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水腫模型制備實(shí)驗(yàn)報(bào)告課程:機(jī)能實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院系 臨床班姓名學(xué)號(hào)組員: 【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹客ㄟ^阻斷下腔靜脈回流并輔以快速輸入大量生理鹽水而復(fù)制腹腔積液(腹水)模型,旨在加深理解體循環(huán)靜脈壓增高致水腫發(fā)生的機(jī)制。【實(shí)驗(yàn)原理】水腫是指過多液體在組織間隙或體腔中積聚的一種病理過程。體腔內(nèi)液體積聚稱為積液或積水,如腹腔積液等。水腫按范圍可分為全身水腫、局部水腫,按病因可分為腎性水腫、肝性水腫、心性水腫、營養(yǎng)不良性水腫、淋巴性水腫、炎性水腫等。水腫的發(fā)病機(jī)制包括血管內(nèi)外液體交換失衡(組織液生成大于回流)及體內(nèi)外液體交換失衡(鈉水潴留)兩大機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)通過夾閉家兔下腔靜脈,阻斷靜脈回流使體循環(huán)靜脈壓明顯增高,并輔以快速輸入大量生理鹽水,使血漿膠體滲透壓下降、血容量明顯增加,從而復(fù)制腹水模型。組織液生成〉回流公式:有效濾過壓=(毛細(xì)血管血壓+組織液膠體滲透壓)-(組織液靜水壓+血漿膠體滲透壓)1) 毛細(xì)血管流體靜壓增高:主要是靜脈壓升高。靜脈壓升高可逆向傳遞到微靜脈和毛細(xì)血管端,從而使毛細(xì)血管流體靜壓增高。2) 血漿膠體滲透壓降低:主要取決于血漿蛋白的濃度。①蛋白質(zhì)攝入不足②蛋白質(zhì)丟失過多③蛋白質(zhì)合成障礙④蛋白質(zhì)分解代謝增加3) 毛細(xì)血管壁通透性增高:如感染燒傷凍傷、化學(xué)性損傷及昆蟲叮咬等,可直接損傷毛細(xì)血管壁,或通過組胺、激肽類等炎癥介質(zhì)的作用而使毛細(xì)血管壁通透性增高。4) 淋巴回流受阻:正常的淋巴回流不僅能引流組織液,而且具有強(qiáng)大代償潛力;還可以運(yùn)走組織間液中的蛋白質(zhì),使組織間液的膠體滲透壓降低,以促進(jìn)組織間液自毛細(xì)血管靜脈端回流。鈉水潴留基本機(jī)制在于腎的水、鈉排泄功能受阻?;景l(fā)病環(huán)節(jié)是腎小球?yàn)V過率降低,或腎小管重吸收鈉水增多。1) 腎小球?yàn)V過率降低:主要取決于腎小球的有效率過壓、濾過膜的通透性和濾過面積及腎血流量。①腎血流量減少及腎小球?yàn)V過壓下降。②濾過膜面積減少和通透性降低。2) 腎小球重吸收鈉水增多:①近端小管重吸收鈉水增多:血漿中非膠體成分濾出增多,導(dǎo)致流經(jīng)腎小管周圍的毛細(xì)血管血流中的血漿膠體滲透壓增高,而流體靜壓下降,使近端小管重吸收鈉水增加;心房利鈉因子分泌減少也使近端小管重吸收鈉水增多。②遠(yuǎn)端小管和集合小管重吸收鈉水增加:病理時(shí),由于直接因素或腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活,可使醛固酮、抗利尿激素分泌增加,加之肝滅活醛固酮、抗利尿激素的能力下降,由此使遠(yuǎn)端小管、集合小管吸收鈉水增多而導(dǎo)致水腫。【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】家兔【實(shí)驗(yàn)藥物】生理鹽水,1.5%戊巴比妥鈉溶液,鹽酸普魯卡因溶液【實(shí)驗(yàn)步驟】準(zhǔn)備靜脈插管(預(yù)先連接輸液裝置并將生理鹽水充滿靜脈插管);準(zhǔn)備呼吸機(jī);準(zhǔn)備膀胱導(dǎo)尿管:準(zhǔn)備計(jì)漏器。家兔稱重,耳緣靜脈注射1.5%的戊巴比妥鈉(2ml/kg)麻醉家兔;麻醉后固定與兔手術(shù)臺(tái)(打開兔臺(tái)加溫開關(guān))。頸外靜脈分離及插管;頸部剪毛,做正中垂直切開。夕卜側(cè)皮下找到頸外靜脈并分離3cm,穿2根線備用。結(jié)扎遠(yuǎn)心端,提起結(jié)扎線,靠近結(jié)扎處剪V形切口,插入靜脈導(dǎo)管,搭建輸液通道。氣管分離及插管;連接呼吸機(jī)并啟動(dòng)(預(yù)設(shè)呼吸機(jī)參數(shù)一一呼氣:吸氣=2:1;呼吸頻率25次/分;潮氣量10ml/kg);腹部手術(shù)及膀胱插管:剪去恥骨聯(lián)合以上下腹部的被毛;恥骨聯(lián)合上0.5cm處做腹部正中切口,約3?5cm;暴露腹白線;止血鉗在腹白線兩側(cè)夾住骨骼肌上提,剪一小口。左右食指和中指深入小口內(nèi)分離,右手沿兩指上下方向剪開腹壁。輕柔提出膀胱,在膀胱頂部避開血管做一橫切口,插入膀胱插管,插管口對(duì)準(zhǔn)輸尿管開口;結(jié)扎;膀胱插管連接計(jì)漏器,并打開記錄通道。右側(cè)開胸,暴露并夾閉下腔靜脈;右側(cè)胸壁備皮,沿胸骨右緣做長度6?7cm縱向切口,鈍性分離骨骼肌,暴露7,8,9肋骨。用一把大止血鉗與胸骨平行從第10肋間插入,從第6肋間插出并夾閉;然后平行插入另一把止血鉗并夾閉,兩者距離應(yīng)盡量寬以保持手術(shù)野。用粗剪減去兩平行止血鉗間的肋骨并清理干凈;打開胸腔,找到下腔靜脈(用鑷子柄推起心臟,聚光于心臟深部,可見到心臟下部有深藍(lán)色下腔靜脈)。止血鉗頭部套上膠布,完全夾閉下腔靜脈,再用止血鉗關(guān)閉胸腔。經(jīng)頸外靜脈輸液通道快速輸入生理鹽水(120滴/min);記錄輸入液體量,并計(jì)時(shí),同時(shí)觀察腹部變化。輸入300ml時(shí),停止輸液,打開腹腔,觀察腹水,肝臟,腎臟等外觀?!緦?shí)驗(yàn)結(jié)果】夾閉下腔靜脈后,頸外靜脈輸液通道20min輸入生理鹽水380ml,腹腔可見積液。如圖,手指向家兔腹腔積液【實(shí)驗(yàn)討論】本實(shí)驗(yàn)制備的水腫模型用到了體循環(huán)靜脈壓增高致水腫發(fā)生的原理。根據(jù)公式:有效濾過壓=(毛細(xì)血管血壓+組織液膠體滲透壓)-(組織液靜水壓+血漿膠體滲透壓)可知,有效濾過壓主要受四個(gè)因素影響。夾閉下腔靜脈,快速輸入大量生理鹽水同時(shí)作用,使體循環(huán)血容量迅速增大,靜脈回心血量增加,且靜脈壓升高可逆向傳遞到微靜脈和毛細(xì)血管端,從而使毛細(xì)血管流體靜壓增高。因此,毛細(xì)血管血壓增大。又因?yàn)榇罅可睇}水稀釋了血漿膠體滲透壓,所以血漿膠體滲透壓又迅速減小。所以有效濾過壓顯著增大,組織液生成大量增加,形成水腫?!緦?shí)驗(yàn)結(jié)論】通過本次實(shí)驗(yàn),我們了解呼吸機(jī)、計(jì)漏器的使用,學(xué)會(huì)了開腹手術(shù)、開胸手術(shù),練習(xí)并熟練了耳緣靜脈注射、頸部手術(shù)等。成功通過阻斷下腔靜脈回流并輔以快速輸入大量生理鹽水而復(fù)制腹腔積液(腹水)模型,旨在加深理解體循環(huán)靜脈壓增高致水腫發(fā)生的機(jī)制。更加熟悉了水腫的原理和機(jī)制。【實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)】家兔重2.2kg,耳緣靜脈誤推注麻醉劑3.5ml(第一次應(yīng)打2/3,即2.9ml),家兔體征異常,呼吸加深,心跳加快,嘴顏色加深偏紫,經(jīng)觀察10min后趨于穩(wěn)定,繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。頸外靜脈分離及插管成功,建立靜脈輸液通道成功。但由于建立通道后,沒有進(jìn)行生理鹽水輸液,導(dǎo)致最后需要快速輸入大量生理鹽水時(shí),針管堵塞。在使用肝素、生理鹽水快速推注后,針管通道開放,恢復(fù)輸液。開胸前,兩把止血鉗必須平行夾閉肋骨,否則會(huì)發(fā)生不必要的肋間血管出血。此外,兩把止血鉗的間距應(yīng)盡可能大,若間距過小會(huì)影響開胸后的手術(shù)視野,不利于找到下腔靜脈。下腔靜脈位于右心后面,較粗,深藍(lán)色。尋找下腔靜脈需要手術(shù)燈光充份照射手術(shù)視野。開胸前呼吸機(jī)一定要與氣管插管相連并設(shè)置呼吸機(jī)的參數(shù)設(shè)置,確認(rèn)啟動(dòng)工作。實(shí)驗(yàn)過程中防止呼吸機(jī)的橡皮管與氣管插管脫落,以免動(dòng)
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