所需要的基本理論和基本技能的要求制定的。本課程的任務(wù)是通過教學(xué)過程，使學(xué)生掌握常規(guī)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)和方法，培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)際操作能力、分析解決問題的能力、開拓創(chuàng)新思維的能力、實(shí)驗(yàn)設(shè)計的思維方法、以及規(guī)范書寫實(shí)驗(yàn)報告等知識。為學(xué)生進(jìn)一步學(xué)習(xí)，掌握復(fù)雜的綜合性的生物化學(xué)技術(shù)，畢業(yè)論文的撰寫、從事生物化學(xué)和相關(guān)學(xué)科的教學(xué)、研究與生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。10.2教學(xué)要求通過教學(xué)過程加深學(xué)生對生物化學(xué)基本原理的理解，要求同學(xué)熟悉并掌握基本生化技術(shù)，掌握生物大分子的分離純化、性質(zhì)表征、代謝調(diào)控等相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)中應(yīng)遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，有序進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)格按照規(guī)定程序操作，全面觀察，準(zhǔn)確如實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，做好善后工作，清潔整理實(shí)驗(yàn)器具并清點(diǎn)歸還，經(jīng)指導(dǎo)教師檢查無誤后方可離開實(shí)驗(yàn)室；及時整理實(shí)驗(yàn)記錄和數(shù)據(jù)，按要求認(rèn)真獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)報告，并按時提交；積極參加課后討論。10.3教學(xué)目的使學(xué)生了解并掌握生物大分子的分離和純化的相關(guān)知識和技能，為專業(yè)課的學(xué)習(xí)和專業(yè)技能的培訓(xùn)奠定良好的基礎(chǔ)，并通過嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)要求和管理，培養(yǎng)學(xué)生具有初步的科學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰皣?yán)格的科研作風(fēng)，同時驗(yàn)證生化的某些基本理論知識，加深感性認(rèn)識。另外，進(jìn)行一定比例的綜合性、設(shè)計性實(shí)驗(yàn)，將實(shí)驗(yàn)理論和實(shí)驗(yàn)技能融為一體，從而培養(yǎng)學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)思想、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)技能和綜合應(yīng)用能力；引導(dǎo)學(xué)生將所學(xué)的知識和技能用于今后的社會實(shí)踐，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的態(tài)度、創(chuàng)新的思維方法及團(tuán)結(jié)合作精神，使學(xué)生成為求是、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的專門人才。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?1.1熟練掌握以下各項(xiàng)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本技能各種常用玻璃儀器的洗滌和使用；滴管、移液管、微量加樣器的使用；離心機(jī)、分光光度計、紫外檢測系統(tǒng)、層析系統(tǒng)、恒溫水浴、梯度發(fā)生器、電泳儀系統(tǒng)、瓦氏呼吸儀等的使用。11.2掌握以下各項(xiàng)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)核酸的顏色反應(yīng)，地衣酚比色分析法測定RNA的含量以及二苯胺比色分析法測定DNA含量；RF-5301熒光分光光度計的使用，應(yīng)用熒光法定量測定維生素B2和維生素C；離子交換柱層析分離pI值具有顯著差別的核苷酸；瓦氏呼吸儀的使用，用該呼吸儀觀察檸檬酸、琥珀酸等中間產(chǎn)物對酵母三羧酸循的促進(jìn)作用；應(yīng)用紙層析技術(shù)定性鑒定體外氨基轉(zhuǎn)換反應(yīng)。12．開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300301牛肝DNA、RNA的分離及含量測定綜合性選做8219990334300302種子萌發(fā)前后蛋白質(zhì)、核酸、糖、脂類含量變化測定綜合性必做24220140534300303三羧酸循環(huán)中間產(chǎn)物對酵母耗氧率的影響綜合性選做8219990334300304生化代謝實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)驗(yàn)證性選做6220140534300305DNA光損傷因素測定綜合性選做6220140534300306酵母DNA的提取及含量和純度測定設(shè)計性選做2120100334300307栝蔞中天花粉蛋白的組織分布及生物活性研究設(shè)計性選做21201303注：設(shè)計性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中，學(xué)生可以任選其一。牛肝DNA、RNA的分離及含量測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括講授相關(guān)理論知識；主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：利用在鹽溶液中溶解度差異分離DNP和RNP，根據(jù)DNP、RNP復(fù)合物的穩(wěn)定性差異選作苯酚法和氯仿-異戊醇法進(jìn)行DNA、RNA的分離，乙醇沉淀DNA、RNA，地衣酚法測定RNA濃度、二苯胺法測定DNA濃度。種子萌發(fā)前后蛋白質(zhì)、核酸、糖、脂類含量變化測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括講授相關(guān)理論知識，主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：利用瓦氏呼吸儀檢測種子萌發(fā)時氣體體積變化速率，利用雙縮脲法測定種子萌發(fā)時的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化率；掌握硫酸蒽酮法測定總糖的方法；掌握索氏提取法結(jié)合稱量法測定脂肪含量的方法；掌握植物組織提取DNA、RNA的方法；掌握DNA、RNA、蛋白質(zhì)純度的鑒定方法及含量的檢測方法。三羧酸循環(huán)中間產(chǎn)物對酵母耗氧率的影響。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括講授相關(guān)理論知識，主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：大腸桿菌體內(nèi)的L-谷氨酸脫羧酶，可以專一的催化L-谷氨酸脫羧，釋放出二氧化碳。利用瓦氏呼吸計測定出CO2的量，能求出L-谷氨酸的量。生化代謝實(shí)驗(yàn)基本技術(shù)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括講授相關(guān)理論知識，主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：學(xué)習(xí)并了解瓦氏呼吸儀和752N紫外分光光度計的基本原理，掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用方法，掌握測量種子呼吸運(yùn)動的要點(diǎn)和方法。DNA光損傷因素測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括講授相關(guān)理論知識，主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：探索在不同波長、不同劑量紫外-可見光的照射下，利用光譜學(xué)和光動力學(xué)方法結(jié)合核酸電泳和PCR技術(shù)研究距離光源不同距離的DNA溶液樣品的光損傷程度。酵母DNA的提取及含量和純度測定。主要內(nèi)容為結(jié)合生物化學(xué)II大實(shí)驗(yàn)已學(xué)過的理論、方法獨(dú)立設(shè)計實(shí)驗(yàn)流程和提出核基因（DNA）與細(xì)胞器-線粒體基因（DNA）的分離方法和鑒定指標(biāo)，重點(diǎn)檢驗(yàn)方法的完備性和合理性。栝蔞中天花粉蛋白的組織分布及生物活性研究。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容結(jié)合生物化學(xué)II綜合實(shí)驗(yàn)已學(xué)過的理論、方法獨(dú)立設(shè)計實(shí)驗(yàn)流程和提出探索中藥栝蔞中天花粉蛋白在其根、莖、葉、花、果實(shí)中的含量及生物活性研究計劃。13．實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅱ(第三版)，科學(xué)出版社，2008年2）滕利榮等，生命科學(xué)儀器實(shí)用技術(shù)教程，科學(xué)出版社，2008年3）王冬梅等，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，科學(xué)出版社，2009年4）劉志國等，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，華中科技大學(xué)出版社，2007年5）王鏡巖等，生物化學(xué)（第三版），高等教育出版社，2002年6）張彩瑩等，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)化學(xué)，工業(yè)出版社，2009年7）楊榮武等，生物化學(xué)原理，高等教育出版社，2006年8）叢峰松等，生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，上海交通大學(xué)出版社，2005年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，40%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人呂明副教授張作明副教授周毓麟助理工程師16．制定日期2013102017．審核人滕利榮教授18．審核日期2013102619．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131030微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)（343004）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)04．課程代碼：34300405．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課程06．課程性質(zhì)：必修07．課程學(xué)時：6408．課程學(xué)分：209．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)微生物實(shí)驗(yàn)課由一系列的綜合性大實(shí)驗(yàn)組成，通過本課程教學(xué)，使學(xué)生掌握從土壤中分離純化微生物、形態(tài)觀察、計數(shù)、生理生化反應(yīng)、生長曲線測定、抗菌肽效價測定、菌種保藏等相關(guān)知識、技術(shù)方法。同時培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新能力、科學(xué)思維、分析解決實(shí)際問題的能力。10.2教學(xué)要求以綜合性大實(shí)驗(yàn)的方式，向?qū)W生系統(tǒng)傳授微生物學(xué)研究的基本思路和方法。通過微生物實(shí)驗(yàn)，學(xué)生能夠系統(tǒng)理解實(shí)驗(yàn)流程，牢固掌握操作技術(shù)，準(zhǔn)確把握課程要點(diǎn)。因此，要求學(xué)生實(shí)驗(yàn)前要參加實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)講授，認(rèn)真預(yù)習(xí)操作和注意事項(xiàng)；實(shí)驗(yàn)中要積極動腦思考，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，詳實(shí)記錄；實(shí)驗(yàn)后要及時整理實(shí)驗(yàn)器材，處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，分析試驗(yàn)結(jié)果，撰寫實(shí)驗(yàn)報告，參加實(shí)驗(yàn)課后討論。10.3教學(xué)目的使學(xué)生鞏固和加深對微生物學(xué)基本原理和基本方法的理解，初步掌握微生物學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，培養(yǎng)獨(dú)立科研能力及實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新能力。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰W(xué)生應(yīng)掌握無菌技術(shù)、顯微技術(shù)、培養(yǎng)技術(shù)及滅菌、取樣、稀釋、接種、染色、顯微觀察、制片、菌種保藏技能；實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力、獨(dú)立科研能力及實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新能力。開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300401微生物實(shí)驗(yàn)中的無菌操作驗(yàn)證性必做4120040934300402顯微鏡油鏡的使用及微生物測微技術(shù)驗(yàn)證性必做2120140934300403土壤中微生物的分離純化、培養(yǎng)觀察及菌種保藏綜合性必做48220010734300404從酸奶中分離、培養(yǎng)產(chǎn)乳鏈菌肽的乳酸乳球菌及乳鏈菌肽效價測定綜合性選做8220140934300405大腸桿菌噬菌體的分離、純化及效價測定綜合性選做8220030334300406纖維素酶產(chǎn)生菌的選育綜合性選做8220140934300407高產(chǎn)淀粉酶霉菌的分離純化設(shè)計性選做2120070734300408高產(chǎn)酒精的釀酒酵母菌株的誘變選育設(shè)計性選做2120060734300409高產(chǎn)抗菌肽乳酸菌的分離純化設(shè)計性選做21200607注：設(shè)計性實(shí)驗(yàn)中學(xué)生可任選其一微生物實(shí)驗(yàn)中的無菌操作。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括微生物實(shí)驗(yàn)中各種玻璃器皿的包扎方法以及各種器皿的消毒與滅菌；高壓蒸汽滅菌器的使用與維護(hù)保養(yǎng)及注意事項(xiàng)；超凈工作臺的使用及注意事項(xiàng)；物理及化學(xué)的消毒與滅菌的方法；微生物實(shí)驗(yàn)中常用的無菌操作技術(shù)訓(xùn)練。顯微鏡油鏡的使用及微生物測微技術(shù)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括微生物的常規(guī)涂片；物鏡由低倍鏡到高倍鏡的觀察；微生物的油鏡觀察；油鏡的擦拭方法；血球計數(shù)板的使用方法；微生物的測微技術(shù)。土壤中微生物的分離純化、培養(yǎng)觀察及菌種保藏綜合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括：常用培養(yǎng)基的制備、消毒與滅菌。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括計算、稱量與量取、熔化、定容、調(diào)pH值、分裝、加塞、包扎、滅菌、冷卻、無菌檢查；各種玻璃器皿的包扎、滅菌。土壤中微生物的分離純化、培養(yǎng)觀察。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括菌液的制備與稀釋；制備平板、接種、倒置培養(yǎng)、觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。細(xì)菌菌落的形態(tài)觀察，細(xì)菌的簡單染色及革蘭氏染色。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括常規(guī)涂片、初染、水洗、媒染、乙醇脫色、水洗、復(fù)染、干燥、鏡檢及作圖。酵母菌形態(tài)觀察，死活細(xì)胞鑒定及血球計數(shù)板計數(shù)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括血球計數(shù)板計算酵母菌數(shù)量；美蘭染料鑒定酵母菌死活細(xì)胞、鏡檢觀察及作圖。霉菌、放線菌的形態(tài)觀察。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基制備及滅菌；制備平板、劃線接種、插片、培養(yǎng)、鏡檢觀察及作圖。細(xì)菌細(xì)胞生理生化反應(yīng)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基制備及滅菌；接種、培養(yǎng)觀察、記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。Nison抗菌肽效價的測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基制備及滅菌；含有Nison樣品的制備；倒底層平板平板、指示菌與頂層培養(yǎng)基混合后倒頂層平板，打孔、加待測樣品、培養(yǎng)、觀察并計算。大腸桿菌生長曲線的測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基制備及滅菌；接菌、振蕩培養(yǎng)、測吸光度、繪制生長曲線。菌種保藏。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基制備及滅菌；斜面保藏法；液體石蠟保藏法；甘油保藏法；沙土管保藏法；冷凍干燥保藏法。從酸奶中分離、培養(yǎng)產(chǎn)乳鏈菌肽的乳酸乳球菌及乳鏈菌肽效價測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括制備平板、取酸奶樣品，梯度稀釋，涂布平板，倒置培養(yǎng)。挑取單菌落，培養(yǎng)，離心，取上清，培養(yǎng)指示菌，配制底層及頂層培養(yǎng)基并滅菌，采用瓊脂擴(kuò)散法測定乳鏈菌肽效價。大腸桿菌噬菌體的分離、純化及效價測定。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基制備及滅菌，接種大腸桿菌，配制培養(yǎng)基培養(yǎng)噬菌體，配制底層及頂層培養(yǎng)基并滅菌，制備底層平板，加入含有宿主細(xì)菌和一定稀釋度噬菌體的半固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)，觀察噬菌斑并計算噬菌斑數(shù)量。纖維素酶產(chǎn)生菌的選育。主要實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括取秸桿樣品，梯度稀釋，配制含CMC的瓊脂培養(yǎng)基并滅菌，制備平板，涂布平板，培養(yǎng)，長出單菌落后，用剛果紅染色，挑取透明圈大的菌落，分離純化、鑒定并保藏。高產(chǎn)淀粉酶霉菌的分離純化。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基的制備；稀釋涂布平板法分離純化高產(chǎn)淀粉酶霉菌；插片法觀察霉菌的形態(tài)。高產(chǎn)酒精的釀酒酵母菌株的誘變選育。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基的制備；高產(chǎn)酒精釀酒酵母菌的分離純化、鏡檢及觀察。高產(chǎn)抗菌肽乳酸菌的分離純化。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括培養(yǎng)基的制備；稀釋涂布平板法分離酸奶中產(chǎn)抗菌肽的乳酸菌；乳酸菌的染色觀察及生理生化反應(yīng)；瓊脂擴(kuò)散法測定抗菌肽效價。13．實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅰ（第三版），科學(xué)出版社，2008年2）黃秀梨，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，高等教育出版社，1999年3）范秀容等，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，人民教育出版社，1980年4）沈萍等，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，2007年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，40%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人王麗萍教授任曉冬副教授單亞明副教授16．制定日期2013101517．審核人滕利榮教授18．審核日期2013112019．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131130分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)A（343006）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)A04．課程代碼：34300605．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課06．課程性質(zhì)：必修07．課程學(xué)時：6408．課程學(xué)分：209．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)本課程讓學(xué)生運(yùn)用已學(xué)過的知識驗(yàn)證一些結(jié)論、結(jié)果和現(xiàn)象，及綜合運(yùn)用已學(xué)過的理論知識設(shè)計實(shí)驗(yàn)或進(jìn)行綜合性的實(shí)驗(yàn)，鞏固和加深對分子生物學(xué)課程中基本理論知識的理解，使學(xué)生對分子生物學(xué)方法的應(yīng)用和意義有具體而全面的理解，訓(xùn)練學(xué)生理論知識的運(yùn)用能力、實(shí)驗(yàn)操作技能、儀器儀表的使用能力、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理和分析能力。10.2教學(xué)要求要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真聽教師講解，認(rèn)真預(yù)習(xí)，掌握實(shí)驗(yàn)的基本原理、主要操作步驟和注意事項(xiàng);實(shí)驗(yàn)中操作正確，觀察細(xì)致，記錄認(rèn)真，能及時發(fā)現(xiàn)、分析和解決實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的問題；實(shí)驗(yàn)后整理實(shí)驗(yàn)用品，正確書寫實(shí)驗(yàn)報告，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析討論，按時參加課后總結(jié)與討論從而將理論與實(shí)際聯(lián)系起來，全面提高學(xué)生的綜合素質(zhì)。10.3教學(xué)目的通過本課程的教學(xué)，使學(xué)生掌握現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的基本知識、理論、方法、技術(shù)和技能。通過質(zhì)粒載體與目的基因雙酶切，瓊脂糖凝膠電泳、瓊脂糖凝膠回收，質(zhì)粒載體與目的基因的連接，感受態(tài)細(xì)胞的CaCl2法制備，重組DNA的轉(zhuǎn)化，重組子的篩選和質(zhì)粒DNA的抽提以及PCR法鑒定陽性克隆等實(shí)驗(yàn)過程，使學(xué)生掌握基因工程的核心內(nèi)容、基本過程與實(shí)驗(yàn)技術(shù)，訓(xùn)練并培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)際動手能力及發(fā)現(xiàn)、分析和解決問題的能力。利用分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)理論、技術(shù)與方法（含查資料獲得的新知識），自己獨(dú)立設(shè)計實(shí)驗(yàn)方案并完成填報設(shè)計實(shí)驗(yàn)申請書的全過程，培養(yǎng)學(xué)生查閱文獻(xiàn)、手冊、工具書和其它信息源的能力及各種文獻(xiàn)整理的能力。從而促進(jìn)學(xué)生對生命科學(xué)探索的興趣和愛好、創(chuàng)新思維和科研素養(yǎng)的培養(yǎng)及綜合素質(zhì)的提高，為今后的畢業(yè)論文設(shè)計和從事專業(yè)相關(guān)領(lǐng)域工作奠定良好的基礎(chǔ)。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰φ莆誅NA雙酶切、連接，瓊脂糖凝膠電泳、瓊脂糖凝膠回收、CaCl2法制備感受態(tài)細(xì)胞、重組DNA的轉(zhuǎn)化和質(zhì)粒抽提以及PCR法鑒定陽性克隆等實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法；掌握核酸芯片設(shè)計與制作、微陣列芯片檢測與數(shù)據(jù)分析等實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法；DNA和RNA提取技術(shù)；PCR－RFLP法鑒定基因型技術(shù)；Southern印記雜交技術(shù)；動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的實(shí)驗(yàn)原理；核酸探針制備技術(shù)。12．開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300601重組人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的構(gòu)建綜合性必做42220080334300602頭發(fā)中抽提DNA并用PCR－RFLP法鑒定CYP2C9基因型綜合性選做20220040334300603蛋白質(zhì)印跡分析綜合性選做4220060334300604DNA探針的制備和標(biāo)記綜合性選做16220040334300605Southern印跡法綜合性選做16220040334300606RNA的Northern雜交綜合性選做16220060334300607真核生物cDNA文庫的構(gòu)建和分析綜合性選做20220060334300608電穿孔法轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞綜合性選做16220060334300609聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測（PCR-SSCP）綜合性選做16220060334300610PLPR啟動子表達(dá)載體表達(dá)目的基因綜合性選做20220060334300611微生物基因組學(xué)分析綜合性選做16220060334300612熒光定量PCR法鑒定CYP2C9基因型綜合性選做16220140934300613熒光定量PCR檢測液體發(fā)酵雜菌污染綜合性選做16220140934300614瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段驗(yàn)證性選做4120090334300615PCR擴(kuò)增目的DNA片段驗(yàn)證性選做4120090334300616藍(lán)白斑篩選驗(yàn)證性選做4120090334300617感受態(tài)細(xì)胞的制備驗(yàn)證性選做4120090334300618畢赤酵母的cDNA文庫的構(gòu)建及分析設(shè)計性選做2120060334300619人胰島素基因在大腸桿菌中的克隆表達(dá)設(shè)計性選做2120060334300620中國人群CYP2E1基因的主要多態(tài)性類別與抗結(jié)核藥物代謝的關(guān)系設(shè)計性選做21200603注：設(shè)計性實(shí)驗(yàn)中學(xué)生可任選其一。重組人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的構(gòu)建。主要內(nèi)容包括限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ和PstⅠ雙酶切pUC18質(zhì)粒和IL-18目的基因，瓊脂糖凝膠電泳檢測，凝膠回收兩個基因片段，在T4-DNAligase作用下將兩個回收片段連接，獲得重組pUC18-IL-18；CaCl2法制備E.coliJM109感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化pUC18-IL-18，用PCR法鑒定重組陽性克隆。頭發(fā)中抽提DNA并用PCR－RFLP法鑒定CYP2C9基因型。主要內(nèi)容包括從頭發(fā)中抽提DNA，并用PCR擴(kuò)增目的DNA片段，電泳檢測后，進(jìn)行限制性內(nèi)切酶酶切，檢測酶切位點(diǎn)，用PCR－RFLP法鑒定CYP2C9基因型。蛋白質(zhì)印跡分析。主要內(nèi)容包括主要內(nèi)容包括將目的蛋白進(jìn)行SDS電泳，目的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到纖維素膜上，考馬斯亮藍(lán)染色后觀察、染色結(jié)果分析。DNA探針的制備和標(biāo)記。主要內(nèi)容包括利用大腸桿菌DNA聚合酶的3’外切核酸酶活性從5’末端切除核酸，同時在DNA聚合酶的5’聚合酶活性的催化下將dNTP添加到切口的3’末端，5’末端核苷酸的去除與3’末端核苷酸的加入同時進(jìn)行，導(dǎo)致切口隨著DNA鏈移動由具有熒光素標(biāo)記的核苷酸置換了原來的核苷酸，可合成具有熒光素標(biāo)記的DNA探針。Southern印跡法。主要內(nèi)容包括將待檢測的DNA樣品固定在固相載體上，與標(biāo)記的核酸探針進(jìn)行雜交，在與探針有同源序列的固相DNA的位置上顯示出雜交信號。通過Southern雜交判斷被檢測的DNA樣品中是否有與探針同源的片段以及該片段的長度。RNA的Northern雜交。主要內(nèi)容包括RNA分離；將RNA固定到支持物上；固相RNA與探針分子雜交；對特異結(jié)合的探針分子的圖像進(jìn)行檢測、捕獲和分析。真核生物cDNA文庫的構(gòu)建和分析。主要內(nèi)容包括以生物細(xì)胞的總mRNA為模板，用逆轉(zhuǎn)錄酶合成互補(bǔ)的雙鏈cDNA，然后接到載體上，轉(zhuǎn)入到宿主后建立的基因文庫就是cDNA文庫。電穿孔法轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞。主要內(nèi)容包括將盛有細(xì)胞和DNA混合液的特制小容器置于電脈沖儀的正負(fù)電極之間，在0℃下加高壓(2.0～4.0kV)電脈沖10分鐘后，將處理的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中生長2天，再行篩選。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測（PCR-SSCP）。主要內(nèi)容包括以總RNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將PCR擴(kuò)增出特異性好的產(chǎn)物，在聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行電泳，染色后觀察電泳結(jié)果。PLPR啟動子表達(dá)載體表達(dá)目的基因。主要內(nèi)容包括將IL基因以5'端EcoRI和3'端BamHI酶切位點(diǎn)插入pBV220載體多克隆位點(diǎn)中，轉(zhuǎn)化到大腸桿菌JMl09內(nèi)，便能通過溫度的變換控制CI蛋白的活性，繼而調(diào)節(jié)啟動子的活性，使IL基因連同其5'端上游帶SD序列轉(zhuǎn)錄成mRNA并轉(zhuǎn)錄終止于rrnB位點(diǎn)。微生物基因組學(xué)分析。主要內(nèi)容包括在核酸芯片上固定不同細(xì)菌的探針，通過PCR擴(kuò)增待測細(xì)菌的特定基因，并對PCR產(chǎn)物進(jìn)行熒光標(biāo)記，標(biāo)記后的PCR產(chǎn)物與基因芯片進(jìn)行雜交；用微陣列芯片CCD掃描儀對基因芯片進(jìn)行掃描和數(shù)據(jù)分析，明確芯片上檢測出的基因，進(jìn)而推測出待測細(xì)菌類型。熒光定量PCR法鑒定CYP2C9基因型。主要內(nèi)容包括從口腔抽提DNA并進(jìn)行檢測，并用采用PCR法擴(kuò)增CYP2C9DNA片段，電泳檢測后，最后采用Real-timePCR法進(jìn)行突變位點(diǎn)的檢測，鑒定CYP2C9基因型。熒光定量PCR檢測液體發(fā)酵雜菌污染。主要內(nèi)容包括對微生物進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)，取發(fā)酵液并對微生物進(jìn)行分離。提取微生物DNA并進(jìn)行熒光定量PCR。根據(jù)反應(yīng)曲線判定染菌程度。瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段。主要內(nèi)容包括配制瓊脂糖凝膠，利用水平電泳對不同分子量DNA片段進(jìn)行分離。PCR擴(kuò)增目的DNA片段。主要內(nèi)容包括PCR使用技術(shù)。藍(lán)白斑篩選。主要內(nèi)容包括含有重組DNA的大腸桿菌的涂布與培養(yǎng)、重組克隆的篩選，重組率的計算。感受態(tài)細(xì)胞的制備。主要內(nèi)容包括大腸桿菌液體培養(yǎng)與化學(xué)處理。畢赤酵母的cDNA文庫的構(gòu)建及分析。主要內(nèi)容包括mRNA的提純;cDNA第一條鏈的合成;cDNA第二條鏈的合成;雙鏈cDNA的修飾;雙鏈cDNA的分子克隆;cDNA文庫的擴(kuò)增;cDNA文庫鑒定評價。人胰島素基因在大腸桿菌中的克隆表達(dá)。主要內(nèi)容包括限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ和PstⅠ雙酶切pUC18質(zhì)粒和人胰島素目的基因，瓊脂糖凝膠電泳檢測，凝膠回收兩個基因片段，在T4-DNAligase作用下將兩個回收片段連接，獲得重組pUC18-胰島素；CaCl2法制備E.coliJM109感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化pUC18-IL-18，用PCR法鑒定重組陽性克隆。中國人群CYP2E1基因的主要多態(tài)性類別與抗結(jié)核藥物代謝的關(guān)系。主要內(nèi)容包括提取不同人群基因組DNA；對基因組DNA進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增；通過分析Ct值和Tm值確定基因多態(tài)性。13．實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅱ（第三版），科學(xué)出版社，2008年2）周俊宜等，分子生物學(xué)基本技能與策略，科學(xué)出版社，2003年3）魏群等，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，高等教育出版社，1999年4）J.薩姆布魯克，分子克隆實(shí)驗(yàn)指南，科學(xué)出版社，2005年5）郝福英等，分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，北京大學(xué)出版社，2003年6）梁國棟等，最新分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，科學(xué)出版社，2007年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，40%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人崔銀秋教授林鳳教授姜大志副教授湯海峰工程師16．制定日期2013112017．審核人周慧教授崔銀秋教授18．審核日期2013112019．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131130遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)（343007）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)04．課程代碼：34300705．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課06．課程性質(zhì)：必修（生物科學(xué)、生物技術(shù)）選修（制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班）07．課程學(xué)時：3208．課程學(xué)分：109．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課以經(jīng)典遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)為主要內(nèi)容，針對高等生物及微生物進(jìn)行的遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)，由基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)和綜合性大實(shí)驗(yàn)組成，具體包括動植物染色體觀察綜合實(shí)驗(yàn)、果蠅雜交綜合實(shí)驗(yàn)、植物多倍體的誘發(fā)實(shí)驗(yàn)、鏈孢霉有性雜交的四分體分析實(shí)驗(yàn)、群體等位基因頻率估算及遺傳平衡分析實(shí)驗(yàn)、設(shè)計創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)等內(nèi)容。10.2教學(xué)要求配合遺傳學(xué)理論教學(xué)，向?qū)W生系統(tǒng)傳授遺傳學(xué)研究的基本思路和方法，使學(xué)生通過動手操作，對遺傳學(xué)理論及實(shí)踐形成系統(tǒng)的認(rèn)識，并且能夠獨(dú)立地進(jìn)行遺傳學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)操作，系統(tǒng)理解實(shí)驗(yàn)流程，牢固掌握操作技術(shù)，準(zhǔn)確把握課程要點(diǎn)。要求學(xué)生實(shí)驗(yàn)前參加實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)講授，認(rèn)真預(yù)習(xí)；實(shí)驗(yàn)中要積極思考，遵守操作規(guī)程，詳細(xì)做好記錄；實(shí)驗(yàn)后整理好實(shí)驗(yàn)用品，及時處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，撰寫實(shí)驗(yàn)報告，參加課后討論。10.3教學(xué)目的使學(xué)生鞏固對經(jīng)典遺傳學(xué)基本原理和基本方法的理解，初步掌握遺傳學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，培養(yǎng)獨(dú)立科研能力。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰κ箤W(xué)生牢固掌握經(jīng)典遺傳學(xué)研究方法與技術(shù)，如動植物染色體制片、各種顯微鏡的使用、果蠅的飼養(yǎng)和雜交操作，熟悉遺傳學(xué)分析方法及有關(guān)計算程序，初步具備設(shè)計和操作科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)的能力與素質(zhì)。12．開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300701動植物培養(yǎng)成分配制技術(shù)驗(yàn)證性必做2220040334300702動植物染色體觀察綜合性必做20119990334300703果蠅的雜交綜合性選做8119990334300704鏈孢霉有性雜交的四分子分析驗(yàn)證性選做4119990334300705植物多倍體的誘發(fā)驗(yàn)證性選做4219990334300706群體等位基因頻率估算及遺傳平衡分析驗(yàn)證性選做4219990334300707CTAB法提取植物基因組DNA綜合性選做4220140934300708果蠅新性狀的鑒別與遺傳機(jī)理研究設(shè)計性選做2119990334300709外界因素對動植物染色體結(jié)構(gòu)的影響設(shè)計性選做2120000334300710果蠅非同源染色體非等位基因親本雜交的后代表型分析設(shè)計性選做2120040934300711高壓靜電場對小鼠骨髓細(xì)胞有絲分裂的影響設(shè)計性選做21200603注：設(shè)計性實(shí)驗(yàn)中，學(xué)生可任選其一。動植物培養(yǎng)成分配制技術(shù)。主內(nèi)容包括將大蒜或洋蔥進(jìn)行水培、沙培、土培，觀察根尖生長情況；采摘玉米花藥，配制固定液，采摘時間，并將花藥進(jìn)行固定；制備飼養(yǎng)果蠅的培養(yǎng)基配制，并進(jìn)行裝瓶無菌操作。動植物染色體觀察。主內(nèi)容包括制備大蒜或洋蔥有絲分裂染色體標(biāo)本，鏡檢觀察并繪圖；制備玉米減數(shù)分裂染色體標(biāo)本，鏡檢觀察并繪圖；制備雄蝗蟲減數(shù)分裂染色體標(biāo)本，鏡檢觀察并繪圖；制備virilis果蠅（Drosophilavirilis）或黑腹果蠅唾腺染色體標(biāo)本，鏡檢觀察并繪圖；制備小鼠或蟾蜍骨髓染色體標(biāo)本，鏡檢觀察并繪圖；制備、觀察正處于減數(shù)分裂時期的紫萼玉簪花蕾染色體標(biāo)本，尋找中期減數(shù)分裂時期的典型細(xì)胞進(jìn)行繪圖或拍攝；對紫萼玉組織進(jìn)行化學(xué)誘變，制備染色體標(biāo)本并鏡檢觀察，研究染色體數(shù)目的變化；對大蒜組織進(jìn)行化學(xué)誘變后進(jìn)行染色體組型分析；將人外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行化學(xué)誘變、低滲處理、Giemsa染色并鏡檢觀察。果蠅的雜交。主內(nèi)容包括飼養(yǎng)果蠅，觀察記錄生活史；單因子遺傳實(shí)驗(yàn)；雙因子遺傳實(shí)驗(yàn)；伴性遺傳實(shí)驗(yàn)；基因連鎖和交換實(shí)驗(yàn)；三點(diǎn)實(shí)驗(yàn)和基因定位實(shí)驗(yàn)。鏈孢霉有性雜交的四分子分析。主內(nèi)容包括活化粗糙鏈孢霉（Neurosporacrassa），將Lys+與Lys-兩種表型進(jìn)行雜交，待子囊果成熟后（大約三周）制片觀察，分析結(jié)果數(shù)據(jù)。植物多倍體的誘發(fā)。主內(nèi)容包括對大蒜組織進(jìn)行化學(xué)誘變，取根尖的分生組織制作標(biāo)本，鏡檢觀察。群體等位基因頻率估算及遺傳平衡分析。主內(nèi)容包括：調(diào)查本班同學(xué)耳垂（有或無）、卷舌（有或無）、眼瞼（雙眼皮或單眼皮）等性狀，并對耳垂、卷舌、眼瞼的性狀進(jìn)行群體遺傳分析。CTAB法提取植物基因組DNA。主內(nèi)容包括采用CTAB法從植物葉片中提取基因組DNA，并用分光光度計測定A260與A280，最后計算DNA的濃度，評價DNA的純度。果蠅新性狀的鑒別與遺傳機(jī)理研究。主內(nèi)容包括學(xué)會識別果蠅的各種形狀、區(qū)分果蠅的性別以及基本的飼養(yǎng)方法，為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。訓(xùn)練果蠅的記憶、嗅覺、行為和神經(jīng)學(xué)等遺傳機(jī)理方面的研究。外界因素對動植物染色體結(jié)構(gòu)的影響。主內(nèi)容包括農(nóng)藥有機(jī)磷、氟化物、X射線和其他因素對動植物染色體結(jié)構(gòu)的影響。果蠅非同源染色體非等位基因親本雜交的后代表型分析。主內(nèi)容包括飼養(yǎng)果蠅，觀察記錄生活史，果蠅非同源染色體非等位基因親本雜交的后代表型。高壓靜電場對小鼠骨髓細(xì)胞有絲分裂的影響。主內(nèi)容包括利用銀染技術(shù)對高壓靜電場作用下的小白鼠骨髓細(xì)胞有絲分裂的影響。13．實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅱ（第三版），科學(xué)出版社，2008年2）楊大翔，遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)，科學(xué)出版社，2006年3）祝水金等，遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，中國農(nóng)業(yè)出版社，2005年4）郭善利等，遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教程，科學(xué)出版社，2004年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，40%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人侯阿澧副教授王飛講師孟令軍工程師16．制定日期2013101817．審核人侯阿澧副教授18．審核日期2013102519．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131031PAGE44細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)A（343005）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)A04．課程代碼：34300505．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課程06．課程性質(zhì)：必修07．課程學(xué)時：6408．課程學(xué)分：209．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)細(xì)胞生物學(xué)是生命科學(xué)的一個重要分支，是生物學(xué)相關(guān)專業(yè)重要的基礎(chǔ)必修課。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)使學(xué)生了解和掌握本學(xué)科的主要研究方法和技術(shù)；鞏固和加深基礎(chǔ)理論知識的學(xué)習(xí)，提高學(xué)生分析問題、解決問題的能力；培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新思維和動手能力，使學(xué)生養(yǎng)成良好的科研習(xí)慣，全面提高學(xué)生的生物學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技能。10.2教學(xué)要求要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前參加本課程原理與技術(shù)講授，認(rèn)真預(yù)習(xí)與準(zhǔn)備，參加基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)訓(xùn)練；實(shí)驗(yàn)中要遵守操作規(guī)程，掌握細(xì)胞生物學(xué)的基本操作和基本技能（特別是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)石蠟切片的制作及染色技術(shù)，動物細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞融合，植物組織培養(yǎng)等基本實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)等），并做好實(shí)驗(yàn)記錄；實(shí)驗(yàn)后要整理好物品，及時處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，獨(dú)立撰寫實(shí)驗(yàn)報告，積極參加課后討論。10.3教學(xué)目的培養(yǎng)學(xué)生實(shí)際動手能力及觀察問題和解決問題的能力，同時掌握和初步了解細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)和方法，如涂片、鋪片、徒手切片、細(xì)胞傳代等，并且進(jìn)行創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)的設(shè)計。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰νㄟ^本實(shí)驗(yàn)課程，學(xué)生應(yīng)熟練掌握血涂片的制備法，小鼠腸系膜鋪片法；徒手切片法；細(xì)胞活體染色技術(shù)；石蠟切片的制作技術(shù)及特征性染色方法等基本原理及操作技術(shù)；掌握熒光顯微鏡的使用；掌握動物細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞融合、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞生理性實(shí)驗(yàn)；植物組織培養(yǎng)及植物原生質(zhì)體的分離、融合、體細(xì)胞雜交、細(xì)胞器的分級分離等基本原理及操作技術(shù)。12．開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300501徒手切片、石蠟切片、冷凍切片的制作技術(shù)驗(yàn)證性必做4120130934300502細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作技術(shù)驗(yàn)證性必做4120130934300503細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇技術(shù)驗(yàn)證性必做4120130934300504植物組織培養(yǎng)無菌操作及觀察技術(shù)驗(yàn)證性必做4120130934300505徒手切片、裝片、涂片的制作及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察綜合性選做4119930334300506石蠟切片的制備及細(xì)胞的染色觀察綜合性必做26119990334300507細(xì)胞器的熒光標(biāo)記技術(shù)綜合性選做4220040334300508植物組織培養(yǎng)，植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及植物原生質(zhì)體的分離培養(yǎng)綜合性選做4220010334300509冷凍切片技術(shù)驗(yàn)證性選做4220160334300510免疫膠體金技術(shù)綜合性選做4220030334300511動物細(xì)胞的融合綜合性選做4120050334300512動物細(xì)胞傳代與原代培養(yǎng)綜合性必做12120080334300513細(xì)胞器的分離與鑒定綜合性選做4120070334300514細(xì)胞生理性質(zhì)實(shí)驗(yàn)綜合性選做4120090934300515細(xì)胞凋亡過程中DNA及蛋白檢測實(shí)驗(yàn)綜合性選做4220160334300516利用RT-PCR技術(shù)檢測細(xì)胞中β-actin的表達(dá)綜合性選做4220100934300517哺乳動物早熟染色體凝聚誘導(dǎo)綜合性選做4220110934300518設(shè)計觀察患病(糖尿病或肝癌)小鼠肝\腎細(xì)胞內(nèi)多糖的變化設(shè)計性選做2120120334300519設(shè)計觀察藥物（四氯化碳或乙醇）對肝臟細(xì)胞損傷后蛋白質(zhì)的變化測定設(shè)計性選做2120130934300520利用植物培養(yǎng)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)原理設(shè)計能夠具有潛在應(yīng)用價值的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計性選做21201009注：在設(shè)計性實(shí)驗(yàn)中，學(xué)生可自選其一。徒手切片、石蠟切片、冷凍切片的制作技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括徒手切片操作技巧，制作出易于觀察細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞組成成分的切片；包括切片機(jī)的操作要領(lǐng)，切片的制作技巧，制作出符合HE染色、PAS染色、Feulgen染色的石蠟切片、冷凍切片。細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括無菌操作臺、臭氧發(fā)生器、二氧化碳培養(yǎng)箱的使用及維護(hù)保養(yǎng)技術(shù)；培養(yǎng)基的配制及滅菌的方法；細(xì)胞室處理及檢測技術(shù)。細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括程序降溫儀、細(xì)胞凍存盒、液氮罐的使用，了解細(xì)胞凍存、細(xì)胞復(fù)蘇的注意事項(xiàng)，細(xì)胞凍存及復(fù)蘇技術(shù)。植物組織培養(yǎng)無菌操作及觀察技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括植物組織培養(yǎng)所需培養(yǎng)基的配制，培養(yǎng)時無菌操作，培養(yǎng)過程中及培養(yǎng)結(jié)果的觀察，植物組織培養(yǎng)無菌操作及觀察技術(shù)。徒手切片、裝片、涂片的制作及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察實(shí)驗(yàn)。包括血涂片的制備；紅細(xì)胞及各種白細(xì)胞的形態(tài)觀察；顯微鏡測微尺的使用；植物細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)觀察；細(xì)胞后含體的觀察和鑒別；小鼠腸系膜鋪片；花生、向日葵徒手切片及細(xì)胞中脂類的染色，脂肪顯示技術(shù)；中性紅染液染小麥或黃豆幼根根尖液泡系；詹納斯綠B溶液染人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體；線粒體、液泡系的活細(xì)胞術(shù)。石蠟切片的制備及細(xì)胞的染色觀察實(shí)驗(yàn)。包括制作石蠟切片，HE染色觀察；PAS反應(yīng)，觀察多糖在細(xì)胞中的移動；Feulgen染色，觀察DNA染色結(jié)果。細(xì)胞器的熒光標(biāo)記技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括熒光顯微鏡的使用；羅丹明標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽染色；超聲波法制備脂質(zhì)體；凍融法制備脂質(zhì)體；冷凍干燥法制備脂質(zhì)體；脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)。植物組織培養(yǎng)，植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及植物原生質(zhì)體的分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。掌握植物組織培養(yǎng)；植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)；植物原生質(zhì)體分離和培養(yǎng)；PEG方法誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合；根據(jù)親本原生質(zhì)體的形態(tài)標(biāo)志來鑒別雜種細(xì)胞。冷凍切片技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括超薄切片制作；掃描電子顯微鏡樣品制備。免疫膠體金技術(shù)實(shí)驗(yàn)。包括制備膠體金，標(biāo)記山羊抗鼠Ig抗體并檢測效果。動物細(xì)胞的融合實(shí)驗(yàn)。包括制備細(xì)胞懸液；50%PEG溶液進(jìn)行細(xì)胞融合；詹納斯綠染色觀察細(xì)胞融合的現(xiàn)象。動物細(xì)胞傳代與原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。包括細(xì)胞的消化分散；細(xì)胞計數(shù)；傳代細(xì)胞培養(yǎng)；原代細(xì)胞培養(yǎng)；細(xì)胞凍存及復(fù)蘇；小鼠解剖及所需組織分離破碎處理。細(xì)胞器的分離與鑒定實(shí)驗(yàn)。包括細(xì)胞器的分級分離；玉米線粒體的分離與觀察；觀察離體葉綠體對染料的還原作用；制備大鼠肝細(xì)胞勻漿；差速離心細(xì)胞器；培育玉米種子芽；分離制備收集保存線粒體；制備葉綠體并對分離物進(jìn)行鑒定。細(xì)胞生理性質(zhì)實(shí)驗(yàn)。包括制備羊血細(xì)胞懸液及低滲溶液；研究紅細(xì)胞的滲透性；進(jìn)行小鼠實(shí)驗(yàn)前處理及小鼠腹腔注射血紅細(xì)胞，顯微鏡下觀察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象。細(xì)胞凋亡過程中DNA及蛋白檢測實(shí)驗(yàn)。包括誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，提取凋亡細(xì)胞中的總蛋白，利用雙向電泳檢測其種類，利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡過程。利用RT-PCR技術(shù)檢測細(xì)胞中β-actin的表達(dá)實(shí)驗(yàn)。包括細(xì)胞培養(yǎng)；總RNA提??；進(jìn)行總RNA定量，cDNA合成，PCR擴(kuò)增及電泳檢測。哺乳動物早熟染色體凝聚誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。包括誘導(dǎo)有絲分裂期及間期細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞融合。設(shè)計觀察患病(糖尿病或肝癌)小鼠肝\腎細(xì)胞內(nèi)多糖的變化實(shí)驗(yàn)。包括利用已患病的小鼠肝細(xì)胞進(jìn)行石蠟切片制作,特異性染色及觀察。設(shè)計觀察藥物（四氯化碳或乙醇）對肝臟細(xì)胞損傷后蛋白質(zhì)的變化測定實(shí)驗(yàn)。包括利用不同濃度的藥物對肝細(xì)胞的損傷,觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的變化。利用植物培養(yǎng)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)原理設(shè)計能夠具有潛在應(yīng)用價值的實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)。包括利用植物培養(yǎng)技術(shù)，進(jìn)行次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)（如利用胡蘿卜生產(chǎn)β-胡蘿卜素）。13．實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅰ（第三版），科學(xué)出版社，2008年2）王金發(fā)等，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程，科學(xué)出版社，2005年3）辛華，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，北京，科學(xué)出版社，2001年4）李素文，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，北京，高等教育出版社/施普林格出版，2001年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，30%；實(shí)驗(yàn)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人張桂榮教授費(fèi)曉方教授黃宜兵副教授蘇維恒講師16．制定日期2013101517．審核人張桂榮教授18．審核日期2013101519．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131030免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)（343008）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)04．課程代碼：34300805．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課06．課程性質(zhì)：必修（生物科學(xué)）選修（生物技術(shù)、制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班）07．課程學(xué)時：3208．課程學(xué)分：109．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)使學(xué)生掌握和了解免疫學(xué)的主要研究方法與技術(shù)，鞏固和加深基礎(chǔ)理論知識，提高分析、解決問題的能力和開拓創(chuàng)新能力，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)肅、嚴(yán)密、嚴(yán)格、求實(shí)的科學(xué)態(tài)度，為從事免疫學(xué)的研究和應(yīng)用打下基礎(chǔ)。10.2教學(xué)要求要求學(xué)生掌握免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作和基本技能，特別是動物免疫、抗原抗體結(jié)合反應(yīng)、外周血淋巴細(xì)胞的分離，酶聯(lián)免疫吸附等技術(shù)。因此，學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前要積極參加實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)講授，認(rèn)真預(yù)習(xí)；實(shí)驗(yàn)中要遵守操作規(guī)程，動腦思考，詳細(xì)記錄；實(shí)驗(yàn)后要整理好物品，及時處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，撰寫報告，參加課后討論。10.3教學(xué)目的培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立解決問題的能力，同時掌握和初步了解先進(jìn)的免疫學(xué)技術(shù)和方法，如免疫印跡、免疫共沉淀等，并且進(jìn)行創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)的設(shè)計。11．學(xué)生應(yīng)掌握的實(shí)驗(yàn)技術(shù)及實(shí)驗(yàn)?zāi)芰νㄟ^本實(shí)驗(yàn)課程，學(xué)生應(yīng)熟練掌握免疫動物的方法和程序，掌握抗體效價的測定方法，掌握免疫組織化學(xué)試驗(yàn)、NK細(xì)胞功能檢測、免疫沉淀實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、免疫印跡實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞因子檢測技術(shù)及單克隆抗體制備的操作方法。12．開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開設(shè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一覽表實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目編號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱實(shí)驗(yàn)類型實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)學(xué)時每組人數(shù)首次開出年月34300801多克隆抗體的制備綜合性必做12220030934300802淋巴細(xì)胞功能檢測實(shí)驗(yàn)綜合性必做8220030934300803凝集實(shí)驗(yàn)演示性選做2120030934300804免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)綜合性選做8220090934300805NK細(xì)胞功能檢測綜合性必做4220030934300806補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)綜合性選做8220090934300807細(xì)胞因子檢測技術(shù)綜合性選做8220090934300808酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)綜合性選做4220030934300809免疫沉淀演示性選做2120030934300810免疫印跡綜合性選做8220090934300811單克隆抗體的制備演示性選做2120030934300812免疫共沉淀綜合性選做6220090934300813淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物分析綜合性選做6220160334300814酶標(biāo)儀檢測多克隆抗體效價驗(yàn)證性必做2120030934300815用自制多克隆抗體檢測組織或細(xì)胞中特定蛋白的表達(dá)情況設(shè)計性選做2120030934300816應(yīng)用病毒疫苗刺激外周血單核細(xì)胞檢測細(xì)胞因子分泌情況設(shè)計性選做21200309注：設(shè)計性實(shí)驗(yàn)中，學(xué)生可自選其一。多克隆抗體的制備。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括首先進(jìn)行抗原的制備和純化，然后用該抗原免疫Balb/c小鼠；免疫結(jié)束一周后摘眼球取血，進(jìn)行免疫血清的分離和純化；最后用Elisa法檢測血清的抗體效價。淋巴細(xì)胞功能檢測實(shí)驗(yàn)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括從人外周血中分離淋巴細(xì)胞并計數(shù)；用非特異性有絲分裂原或特異性抗原刺激T淋巴細(xì)胞使其向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化并用MTT法對其進(jìn)行檢測；用溶血空斑實(shí)驗(yàn)檢測特異性抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞中的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的能力。凝集實(shí)驗(yàn)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括講授相關(guān)理論知識、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙饬x、原理、材料和儀器、實(shí)驗(yàn)步驟；進(jìn)行直接凝集法檢測血清抗體效價的示范教學(xué)。免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括選取特定的組織材料、進(jìn)行石蠟包埋、組織切片、切片的脫蠟至水、抗原修復(fù)、血清封閉、加一抗、加二抗、顯色、復(fù)染、脫水、透明、封片、鏡檢。NK細(xì)胞功能檢測。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括取小鼠脾細(xì)胞，制備效應(yīng)細(xì)胞并計數(shù)，靶細(xì)胞計數(shù)，將效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞按照一定比例加板、孵育、用酶標(biāo)儀檢測，以測定NK細(xì)胞的殺傷活性。補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括用抗Thy-1血清與小鼠胸腺細(xì)胞相互作用，可直接激活補(bǔ)體產(chǎn)生膜攻擊復(fù)合體，引起靶細(xì)胞膜損傷，進(jìn)而引起細(xì)胞死亡，用臺盼藍(lán)可以使其染成藍(lán)色，而活細(xì)胞不著色，通過顯微鏡計數(shù)可以算出細(xì)胞死亡率，即補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用的強(qiáng)度。細(xì)胞因子檢測技術(shù)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括向CTLL-2細(xì)胞中加入倍比稀釋的含有IL-2的待測樣品及IL-2標(biāo)準(zhǔn)品培養(yǎng)16-24小時，加入3H-TdR繼續(xù)培養(yǎng)4-6小時，用β閃爍計數(shù)儀測定3H-TdR的參入量，以檢測待測樣品中IL-2的含量。酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括首先將已知的抗原或抗體吸附固定在固相載體表面，然后封閉，加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，最后直接加入酶反應(yīng)底物和顯色劑進(jìn)行顯色反應(yīng)。免疫沉淀。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括單向免疫擴(kuò)散；雙向免疫擴(kuò)散；免疫電泳。免疫印跡。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括將含有目標(biāo)蛋白的樣品用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS)分離后，通過印跡技術(shù)將在凝膠中已經(jīng)分離的條帶轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上,并依次與特異性抗體和酶標(biāo)二抗作用,再加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物,顯示特異性條帶。單克隆抗體的制備。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括首先制備抗原并免疫動物，從免疫動物脾細(xì)胞中獲得能合成專一性抗體的單克隆B淋巴細(xì)胞，應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與免疫的淋巴細(xì)胞融合，篩選得到雜交瘤細(xì)胞，并將其克隆。免疫共沉淀。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括首先在非變性條件下裂解細(xì)胞，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用不被破壞。然后，將細(xì)胞裂解液與結(jié)合有特異性抗體的瓊脂糖A共孵育，特異性抗體將此蛋白及與此蛋白相互的其它蛋白質(zhì)同時沉淀下來。淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志物分析。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括首先制備小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液，細(xì)胞經(jīng)固定后用帶有兩種不同熒光標(biāo)記的抗體分別識別CD4和CD8分子，最后用流式細(xì)胞儀檢測這兩種細(xì)胞表面標(biāo)志物分子在每個細(xì)胞表面的表達(dá)情況，并以此對脾淋巴細(xì)胞懸液進(jìn)行分群分析。酶標(biāo)儀檢測多克隆抗體效價。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括介紹酶標(biāo)儀的工作原理、應(yīng)用領(lǐng)域，講解酶標(biāo)儀與分光光度計的不同之處、使用的注意事項(xiàng)；以ELx800型和SYNERGY-4型酶標(biāo)儀為例，介紹數(shù)據(jù)讀取、程序編輯、數(shù)據(jù)分析及導(dǎo)出功能。用自制多克隆抗體檢測組織或細(xì)胞中特定蛋白的表達(dá)情況。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括選取一種蛋白作為抗原，免疫動物獲得其特異性多克隆抗體，并用此抗體去檢測組織或細(xì)胞中該蛋白的表達(dá)情況。應(yīng)用病毒疫苗刺激外周血單核細(xì)胞檢測細(xì)胞因子分泌情況。主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括用病毒疫苗刺激外周血單核細(xì)胞，分離上清并用ELISA法檢測上清中各種細(xì)胞因子的分泌情況。13．實(shí)驗(yàn)教材或指導(dǎo)書或主要參考資料1）滕利榮等，生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教程Ⅰ（第三版），科學(xué)出版社，2008年2）黎燕等，分子免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)指南，化學(xué)工業(yè)出版社，2008年3）朱立平等，免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法，人民軍醫(yī)出版社，2000年4）唐建民，醫(yī)學(xué)微生物學(xué)及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，人民軍醫(yī)出版社，2004年14．考核要求、考核方式及成績評定標(biāo)準(zhǔn)14.1考核要求：以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度、科學(xué)思維和實(shí)驗(yàn)操作能力為前提，注重訓(xùn)練學(xué)生的獨(dú)立動手能力、思考能力，發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計能力及創(chuàng)新能力，教師應(yīng)及時、客觀、公正、如實(shí)評價每名學(xué)生實(shí)驗(yàn)情況及評閱試卷、實(shí)驗(yàn)報告和設(shè)計實(shí)驗(yàn)。14.2考核方式：采取考核與考試相結(jié)合的方式綜合評定實(shí)驗(yàn)成績，按百分制方式計分。14.3成績評定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心制定的《學(xué)生實(shí)驗(yàn)成績考評方法》進(jìn)行評定。實(shí)驗(yàn)習(xí)慣成績，10%；預(yù)習(xí)考試成績，10%；實(shí)驗(yàn)操作成績，40%；實(shí)驗(yàn)報告成績，20%；設(shè)計實(shí)驗(yàn)成績，20%。15．執(zhí)筆人：王迪講師于彬講師王飛講師16．制定日期2013111517．審核人滕利榮教授18．審核日期2013103019．學(xué)院審定程序說明2013年10月10日接到學(xué)校通知后成立《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）”》修訂專項(xiàng)工作組并進(jìn)行前期籌備工作。2013年10月14日至2013年10月16日各門課程梯隊(duì)召開《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）”》修訂工作會議，分配修訂任務(wù)。2013年10月21日前各門課程梯隊(duì)提交《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿。2013年10月25日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第一次會議審議《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》修訂稿并提出整改意見。2013年10月26日至10月28日各門課程梯隊(duì)按照“整改意見”進(jìn)行整改。2013年10月30日生命科學(xué)學(xué)院教學(xué)委員會召開第二次會議審定通過《生命科學(xué)學(xué)院實(shí)踐教學(xué)大綱（2013版）》。20．學(xué)院審定日期20131030研究創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)（343011）教學(xué)大綱01．教學(xué)單位名稱：生命科學(xué)學(xué)院02．實(shí)驗(yàn)中心名稱：吉林大學(xué)國家級生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心03．課程名稱：研究創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)04．課程代碼：34301105．課程類別：學(xué)科基礎(chǔ)課程06．課程性質(zhì)：選修07．課程學(xué)時：64學(xué)時08．課程學(xué)分：2學(xué)分09．面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、制藥工程、藥物制劑、唐敖慶班10．實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)任務(wù)、要求和教學(xué)目的10.1教學(xué)任務(wù)調(diào)動學(xué)生的學(xué)習(xí)主動性、積極性和創(chuàng)造性，激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新思維和創(chuàng)新意識，開發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新潛能，強(qiáng)化學(xué)生的創(chuàng)新能力訓(xùn)練，使學(xué)生了解當(dāng)前生命科學(xué)的發(fā)展前沿與最新進(jìn)展，掌握生命科學(xué)研究的基本思路和方法，從而培養(yǎng)適應(yīng)創(chuàng)新型國家建設(shè)需要的高水