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免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)1T淋巴細(xì)胞亞群分類方式?
檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群的臨床意義?T淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)方法?思考2淋巴細(xì)胞類別及其亞類3淋巴細(xì)胞類別及其亞類4
檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群的臨床意義病毒感染腫瘤患者自身免疫性疾病免疫缺陷病5
T淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)方法?免疫熒光法免疫酶標(biāo)法PAP法
APAAP法
ABC法免疫金銀法SPA花環(huán)形成法6
用堿性磷酸酶代替HRP建立的堿性磷酸酶(AP)-抗堿性磷酶(AAP)法,簡(jiǎn)稱APAAP法。+++底物二抗/Ab2Ag兔源APAAP復(fù)合物AgAgAgAg-Ab1-Ab2-APAAP復(fù)合物APAAP法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群7APAAP復(fù)合物+++底物二抗/Ab2Ag兔源APAAP復(fù)合物AgAgAgAg-Ab1-Ab2-APAAP復(fù)合物APAAP法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群2個(gè)鼠抗人AP抗體+3個(gè)AP=APAAP鼠抗人的AP抗體AP8
APAAP法原理:++底物二抗/Ab2兔源一抗/Ab1AgAgAgAg鼠抗人的CD3、CD4和CD8單克隆抗體
羊抗鼠IgG抗體底物9
方法:1制備血涂片,干燥過夜,圈出要檢測(cè)的視野范
圍,滴加固定液一滴,1~2min后,PBS沖洗3
次,最后一次干燥。2
滴加一抗10~15μL,放入濕盒20~30min,
PBS沖洗3次,最后一次干燥。3
滴加羊抗鼠二抗10~15μL,放入濕盒20~30minPBS沖洗3次,最后一次干燥。
停留1min倒掉10
方法:4
滴加APAAP復(fù)合物10~15μL,放入濕盒20
~30min,PBS沖洗3次,最后一次干燥。5
滴加底物液20~40μL,放入濕盒20~30minPBS沖洗3次,最后一次干燥。6
滴加蘇木素復(fù)染液一滴復(fù)染1~2min,自來水沖洗,干燥。7油鏡觀察。
11
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:觀察T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并繪圖陽(yáng)性細(xì)胞,胞漿藍(lán)色胞膜紅色,陰性細(xì)胞胞漿藍(lán)色胞膜無色。陽(yáng)性細(xì)胞陽(yáng)性細(xì)胞12
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:正常值:CD3+T細(xì)胞70-90%CD4+T細(xì)胞40-60%CD8+T細(xì)胞20-35%CD4+T細(xì)胞/CD8+T細(xì)胞1.5~2
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