神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件

LHW神經(jīng)生物學(xué)常用形庵學(xué)研究方法LHW1LHW組織閥的程1定(fixation目的:防止組織自溶,保護(hù)組織免受微生物侵襲,保存組織成份不被破壞丟失,維持組織結(jié)構(gòu)使之正確的反應(yīng)生活狀態(tài)。固定劑:4%多聚甲醛(常用)方法:浸泡固定,灌注固定2切片(section):石蠟切片,冰凍切片LHW2LHW(-)尼氏染色方法(Nisslstaining):1.定義:是用堿性染料染神經(jīng)組織的一種方法,神經(jīng)組織中可與堿性染料結(jié)合的主要成份是核酸,經(jīng)元胞體中有大量核糖核酸,主要以尼氏小體的形式存在。細(xì)胞核中染色質(zhì)少,故染色淺,但有明顯的核仁。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的核中染色質(zhì)較多,著色較深,但胞漿不著色。電鏡下尼氏小體是許多規(guī)則平行排列并相互夠通的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以及其間的游離核糖體組成LHW3LHW2用于尼氏染色的常用染料有:焦油紫(cresylviolet硫堇(thionine)甲苯胺藍(lán)(toluidineblue)LHW4LHW焦油紫染色法:石蠟切片或冰凍切片0.1%焦油紫染液一37℃5-10min烝餾水洗-70%Alc3min95%Ac3min100%Ac1min×3次二甲苯5min×2次·封片。結(jié)果:尼氏小體紫色,本底無(wú)色。LHW5LHWDLGDRGCresylvioletstainingLHW6LHW09ThioninestainingCresylvioletstainingLHW7LHW高爾基技術(shù)(Golgitechnique)TheGolgi(andrelated)methodsworkbystainingtissuewithsilvernitratewhichisthenreducedtosilver.Thisproducesuniformdarkcoloringofthewholeneuron.ThemorphologyofdendritesandaxoncanbestudiedindetailLHW8LHWCerebellumcortexneuronLHW9LHW神經(jīng)束路示蹤利用軸漿運(yùn)輸現(xiàn)象追蹤神經(jīng)元之間聯(lián)系的種方法示蹤劑:HRP(horseradishperoxidase,辣根過(guò)氧化物酶),快藍(lán)(fastblue),熒光金(fluorogold),核黃(nuclearyellow),神經(jīng)生物素(neurobiotin),生物素化葡聚糖胺(biotinylateddextranamine,BDA)LHW10神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件11神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件12神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件13神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件14神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件15神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件16神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件17神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件18神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件19神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件20神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件21神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件22神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件23神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件24神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件25神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件26神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件27神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件28神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件29神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件30神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件31神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件32神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件33神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件34神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件35神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件36神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件37神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件38神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件39神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件40神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件41神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件42神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件43神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件44神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件45神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件46神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件47神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件48神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件49神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件50神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件51神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件52神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件53神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件54神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件55神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件56神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件57神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件58神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件59神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件60神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件61神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件62神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件63神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件64神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件65神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件66神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件67LHW神經(jīng)生物學(xué)常用形庵學(xué)研究方法LHW68LHW組織閥的程1定(fixation目的:防止組織自溶,保護(hù)組織免受微生物侵襲,保存組織成份不被破壞丟失,維持組織結(jié)構(gòu)使之正確的反應(yīng)生活狀態(tài)。固定劑:4%多聚甲醛(常用)方法:浸泡固定,灌注固定2切片(section):石蠟切片,冰凍切片LHW69LHW(-)尼氏染色方法(Nisslstaining):1.定義:是用堿性染料染神經(jīng)組織的一種方法,神經(jīng)組織中可與堿性染料結(jié)合的主要成份是核酸,經(jīng)元胞體中有大量核糖核酸,主要以尼氏小體的形式存在。細(xì)胞核中染色質(zhì)少,故染色淺,但有明顯的核仁。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的核中染色質(zhì)較多,著色較深,但胞漿不著色。電鏡下尼氏小體是許多規(guī)則平行排列并相互夠通的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以及其間的游離核糖體組成LHW70LHW2用于尼氏染色的常用染料有:焦油紫(cresylviolet硫堇(thionine)甲苯胺藍(lán)(toluidineblue)LHW71LHW焦油紫染色法:石蠟切片或冰凍切片0.1%焦油紫染液一37℃5-10min烝餾水洗-70%Alc3min95%Ac3min100%Ac1min×3次二甲苯5min×2次·封片。結(jié)果:尼氏小體紫色,本底無(wú)色。LHW72LHWDLGDRGCresylvioletstainingLHW73LHW09ThioninestainingCresylvioletstainingLHW74LHW高爾基技術(shù)(Golgitechnique)TheGolgi(andrelated)methodsworkbystainingtissuewithsilvernitratewhichisthenreducedtosilver.Thisproducesuniformdarkcoloringofthewholeneuron.ThemorphologyofdendritesandaxoncanbestudiedindetailLHW75LHWCerebellumcortexneuronLHW76LHW神經(jīng)束路示蹤利用軸漿運(yùn)輸現(xiàn)象追蹤神經(jīng)元之間聯(lián)系的種方法示蹤劑:HRP(horseradishperoxidase,辣根過(guò)氧化物酶),快藍(lán)(fastblue),熒光金(fluorogold),核黃(nuclearyellow),神經(jīng)生物素(neurobiotin),生物素化葡聚糖胺(biotinylateddextranamine,BDA)LHW77神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件78神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件79神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件80神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件81神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件82神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件83神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件84神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件85神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件86神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件87神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件88神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件89神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件90神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件91神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件92神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件93神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件94神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件95神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件96神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件97神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件98神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件99神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件100神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件101神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件102神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件103神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件104神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件105神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件106神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件107神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件108神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件109神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件110神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件111神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件112神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件113神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件114神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件115神-經(jīng)-生-物-學(xué)-常-用-形-態(tài)-學(xué)-研-究-方-法課件116