檢驗(yàn)科生物安全防護(hù)課件

以前的實(shí)驗(yàn)室...現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)室對(duì)個(gè)人防護(hù)有了新的要求...1以前的實(shí)驗(yàn)室...現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)室對(duì)個(gè)人防護(hù)有了新的要求...1生物安全概要簡(jiǎn)介實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染生物危害分類感染/生物危害控制溢出響應(yīng)生物醫(yī)學(xué)廢棄物處理總結(jié)2生物安全概要簡(jiǎn)介2什么是生物安全?從業(yè)人員處理生物危害材料時(shí)的措施，以避免感染自己、他人或環(huán)境達(dá)到此目的主要通過：工程學(xué)控制行政管理控制操作與規(guī)程個(gè)體防護(hù)設(shè)備3什么是生物安全?從業(yè)人員處理生物危害材料時(shí)的措施，以避免感染什么是生物危害?例如：病毒、細(xì)菌、真菌和寄生蟲以及他們的毒素血液和體液,還有人和動(dòng)物的組織變異的細(xì)胞系和一些特定類型的核酸

是由生物或者此種生物產(chǎn)生的物質(zhì)引起的對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境具有潛在威脅4什么是生物危害?例如：是由生物或者此種生物產(chǎn)生的物質(zhì)為什么我們關(guān)注生物危害物質(zhì)？可能獲得實(shí)驗(yàn)室感染(LAI)環(huán)境污染造成研究的污染公眾知曉5為什么我們關(guān)注生物危害物質(zhì)？可能獲得實(shí)驗(yàn)室感染(LAI)5實(shí)驗(yàn)室感染傳播途徑易感宿主感染源經(jīng)皮接種吸入氣溶膠粘膜接觸食入培養(yǎng)物和儲(chǔ)存物研究的動(dòng)物標(biāo)本免疫系統(tǒng)免疫狀況年齡6實(shí)驗(yàn)室感染傳播途徑易感宿主感染源經(jīng)皮接種培養(yǎng)物和儲(chǔ)存物免疫系只有20%可查到原因80%是由人為的錯(cuò)誤造成的20%是由于設(shè)備故障造成的排在前4位的導(dǎo)致感染的事故溢出或?yàn)R出注射器及針尖銳的物體，碎玻璃動(dòng)物或體外寄生蟲的抓傷或咬傷實(shí)驗(yàn)室感染7只有20%可查到原因?qū)嶒?yàn)室感染7實(shí)驗(yàn)室感染誰什么哪里何時(shí)如何研究者SARS臺(tái)灣2003年12月微生物學(xué)家西尼羅病毒美國(guó)2002年8月劃傷實(shí)驗(yàn)室工作人員流腦美國(guó)2000年氣溶膠?實(shí)驗(yàn)室工作人員牛痘病毒歐洲2002年接觸8實(shí)驗(yàn)室感染誰什么哪里何時(shí)如何研究者SARS臺(tái)灣2003年121979－1999年間實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染（LAI）的統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)室感染91979－1999年間實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染（LAI）的統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)室感暴露的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)的病原體體液的類型暴露的途徑暴露的持續(xù)時(shí)間暴露過程中的血液量此次暴露病毒的濃度個(gè)人保護(hù)設(shè)備使用10暴露的風(fēng)險(xiǎn)10如果發(fā)生了暴露或可能發(fā)生了暴露開始急救通知你的管理者或指定的人向醫(yī)院的急診部門或大學(xué)的衛(wèi)生服務(wù)部門報(bào)告向職業(yè)衛(wèi)生、傷殘和死亡辦公室報(bào)告（電話或網(wǎng)絡(luò)）11如果發(fā)生了暴露或可能發(fā)生了暴露11全面預(yù)防預(yù)防血傳病原體傳播的最簡(jiǎn)單的行之有效的方法包括: 教育洗手穿防護(hù)設(shè)備使用安全的工作規(guī)程

如果不能保證樣品的非感染性，按照感染性樣品處理Ifsamplescannotbeguaranteednon-infective……treatasinfectious!12全面預(yù)防預(yù)防血傳病原體傳播的最簡(jiǎn)單的行之有效的方法如果不能保生物危害的分類常見病原體非傳統(tǒng)的病原體重組DNA組織培養(yǎng)動(dòng)物工作解剖的標(biāo)本13生物危害的分類常見病原體13BSL4BSL3BSL2BSL1__水平按箭頭方向由低到高

微生物對(duì)人、動(dòng)物、植物和/或環(huán)境的危險(xiǎn)性程序和設(shè)備需求

圍堵策略水平需求

對(duì)人員、環(huán)境和社區(qū)的保護(hù)程度生物危害的等級(jí)14BSL4BSL3BSL2BSL1__水平按箭頭方向由危險(xiǎn)分組個(gè)體危險(xiǎn)公眾危險(xiǎn)遏制例子1LowLowLevel1大腸桿菌細(xì)桿菌2ModerateLimitedLevel2大腸桿菌0157:H7,鏈球菌、沙門氏菌、腺病毒、肝炎病毒A、B、C，流感，麻疹。3HighLowLevel3炭疽桿菌，結(jié)核分支桿菌，漢坦病毒，HIV，黃熱病度4HighHighLevel4拉沙病毒,埃博拉病毒,馬爾堡病毒UnlikelytocausediseaseinhealthyworkersoranimalsRarelycauseserioushumanoranimaldiseaseMaycauseseriousdiseaseLikelytocauseveryseriousdisease常見病原體的等級(jí)15危險(xiǎn)個(gè)體危險(xiǎn)公眾危險(xiǎn)遏制例子1LowLowLevel12M不常見的病原體傳播性的海綿體腦病阮病毒疾病；致死性神經(jīng)變性情況庫賈氏病,新型克雅氏病,瘋牛病,綿羊瘙癢病，慢性消耗性疾病。對(duì)通常的滅活病毒的破壞方法產(chǎn)生抗性與危害處理辦公室接觸以評(píng)估其需求（防護(hù)、程序、廢棄物的處理）16不常見的病原體傳播性的海綿體腦病阮病毒疾??；致死性神經(jīng)變性情重組DNA危險(xiǎn)級(jí)別依賴于DNA的來源、載體及宿主

生物安全委員會(huì)將幫助研究者作出這方面的判斷遺傳工程=在體外將遺傳物質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞參入到另一個(gè)細(xì)胞17重組DNA危險(xiǎn)級(jí)別依賴于DNA的來源、載體及宿主遺傳工程1組織培養(yǎng)一般可能含有致病微生物的潛在風(fēng)險(xiǎn)Level2人和靈長(zhǎng)類的含有支原體的細(xì)胞系當(dāng)使用新的細(xì)胞系時(shí)要進(jìn)行詳細(xì)的評(píng)估其他Level118組織培養(yǎng)一般可能含有致病微生物的潛在風(fēng)險(xiǎn)Level2人和靈動(dòng)物工作動(dòng)物可儲(chǔ)存感染性的微生物（自然的或引進(jìn)的）等級(jí)基于所從事工作的類型對(duì)所有從事動(dòng)物工作的人員都需要進(jìn)行專門的動(dòng)物照料培訓(xùn)所有的工作包括動(dòng)物的使用必須得到動(dòng)物委員會(huì)的許可19動(dòng)物工作動(dòng)物可儲(chǔ)存感染性的微生物（自然的或引進(jìn)的）19解剖的標(biāo)本所有的標(biāo)本都應(yīng)考慮其可能存在的感染性微生物考慮標(biāo)本的類型尤為重要血液,器官,組織脊髓,腦組織來自于感染的病人一般而言，生物2級(jí)僅僅依據(jù)于其工作的特性20解剖的標(biāo)本所有的標(biāo)本都應(yīng)考慮其可能存在的感染性微生物20感染/生物危害控制工程控制管理控制實(shí)踐與操作個(gè)人防護(hù)設(shè)備21感染/生物危害控制工程控制21工程控制在技術(shù)層面上,通過改變危害的來源以減少或根除危害的暴露防護(hù):一道vs二道防護(hù)水平22工程控制在技術(shù)層面上,通過改變危害的來源以減少或根除危害第一道防護(hù)（一級(jí)屏障）確保工作人員和直接環(huán)境免受感染性微生物的暴露‘保護(hù)性的外殼’封閉感染性的微生物或動(dòng)物培養(yǎng)皿,玻璃罐,瓶塞等生物安全柜，手套箱和動(dòng)物籠等裝備

控制的效果取決于防護(hù)的完整性23第一道防護(hù)（一級(jí)屏障）確保工作人員和直接環(huán)境免受感染性微生物第二道防護(hù)（二級(jí)屏障）保護(hù)實(shí)驗(yàn)室外的環(huán)境免遭暴露包括實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和規(guī)章制度24第二道防護(hù)（二級(jí)屏障）保護(hù)實(shí)驗(yàn)室外的環(huán)境免遭暴露24生物安全防護(hù)水平防護(hù)水平與危險(xiǎn)水平相似生物安全委員會(huì)將對(duì)研究提案進(jìn)行評(píng)估以確保防護(hù)水平恰當(dāng)。一級(jí)二級(jí)三級(jí)四級(jí)25生物安全防護(hù)水平防護(hù)水平與危險(xiǎn)水平相似25一級(jí)水平

最基本的實(shí)驗(yàn)室不需要特別的設(shè)計(jì)特性不需要生物安全柜可在開放的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行工作26一級(jí)水平最基本的實(shí)驗(yàn)室26二級(jí)水平

具有生物危害2級(jí)的臨床、診斷、研究和教學(xué)部門如果具有氣溶膠或?yàn)R出的潛在風(fēng)險(xiǎn)，需要一級(jí)或二級(jí)生物安全柜必須制定處理溢出的應(yīng)急方案使用權(quán)應(yīng)加以控制27二級(jí)水平具有生物危害2級(jí)的臨床、診斷、研究和教學(xué)部門27專門的設(shè)計(jì)和建造一級(jí)屏障保護(hù)個(gè)體二級(jí)屏障保護(hù)環(huán)境所有工作人員必須進(jìn)行專門的培訓(xùn)：病原微生物的使用，個(gè)人防護(hù)設(shè)備，設(shè)備、廢棄物處理，還有實(shí)踐與操作三級(jí)水平

安全柜：Ⅲ型(全密封型)28專門的設(shè)計(jì)和建造三級(jí)水平安全柜：Ⅲ型(全密封型)28四級(jí)水平在一個(gè)國(guó)家一般只有一個(gè)設(shè)計(jì)規(guī)范異常的嚴(yán)格，工作人員完全與感染性材料隔離29四級(jí)水平在一個(gè)國(guó)家一般只有一個(gè)2930303131生物安全柜對(duì)生物病原物理防護(hù)的有效方法，尤其當(dāng)產(chǎn)生氣溶膠時(shí)。高效分子空氣過濾器能以99.97%的效率去除顆粒（最小0.3微米）有三個(gè)主要級(jí)別的安全柜（I,II,III）能提供不同水平的保護(hù)。32生物安全柜對(duì)生物病原物理防護(hù)的有效方法，尤其當(dāng)產(chǎn)生氣溶膠時(shí)。在生物安全柜內(nèi)安全操作使用前:確保生物安全柜經(jīng)過檢驗(yàn)關(guān)閉紫外燈，打開熒光燈用適宜的消毒劑消毒工作臺(tái)面將最基本的條目放入安全柜在工作之前，讓排風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10分鐘33在生物安全柜內(nèi)安全操作使用前:33使用中:確保材料和器材放置在接近安全柜內(nèi)的后部，尤其是產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備，不要阻擋通風(fēng)口。使用技術(shù)減少飛濺和氣溶膠的產(chǎn)生?？偟墓ぷ髁鞒虘?yīng)該是從清潔區(qū)域到污染區(qū)域。減少運(yùn)動(dòng)以免阻礙氣流在生物安全柜內(nèi)打開火焰存在著爭(zhēng)議。在生物安全柜內(nèi)安全操作34使用中:在生物安全柜內(nèi)安全操作34使用后:保持排風(fēng)機(jī)工作至少5分鐘以清潔安全柜移走和消毒用過的器材和材料消毒安全柜臺(tái)面關(guān)閉排風(fēng)機(jī)和熒光燈，打開紫外燈。在生物安全柜內(nèi)安全操作35使用后:在生物安全柜內(nèi)安全操作35保養(yǎng):2次/天--擦拭工作臺(tái)面1次/周–擦拭紫外燈1次/月–擦拭所有的垂直面1次/年–紫外燈強(qiáng)度驗(yàn)證

--用甲醛氣體去除沾染

(ORM)--認(rèn)證(ORM)在生物安全柜內(nèi)安全操作36保養(yǎng):在生物安全柜內(nèi)安全操作36行政管理控制危險(xiǎn)評(píng)估醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)培訓(xùn)/教育資源檢查符號(hào)&標(biāo)志根據(jù)程序、信息和方法將暴露危險(xiǎn)降至最低37行政管理控制危險(xiǎn)評(píng)估根據(jù)程序、信息和方法將暴露危險(xiǎn)降至最低3風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定防護(hù)的種類,方法和所需的安全設(shè)備使用者的職責(zé),

能從ORM得到的幫助考慮的方面有:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),方法,個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)和知識(shí)情況等http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl/lbg-ldmbl/pdf/lbg-3e-draft.pdf

*行政管理控制38風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估http://www.hc-sc.gc.ca/pph醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)

用醫(yī)學(xué)方法監(jiān)測(cè)環(huán)境污染對(duì)人類健康的影響，觀察人群健康水平和人體對(duì)環(huán)境污染的生物學(xué)效應(yīng)。培訓(xùn)&教育實(shí)驗(yàn)室專門的政策和規(guī)程生物安全培訓(xùn)行政管理控制39醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)行政管理控制39檢查日常的自查生物安全檢查清單此外,

檢查實(shí)驗(yàn)室以確保其按照規(guī)程或

指導(dǎo)方針工作并提供反饋意見行政管理控制40檢查行政管理控制40標(biāo)記&標(biāo)簽生物危害標(biāo)記必須粘貼在使用生物危害材料的實(shí)驗(yàn)室的門上生物危害標(biāo)簽應(yīng)貼在使用生物病原的容器、設(shè)備和儲(chǔ)存裝置上行政管理控制41標(biāo)記&標(biāo)簽行政管理控制41實(shí)踐和規(guī)程總的安全指導(dǎo)方針好的微生物學(xué)實(shí)踐洗手專門的規(guī)程離心機(jī)注射器、針頭和其他的尖銳物移液管混勻器、研磨器、超聲破碎儀、冷凍真空干燥器接種環(huán)冷凍切片機(jī)42實(shí)踐和規(guī)程總的安全指導(dǎo)方針42一般實(shí)驗(yàn)室安全指導(dǎo)方針基本的常識(shí),你必須了解你所面對(duì)的實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)，并且經(jīng)過正確的培訓(xùn)以便處理這些危險(xiǎn)。最基本的是知道所有的實(shí)驗(yàn)危險(xiǎn)舉出5個(gè)例子?biosafety使用移液管和移液器使用接種環(huán)分離血清打開安瓶使用離心機(jī)43一般實(shí)驗(yàn)室安全指導(dǎo)方針基本的常識(shí),你必須了解你所面對(duì)的實(shí)驗(yàn)室良好的微生物實(shí)踐(GMP)基本的使用標(biāo)準(zhǔn)適用于所有的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工作目的預(yù)防實(shí)驗(yàn)室人員和環(huán)境被污染預(yù)防實(shí)驗(yàn)或樣本被污染無菌操作、減少氣溶膠產(chǎn)生、控制污染、個(gè)人防護(hù)、應(yīng)急反應(yīng)。44良好的微生物實(shí)踐(GMP)基本的使用標(biāo)準(zhǔn)適用于所有的微生物洗手預(yù)防感染的單純有效的方法之一如果經(jīng)常正確的執(zhí)行何時(shí)洗手？

開始任何操作之前離開實(shí)驗(yàn)室之前當(dāng)手有明顯的污物時(shí)在安全柜內(nèi)完成任何實(shí)驗(yàn)之前和之后每次脫掉手套時(shí)在觸及臉和嘴之前下班時(shí)Level1lab-anonantisepticsoapcanbeused

Level2lab-requiresantiseptichandwashingsolutions45洗手預(yù)防感染的單純有效的方法之一開始任何操作之前Level安全使用離心機(jī)使用前裂紋？過滿？平衡？蓋子或塞子安置正確？轉(zhuǎn)速能達(dá)到？使用可封閉的轉(zhuǎn)子

使用后離心完全停止？溢出或滲漏？使氣溶膠沉降（30分鐘）or在生物安全柜內(nèi)打開46安全使用離心機(jī)使用前46注射劑及針盡可能避免使用在生物安全柜內(nèi)完成感染性材料的操作使用注射器時(shí)小心抽吸保護(hù)從塞子退出的針不要弄彎、切斷或翻新針處理所有使用過的針和注射器，將其放入黃色的尖銳物體盛放器內(nèi)47注射劑及針盡可能避免使用47移液管禁用嘴吸移液管所有的生物危害材料的移液管都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)使用。不要使液體溢出，使用移液管裝置。避免飛濺，沿管壁將液體慢慢注入試管或瓶?jī)?nèi)不要用抽-吸混勻溶液?？稍俣仁褂玫囊埔汗軕?yīng)水平放置在已消毒的淺盤上48移液管禁用嘴吸移液管48混勻器、研磨器、超聲破碎器和冷凍干燥器盡可能地在BSC內(nèi)操作，再打開前靜置5分鐘以使氣溶膠沉降。安全地混勻不要用玻璃混勻罐使用后立即清除污染冷凍真空干燥器使用玻璃制造的真空部件時(shí)，確保使用前無損壞。使用后所有的表面都要消毒盡可能使用真空蒸發(fā)套49混勻器、研磨器、超聲破碎器和冷凍干燥器盡可能地在BSC內(nèi)操作接種環(huán)在開放的火焰上滅菌可能產(chǎn)生含有活微生物的氣溶膠柄越短，越能減少震動(dòng)一次性的塑料接種環(huán)是較好的替代50接種環(huán)在開放的火焰上滅菌可能產(chǎn)生含有活微生物的氣溶膠50冷凍干燥器在準(zhǔn)備冰凍切片時(shí)戴手套，當(dāng)使用冷凍干燥器時(shí)戴厚手套。經(jīng)常性的去污(70%乙醇o(jì)r專門的消毒劑)防備和上鎖!51冷凍干燥器在準(zhǔn)備冰凍切片時(shí)戴手套，當(dāng)使用冷凍干燥器時(shí)戴厚手套個(gè)體防護(hù)設(shè)備個(gè)體防護(hù)設(shè)備是非常重要的防護(hù)屏障，也是最后一道防護(hù)線監(jiān)督者和使用者的職責(zé)就是確保使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備護(hù)目鏡手套實(shí)驗(yàn)室外衣鞋52個(gè)體防護(hù)設(shè)備個(gè)體防護(hù)設(shè)備是非常重要的防護(hù)屏障，也是最后一道防個(gè)體防護(hù)設(shè)備考慮的標(biāo)準(zhǔn)阻斷暴露的途徑提供保護(hù)的級(jí)別容易使用只有當(dāng)正確的選擇、適合、小心使用和個(gè)體培訓(xùn)才能產(chǎn)生效果確保離開實(shí)驗(yàn)室前脫下個(gè)體防護(hù)設(shè)備53個(gè)體防護(hù)設(shè)備考慮的標(biāo)準(zhǔn)53個(gè)體防護(hù)設(shè)備鞋襪應(yīng)該穿包裹腳趾的鞋，在一些較高級(jí)防護(hù)的實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物設(shè)施部門穿靴子。實(shí)驗(yàn)室外衣長(zhǎng)袖達(dá)膝的外衣有彈性的袖口后背系帶的長(zhǎng)大衣定期清洗54個(gè)體防護(hù)設(shè)備鞋襪54個(gè)體防護(hù)設(shè)備手套對(duì)于從事生物病原的人使用乳膠、腈、乙烯樹脂材料的手套測(cè)驗(yàn)的手套不應(yīng)再用，實(shí)用的手套能消毒再用，如果它們沒有變形的征兆。考慮彈性和手掌的長(zhǎng)度雙層手套危險(xiǎn)處理辦公室對(duì)那些具有過敏的人提供幫助，找到替換材質(zhì)的手套。

在公共場(chǎng)所不要帶實(shí)驗(yàn)手套55個(gè)體防護(hù)設(shè)備手套55個(gè)體防護(hù)設(shè)備眼和臉防護(hù)護(hù)目鏡、安全眼鏡可以保護(hù)眼睛面罩可以保護(hù)面部皮膚呼吸罩56個(gè)體防護(hù)設(shè)備眼和臉防護(hù)56溢出溢出反應(yīng)不同主要基于：溢出的是什么？溢出多少？在哪里溢出的?對(duì)環(huán)境潛在的風(fēng)險(xiǎn)是什么？溢出物應(yīng)該被立即清理（除非產(chǎn)生了氣溶膠），確保正確的去除污染方法確保恰當(dāng)?shù)氖褂脗€(gè)體防護(hù)設(shè)備，清除設(shè)備容易使用57溢出溢出反應(yīng)不同主要基于：57溢出一般清理用吸收性物質(zhì)蓋住溢出區(qū)域用恰當(dāng)?shù)南緞?0%漂白劑）浸泡溢出區(qū)從吸收性物質(zhì)的外圍向內(nèi)倒消毒劑確保每個(gè)玻璃碎片都被撿起（用鑷子?。┎⑵浞湃爰怃J物品盛放器內(nèi)。

作用20-30分鐘

擦拭掉吸收性物質(zhì)廢棄物應(yīng)放入適當(dāng)?shù)纳镂：ξ锲反?，以便高壓滅菌處?8溢出一般清理用吸收性物質(zhì)蓋住溢出區(qū)域58溢出

–特殊案例在離心機(jī)內(nèi)在生物安全柜內(nèi)開放區(qū)域(實(shí)驗(yàn)室,再轉(zhuǎn)送過程中)可用的溢出響應(yīng)方案在：http://www.uottawa.ca/services/ehss/SPILLRESPONSEPLAN.pdf59溢出–特殊案例在離心機(jī)內(nèi)59廢棄物處理生物廢棄物(未處理)60廢棄物處理生物廢棄物(未處理)60廢棄物處理生物廢棄物(已處理)WithH2O1:10IncompliancewithSeweruseby-laws*61廢棄物處理生物廢棄物(已處理)WithH2O1:10I特殊的廢棄物EB（溴化乙錠）(4.2g亞硝酸鈉(NaNO2)和20ml次磷酸(50%)(H3PO2)加蒸餾水至300ml）

用蘸取清洗液的紙巾清洗1次污染區(qū)，然后用紙巾蘸取自來水清洗5次，再用新的紙巾擦拭1次，最后用紫外燈檢測(cè)，以確保EB被完全清除。RecombinantDNA

（重組DNA）

液體培養(yǎng)物必須加次氯酸鈉至終濃度10%，作用至少5分鐘，然后倒入下水道。62特殊的廢棄物EB（溴化乙錠）62總結(jié)生物安全–保證個(gè)體和環(huán)境不受感染生物危害–微生物,血液和體液，組織和組織培養(yǎng)大學(xué)內(nèi)的每一個(gè)人都有職責(zé)正確的知識(shí)、計(jì)劃和關(guān)注，生物暴露是可避免的63總結(jié)生物安全–保證個(gè)體和環(huán)境不受感染63謝謝！64謝謝！64以前的實(shí)驗(yàn)室...現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)室對(duì)個(gè)人防護(hù)有了新的要求...65以前的實(shí)驗(yàn)室...現(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)室對(duì)個(gè)人防護(hù)有了新的要求...1生物安全概要簡(jiǎn)介實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染生物危害分類感染/生物危害控制溢出響應(yīng)生物醫(yī)學(xué)廢棄物處理總結(jié)66生物安全概要簡(jiǎn)介2什么是生物安全?從業(yè)人員處理生物危害材料時(shí)的措施，以避免感染自己、他人或環(huán)境達(dá)到此目的主要通過：工程學(xué)控制行政管理控制操作與規(guī)程個(gè)體防護(hù)設(shè)備67什么是生物安全?從業(yè)人員處理生物危害材料時(shí)的措施，以避免感染什么是生物危害?例如：病毒、細(xì)菌、真菌和寄生蟲以及他們的毒素血液和體液,還有人和動(dòng)物的組織變異的細(xì)胞系和一些特定類型的核酸

是由生物或者此種生物產(chǎn)生的物質(zhì)引起的對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境具有潛在威脅68什么是生物危害?例如：是由生物或者此種生物產(chǎn)生的物質(zhì)為什么我們關(guān)注生物危害物質(zhì)？可能獲得實(shí)驗(yàn)室感染(LAI)環(huán)境污染造成研究的污染公眾知曉69為什么我們關(guān)注生物危害物質(zhì)？可能獲得實(shí)驗(yàn)室感染(LAI)5實(shí)驗(yàn)室感染傳播途徑易感宿主感染源經(jīng)皮接種吸入氣溶膠粘膜接觸食入培養(yǎng)物和儲(chǔ)存物研究的動(dòng)物標(biāo)本免疫系統(tǒng)免疫狀況年齡70實(shí)驗(yàn)室感染傳播途徑易感宿主感染源經(jīng)皮接種培養(yǎng)物和儲(chǔ)存物免疫系只有20%可查到原因80%是由人為的錯(cuò)誤造成的20%是由于設(shè)備故障造成的排在前4位的導(dǎo)致感染的事故溢出或?yàn)R出注射器及針尖銳的物體，碎玻璃動(dòng)物或體外寄生蟲的抓傷或咬傷實(shí)驗(yàn)室感染71只有20%可查到原因?qū)嶒?yàn)室感染7實(shí)驗(yàn)室感染誰什么哪里何時(shí)如何研究者SARS臺(tái)灣2003年12月微生物學(xué)家西尼羅病毒美國(guó)2002年8月劃傷實(shí)驗(yàn)室工作人員流腦美國(guó)2000年氣溶膠?實(shí)驗(yàn)室工作人員牛痘病毒歐洲2002年接觸72實(shí)驗(yàn)室感染誰什么哪里何時(shí)如何研究者SARS臺(tái)灣2003年121979－1999年間實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染（LAI）的統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)室感染731979－1999年間實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染（LAI）的統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)室感暴露的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)的病原體體液的類型暴露的途徑暴露的持續(xù)時(shí)間暴露過程中的血液量此次暴露病毒的濃度個(gè)人保護(hù)設(shè)備使用74暴露的風(fēng)險(xiǎn)10如果發(fā)生了暴露或可能發(fā)生了暴露開始急救通知你的管理者或指定的人向醫(yī)院的急診部門或大學(xué)的衛(wèi)生服務(wù)部門報(bào)告向職業(yè)衛(wèi)生、傷殘和死亡辦公室報(bào)告（電話或網(wǎng)絡(luò)）75如果發(fā)生了暴露或可能發(fā)生了暴露11全面預(yù)防預(yù)防血傳病原體傳播的最簡(jiǎn)單的行之有效的方法包括: 教育洗手穿防護(hù)設(shè)備使用安全的工作規(guī)程

如果不能保證樣品的非感染性，按照感染性樣品處理Ifsamplescannotbeguaranteednon-infective……treatasinfectious!76全面預(yù)防預(yù)防血傳病原體傳播的最簡(jiǎn)單的行之有效的方法如果不能保生物危害的分類常見病原體非傳統(tǒng)的病原體重組DNA組織培養(yǎng)動(dòng)物工作解剖的標(biāo)本77生物危害的分類常見病原體13BSL4BSL3BSL2BSL1__水平按箭頭方向由低到高

微生物對(duì)人、動(dòng)物、植物和/或環(huán)境的危險(xiǎn)性程序和設(shè)備需求

圍堵策略水平需求

對(duì)人員、環(huán)境和社區(qū)的保護(hù)程度生物危害的等級(jí)78BSL4BSL3BSL2BSL1__水平按箭頭方向由危險(xiǎn)分組個(gè)體危險(xiǎn)公眾危險(xiǎn)遏制例子1LowLowLevel1大腸桿菌細(xì)桿菌2ModerateLimitedLevel2大腸桿菌0157:H7,鏈球菌、沙門氏菌、腺病毒、肝炎病毒A、B、C，流感，麻疹。3HighLowLevel3炭疽桿菌，結(jié)核分支桿菌，漢坦病毒，HIV，黃熱病度4HighHighLevel4拉沙病毒,埃博拉病毒,馬爾堡病毒UnlikelytocausediseaseinhealthyworkersoranimalsRarelycauseserioushumanoranimaldiseaseMaycauseseriousdiseaseLikelytocauseveryseriousdisease常見病原體的等級(jí)79危險(xiǎn)個(gè)體危險(xiǎn)公眾危險(xiǎn)遏制例子1LowLowLevel12M不常見的病原體傳播性的海綿體腦病阮病毒疾??；致死性神經(jīng)變性情況庫賈氏病,新型克雅氏病,瘋牛病,綿羊瘙癢病，慢性消耗性疾病。對(duì)通常的滅活病毒的破壞方法產(chǎn)生抗性與危害處理辦公室接觸以評(píng)估其需求（防護(hù)、程序、廢棄物的處理）80不常見的病原體傳播性的海綿體腦病阮病毒疾??；致死性神經(jīng)變性情重組DNA危險(xiǎn)級(jí)別依賴于DNA的來源、載體及宿主

生物安全委員會(huì)將幫助研究者作出這方面的判斷遺傳工程=在體外將遺傳物質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞參入到另一個(gè)細(xì)胞81重組DNA危險(xiǎn)級(jí)別依賴于DNA的來源、載體及宿主遺傳工程1組織培養(yǎng)一般可能含有致病微生物的潛在風(fēng)險(xiǎn)Level2人和靈長(zhǎng)類的含有支原體的細(xì)胞系當(dāng)使用新的細(xì)胞系時(shí)要進(jìn)行詳細(xì)的評(píng)估其他Level182組織培養(yǎng)一般可能含有致病微生物的潛在風(fēng)險(xiǎn)Level2人和靈動(dòng)物工作動(dòng)物可儲(chǔ)存感染性的微生物（自然的或引進(jìn)的）等級(jí)基于所從事工作的類型對(duì)所有從事動(dòng)物工作的人員都需要進(jìn)行專門的動(dòng)物照料培訓(xùn)所有的工作包括動(dòng)物的使用必須得到動(dòng)物委員會(huì)的許可83動(dòng)物工作動(dòng)物可儲(chǔ)存感染性的微生物（自然的或引進(jìn)的）19解剖的標(biāo)本所有的標(biāo)本都應(yīng)考慮其可能存在的感染性微生物考慮標(biāo)本的類型尤為重要血液,器官,組織脊髓,腦組織來自于感染的病人一般而言，生物2級(jí)僅僅依據(jù)于其工作的特性84解剖的標(biāo)本所有的標(biāo)本都應(yīng)考慮其可能存在的感染性微生物20感染/生物危害控制工程控制管理控制實(shí)踐與操作個(gè)人防護(hù)設(shè)備85感染/生物危害控制工程控制21工程控制在技術(shù)層面上,通過改變危害的來源以減少或根除危害的暴露防護(hù):一道vs二道防護(hù)水平86工程控制在技術(shù)層面上,通過改變危害的來源以減少或根除危害第一道防護(hù)（一級(jí)屏障）確保工作人員和直接環(huán)境免受感染性微生物的暴露‘保護(hù)性的外殼’封閉感染性的微生物或動(dòng)物培養(yǎng)皿,玻璃罐,瓶塞等生物安全柜，手套箱和動(dòng)物籠等裝備

控制的效果取決于防護(hù)的完整性87第一道防護(hù)（一級(jí)屏障）確保工作人員和直接環(huán)境免受感染性微生物第二道防護(hù)（二級(jí)屏障）保護(hù)實(shí)驗(yàn)室外的環(huán)境免遭暴露包括實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和規(guī)章制度88第二道防護(hù)（二級(jí)屏障）保護(hù)實(shí)驗(yàn)室外的環(huán)境免遭暴露24生物安全防護(hù)水平防護(hù)水平與危險(xiǎn)水平相似生物安全委員會(huì)將對(duì)研究提案進(jìn)行評(píng)估以確保防護(hù)水平恰當(dāng)。一級(jí)二級(jí)三級(jí)四級(jí)89生物安全防護(hù)水平防護(hù)水平與危險(xiǎn)水平相似25一級(jí)水平

最基本的實(shí)驗(yàn)室不需要特別的設(shè)計(jì)特性不需要生物安全柜可在開放的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行工作90一級(jí)水平最基本的實(shí)驗(yàn)室26二級(jí)水平

具有生物危害2級(jí)的臨床、診斷、研究和教學(xué)部門如果具有氣溶膠或?yàn)R出的潛在風(fēng)險(xiǎn)，需要一級(jí)或二級(jí)生物安全柜必須制定處理溢出的應(yīng)急方案使用權(quán)應(yīng)加以控制91二級(jí)水平具有生物危害2級(jí)的臨床、診斷、研究和教學(xué)部門27專門的設(shè)計(jì)和建造一級(jí)屏障保護(hù)個(gè)體二級(jí)屏障保護(hù)環(huán)境所有工作人員必須進(jìn)行專門的培訓(xùn)：病原微生物的使用，個(gè)人防護(hù)設(shè)備，設(shè)備、廢棄物處理，還有實(shí)踐與操作三級(jí)水平

安全柜：Ⅲ型(全密封型)92專門的設(shè)計(jì)和建造三級(jí)水平安全柜：Ⅲ型(全密封型)28四級(jí)水平在一個(gè)國(guó)家一般只有一個(gè)設(shè)計(jì)規(guī)范異常的嚴(yán)格，工作人員完全與感染性材料隔離93四級(jí)水平在一個(gè)國(guó)家一般只有一個(gè)2994309531生物安全柜對(duì)生物病原物理防護(hù)的有效方法，尤其當(dāng)產(chǎn)生氣溶膠時(shí)。高效分子空氣過濾器能以99.97%的效率去除顆粒（最小0.3微米）有三個(gè)主要級(jí)別的安全柜（I,II,III）能提供不同水平的保護(hù)。96生物安全柜對(duì)生物病原物理防護(hù)的有效方法，尤其當(dāng)產(chǎn)生氣溶膠時(shí)。在生物安全柜內(nèi)安全操作使用前:確保生物安全柜經(jīng)過檢驗(yàn)關(guān)閉紫外燈，打開熒光燈用適宜的消毒劑消毒工作臺(tái)面將最基本的條目放入安全柜在工作之前，讓排風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10分鐘97在生物安全柜內(nèi)安全操作使用前:33使用中:確保材料和器材放置在接近安全柜內(nèi)的后部，尤其是產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備，不要阻擋通風(fēng)口。使用技術(shù)減少飛濺和氣溶膠的產(chǎn)生?？偟墓ぷ髁鞒虘?yīng)該是從清潔區(qū)域到污染區(qū)域。減少運(yùn)動(dòng)以免阻礙氣流在生物安全柜內(nèi)打開火焰存在著爭(zhēng)議。在生物安全柜內(nèi)安全操作98使用中:在生物安全柜內(nèi)安全操作34使用后:保持排風(fēng)機(jī)工作至少5分鐘以清潔安全柜移走和消毒用過的器材和材料消毒安全柜臺(tái)面關(guān)閉排風(fēng)機(jī)和熒光燈，打開紫外燈。在生物安全柜內(nèi)安全操作99使用后:在生物安全柜內(nèi)安全操作35保養(yǎng):2次/天--擦拭工作臺(tái)面1次/周–擦拭紫外燈1次/月–擦拭所有的垂直面1次/年–紫外燈強(qiáng)度驗(yàn)證

--用甲醛氣體去除沾染

(ORM)--認(rèn)證(ORM)在生物安全柜內(nèi)安全操作100保養(yǎng):在生物安全柜內(nèi)安全操作36行政管理控制危險(xiǎn)評(píng)估醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)培訓(xùn)/教育資源檢查符號(hào)&標(biāo)志根據(jù)程序、信息和方法將暴露危險(xiǎn)降至最低101行政管理控制危險(xiǎn)評(píng)估根據(jù)程序、信息和方法將暴露危險(xiǎn)降至最低3風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估確定防護(hù)的種類,方法和所需的安全設(shè)備使用者的職責(zé),

能從ORM得到的幫助考慮的方面有:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),方法,個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)和知識(shí)情況等http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl/lbg-ldmbl/pdf/lbg-3e-draft.pdf

*行政管理控制102風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估http://www.hc-sc.gc.ca/pph醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)

用醫(yī)學(xué)方法監(jiān)測(cè)環(huán)境污染對(duì)人類健康的影響，觀察人群健康水平和人體對(duì)環(huán)境污染的生物學(xué)效應(yīng)。培訓(xùn)&教育實(shí)驗(yàn)室專門的政策和規(guī)程生物安全培訓(xùn)行政管理控制103醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)行政管理控制39檢查日常的自查生物安全檢查清單此外,

檢查實(shí)驗(yàn)室以確保其按照規(guī)程或

指導(dǎo)方針工作并提供反饋意見行政管理控制104檢查行政管理控制40標(biāo)記&標(biāo)簽生物危害標(biāo)記必須粘貼在使用生物危害材料的實(shí)驗(yàn)室的門上生物危害標(biāo)簽應(yīng)貼在使用生物病原的容器、設(shè)備和儲(chǔ)存裝置上行政管理控制105標(biāo)記&標(biāo)簽行政管理控制41實(shí)踐和規(guī)程總的安全指導(dǎo)方針好的微生物學(xué)實(shí)踐洗手專門的規(guī)程離心機(jī)注射器、針頭和其他的尖銳物移液管混勻器、研磨器、超聲破碎儀、冷凍真空干燥器接種環(huán)冷凍切片機(jī)106實(shí)踐和規(guī)程總的安全指導(dǎo)方針42一般實(shí)驗(yàn)室安全指導(dǎo)方針基本的常識(shí),你必須了解你所面對(duì)的實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)，并且經(jīng)過正確的培訓(xùn)以便處理這些危險(xiǎn)。最基本的是知道所有的實(shí)驗(yàn)危險(xiǎn)舉出5個(gè)例子?biosafety使用移液管和移液器使用接種環(huán)分離血清打開安瓶使用離心機(jī)107一般實(shí)驗(yàn)室安全指導(dǎo)方針基本的常識(shí),你必須了解你所面對(duì)的實(shí)驗(yàn)室良好的微生物實(shí)踐(GMP)基本的使用標(biāo)準(zhǔn)適用于所有的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工作目的預(yù)防實(shí)驗(yàn)室人員和環(huán)境被污染預(yù)防實(shí)驗(yàn)或樣本被污染無菌操作、減少氣溶膠產(chǎn)生、控制污染、個(gè)人防護(hù)、應(yīng)急反應(yīng)。108良好的微生物實(shí)踐(GMP)基本的使用標(biāo)準(zhǔn)適用于所有的微生物洗手預(yù)防感染的單純有效的方法之一如果經(jīng)常正確的執(zhí)行何時(shí)洗手？

開始任何操作之前離開實(shí)驗(yàn)室之前當(dāng)手有明顯的污物時(shí)在安全柜內(nèi)完成任何實(shí)驗(yàn)之前和之后每次脫掉手套時(shí)在觸及臉和嘴之前下班時(shí)Level1lab-anonantisepticsoapcanbeused

Level2lab-requiresantiseptichandwashingsolutions109洗手預(yù)防感染的單純有效的方法之一開始任何操作之前Level安全使用離心機(jī)使用前裂紋？過滿？平衡？蓋子或塞子安置正確？轉(zhuǎn)速能達(dá)到？使用可封閉的轉(zhuǎn)子

使用后離心完全停止？溢出或滲漏？使氣溶膠沉降（30分鐘）or在生物安全柜內(nèi)打開110安全使用離心機(jī)使用前46注射劑及針盡可能避免使用在生物安全柜內(nèi)完成感染性材料的操作使用注射器時(shí)小心抽吸保護(hù)從塞子退出的針不要弄彎、切斷或翻新針處理所有使用過的針和注射器，將其放入黃色的尖銳物體盛放器內(nèi)111注射劑及針盡可能避免使用47移液管禁用嘴吸移液管所有的生物危害材料的移液管都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)使用。不要使液體溢出，使用移液管裝置。避免飛濺，沿管壁將液體慢慢注入試管或瓶?jī)?nèi)不要用抽-吸混勻溶液?？稍俣仁褂玫囊埔汗軕?yīng)水平放置在已消毒的淺盤上112移液管禁用嘴吸移液管48混勻器、研磨器、超聲破碎器和冷凍干燥器盡可能地在BSC內(nèi)操作，再打開前靜置5分鐘以使氣溶膠沉降。安全地混勻不要用玻璃混勻罐使用后立即清除污染冷凍真空干燥器使用玻璃制造的真空部件時(shí)，確保使用前無損壞。使用后所有的表面都要消毒盡可能使用真空蒸發(fā)套113混勻器、研磨器、超聲破碎器和冷凍干燥器盡可能地在BSC內(nèi)操作接種環(huán)在開放的火焰上滅菌可能產(chǎn)生含有活微生物的氣溶膠柄越短，越能減少震動(dòng)一次性的塑料接種環(huán)是較好的替代114接種環(huán)在開放的火焰上滅菌可能產(chǎn)生含有活微生物的氣溶膠50冷凍干燥器在準(zhǔn)備冰凍切片時(shí)戴手套，當(dāng)使用冷凍干燥器時(shí)戴厚手套。經(jīng)常性的去污(70%乙醇o(jì)r專門的消毒劑)防備和上鎖!115冷凍干燥器在準(zhǔn)備冰凍切片時(shí)戴手套，當(dāng)使用冷凍干燥器時(shí)戴厚手套個(gè)體防護(hù)設(shè)備個(gè)體防護(hù)設(shè)備是