
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文檔簡介
多莉動物細胞工程的成果口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、α及β干擾素、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、生長激素、免疫球蛋白以及單克隆抗體等。
人耳鼠
動物細胞培養(yǎng)動物細胞核移植動物細胞融合單克隆抗體等
動物細胞工程常用的技術(shù)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)
是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。為什么要進行動物細胞培養(yǎng)?什么是動物細胞培養(yǎng)?如何進行細胞培養(yǎng)?動物細胞工程之一----動物細胞培養(yǎng)從動物機體中取出相關(guān)組織,將它們分散成單個細胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖。WWW用于生產(chǎn)流感疫苗的病毒一直是在受精雞蛋(雞蛋胚胎)中培養(yǎng)的。但這存在一些問題:一方面,對雞蛋要求嚴(yán)格,不是每只雞蛋都可以用來生產(chǎn)疫苗,只有經(jīng)過認證的養(yǎng)雞廠才可以提供此類雞蛋;另一方面,每只受精雞蛋一次只能注射一個病毒菌株,但是典型的流感病毒包含三個菌株。不僅如此,現(xiàn)有方法需要大量的受精雞蛋。如果為所有美國人生產(chǎn)流感疫苗的話,則需要2.7億只受精雞蛋,一旦雞蛋有問題,整個疫苗計劃就會失敗。更為重要的是,新的細胞培養(yǎng)法有助于人類靈活應(yīng)對大規(guī)模暴發(fā)的流感。近年來,高致病性禽流感的爆發(fā)總讓人擔(dān)心屆時疫苗夠不夠用。用雞蛋培養(yǎng)病毒的話,生產(chǎn)多少疫苗必須提前做出精確計劃,但一般來說流感暴發(fā)時,人們很難在短時間內(nèi)購置生產(chǎn)疫苗所需的數(shù)百萬只雞蛋。而新方法可在很小的生產(chǎn)空間,很快地制造出大批純凈的疫苗。
世界上第一個細胞培養(yǎng)生產(chǎn)的流感疫苗上市
2007-06-09放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)過程示意圖
為何動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞的呢?
胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可說明細胞間的物質(zhì)是什么成份?關(guān)鍵詞:接觸抑制細胞貼壁原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)接觸抑制
(contactinhibition)細胞在貼壁生長過程中,隨著細胞分裂,數(shù)量不斷增加,最后形成一個單層,此時細胞間相互接觸,細胞分裂和生長停止,數(shù)量不再增加。NormalcellCancercell
用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞,想一想,這是為什么?
為什么要進行傳代培養(yǎng)?根據(jù)你已有的知識分析,體外動物細胞培養(yǎng)需要哪些條件?動物細胞培養(yǎng)的一般過程
一、準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備工作對開展細胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,準(zhǔn)備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或無法進行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。培養(yǎng)器皿動物細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)表面為什么要光滑、無毒?二、取材在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過一定的處理(如分散細胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養(yǎng),所以往往較多的是選擇動物的胚胎或出生不久的幼齡動物的器官和組織。動物細胞培養(yǎng)的一般過程
如何處理分散細胞?三、培養(yǎng)
將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。培養(yǎng)時需要有合適的培養(yǎng)液。正在培養(yǎng)中的細胞應(yīng)每隔一定時間觀察一次,觀察的內(nèi)容包括細胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,有無污染,培養(yǎng)基的pH是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對培養(yǎng)溫度等也要定時檢查。
動物細胞培養(yǎng)的一般過程
1.無菌、無毒的環(huán)境2.一定的營養(yǎng)物質(zhì)3.適宜的溫度和pH4.合適的氣體環(huán)境體外動物細胞培養(yǎng)的條件蘇丹紅是一種人工色素(工業(yè)染料),它在人體內(nèi)代謝生成相應(yīng)的胺類??蒲腥藛T以小鼠為實驗材料,用“動物細胞培養(yǎng)技術(shù)”對蘇丹紅毒性進行了檢測。(1)該方法檢測有毒物質(zhì)毒性的指標(biāo)是
。(2)請完善檢測蘇丹紅毒性的實驗。主要實驗步驟:.第一步,取大小相同的六只培養(yǎng)瓶依次編號為l~6,分別加入等量相同的培養(yǎng)液和小鼠細胞;第二步:
;第三步:
。結(jié)果如下表:結(jié)論:
。變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的比例向1號瓶中加入適量的水,向2—6號瓶中加入等量不同濃度的蘇丹紅添加劑。培養(yǎng)一段時間后,取樣制成臨時裝片,觀察記錄變異細胞的數(shù)目。低濃度的蘇丹紅毒性很小,隨濃度增加毒性逐漸增強。動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用繼哺乳動物乳腺發(fā)生器研發(fā)成功后,膀胱生物發(fā)生器的研究也取得了一定進展。最近,科學(xué)家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。請回答:(1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞,常用方法是
。(2)在研制膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
細胞中特異表達。(5)為使外源基因在后代長期保持,可將轉(zhuǎn)基因小鼠細胞的
轉(zhuǎn)入
細胞中構(gòu)成重組細胞,使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個體。該技術(shù)稱為
。該重組細胞發(fā)育的過程中還應(yīng)用了
技術(shù)。顯微注射法膀胱上皮細胞核
去核的卵母細胞細胞核移植動物細胞培養(yǎng)
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