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文檔簡介
2023113現(xiàn)代生物科技一、單項選擇題〔共3題〕1.〔2023?江蘇〕為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培育條件和植株再生力量,某爭論小組的試驗過程如以下圖。以下表達(dá)正確的選項是〔 〕A.過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中 B.過程②需提高生長素的比例以促進(jìn)芽的分化C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生 D.原生質(zhì)體雖無細(xì)胞壁但仍保持細(xì)胞的全能性2.〔2023?江蘇〕以下生物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造,不會遺傳給子代的是〔〕將胰島素基因表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌,篩選獲得基因工程菌將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞,經(jīng)組培獲得花色變異植株將腸乳糖酶基因?qū)肽膛J芫?,培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細(xì)胞后回輸患者,進(jìn)展基因治療3.〔2023?北京〕甲、乙是嚴(yán)峻危害某二倍體賞識植物的病害。爭論者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因1植株,再將二者雜交后得到F1
,結(jié)合單倍體育種技術(shù),培育出同時抗甲、乙的植物品種。以下對相關(guān)操作及結(jié)果的表達(dá),錯誤的選項是〔〕將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞通過接種病原體對轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)展抗病性鑒定1調(diào)整培育基中植物激素比例獲得F1
花粉再生植株經(jīng)花粉離體培育獲得的假設(shè)干再生植株均為二倍體二、多項選擇題〔共2題〕4.〔2023?江蘇〕以下圖為一富養(yǎng)分化河流生態(tài)修復(fù)工程的示意圖,以下表達(dá)正確的選項是〔〕曝氣可增加厭氧微生物降解有機(jī)污染物的力量吸附基質(zhì)增加了微生物附著的外表積,提高了凈化效果植物浮床有吸取水體氮、磷的力量,可削減富養(yǎng)分化增加水體透亮度,恢復(fù)水草生長是該修復(fù)工程的目標(biāo)之一5.〔2023?江蘇〕以下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶〔HGPRT-〕,HAT篩選培育液中不能正常合成DNA,無法生長。以下表達(dá)正確的選項是〔〕A.可用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合 B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培育液中生長C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn) D.細(xì)胞膜的流淌性是細(xì)胞融合的根底三、綜合題〔共5題〕6.〔2023?江蘇編輯豬,可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。以下圖為基因編輯豬培育流程,請答復(fù)以下問題:對1號豬使用 處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在 時期的卵母細(xì)胞用于核移植。22采集2號豬的組織塊,用 處理獲得分散的成纖維細(xì)胞,放置于37℃的CO培育箱中培育,其中CO的作用是 。22為獲得更多基因編輯豬,可在胚胎移植前對胚胎進(jìn)展 。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于 號豬。為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號豬并正常表達(dá),可承受的方法〔填序號〕。①DNA測序 ②染色體倍性分析③體細(xì)胞構(gòu)造分析④抗原—抗體雜交7.〔2023?天津〕B基因存在于水稻基因組中,其僅在體細(xì)胞〔2n〕和精子中正常表達(dá),但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為爭論B基因表達(dá)對卵細(xì)胞的影響,設(shè)計了如下試驗。據(jù)圖答復(fù):〔1〕B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄,推想其可能的緣由是卵細(xì)胞中 〔單項選擇〕。A.含B基因的染色體缺失 B.DNA聚合酶失活C.B基因發(fā)生基因突變 D.B基因的啟動子無法啟動轉(zhuǎn)錄從水稻體細(xì)胞或 中提取總RNA,構(gòu)建 文庫進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因〔表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光連接成融合基〔表達(dá)的蛋白質(zhì)能保存兩種蛋白質(zhì)各自的功能〕,然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。在過程①②轉(zhuǎn)化篩選時過程 中T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上過程 在培育基中應(yīng)參加卡那霉素。獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中,以下鑒定篩選方式正確的選項是 〔多項選擇〕。將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)展DNA分子雜交Luc基由于模板設(shè)計探針進(jìn)展DNA分子雜交以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交檢測參加熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分別出胚,觀看到細(xì)胞內(nèi)僅含一個染色體組,判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而一般狀況下水稻卵細(xì)胞在未受精時不進(jìn)展發(fā)育,由此說明。8.〔2023?全國Ⅱ〕植物組織培育技術(shù)在科學(xué)爭論和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應(yīng)用。答復(fù)以下問題。植物微型生殖是植物生殖的一種途徑。與常規(guī)的種子生殖方法相比,這種微型生殖技術(shù)的特點(diǎn)有 〔答出2點(diǎn)即可〕。通過組織培育技術(shù),可把植物組織細(xì)胞培育成胚狀體,再通過人工種皮〔人工薄膜〕包裝得到人工種子〔如下圖〕,這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是 。人工胚乳能夠為胚狀體生長供給所需的物質(zhì)因此應(yīng)含有植物激素和 等幾類物質(zhì)。用脫毒苗進(jìn)展生殖,可以削減作物感染病毒。為了獲得脫毒苗,可以選取植物的 進(jìn)展組織培育。植物組織培育技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培育成一個完整植株的根本程序是 〔用流程圖表示〕。9.〔2023?全國Ⅰ〕基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。答復(fù)以下問題?;蚬こ讨兴玫哪康幕蚩梢匀斯ず铣桑部梢詮幕蛭膸熘蝎@得?;蛭膸彀?和 。生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開頭時,解開DNA雙鏈的酶是 。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反響體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是 。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的 。目前在PCR反響中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要緣由是 。10.〔2023?江蘇〕圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因〔tetr)和氨芐青霉素抗性基因〔ampr〕。請答復(fù)以下問題:〔1〕EcoRV酶切位點(diǎn)為,EcoRV酶切出來的線性載體P1為 未端。用TaqDNA聚合酶進(jìn)展〔1〕EcoRV酶切位點(diǎn)為,EcoRV酶切出來的線性載體P1為 未端。為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落,承受含有不同抗生素的平板進(jìn)展篩選,得到A、B、C三類菌落,其生長狀況如下表〔“+”代表生長,“﹣”代表不生長〕。依據(jù)表中結(jié)果推斷,應(yīng)選擇的菌落是 〔填表中字母〕類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入狀況分別是 、 。菌落類型平板類型菌落類型平板類型ABC無抗生素 ﹢﹢﹢氨芐青霉素 ﹢﹢﹣四環(huán)素 ﹢﹣﹣氨芐青霉素+四環(huán)素﹢﹣﹣為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計引物進(jìn)展PCR鑒定。圖2所示為甲乙丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物 某學(xué)生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段,緣由是 。四、試驗探究題〔共1題〕11.〔2023?全國Ⅲ〕培育胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過程如下圖。答復(fù)以下問題。利用胡蘿卜根段進(jìn)展組織培育可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培育成完整的植株,這是由于植物細(xì)胞具有 。步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,緣由是 。從步驟⑤到步驟⑥需要更換的培育基其緣由是 。在的培育基上愈傷組織通過細(xì)胞的 過程,最終可形成試管苗。步驟⑥要進(jìn)展照光培育,其作用是 。經(jīng)組織培育得到的植株,一般可保持原品種的 ,這種生殖方式屬于 生殖。答案解析局部一、單項選擇題D【考點(diǎn)】植物組織培育的過程解:【解答】A.30%的蔗糖溶液中會失水皺縮,A不符合題意;B.②誘導(dǎo)芽分化時,需要提高細(xì)胞分裂素的比例,B不符合題意;C.③可以表示誘導(dǎo)根的分化形成幼苗,此時細(xì)胞壁已經(jīng)形成,C不符合題意;D.原生質(zhì)體無細(xì)胞壁,但由于含有一整套的遺傳物質(zhì),故具有全能性,D符合題意故答案為:D【分析】〔1〕植物細(xì)胞的全能性①概念:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。②原理:細(xì)胞內(nèi)含有本物種的全部遺傳信息。③全能性表達(dá)條件:具有完整的細(xì)胞構(gòu)造,處于離體狀態(tài),供給肯定的養(yǎng)分、激素和其他適宜外界條件?!?〕植物組織培育時植物激素處理的不同處理:生長素與細(xì)胞分裂素比例適中時,有利于愈傷組織的形成;生長素//細(xì)胞分裂素比例降低,利于芽的分化。D【考點(diǎn)】基因工程的應(yīng)用【解答】A.將含胰島素基因表達(dá)載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌,由于轉(zhuǎn)變的是遺傳物質(zhì),所以可以通過二分裂將胰島素基因傳給后代,A不符合題意;均含有花青素代謝基因,花青素代謝基因會隨該植物傳給后代,B不符合題意;遺傳給后代,C不符合題意;該患者進(jìn)展基因治療時,由于只轉(zhuǎn)變了淋巴細(xì)胞,所以性原細(xì)胞不含該基因,故不能遺傳給后代,D符合題意。故答案為:D【分析】〔1〕轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組。馬上目的基因和生物的遺傳物質(zhì)重組合,從而使得生物表現(xiàn)出目的基因的性狀?!?〕基因治療:指把正?;?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而到達(dá)治療疾病的是在體內(nèi)還是體外。D【考點(diǎn)】植物組織培育的過程,基因工程的操作程序〔具體〕解:【解答】A、要獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株應(yīng)將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,A不符合題意;B、對轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)展個體水平檢測的方法是接種病原體對轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)展抗病性鑒定,B不符合題意;C、花藥培育基配方、誘導(dǎo)叢芽或胚狀體的培育基配方和誘導(dǎo)生根的培育基配方個植物激素的種類,濃度比例不同,要想獲得F1花粉再生植株需要調(diào)整培育基中植物激素比例,C不符合題意;D、經(jīng)花粉離體培育獲得的再生植株為單倍體植株,需再經(jīng)過人工誘導(dǎo)使染色體數(shù)目加倍,才能獲得二倍體植株,D符合題意。故答案為:D2.花藥離體培育二、多項選擇題4.B,C,D【考點(diǎn)】生態(tài)恢復(fù)工程解:【解答】A.曝氣可增加溶氧量,進(jìn)而降低厭氧微生物降解有機(jī)污染物的力量,A不符合題意;B.吸附基質(zhì)增加了微生物附著的面積,有利于微生物的生理活動,可促進(jìn)有機(jī)污染物的降解,因此能夠提高凈化效果,B符合題意;C.磷等物質(zhì),可削減水體富養(yǎng)分化,C符合題意D.恢復(fù)水生植物生長,從而起到了改善和凈化水質(zhì)的效果,可見,增加水體透亮度,恢復(fù)水草生長是該修復(fù)過程的目標(biāo)之一,D符合題意。故答案為:BCD【分析】1.生態(tài)工程的原理生態(tài)工程建設(shè)的目的:遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,到達(dá)經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步進(jìn)展。生態(tài)經(jīng)濟(jì):通過實行循環(huán)經(jīng)濟(jì)的原則,使一個系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物能夠成為本系統(tǒng)或另一個系統(tǒng)的生產(chǎn)原料,從而實現(xiàn)廢棄物的資源化。實現(xiàn)手段:生態(tài)工程。根本原理:物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理、系統(tǒng)性和工程學(xué)原理。2.水體富養(yǎng)分化是指水體中氮、磷等植物養(yǎng)分物質(zhì)的富集,引起藻類及其他浮游生物快速生殖,導(dǎo)致水體溶氧量下降,進(jìn)而引起水生生物衰亡、水質(zhì)惡化的現(xiàn)象。A,C,D【考點(diǎn)】單克隆抗體的制備過程解:【解答】A.誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒〔如滅活的仙臺病毒〕等,A符合題意;B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞。骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖,但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但不具有無限增殖的本領(lǐng),所以在HAT篩選培育液中,兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長,只有雜交瘤細(xì)胞才能生長,B不符合題意;因每種免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,所以在HAT培育基培育基上有多種骨髓瘤細(xì)胞,這些雜交瘤細(xì)胞篩選出來,C符合題意;動物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流淌性為根底的,D符合題意。故答案為:ACD【分析】1、動物細(xì)胞融合:兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。2、誘導(dǎo)方法:化學(xué)法〔聚乙二醇〕,滅活的病毒,物理法〔離心、振動、電激等〕。3、動物細(xì)胞融合的意義:抑制了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為爭論細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物品種培育等的重要手段。4、在誘導(dǎo)劑的作用下進(jìn)展細(xì)胞的誘導(dǎo)融合,形成的雜種細(xì)胞有三種:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞,所以需要用選擇性培育基進(jìn)展篩選。5、相比較植物體細(xì)胞雜交,動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理,其他物理化學(xué)誘導(dǎo)融合的方法與植物體細(xì)胞雜交過程中原生質(zhì)體融合方法一樣。三、綜合題〔1〕促性腺激素;減數(shù)其次次分裂中期胰蛋白酶〔膠原蛋白酶〕;維持培育液的pH分割;2〔4〕①④【考點(diǎn)】動物細(xì)胞培育技術(shù),動物細(xì)胞核移植技術(shù),胚胎分割,基因工程的操作程序〔具體〕解:【解答】〔1〕據(jù)圖分析可知,1號豬供給的是卵母細(xì)胞,對其注射促性腺激素可使其超數(shù)排卵,獲得的卵母細(xì)胞需要培育到減數(shù)其次次分裂中期才能進(jìn)展核移植。將2號豬的組織塊分散成單個的成纖維細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,該細(xì)胞的培育375%CO2的恒溫培育箱中進(jìn)展,其中CO2的主要作用是維持培育液的pH。利用胚胎分割技術(shù)對圖示早期胚胎進(jìn)展分割,可以獲得更多的基因編輯豬;據(jù)圖分析可知,核2號豬,因此產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬。檢測病毒外殼蛋白基因〔目的基因〕4號豬,可以承受DNA分子雜交法檢測目的基因的序列;目的基因表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)〔病毒外殼蛋白〕,可以利用抗原-抗體雜交法進(jìn)展檢測,應(yīng)選①④。故答案為:(1).(2).胰蛋白酶〔膠原蛋白酶〕維持培育液的pH;(3).胚胎分割 2 (4).①④【分析】據(jù)圖分析,圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎〔目的基因〕2號豬的體細(xì)胞核213號豬的子宮中去,最終分娩產(chǎn)生了4號轉(zhuǎn)基因克隆豬。7.〔1〕D〔2〕精子;cDNA〔3〕②;①〔4〕B,C,D〔5〕B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚【考點(diǎn)】基因工程的操作程序〔具體〕解:【解答】〔1〕AB基因的染色體缺失,應(yīng)當(dāng)是隨機(jī)的,不會只在卵細(xì)胞中缺失,不符合題意;B、基因表達(dá)過程中需要RNA聚合酶,不需要DNA聚合酶,不符合題意;C、假設(shè)是B基因發(fā)生基因突變,應(yīng)當(dāng)是隨機(jī)的,不會只在卵細(xì)胞中基因突變,不符合題意;D、B基因只在卵細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄,可能是基因的選擇性表達(dá),B基因的啟動子在卵細(xì)胞中無法啟動轉(zhuǎn)錄,,符合題意故答案為:D據(jù)題意可知,水稻的體細(xì)胞和精子中BBRNA,故可從水稻的體細(xì)胞和精子中提取總RNADNACDNAB基因編碼蛋白的序列。圖示中過程①表示篩選含有目的基因的重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,圖示中表達(dá)載體上卡那霉素抗性基因和潮霉素抗性基因作為標(biāo)記基因,選擇培育基中參加的是卡那霉素或者潮霉素可以起到篩選的作用。過程②表示用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌去感染水稻愈傷組織,并將其T-DNA整合到水稻細(xì)胞染色DNA上。AB基由于模板設(shè)計探針進(jìn)展DNA斷裂的BB、以Luc基由于模板設(shè)計探針進(jìn)展DNA分子雜交可以檢測是否導(dǎo)入目的基因,,符合題意;CB基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA進(jìn)展分子雜交,可以檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,符合題意;DB基因與Luc基因連接形成B-LucLuc細(xì)胞中是否發(fā)出熒光,可檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),符合題意故答案為:BCD。由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的個體細(xì)胞中才只有一個染色體組,但是一般狀況下水稻卵細(xì)胞在未受精時不進(jìn)展發(fā)育,轉(zhuǎn)基因植株能使B基因在卵細(xì)胞中正常表達(dá),從而使卵細(xì)胞不經(jīng)受精作用就可以直接發(fā)育成胚。因此證明白B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。故答案為:(1)D;(2)精子cDNA;(3)②①;(4)BCD;(5)B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。【分析】主要考察基因工程相關(guān)問題?;蚬こ痰母静僮鞒绦颍?、目的基因的獵?。骸?〕目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的構(gòu)造基因?!?〕獵取方法:①從基因文庫中獵?。虎谌斯ず铣伞卜崔D(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法〕;③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:〔1〕目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?!?〕組成:目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因。①啟動子:是一段有特別構(gòu)造的DNARNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。②終止子:也是一段有特別構(gòu)造的DNA片段,位于基因的尾出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:〔1〕轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維〔2〕常用的轉(zhuǎn)化方法:常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法〔植物〕、顯微注射技術(shù)〔動物〕、Ca2+處理法〔微生物〕?!?〕重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。4、目的基因的檢測和鑒定:〔1〕首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是承受DNA分子雜交技術(shù)?!?〕mRNA,方法是用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA的分子雜交?!?〕最終檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)展抗原--抗體雜交。〔4〕有時還需進(jìn)展個體生物學(xué)水平的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否消滅抗蟲性狀。8.〔1〕能保持植物原有的遺傳特性,生殖速度快有利于胚狀體進(jìn)展呼吸作用;礦質(zhì)元素;糖莖尖4〕含目的基因的細(xì)胞愈傷組織4〕含目的基因的細(xì)胞愈傷組織小植株解:【解答】〔1〕植物微型生殖是一種用于快速生殖優(yōu)良品種的植物組織培育技術(shù),這種技術(shù)的特點(diǎn)是能保持植物原有的遺傳特性。人工種子萌發(fā)過程中需要從外界獲得氧氣進(jìn)展細(xì)胞呼吸,所以人工種皮應(yīng)具有透氣性。人工胚乳能夠為胚狀體生長供給所需的物質(zhì),因此應(yīng)含有植物激素、礦質(zhì)元素、糖、水、自然附加物等。為了獲得脫毒苗,目前承受莖尖組織培育技術(shù)來脫除病毒。將含有目的基因的細(xì)胞培育成完整植株的根本程序是:質(zhì)元素糖;〔3〕莖尖;〔質(zhì)元素糖;〔3〕莖尖;〔4〕【分析】1.植物生殖的途徑微型生殖:用于快速生殖優(yōu)良品種的植物組織培育技術(shù)。作物脫毒:選取作物無毒組織〔如莖尖〕進(jìn)展組織培育,獲得脫毒苗。人工種子:以植物組織培育得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料,經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。2.植物組織培育技術(shù):9.〔1〕基因組文庫;cDNA文庫90~95℃;氫鍵Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活【考點(diǎn)】PCR技術(shù)的根本操作和應(yīng)用,DNA分子的復(fù)制,基因工程的操作程序〔具體〕解:【解答】〔1〕將含有某種生物不同基因的很多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存,各個受做局部基因文庫,體內(nèi)DNAPCR體系內(nèi)沒有放置解旋酶,使用的是高溫〔即加熱到90~95℃〕來講DNA的氫鍵斷開,從而到達(dá)解旋的目的。共同點(diǎn)是為了解螺旋,都破壞了DNA雙鏈之間的氫鍵PCR反響中由于使用了高溫作為解旋的條件,假設(shè)使用一般的聚合酶,其活性會被高溫破壞,所以只能使用Taq酶故答案為:〔1〕基因組文庫局部基因文庫〔2〕90~95℃氫鍵〔3〕Taq酶熱穩(wěn)定性高,假設(shè)用大腸桿菌DNA聚合酶則在高溫下會失活【分析】〔1〕基因文庫包括基因組文庫和局部基因文庫。將含有某種生物不同基因的很多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存,各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因,稱為基因文庫。假設(shè)這個生物的一局部基因,這種基因文庫叫做局部基因文庫,例如cDNA文庫,首先得到mRNA,再反轉(zhuǎn)錄cDNA,形成文庫。cDNAcDNAmRNA拼接過程中已經(jīng)除去了內(nèi)含子等成分,便于DNA重組時直接使用?!?〕PCR技術(shù):概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒错?,是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù).原理:DNA復(fù)制.前提條件:要有一段目的基因的核苷酸序以便合成一對引物.條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶〔Taq酶〕過程:①高溫變性:DNA解旋過程〔PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開〕;低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延長:合成子鏈.10.〔1〕平胸腺嘧啶〔T〕;DNA連接B;A類菌落含有P0;C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒乙丙;目的基因反向連接【考點(diǎn)】培育基對微生物的選擇作用,基因工程的操作程序〔具體〕1〕EcoRV-GATAT-之間進(jìn)展切割,因此其切出來的線性載體P1為平末端。
并且兩條鏈都在中間的T與AA,則在載體P1的兩端需要個加一個堿T形成具有粘性末端的載體P2,再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。,因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在四環(huán)素中應(yīng)當(dāng)不能生長,而在氨芐青霉素的培育基中能生長,結(jié)合表格分析可知,應(yīng)中選擇B類菌落。依據(jù)表格分析,A類菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培育基中都能夠生長,說明其導(dǎo)入的是P0;C類菌落在任何抗生素的培育基中都不能生長,說明其沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒。據(jù)圖分析,依據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術(shù)的原理分析,PCR鑒定時應(yīng)中選擇的一對引物是乙和丙;依據(jù)題意和圖形分析,某同學(xué)用圖中的另外一對引物〔甲、乙〕從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增400bp的片段,說明其目的基因發(fā)生了反向連接。故答案為(1)平;(2)胸腺嘧〔T〕DNA連接;(3)B A類菌落含有P0 C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒;乙丙 目的基因反向連接【分析】〔1〕基因表達(dá)載體的根本構(gòu)造包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子等。依據(jù)題干信息和圖形分析,P0是載體質(zhì)粒,其含有的氨芐青霉素抗性基因〔ampr〕和四環(huán)素抗性基因〔tetr〕都屬于標(biāo)記基因,可以用檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞;EcoRV酶為限制酶,其切割質(zhì)粒懊悔破壞了四環(huán)素抗性基因〔tetr〕?!?〕基因工程的步驟1、獵取目的基因獵取目的基因是實施基因工程的第一步。如植物的抗病〔抗病毒抗細(xì)菌〕基因,2、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合的過程,實際上是不同來源的DNA重組合的過程。假設(shè)以質(zhì)粒作為運(yùn)載體,首先要用肯定的限制酶切割質(zhì)粒,使質(zhì)粒消滅一個缺口,露出黏性末端。然后用同一種限制酶切斷目的基因,使其產(chǎn)生一樣的黏性末端〔局部限制性內(nèi)切酶可切割出平末端,擁有一樣效果〕。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞DNA分子后,下一步是將重組DNA分子引入受體細(xì)胞中進(jìn)展擴(kuò)增。4、目的基因的檢測和表達(dá)是基因工程的第四步工作。質(zhì)粒與外源DNA組合在一起形成重組質(zhì)粒,并被轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞后,就可以依據(jù)受體細(xì)胞是否具有青霉素抗性來推斷受體細(xì)胞是否獲得了目的基因。重組DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后,受體細(xì)胞必需表現(xiàn)出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達(dá)過程。四、試驗探究題11.〔1〕全能性〔或答:形成完整植株所需的全部基因〕形成層簡潔誘導(dǎo)形成愈傷組織誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同;分化〔或答:再分化〕誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)展光合作用遺傳特性;無性【考點(diǎn)】葉綠體構(gòu)造及色素的分布和作用,植物組織培育的過程解:解:【解答】〔1〕細(xì)胞全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞,仍舊具有發(fā)育成完整生物體的潛能。在多細(xì)胞生物中,每個體細(xì)胞的細(xì)胞核都含有個體發(fā)育的全部基因,只要條件許可,都可發(fā)育成完整的個體?!?〕形成層細(xì)胞分裂力量強(qiáng),細(xì)胞的
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