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文檔簡介

T100ThermalCycler中文操作手冊手冊內容1工作環(huán)境2T100ThermalCycler的介紹3T100ThermalCycler創(chuàng)建、編輯和儲存程序4運行程序5管理文件夾和反應程序文件6工具7儀器日常維護1工作環(huán)境1.1工作溫度15-31°C1.2工作和存儲濕度20-80%1.3工作電源100-240VAC(±10%),50-60HZ1.4PCR許可證有2T100ThermalCycler的介紹2.1T100ThermalCycler各部分簡介熱蓋加熱模塊熱蓋加熱模塊散熱口LED指示燈觸屏IISH接口T100ThermalCycler前面T100ThermalCycler具有96孔的反應模塊,可以使用標準96孔板、聯(lián)管或單管等多種耗材。儀器支持的樣品反應體積為1-100ul,推薦的反應體積為15-50u1。儀器主要包括以下幾個部分:■加熱模塊:放置裝有樣品的標準96孔板、聯(lián)管或單管■熱蓋:加熱樣品管的頂部,防止樣品蒸發(fā)和冷凝觸屏:用于反應程序的編輯、修改和運行,實時顯示運行程序USB接口:外接USB,導出數(shù)據(jù)LED指示燈:儀器正常運行時,指示燈亮散熱口:提供通風,用于儀器的快速升溫和降溫2.2觸屏

儀器開機后,顯示觸屏界面,界面提供儀器的名字,日期和時間,觸屏上的四個按鍵分別代表的意義如下:NewProtocol:創(chuàng)建一個新的反應程序SavedProtocols:查看、編輯、運行儲存的程序Incubate:可長時間運行一個恒定的溫度,與水浴鍋功能相似Tools:設置、儀器自檢、儀器信息、軟件升級2.3放置樣品向上打開儀器熱蓋,將樣品管放到相應的位置,合上熱蓋。熱蓋的主要功能是在程序運行時,加熱樣品管的頂部,防止樣品蒸發(fā)和冷凝。放置樣品管時,要確保管子與反應模塊完全接觸,且反應模塊必須完全干凈。

3T100ThermalCycler創(chuàng)建、編輯和儲存程序3.1創(chuàng)建新的程序,點擊觸屏界面的“NewProtocol”按鈕,進入編輯界面。3.2也可選擇編輯儲存的程序,點擊觸屏界面的“SavedProtocols”按鈕,選擇一個程序,點擊“Edite”,進入編輯界面。iTJWXFSFWCr03DiTJWXFSFWCr03D$6aC.O054?2-C7309WQQTIZC.m屮use選擇SavedProtocols,點擊Edits3.3新的程序編輯界面打開,如圖所示PCRRS的模板hvwPri^BeelM55NameUMSAVED13.3新的程序編輯界面打開,如圖所示PCRRS的模板hvwPri^BeelM55NameUMSAVED1W?|Hcsnw83.4按照需要的實驗程序,首先設置反應體積,在Volume中輸入體積數(shù),可輸入范圍為1-100ul,推薦反應體積為15-50u1。其次設置熱蓋的溫度,在Lid中輸入溫度,可輸入范圍為40-110°C,推薦溫度為105°C。最后,點擊反應程序的每

一步時,顯示為綠色,分別設置該步反應的溫度和時間。點擊溫度按鈕,如95C,出現(xiàn)數(shù)字鍵盤,輸入需要的溫度,點擊“0K”確認。同樣的操作編輯時間。23210&CHomeInsertTemperature^J-1Q£TC)NewProtocofNarrczUNSAVEDCartel23210&CHomeInsertTemperature^J-1Q£TC)NewProtocofNarrczUNSAVEDCartel使用數(shù)字鍵盤編輯溫度“GOTO”可以設置反應的循環(huán)數(shù),如“34X”即共35個循環(huán),也可設置循環(huán)的起始反應步驟,如“Step2”,即循環(huán)反應從第2步開始至第4步結束,箭頭指示的過程。3.5插入新的反應步驟,點擊一個步驟,顯示為綠色,點擊“Insert”將在該步驟后面插入新的反應步驟。在“InsertStep”界面選擇需要插入反應步驟的類型,“Temperature”即可插入溫度反應,“Gradient”卩可插入溫度梯度反應,“GOTO”即可插入PCR循環(huán)反應。點擊“Delete”,即可刪除選擇的步驟。

InsertstepUNSAVEDOnuont在Stepq后面插入新的反應步驟hl亡列ProtocolInsertstepUNSAVEDOnuont在Stepq后面插入新的反應步驟hl亡列Protocol0:306:00Cancel3.6添加或刪除溫度梯度。選擇一個反應步驟,點擊“Options”,進入步驟優(yōu)化窗口。NewProtocolStep4OptionsExknaAtimekydeGradifnt

NewProtocolStep4OptionsExknaAtimekydeGradifnt選擇“Gradient”,在“Backrow”輸入溫度梯度的最高溫度,在“Frontrow”輸入溫度梯度的最低溫度,右邊會顯示從A到H每一行的溫度值。注意:該儀器溫度梯度跨度范圍為1-25C。NarrZNewProtocolA:72.0'CB71.3CC^70JfiCD:SSjCTCE:65.&°0F:W,0°CBackGradientrowTimeExtendFrontAtimeicycleNarrZNewProtocolA:72.0'CB71.3CC^70JfiCD:SSjCTCE:65.&°0F:W,0°CBackGradientrowTimeExtendFrontAtimeicyclerowh;eiireStep4Options9t■9&1fnMrtEMIal*OplidmSw步驟優(yōu)化窗口顯示溫度梯度Nam;UNSAIDVoluinie1C5T點擊“OK”,返回程序主界面,最低和最高溫度的溫度梯度顯示在反應步驟中,可以點擊溫度,直接修改溫度梯度,不用再進入“Option”。Nam;UNSAIDVoluinie1C5TBackandfrontrowtemperatures顯示62X>77C的溫度梯度3.7溫度的遞增、時間的延伸和改變升溫速率。選擇一個反應步驟,點擊“Options”,進入步驟優(yōu)化窗口。每一個實驗步驟都包括“Increment”“Extend”、“RampRate”,“Increment”輸入X,即每個循環(huán)后溫度增加X°C,“Extend”輸入Y,即每個循環(huán)后時間延長Y秒,“RampRate”輸入Z,即升溫速率為Z。點擊“0K”,確認。NewProtocol!十TimeCancelStep4設置了溫度遞增,每循環(huán)增加fC+Step4OphontGradientTemperatureNewProtocol!十TimeCancelStep4設置了溫度遞增,每循環(huán)增加fC+Step4OphontGradientTemperatureExtendAnme/cycieRamprateIncrementfttemp^cycle3.8改變“GOTO”參數(shù)。“GOTOStep”表示多個步驟的重復循環(huán)反應。選擇一個“GOTOStep”,點擊“Step”按鈕,進入數(shù)字鍵盤,修改數(shù)字為X,即可決定循環(huán)反應的起始步驟為X,如“Step2”,即循環(huán)反應從第2步開始至第4步結束,箭頭指示的過程。點擊“X”按鈕,進入數(shù)字鍵盤,修改數(shù)字為Y,即表示再重復Y個循環(huán),總循環(huán)數(shù)為Y+1,如“34X”,即共35個循環(huán)。

NewProtocolName:UNSAVEDVolumeIILidI123d567反應程序中GOTOStep2和34個循環(huán)3.9點擊“Run”無需儲存,直接運行編輯好的反應程序。也可點擊“Save”按鈕,進入儲存界面,在Folder后輸入或選擇儲存程序的文件,在Name后輸入反應程序命稱,點擊“Save”返回程序主界面。然后點擊“Run”運行程序。

4運行程序4.1開始運行程序,有如下方法:?創(chuàng)建新的程序,點擊“Run”從“SavedProtocols”中選擇程序,點擊“Run”從“SavedProtocols”中選擇程序,點擊“Edite”,修改后,點擊“Run”前面已經詳細介紹了創(chuàng)建和編輯新的反應程序,下面介紹從“SavedProtocols”中選擇程序,運行。首先從開機界面中,點擊“SavedProtocols”,進入選擇界面。其次從“Folders”文件夾中選擇文件,如“MAIN”。再次選擇“Files”文件中的反應程序,如“ISCRIPT”,“Preview”中會顯示所選程序的詳細設置,包括每一步的反應溫度和時間等信息。SavedProtocolsFifesPrwlMPRF15KBLidVolume50plSavedProtocolsFifesPrwlMPRF15KBLidVolume50pl50042*C.300085*C5:001PRF1K6IPRFShB選擇好程序后,點擊“Run”,出現(xiàn)對話框,詢問是否修改反應體積,點擊“OK”直接運行程序,或者點擊“Volume”修改體積后,再運行程序。

OKCancelRun1SCRIPT?令「踵(£bATH?twFdtftfOptioruFilvOption*EdklFcldorsPreviewOKCancelRun1SCRIPT?令「踵(£bATH?twFdtftfOptioruFilvOption*EdklFcldorsPreviewVolumeSavedProtocolsIPRF15KBLGW5*CVokjme50調t5:00,3000.500運行確認對話框程序運行后,運行進程可以通過兩種狀態(tài)顯示,分別是“Status”和“Clock”?!癝tatus”狀態(tài)顯示整個實驗程序的每個步驟,以及正在進行的步驟。“Clock”狀態(tài)顯示整個實驗程序的剩余時間。點擊“ViewStatus”和“ViewClock”,可在二者之間進行自由切換。Status狀杏Clock在二者之間進行自由切換。Status狀杏Clock4.2暫停和恢復程序運行一個PCR反應程序允許暫停的,暫停時,加熱模塊會維持在當前實驗步驟的反應溫度,熱蓋也維持原本的溫度,直到反應程序恢復繼續(xù)運行。當正在升溫或降溫時,程序暫停,儀器會繼續(xù)升溫或降溫,直到到達設定的溫度,才會保持不變。在“Status”狀態(tài)時,點擊“Pause”按鈕,反應程序暫停。點擊“Resume”按鈕,反應程序繼續(xù)運行。5:00Lid9°C伽4WC17C0:30反應程序在Step4時暫停Nama:MINE按鈕,反應程序繼續(xù)運行。5:00Lid9°C伽4WC17C0:30反應程序在Step4時暫停Nama:MINETim*Remaining:1151.22Votunifl;tQ|jiSamplePiLiitd49°C4.3跳過反應程序中的某一步,可以縮短反應時間。在在“Status”狀態(tài)時,點擊“SkipStep”按鈕,即可跳過當前步驟,多次點擊“SkipStep”按鈕,即可跳過多個步驟。4.4取消反應程序。當程序取消時,加熱模塊立刻停止溫度加熱。不要立即關閉儀器電源,儀器需要時間使加熱模塊降溫。在在“Status”狀態(tài)時,點擊“Cancel”按鈕,選擇“Yes”確認。4.5孵育功能。開機主界面,點擊“Incubate”按鈕,進入孵育功能界面。編輯“Blocktemperature”,輸入溫度值,即設置孵育溫度。編輯“Holdtime”,輸入時間,即設置孵育時間,也可設為無窮時間。編輯“Lidtemperature”,輸入溫度值,推薦105C保持熱該溫度,防止樣品蒸發(fā)或冷凝。點擊“Run”,運行孵育程序。結束孵育功能時,點擊“Cancel”。IncubateIncubate11:101吟Mom*Run孵育功能界面5管理文件夾和反應程序文件開機進入主界面,點擊“SavedProtocols”,進入選擇界面,包括以下文件夾:Ltd1MXVoDume20pl1初■匚Ltd1MXVoDume20pl?轉貯衛(wèi)時60^0107ZC,730GOTO軾目p2.29X729.別QMAINfolder:儀器自帶的一些標準反應程序,可以編輯、刪除和重命名RECENTfolder:儲存的是最近使用過的20個程序CUSTOMfolder:可以設置為實驗室成員的個人文件夾USBfolder:外接SUB里的反應程序5.1新建文件夾,從“SavedProtocols”選擇界面,點擊“FolderOptions”,選擇“New”,輸入8個字節(jié)的名稱,點擊“OK”,完成。105-Coe'20plSavedProtocolsil:U105-Coe'20plgO30>S*C.005:(rc.oiorc.730OTOstep2.29X2X:.500re.?1A贏[03HdtmfoldtrOption)At*OpUffi*EditRuHi新建文件夾界面5.2復制文件夾或文件,從“SavedProtocols"選擇界面,選擇文件夾或文件,點擊“FolderOptions”或“FileOption”,選擇“Copy”,最后選擇文件或文件夾新的儲存位置,點擊“Save”,即可完成。5.3刪除文件夾或文件,從“SavedProtocols”選擇界面,選擇文件夾或文件,點擊“FolderOptions”或“FileOption”,選擇“Delete”,即可完成完整的文件夾或單個文件的刪除。5.4重命名文件夾或文件,從“SavedProtocols”選擇界面,選擇文件夾或文件,點擊“FolderOptions”或“FileOption”,選擇“Rename”,輸入新的名稱,點擊“OK”,確認。6工具開機進入主界面,點擊“Tools”,進入選擇界面,包括以下文件夾:工具界面Settings:儀器的系統(tǒng)設置Self-Test:儀器自檢設置,檢測各部件的功能Logs:觀察反應運行程序界面,可以被拷貝到USBAbout:觀察軟件的版本和儀器的機身號UpdateFirmware:升級儀器的版本ServiceLogin:可以從Bio-Rad廠家獲得幫助服務6.1儀器的系統(tǒng)設置,從“Tools”界面,選擇“Settings”,進入界面,會看到儀器的系統(tǒng)設置,包括“Cyclername”設置儀器的名稱,“Date”設置日期年月曰等信息,“Time”設置詳細時間信息,“Displaybrightness”設置顯示屏亮度,“samplevolume”設置默認的樣反應體積,“Standbydelay”設置一段時間后,為了節(jié)約電資源,儀器會進入待機狀態(tài),“Endofrunbeep”設置運行結束后

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