化妝品用化學(xué)原料體外3T3中性紅攝取光毒性試驗(yàn)方法_第1頁
化妝品用化學(xué)原料體外3T3中性紅攝取光毒性試驗(yàn)方法_第2頁
化妝品用化學(xué)原料體外3T3中性紅攝取光毒性試驗(yàn)方法_第3頁
化妝品用化學(xué)原料體外3T3中性紅攝取光毒性試驗(yàn)方法_第4頁
化妝品用化學(xué)原料體外3T3中性紅攝取光毒性試驗(yàn)方法_第5頁
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文檔簡介

——附錄896孔板加樣示意圖.建議使用如下式樣96孔板。如使用軟件NRU-PIT進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，則必須按以下所示，準(zhǔn)確設(shè)計96孔板的加樣。.鑒于在平板四周外圍孔可能發(fā)生蒸發(fā)作用，建議將四邊這些孔作為空白對照，以糾正可能出現(xiàn)的塑膠材料對中性紅吸收所造成的結(jié)果干擾。.96孔的加樣示例如下：bbbbbbbbbbbbbUCC1C2C3C4C5C6C7C8UCbbucBC1C2C3C4C5C6C7C8UCbbucIC1C2C3C4C5C6C7C8UCbbucIC1C2C3C4C5C6C7C8UCbbucIC1C2C3C4C5C6C7C8UCbbuc|C1C2C3C4C5C6C7C8UCbbbbbbbbbbbbb注：1.UC為未接受處理的對照孔（平均活性設(shè)為100%）；2.C1—C8為8個濃度梯度的受試化學(xué)物（C1—C8為從低濃度向高濃度依次排列）;3.b為空白對照（不含有細(xì)胞，但用NR培養(yǎng)液和NR解吸附溶液處理）。附錄C光模擬器的譜能和細(xì)胞的敏感性1光模擬器譜能分布圖B.1顯示一個可接受的經(jīng)濾過的光模擬器的光譜能量分布，資料來源于3T3NRU光毒性驗(yàn)證試驗(yàn)中的光源一金屬鹵化物燈。圖示分別顯示了兩個不同濾光片和96孔培養(yǎng)板蓋的濾過效果。在3T3NRU光毒性試驗(yàn)中應(yīng)使用H1濾光片；H2濾光片僅用于能耐受高劑量UVB的試驗(yàn)系統(tǒng)（如皮膚模型試驗(yàn)和紅細(xì)胞光溶血性試驗(yàn)）；培養(yǎng)板蓋的濾過作用主要見于UVB區(qū)域，輻射光譜中仍殘留足夠量的UVB足以激活類似胺碘酮的化學(xué)物質(zhì)，它們在UVB區(qū)域具有典型的光吸收作用。2細(xì)胞的光照敏感性（UVA范圍內(nèi)測定）圖B.2顯示Balb/c3T3細(xì)胞對光模擬器發(fā)射光線的敏感性，資料來源于7個不同的實(shí)驗(yàn)室預(yù)驗(yàn)證研究中獲得的UVA范圍內(nèi)測定的3T3NRU光毒性驗(yàn)證試驗(yàn)數(shù)據(jù)。兩條空心標(biāo)志的曲線來自衰老的細(xì)胞（超次數(shù)傳代），必須更新細(xì)胞才能用于試驗(yàn)。標(biāo)記實(shí)心符號的曲線表示可按受的光照耐受水平。從這些數(shù)據(jù)得出最高的無細(xì)胞毒性照射劑

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