血漿miRNAs在兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)不同疾病狀態(tài)中的表達特點

血漿miRNAs在兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)不同疾病狀態(tài)中的表達特點陳霞;何倩【摘要】目的分析3種血漿miRNA在兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)不同疾病狀態(tài)中的表達特點.方法選取急性淋巴細胞白血病患兒40例,其中初診患兒12例,完161225microRNA,cDNA,qRT-PCRmiR150、miR155、miR233miR150、miR155、miR233miR150miR233miR155miRNA3miRNAmiRNAAUC(95%CI(95%可信區(qū)間)均有較好的滿意度,且3種血漿miRNA聯(lián)合檢測的精確度更高.結(jié)論血漿miR150、miR155、miR233的表達在兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)的診斷、治療和復發(fā)監(jiān)測中有較高的應用價值.%ObjectiveToanalyzetheexpressionof3plasmamiRNAinchildrenwithacutelymphoblasticleukemiaindifferentdiseasestates.Methods40childrenwithacutelymphoblasticleukemiawerecollected,including12casesofnewlydi-agnosedchildren,16casesofcompleteremission,12casesofrelapse.Atthesametime,25healthychildrenreceivedphysicalex-aminationwasthecontrolgroup.Thefastingvenousbloodwasextractedfromallthechildren.Aftercentrifugation,theplasmawastakendirectlytoamplifythetargetmicroRNA,andthereversetranscriptionintocDNA.QRT-PCRmethodwasadoptedtodetecttheexpressionofmiR150,miR155andmiR233inplasma.ResultsTheexpressionofmiR150,miR155andmiR233inallgroupweresignificantlydifferentfromthatofthecontrolgroup.TheexpressionofplasmamiR150andmiR233inthenewlydiagnosedandrecurrentgroupweresignificantlylowerthanthatintheremissiongroupandthecontrolgroup(P<0.05).TheexpressionofplasmamiR155intheinitialandrecurrentgroupwassignificantlyhigherthanthatintheremissiongroupandthenormalgroup(P<0.05).Therewasnosignificantdifferenceinthe3microRNAbetweentheinitialdiagnosisgroupandtherecurrencegroup,theremissiongroupandthecontrolgroup(P>0.05);ThreekindsofplasmamiRNAinnewlydiagnosedgroupbetweendifferentageandgenderexpressionshowednosignificantdifference(P>0.05);ThreeplasmaAUCmicroRNA(areaunderthecurve)and95%CI(95%confidenceinterval)hadbettersatisfaction.AndtheaccuracyofthecombineddetectionofplasmamiRNAin3kindsofplasmaishigher.ConclusionTheexpressionofplasmamiR150,miR155andmiR233hasagoodapplicationvalueinthediagnosis,treatmentandrecurrencemonitoringofchildrenwithacutelymphoblasticleukemia.【期刊名稱】《實用癌癥雜志》【年(卷),期】2017(032)002【總頁數(shù)】4頁(P192-195)【關(guān)鍵詞】血漿miRNAs;兒童急性淋巴細胞白血病;不同疾病狀態(tài)【作者】陳霞;何倩【作者單位】441021湖北省襄陽市中心醫(yī)院;441021湖北省襄陽市中心醫(yī)院【正文語種】中文【中圖分類】R733.71兒童急性淋巴細胞白血病(acutelymphoblasticleukemia，ALL)是兒童白血病中80%以上。但由于復發(fā)、密集的化療方案帶來的副作用，該疾病的死亡率仍較高[1]。miRNARNAmiRNAmiRNAmiRNA在疾病的診斷、治療和預后預測中可以發(fā)揮同樣的作用，且創(chuàng)傷小、操作方便[3]。一般資料選取2011年3月至2015年3月期間我院收治的急性淋巴細胞白血病患兒40例，其中初診患兒12例，完全緩解患兒16例，復發(fā)患兒12例，所有患兒均經(jīng)細胞形態(tài)學、遺傳學、分子生物學、免疫學確診，按照CCLG-08方案標準進行治療。同時收集我院經(jīng)健康體檢的兒童25例作為正常對照組。急性淋巴細胞白血病組和正常組的年齡、性別均無統(tǒng)計學差異。檢測方法ALLEDTA30min43000轉(zhuǎn)/10minEP80將所有血漿采取直接擴增目的microRNA，并反轉(zhuǎn)錄為cDNA，qRT-PCR方法檢測血漿miR150、miR155、miR233的表達。統(tǒng)計學分析qRT-PCR3miRNASPSS17.0miR150miR155、miR233比較3miRNAmiR233ALL(P<0.05miR155ALL1。miR150miR155、miR233達比較對3種miRNA在急性淋巴細胞白血病不同階段的表達比較發(fā)現(xiàn)，血漿miR150和miR233在初診組和復發(fā)組的表達顯著低于緩解組和正常組(P<0.05)；血漿miR155在初診組和復發(fā)組的表達顯著高于緩解組和正常組(P<0.05)；3種microRNA在初診組與復發(fā)組之間、緩解組與正常組之間比較均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，見表2。3miRNA比較初診組中不同年齡和性別之間血漿miR-150、miR-155、miR233的表達顯示,3種血漿miRNA在不同年齡和性別之間表達均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，見表3。3miRNA結(jié)果顯示，血漿miR150、miR155、miR233的在診斷ALL時均有較高的敏感度和特異度，且相比于單獨檢測一種指標，三者血漿指標聯(lián)合檢測時的敏感度和特異度更高，診斷意義更大，見表4。有關(guān)發(fā)病機制的研究已成為白血病研究的重要內(nèi)容，近年的研究表明，miRNA在兒童急性淋巴細胞白血病的發(fā)病過程中扮演著重要角色。以往的研究多集中在組織和細胞中的miRNA，最新研究證實在血漿中同樣存在miRNA，并且能夠在白血病患者血漿中檢測到miRNA的特異表達譜，在兒童急性淋巴細胞白血病的早期診斷、預后評估中發(fā)揮重要作用[4]。miR150參與免疫和造血系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，miR150通過調(diào)控靶基因引起下游基因的表達發(fā)生變化，從而參與各系統(tǒng)的發(fā)生，其表達紊亂常導致免疫系統(tǒng)、造血系統(tǒng)等系統(tǒng)惡性疾病的發(fā)生[5]。但是miR150在不同種類的腫瘤中的作用不同，在胃癌、慢性淋巴細胞性白血病、骨肉瘤等腫瘤中呈現(xiàn)高表達，而在慢性粒細胞性白血病、NK/T細胞淋巴瘤等腫瘤中呈現(xiàn)低表達。研究表明，miR150在兒童急性淋巴細胞白血病中的表達降低[6-7]。本研究發(fā)現(xiàn)初診組和復發(fā)組miR150的表達顯著低于緩解組和正常組，而初診組與復發(fā)組之間、緩解組與正常組之間比較均無顯著差異，說明miR150在兒童急性淋巴細胞白血病的發(fā)生過程中通過降低表達水平而可發(fā)揮抑癌作用，且miR150的表達變化可反映患兒不同的疾病狀態(tài)。miR155miRNAmiR150，miR155而發(fā)揮癌基因的作用[8]。Faraoni，miR155miR155miR155正常情況下，miR233在骨髓中表達較高，并在造血系統(tǒng)的分化過程中起重要作用，其表達異常則會導致血液系統(tǒng)惡性疾病的發(fā)生。在對骨髓中miR233的檢測發(fā)現(xiàn)，miR233在兒童急性淋巴細胞白血病患兒緩解期的表達升高，在初診期和復發(fā)期患兒中表達下降，說明miR233的表達下降與兒童急性淋巴細胞白血病的生存有相關(guān)性[10]。本研究通過監(jiān)測兒童急性淋巴細胞白血病患兒血漿miR233水平發(fā)現(xiàn)，其在初診組和復發(fā)組的表達水平與其在骨髓中的表達呈現(xiàn)相同的趨勢，但血漿miR233在緩解組的表達與正常組相比并未出現(xiàn)統(tǒng)計學意義，這可能與我們的病例樣本不足有關(guān)。同時，我們對3種血漿miRNA對兒童急性淋巴細胞白血病的診斷價值進行了研究，發(fā)現(xiàn)血漿miR150、miR155、miR233對急性白血病的診斷均有較高的價值，但是由于每種血漿miRNA均可異常于表達多種疾病中，僅檢測單個miRNA時往往會造成在疾病診斷時特異性不高的情況，因此，為了提高疾病診斷的精確度，需要多種miRNA聯(lián)合檢測。本研究的結(jié)果也證實，將miR150、miR155、miR2333種血漿miRNA聯(lián)合檢測時的特異度和敏感度更高。綜上所述，血漿miR150、miR155、miR233在兒童急性淋巴細胞白血病的不同階段呈現(xiàn)不同的表達特點，可作為監(jiān)測該疾病進展的有效指標，且3種血漿miRNA聯(lián)合檢測的精確度更高，對該疾病的診斷、治療和復發(fā)的監(jiān)測有較好的應用價值?！鞠嚓P(guān)文獻】陳曉曦,吳劍蓉,萬朝敏,等.32J〕.華西醫(yī)學,2015,30(5):885-889.RaghuwanshiS,KarnatiHK,SarvothamanS,etal.MicroRNAs:Keyplayersinhematopoiesis〔J〕.AdvExpMedBiol,2015,887:171-211.SchotteD,DeMenezesRX,AkbariMoqadamF,etal.MicroRNAcharacterizegeneticdiversityanddrugresistanceinpediatricacutelymphoblasticleukemia〔J〕.Haematologica,2011,96(5):703-711.miRNAJ〕.中國小兒血液與腫瘤雜志,2015,20(2):69-73..microRNAJ〕.實用癌癥雜志,2016,31(1):165-168.CukK,ZucknickM,MadhavanD,etal.PlasmamicroRNApanelforminimallyin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