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本文格式為Word版,下載可任意編輯——肺功能儀品牌目的探討非體外循環(huán)下建立操作簡(jiǎn)樸、穩(wěn)定的心肺聯(lián)合移植動(dòng)物模型的方法。方法套管法大鼠左肺移植動(dòng)物模型根基上,結(jié)合左肺及心臟整體移植理論,建立革新套管法大鼠心肺聯(lián)合移植動(dòng)物模型。結(jié)果正式試驗(yàn)中20只大鼠建立模型,供心通血復(fù)跳18只,復(fù)跳率90%;術(shù)后3d內(nèi)移植心臟搏動(dòng)無(wú)力3只,15例手術(shù)告成者存活均超過(guò)7d;第7d開(kāi)胸見(jiàn)肺膨脹良好,無(wú)明顯肺水腫,受體右側(cè)肺門(mén)阻斷前后測(cè)動(dòng)脈血?dú)馀e行對(duì)比,PO2和PCO2均無(wú)顯著差異(P>0.05)。結(jié)論革新套管法心肺聯(lián)合移植動(dòng)物模型制止了體外循環(huán),移植后左肺及全心作功,操作簡(jiǎn)便,儀器設(shè)備要求簡(jiǎn)樸,費(fèi)用較低,效果較好,可推廣應(yīng)用。
革新套管法;大鼠;心肺移植;模型
目前有多種大鼠心肺聯(lián)合移植模型應(yīng)用于根基研究,鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院心外科在套管法大鼠左肺移植動(dòng)物模型[1]根基上,結(jié)合左肺及心臟整體移植理論[2],建立套管法大鼠心肺聯(lián)合移植動(dòng)物模型,術(shù)式相對(duì)簡(jiǎn)樸,對(duì)重要臟器影響較小,受體器官缺血再灌注損傷小,便于術(shù)后查看,具有簡(jiǎn)便、實(shí)用的優(yōu)點(diǎn)。
1資料與方法
1.1測(cè)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)純種Wister成年大鼠(鄭州大學(xué)測(cè)驗(yàn)動(dòng)物中心供給)40只,雌雄不拘,供體體質(zhì)量150~200g,受體體質(zhì)量200~250g。術(shù)前12h禁食,可飲水。
1.2套管及支氣管支架管自制套管及支架管,套管體長(zhǎng)1.2mm,尾長(zhǎng)1.0mm,肺動(dòng)脈套管內(nèi)徑1.1mm,肺靜脈套管內(nèi)徑1.8mm,套管體外觀血管鉗壓痕以便結(jié)扎固定,體尾端刻成鋸齒狀以防血管翻轉(zhuǎn)后滑脫。套管時(shí)將血管自套管體尾端向頭端穿出,血管向尾端翻轉(zhuǎn),片面血管掛于套管體鋸齒防止滑脫,50絲線固定,完成供體血管打定。支氣管末端采用內(nèi)支架管處理,內(nèi)支架管長(zhǎng)3mm,內(nèi)徑2mm,兩端修剪成銳角以便插管,管壁血管鉗壓痕以便結(jié)扎固定。將內(nèi)支架管插入供肺支氣管末端約1.5mm,50絲線結(jié)扎固定,完成供肺支氣管制備。管套入上腔靜脈及主動(dòng)脈,支架管插入左肺支氣管備用。
1.2測(cè)驗(yàn)操作
1.2.1供體手術(shù)大鼠腹腔注射阿托品0.25mg,4%水合氯醛腹腔注射麻醉,頸部氣管切開(kāi)插管,接DH150小動(dòng)物呼吸機(jī)(浙江大學(xué)儀器廠),呼吸頻率100次/分,潮氣量3ml,吸呼比1:2。肝素1000U/kg下腔靜脈注射,剪開(kāi)胸壁暴露心肺組織,鹽水冰泥籠罩心肺降溫,后腔靜脈低壓灌注4℃革新EuroCollins液(另加肝素3U/ml)約10ml,結(jié)扎右肺門(mén),橫斷后腔靜脈和腹主動(dòng)脈放血,經(jīng)胸部后腔靜脈4℃STThomas液灌注心肺至引流灌注液清亮,心肺組織顏色蒼白,結(jié)扎并剪斷下腔靜脈,分開(kāi)結(jié)扎后腔靜脈、左右前腔靜脈并于遠(yuǎn)心端切斷,分開(kāi)主動(dòng)脈并于主動(dòng)脈弓遠(yuǎn)端離斷,切除右肺,完整取出心臟及左肺,置4℃革新EuroCollins液中修剪。于無(wú)名動(dòng)脈處切斷升主動(dòng)脈,4℃肝素生理鹽水沖洗管腔,冰鹽水紗布包裹帶肺葉供心。
1.2.2受體手術(shù)經(jīng)口氣管插管,麻醉方法及呼吸機(jī)參數(shù)設(shè)置同供體手術(shù)。大鼠右側(cè)臥位,經(jīng)左側(cè)第四肋間切口入胸,70絲線牽拉顯露術(shù)野。離斷左下肺韌帶,鉗夾左肺移至胸外并固定以顯露肺門(mén),解剖游離肺門(mén),微血管夾分別鉗夾左肺動(dòng)、靜脈并于遠(yuǎn)端剪斷,將供體上腔靜脈插入受體左肺動(dòng)脈,供體主動(dòng)脈插入左肺靜脈,50絲線結(jié)扎固定。依次開(kāi)放左肺靜、動(dòng)脈,微血管夾鉗受體支氣管并于遠(yuǎn)端剪斷,移除受體肺,將供體心肺納入胸腔放至原位,將供肺支氣管內(nèi)支架管插入受體支氣管殘端,50絲線結(jié)扎固定。開(kāi)放通氣,供肺逐步膨脹,顏色由暗紅轉(zhuǎn)為粉紅,片面肺不張者可加大潮氣量。供心纖顫一般于血管開(kāi)放肺充血1min內(nèi)復(fù)跳,查看5min正常后,調(diào)整移植心、肺位置以防血管扭曲,灑入少量青霉素預(yù)防感染。吻合告成標(biāo)準(zhǔn):①三個(gè)吻合口無(wú)漏血、漏氣;②肺動(dòng)、靜脈充盈;③移植肺呈粉紅色,平勻一致,彈性良好;移植心臟紅色,波動(dòng)有力。置胸腔引流管后關(guān)胸,受體清楚后拔除引流管,漸停呼吸機(jī)。呼吸平穩(wěn)、頻率>100次/min時(shí)拔除氣管插管。術(shù)畢經(jīng)尾靜脈或頸部靜脈分支注入10%葡萄糖溶液或平衡液2ml,防止失血性休克發(fā)生,置23℃恒溫箱保暖。手術(shù)平均耗時(shí)75min。
1.2.3術(shù)后處理術(shù)后供血復(fù)跳
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