GMP實(shí)驗室設(shè)計要求

GMP實(shí)驗室設(shè)計要求1概述GMP是藥品生產(chǎn)和質(zhì)量管理的基本準(zhǔn)則，它的內(nèi)容可以概括為濕件、硬件、軟件。其中硬件就是指廠房與設(shè)施、設(shè)備等。在dd《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（1998年修訂）》中，廠房與設(shè)施共23條，占《規(guī)范》總條數(shù)88條的26．14％。說明廠房與設(shè)施作為硬件在藥品生產(chǎn)中的重要性，廠房是藥品生產(chǎn)的根本條件。隨著國家GMP《規(guī)范》的執(zhí)行及加入WTO組織，全國藥品生產(chǎn)企業(yè)，無論是新建或改建廠房，都應(yīng)符合GMP《規(guī)范》規(guī)定。GMP實(shí)驗室布局設(shè)計要求1） 該GMP實(shí)驗室吊頂凈高2．7米。2） 面積在200平米左右。3） 設(shè)計流程：工作人員一換鞋一男（女）一更一緩沖一換鞋一男（女）二更一消毒一緩沖一潔凈走廊一實(shí)驗室。實(shí)驗完后工作人員原路返回。物料則經(jīng)外走廊一預(yù)處理一消毒一物流吹淋室一緩沖一潔凈走廊一傳遞窗一實(shí)驗室一潔凈走廊一潔凈室藥品專用通道一室外。參觀（外）走廊與實(shí)驗室、潔凈走廊與實(shí)驗室之間在相對應(yīng)的位置上設(shè)置圓弧形鋁型材密閉觀察窗，使參觀者不必進(jìn)入實(shí)驗室，通過參觀走廊上的觀察窗就可以清楚地看到實(shí)驗室里面工作的情況。這樣的工藝布局不僅可以保各實(shí)驗室操作的獨(dú)立性，不發(fā)生相互妨礙的情況，而且可以使人流、物流各行其道，最大限度地避免了交叉污染。潔凈區(qū)主要設(shè)計參數(shù)GMP潔凈實(shí)驗室主要工藝部分面積組成及環(huán)境參數(shù)表序號房間名稱面積血）冬季溫度（°C）夏季溫度（C）相對濕度（%）凈化級別（顆粒＞0.5/ ）噪聲dB(A)正壓值（Pa）照度(Lux)1污物處理10舒適度舒適度十萬級<60-1023002臍帶血預(yù)處理1020±224±255±10十萬級<60-1023003水消毒間20舒適度舒適度23004更衣間1620±224±255±10十萬級<601523005緩沖間10.620±224±255±10十萬級<6015230010111213消毒間臍帶血試驗室單抗試驗室低溫工作室準(zhǔn)備間潔凈走廊清潔工具細(xì)胞試驗室11.423221010.83.75020±220±220±220±2舒適度舒適度20±224±224±224±224±255±1055±1055±1055±10舒適度舒適度24±255±10十萬級千級一萬級一萬級一萬級十萬級十萬級千級W60<60<60<60<60<60<60<6020152020151010152300230023002300230023002300230010111213消毒間臍帶血試驗室單抗試驗室低溫工作室準(zhǔn)備間潔凈走廊清潔工具細(xì)胞試驗室11.423221010.83.75020±220±220±220±2舒適度舒適度20±224±224±224±224±255±1055±1055±1055±10舒適度舒適度24±255±10十萬級千級一萬級一萬級一萬級十萬級十萬級千級W60<60<60<60<60<60<60<60201520201510101523002300230023002300230023002300空調(diào)凈化系統(tǒng)劃分根據(jù)實(shí)驗室工藝布局和不同的使用要求及潔凈度級別，擬劃分五套相對獨(dú)立的空調(diào)凈化系統(tǒng)、一套空氣自凈系統(tǒng)和一套空調(diào)系統(tǒng)為實(shí)驗室送風(fēng)?？照{(diào)系統(tǒng)是設(shè)置在參觀（外）走廊、一次更衣、換鞋、緩沖間吊頂以上的技術(shù)夾層內(nèi)的風(fēng)機(jī)盤管機(jī)組，向房間內(nèi)送空調(diào)風(fēng)。為盡可能減少非生產(chǎn)區(qū)域的占地面積，在潔凈走廊采取頂送頂回的送回風(fēng)方式，在實(shí)驗室（千級或萬級）利用包土建柱子所圍成的空間作為回風(fēng)夾墻，實(shí)現(xiàn)頂送側(cè)下回的送回風(fēng)方式，如有非同一套凈化系統(tǒng)實(shí)驗室共用同一回風(fēng)夾墻情況時，則在回風(fēng)夾墻內(nèi)設(shè)立密封隔板，以嚴(yán)格區(qū)分各系統(tǒng)的回風(fēng)不致相混。進(jìn)行這樣空調(diào)凈化系統(tǒng)劃分，主要目的是在保證GMP實(shí)驗室使用功能的前提下，各實(shí)驗室的空調(diào)凈化及自動控制系統(tǒng)全部自成體系，均可實(shí)現(xiàn)獨(dú)立操控，無相互干擾之憂。即在需要使用某一套實(shí)驗室時，只需開啟共用和該實(shí)驗室部分空調(diào)凈化系統(tǒng)，即可滿足使用要求，不僅操控方便而且節(jié)約能源降低了運(yùn)行成本。其他部分1）建筑圍護(hù)方面設(shè)計選用金屬夾芯作為實(shí)驗室的壁、頂板，地面選用綠色環(huán)氧自流平無縫鋪裝，板材之間及板材與地面相交處選用R50的噴塑鋁型材圓弧相嵌，所有縫隙要求用中性抗菌防霉硅膠密封，這樣處理后可基本消除實(shí)驗室內(nèi)的藏塵機(jī)會。2）電力方面為確保GMP實(shí)驗室的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，此次采用雙路電源為實(shí)驗室供電，并設(shè)置了一臺雙路供電互投配電箱，以保證供電的不間斷性。3）自動控制方面每套凈化空調(diào)系統(tǒng)均設(shè)置了一套自動控制系統(tǒng)及連鎖裝置，對實(shí)驗室內(nèi)的溫濕度、風(fēng)機(jī)運(yùn)行狀態(tài)及各種空調(diào)設(shè)備（風(fēng)機(jī)、排風(fēng)機(jī)、閥門）的起順序均實(shí)現(xiàn)了自動控制，避免了因人工操作失誤而帶來的不必要的損失（僅以Jk2系統(tǒng)為例）。4）安全與通訊方面在GMP實(shí)驗室區(qū)域內(nèi)設(shè)計了與中控值班室相連網(wǎng)的感煙系統(tǒng)、中控磁卡鎖門禁系統(tǒng)和閉路電視監(jiān)視系統(tǒng)。以消除因工作人員或非本室人員誤人而帶來的不安全隱患。另外根據(jù)J?產(chǎn)JX控*--襪揮用耳翼出IX*惶切累沖?上弔爼1劃卞軒TV-Mk的幵或.*串獨(dú)丄取衲埠節(jié)牌TK-軸幵度.?.SAtHfK-?權(quán)揮四區(qū)話崖#-如】■摹生悄臭冷■上出助flTT-2O1的H武,4- VMH上礙功4■苛NHV-201的畀康.3.理應(yīng)甘電-?：?鳳機(jī)嶺霉鳳禹建?*理鳳瓠悴■風(fēng)■關(guān).先開輪機(jī)耐反上’曲光■與理地曲卿1.GMP實(shí)驗室相對比較封閉的特點(diǎn)，在每間實(shí)驗室及潔凈走廊的金屬壁板上設(shè)計安裝了對講電話、電話插座、計算機(jī)網(wǎng)絡(luò)插座、消防報警專用電話插座及緊急按鈕等，以保證實(shí)驗室內(nèi)人員在任何情況下均可隨時與外界保持聯(lián)系，并有效地減少潔凈環(huán)境因人員頻繁進(jìn)出而引起的干擾。GMP潔凈實(shí)驗室自控原理圖八、細(xì)胞室基本儀器設(shè)備投資一覽表1、基本儀器儀器CO2恒溫培養(yǎng)箱體視解剖鏡光學(xué)/相差倒置顯微鏡熒光顯微鏡及CCD成像系統(tǒng)超凈工作臺及生物安全柜高壓消毒鍋電熱恒溫水浴箱普通恒溫培養(yǎng)箱電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱-80°C超低溫冰箱液氮儲存設(shè)備臺式離心機(jī)超聲波組織勻漿器-20C冰箱和4C冰箱超純水處理器離心機(jī)(15ml,50ml)標(biāo)準(zhǔn)型pH計電子天平加熱磁力攪拌器超聲波清洗器正負(fù)壓真空兩用泵不銹鋼濾器EPENDORFF連續(xù)可調(diào)移液器BRAND電動移液器Sepax干細(xì)胞處理系統(tǒng)Cobe2991細(xì)胞處理機(jī)2.耗材一次性培養(yǎng)板6孔，12孔，24孔一次性培養(yǎng)皿100mm,60mm,30mm一次性培養(yǎng)瓶75cm2,25cm2凍存管1ml,5ml一次性離心管

加樣器槍頭1000卩1,200卩110卩13.主要試劑試齊U廠商各類細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM,DF12等胎牛血清(FBS)L—谷氨酰胺胰蛋白酶B27堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)表皮生長因子(EGF)明膠(ge1atin)熒光防淬滅封片齊多聚甲醛美國GIBCO/BRL公司德國BIOCHROMAG公司(Lot.No0013K,Cat.NoS0110)美國GIBCO/BRL公司美國GIBCO/BRL公司美國GIBCO/BRL公司美國INVITROGEN公司美國INVITROGEN公司美國SIGMA公司美國VECTOR公司北京化工廠TritonX-100東方儀器設(shè)備公司生化部4.免疫熒光抗體抗體種屬來源稀釋濃度 公司Pax6兔1:500ChemiconSox2鼠1:100ChemiconSox2兔1:100ChemiconMAP2鼠1:100NeoMarkersBrdU鼠1:100SigmaGFAP鼠1:100ChemiconEGFR鼠1:100MBISatb2兔1:100AbcamTbr2兔1:100ChemiconCaspase3兔1:100ChemiconmouseIgG1:10000Chemicon山羊抗小鼠IgGTRITC1:200中山公司山羊抗小鼠IgGFITC1:200中山公司驢抗鼠IgGFITC1:200中山公司驢抗鼠IgGTRITC1:200中山公司

山羊抗兔IgGTRITC1:200中山公司山羊抗兔IgGFITC1:200中山公司5.WesternBlotting及流式細(xì)胞抗體抗體 種屬來源稀釋濃度公司Pax6兔1:1000ChemiconSox2鼠1:3000ChemiconSox2兔1:3000ChemiconEGFR鼠1:500MBIEGFR山羊1:500SantaCrutzeIF2a兔1:1000CellSignalingPhospho-eIF2a兔1:1000CellSignalingCaspase12鼠1:1000BiovisionBcl2兔1:100AbcamCaspase8兔1:1000AbcamCaspase9兔1:1000AbcamBax兔1:1000ChemiconGADD153(CHOP)兔1:1000Abcam/-actin鼠1:50000ChemiconEGF-Alexa488鼠20ng/mlMolecularProbesmouseIgGChemiconIRDye700DXConjugatedAffinityPurified1:10000RocklandAnti-GoatIgG(H&L)(Donkey)IRDye800ConjugatedAffinityPurified1:10000Rocklandanti-GoatIgG[H&L][Donkey]IRDye700DXConjugatedAffinityPurified1:10000Rocklandanti-MouseIgGF(c)[Goat]IRDye800ConjugatedAffinityPurified1:10000RocklandAnti-mouseIgG[Goat]IRDye700DXConjugatedAffinityPurified1:10000Rocklandanti-MouseIgGF(c)(Rabbit)IRDye800ConjugatedAffinityPurified1:10000RocklandAnti-mouseIgG(Rabbit)IRDye700DXConjugatedAffinityPurified1:10000RocklandAnti-RabbitIgG(Donkey)IRDye800ConjugatedAffinityPurified1:10000Rocklandanti-RabbitIgG[Donkey]IRDye700DXConjugatedAffinityPurified1:10000RocklandAnti-GoatIgGF(c)(Rabbit)

IRDye800ConjugatedAffinityPurified1:10000RocklandAnti-GoatIgG(Rabbit)6.引物序列基因名稱用途引物序列Pax6Mice(F)5'-GATGAGATGGGAGTTGGGTG-3'genotyping(R)5'-AAGTTACCAGGTGTGGTGGG-3'.Pax6Pax6(F)5'-ATAATGCTTCATGCAGAACAGTCACAGCGGAG-3',全長克隆(R)5'-CTCGTCGACTTACTGTAATCGAGGCCAGTACTGAGA3-'(includeHindIIIandSalIrestrictionsite