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第十二章酶學(xué)研究的最新進(jìn)展主要內(nèi)容:

1極端微生物及極端酶2極端酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用3極端酶發(fā)展前景隨著食品工業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)展,酶作為生物催化劑已越來越引起人們的關(guān)注。但在應(yīng)用中常常會出現(xiàn)不穩(wěn)定性,尤其在高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和高滲等極端條件下容易失活,制約著酶技術(shù)的發(fā)展。而運(yùn)用化學(xué)修飾、固定化及定向進(jìn)化等技術(shù),僅在一定程度上提高酶的穩(wěn)定性,還遠(yuǎn)達(dá)不到工業(yè)生產(chǎn)的要求。開發(fā)能在各種極端環(huán)境中起生物催化作用的酶,是人們當(dāng)前急需解決的問題。1極端微生物及極端酶

極端微生物由于長期生活在極端的環(huán)境條件下,為適應(yīng)環(huán)境,在其細(xì)胞內(nèi)形成了多種具有特殊功能的酶,即極端酶。它們能在各種極端環(huán)境中穩(wěn)定地起催化作用。根據(jù)極端微生物的分類,相應(yīng)地將極端酶分為嗜熱酶、嗜冷酶、嗜酸酶、嗜堿酶、嗜壓酶、嗜鹽酶、耐有機(jī)溶劑酶等。食品相關(guān)的極端酶2極端酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用

2.1嗜熱酶2.1.1嗜熱酶的結(jié)構(gòu)特性

嗜熱酶具有耐高溫的特性,它的耐熱性主要是由分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)決定的。維持其內(nèi)部立體結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵和物理鍵,特別是氫鍵、二硫鍵的存在及數(shù)量與酶的熱穩(wěn)定性有關(guān)。一般認(rèn)為,當(dāng)這些鍵存在及數(shù)量增加時,酶的熱穩(wěn)定性增強(qiáng);這些鍵斷開,則酶的熱穩(wěn)定性降低或喪失。此外,分子量較小的蛋白質(zhì)一般比分子量較大的蛋白質(zhì)有更大的熱穩(wěn)定性。嗜熱酶分子的許多微妙結(jié)構(gòu)很可能與熱穩(wěn)定性有關(guān)。例如稍長的螺旋結(jié)構(gòu)、三股鏈組成的β-折疊結(jié)構(gòu)、C和N端氨基酸殘基間的離子作用以及較小的表面環(huán)等。這些構(gòu)造形成了嗜熱酶緊密而有韌性的空間結(jié)構(gòu),提高了熱穩(wěn)定性。由于人們研究嗜熱酶熱穩(wěn)定性的方法不同,得出的結(jié)果也不同,目前還沒有統(tǒng)一的機(jī)理來解釋其變化的本質(zhì)。2.1.2嗜熱酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用嗜熱酶在高溫下反應(yīng)效率高、穩(wěn)定性好,因而可克服中溫酶在應(yīng)用過程中常出現(xiàn)的生物學(xué)不穩(wěn)定的缺點(diǎn),從而使許多高溫化學(xué)反應(yīng)得以實(shí)現(xiàn)。由于嗜熱酶可在高溫下參加反應(yīng),可大大提高反應(yīng)成分的溶解度;并且很少有雜菌能在此條件下生存,從而避免了體系被雜菌污染;同時還能減少細(xì)菌代謝物對產(chǎn)物的污染,提高產(chǎn)物的純度。調(diào)味劑的生產(chǎn)目前調(diào)味劑主要是應(yīng)用蛋白酶水解肉類產(chǎn)生的。應(yīng)用嗜熱酶可以減少作用時間,降低酶的用量,從而有效地降解肉類,生成出高質(zhì)量的多味肽。淀粉加工高溫α一淀粉酶和糖化酶在玉米淀粉深加工中得到大量使用。將玉米淀粉水解成葡萄糖過程中,高溫將有利于淀粉溶解于水中從而促進(jìn)水解。奶制品工業(yè)嗜熱β-半乳糖苷酶可用于生產(chǎn)低乳糖食品,改善乳制品的風(fēng)味和營養(yǎng);此外,在水解過程中還會發(fā)生轉(zhuǎn)糖苷反應(yīng),生成具有多種功能的低聚乳糖。啤酒一些具有耐熱活性的α-淀粉酶已用于酒精、啤酒及其他發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)。同時在啤酒中應(yīng)用β-葡聚糖酶可以提高麥汁分離速度,降低啤酒渾濁度,減少膠狀沉淀。糖漿生產(chǎn)玉米糖漿轉(zhuǎn)化為高果糖漿的最后一步是固定化葡萄糖異構(gòu)酶在60℃下催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖,如將此酶換成嗜熱性的異構(gòu)酶,再升高體系的溫度,將極有利于提高果糖產(chǎn)量。此外,耐熱木糖異構(gòu)酶也能催化葡萄糖異構(gòu)成果糖。其異構(gòu)程度與溫度有關(guān),溫度高,果糖產(chǎn)量大?,F(xiàn)已研制出在100℃左右的木糖異構(gòu)酶,用于生產(chǎn)高果糖漿。2.2嗜冷酶

2.2.1嗜冷酶的結(jié)構(gòu)特性在低溫條件下具有高催化效率和高柔順性分子構(gòu)象,是低溫酶中普遍存在的酶學(xué)特性。通過對嗜冷酶的蛋白質(zhì)模型和χ-射線衍射分析的結(jié)果表明,嗜冷酶具有不同于一般中性酶的結(jié)構(gòu):嗜冷酶分子之間的作用力較弱,與溶劑間的作用力較強(qiáng),使酶結(jié)構(gòu)的柔韌性增加,從而在低溫下容易被底物誘導(dǎo)產(chǎn)生催化作用。當(dāng)溫度提高時,嗜冷酶的弱鍵則容易被破壞而變性失活。2.2.2嗜冷酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用低溫酶能夠廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)的兩大要素,就是它們在低溫環(huán)境中的高催化活力和在中高溫度條件下的熱不穩(wěn)定性。嗜冷酶的應(yīng)用不但可利用其高特異活性,節(jié)省酶量,而且也因其易失活,當(dāng)達(dá)到最佳效果后,只需在中等溫度下保持較短時間就可使酶失活,這樣對食物的口感和質(zhì)量有很好的保持作用,而不必?fù)?dān)心酶的持續(xù)作用改變食物的結(jié)構(gòu)。牛奶加工將嗜冷性的β-半乳糖苷酶用于牛奶工業(yè)中,可用于降解奶制品中乳糖含量,使許多對乳糖敏感的人能飲用。不僅可簡化工藝、縮短水解時間,還有效控制細(xì)菌污染、提高奶制品的質(zhì)量。果汁提取工業(yè)嗜冷的果膠酶在果汁提取的過程中,能夠起到降低粘度、澄清終產(chǎn)品等作用。肉類加工肉類柔嫩酶在低溫下可作用于肉類中的結(jié)締組織膠原和彈性硬蛋白,并可在50℃左右失活,在較低pH(pH4-5)下也具有良好的活性,有助于使肉變嫩。烘烤工藝淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶直接作用于淀粉,可以改進(jìn)面團(tuán)和面包屑的性質(zhì),從而減少生面團(tuán)發(fā)酵時間,提高生面團(tuán)和面包心的質(zhì)量,同時還保持香味和水分。乳品加工使用嗜冷的凝乳酶,可防止剩余的蛋白質(zhì)水解。脂酶則可用于乳制品和黃油的增香、生產(chǎn)類可可脂、提高魚油中n-3系多聚飽和脂肪酸含量等,從而改變食品的風(fēng)味。2.3嗜酸酶和嗜堿酶

嗜酸菌和嗜堿菌的細(xì)胞保持中性pH的內(nèi)環(huán)境,其胞內(nèi)酶仍屬于中性酶,但其胞外酶,如淀粉酶和蛋白酶在極高或極低的pH值環(huán)境中保持穩(wěn)定和活力,因而稱之為嗜酸酶和嗜堿酶。在嗜極菌的酶學(xué)研究中發(fā)現(xiàn):與中性酶相比,嗜酸酶在酸性環(huán)境的穩(wěn)定性是由于酶分子所含的酸性氨基酸的比率高,尤其在酶分子的表面;而嗜堿酶對堿的穩(wěn)定性則因?yàn)槠涿阜肿雍瑝A性氨基酸的比率高。嗜酸酶和嗜堿酶在食品中的應(yīng)用嗜酸酶和嗜堿酶能在極端pH條件下進(jìn)行催化反應(yīng),可用于食品加工中的呈酸或呈堿的環(huán)節(jié),而不需再調(diào)pH值。(1)嗜酸酶在食品中的應(yīng)用嗜酸酶能夠在pH較低的情況下起催化作用,甚至在胃酸的條件下也能保持穩(wěn)定和活力。它應(yīng)用于食品工業(yè)上,主要是幫助谷物在胃里消化成能被胃接受的小分子,從而提高胃的消化能力。可用于加工酸性奶酪、淀粉的酸解和酶解中;還有一些從嗜酸熱古菌中分離得到的β一糖苷酶可用于纖維素的降解。(2)嗜堿酶在食品中的應(yīng)用嗜堿酶在食品中的應(yīng)用比較廣泛,這類酶不僅具有比較強(qiáng)的耐堿性,而且還具有一定的耐熱性。淀粉加工

*從嗜堿芽孢桿菌H-167中分離的堿性淀粉酶在55℃時活性最大,在pH12時仍能保持活性,此酶在加工淀粉時產(chǎn)品為麥芽二糖,已在食品工業(yè)中應(yīng)用。3極端酶

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