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神經(jīng)干動作電位、傳導(dǎo)速度及不應(yīng)期測定實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)神經(jīng)干標(biāo)本的制備。觀察坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動作電位、雙向性傳導(dǎo)并測定其傳導(dǎo)速度。觀察機械損傷對神經(jīng)興奮和傳導(dǎo)的影響學(xué)習(xí)絕對不應(yīng)期和相對不應(yīng)期的測定方法了解蛙類坐骨神經(jīng)干產(chǎn)生動作電位后其興奮性的規(guī)律性變化實驗原理用電刺激神經(jīng),在刺激電極的負(fù)極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化,當(dāng)去極化達到閾電位,膜上產(chǎn)生一次可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn),即動作電位神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動作電位是以膜外記錄方式記錄到的復(fù)合動作電位如果兩個引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面,興奮波先后通過兩個電極處,便引導(dǎo)出兩個方向相反的電位波形,稱雙相動作電位雙相動作電位BiphasicActionPotential興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計+++++++++++++++------------------------------+++++++++++++++----++++++++----動作電位的傳導(dǎo)ConductionofAP
動作電位以局部電流的形式傳導(dǎo)++++++++++++++++--------------------------------++++++++++++++++----++++++++----局部電流實驗原理:如果兩個引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)纖維完全損傷,興奮波只通過第一個引導(dǎo)電極,不能傳至第二個引導(dǎo)電極,則只能引導(dǎo)出一個方向的電位偏向波形,稱單向動作電位單相動作電位MonophasicActionPotential損傷區(qū)興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計刺激偽跡(Stimulusartifact)刺激偽跡AP刺激器放大器+-地刺激電流i-i+R+R-地刺激偽跡是刺激電流通過導(dǎo)電介質(zhì)擴散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號。動作電位傳導(dǎo)速度的測定
MeasurementofConductionVelocityofAP-+SΔt
傳導(dǎo)速度測定
υ=
SACΔt刺激器輸入通道R1-Rr1+R2-R2+實驗原理:神經(jīng)組織在接受一次刺激產(chǎn)生興奮后,其興奮性將會發(fā)生規(guī)律性的變化,依次經(jīng)過絕對不應(yīng)期、相對不應(yīng)期、超常期和低常期,然后回到正常水平。采用兩次脈沖,通過調(diào)節(jié)兩次脈沖間隔,可測得坐骨神經(jīng)的絕對不應(yīng)期和相對不應(yīng)期材料和方法-材料蟾蜍或蛙;蛙板、探針、粗剪刀、細(xì)剪刀、尖鑷子、玻璃分針、大頭針、培養(yǎng)皿、滴管、瓷碗、鋅銅弓或鋁銀電極、任氏液、鐵支架,張力換能器,瓷碗,培養(yǎng)皿,微機生物信號采集處理儀等。
1.坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備1.1毀腦脊髓
1.2剪除軀干上部及內(nèi)臟
1.3剝皮(之后洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械)1.4完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本1.4.1分離兩腿
1.4.2游離坐骨神經(jīng)
1.4.3完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本
材料和方法-方法剪除軀干上部及內(nèi)臟圖4-1-4剝?nèi)テつwN標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)干制備蟾蜍毀腦脊髓,去上肢和內(nèi)臟,下肢剝皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;標(biāo)本腹面向上,用玻璃分針分離脊柱兩側(cè)神經(jīng)叢,用線在近脊柱處結(jié)扎,剪斷神經(jīng);將神經(jīng)干從腹面移向背面。標(biāo)本背面向上固定,從大腿至跟腱分離坐骨神經(jīng)。坐骨神經(jīng)標(biāo)本置任氏液中備用。
采樣頻率通道模式掃描速度靈敏度濾波頻率時間常數(shù)材料和方法-方法3.傳導(dǎo)速度的測定(及參數(shù)設(shè)置)材料和方法-方法4.不應(yīng)期的測定(及參數(shù)設(shè)置)采用雙刺激模式,逐步增加波間隔第二個動作電位出現(xiàn)時的刺激間隔及第二個動作電位振幅剛開始與第一個相等時的刺激間隔
討論單相、雙相動作電位的形成動作電位傳導(dǎo)的速度測定的原理和常見的影響因素絕對不應(yīng)期和相對不應(yīng)期形成的原因影響實驗結(jié)果的主要干擾因素注意事項神經(jīng)盡可能分離得長一些標(biāo)本制備時要注意保持標(biāo)本的濕潤標(biāo)本制備時盡量避免使用尖銳的器械,以免損傷神經(jīng)使用電刺激時,刺激強度不宜太大,否則可能導(dǎo)致神經(jīng)的損
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