緒論和抗體課件

第一章緒論王軍陽副教授免疫學(xué)與病原生物學(xué)系一、免疫（immunity）的概念⒈傳統(tǒng)概念即免除勞役/瘟疫的意思⒉現(xiàn)代概念免疫是指機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物的特異性生理反應(yīng)，其作用是維持機(jī)體的生理平衡和穩(wěn)定，其結(jié)果通常對(duì)機(jī)體是有利的，但在一定條件下也可以有害。免疫學(xué)概述二、免疫的功能⒈免疫防御：免疫缺陷/超敏反應(yīng)⒉免疫監(jiān)視：

腫瘤/病毒持續(xù)感染⒊免疫穩(wěn)定：自身免疫耐受和免疫調(diào)節(jié)兩種機(jī)制。神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫。自身免疫病

構(gòu)成成分

屏障結(jié)構(gòu)（皮膚粘膜屏障、血胎屏障、血腦屏障）；固有免疫細(xì)胞；固有免疫分子特點(diǎn)：①生來就有②能遺傳給后代③具有種的差異④作用無特異性⑤是特異性免疫的基礎(chǔ)（二）適應(yīng)性免疫

適應(yīng)性免疫是個(gè)體出生后，在生活過程中接觸病原微生物等特定抗原后產(chǎn)生的免疫，僅針對(duì)該特定抗原發(fā)生反應(yīng)。又稱特異性免疫（specificimmunity）。執(zhí)行特異性免疫的是抗原特異性淋巴細(xì)胞，即T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。特點(diǎn)：①出生后形成，需抗原刺激②特異性③耐受性④記憶性⑤建立在非特異性免疫的基礎(chǔ)上，又促進(jìn)非特異性免疫

⑥可被動(dòng)轉(zhuǎn)移Thymus(Tcells)BursaofFabricius(Bcells)法氏囊(BursaofFabricius)第二章抗體和免疫球蛋白Antibody&Immunoglobulin,Ig

一、基本概念

抗體（antibody,Ab）B細(xì)胞接受抗原刺激后演變?yōu)闈{細(xì)胞，由漿細(xì)胞合成分泌的，并能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白。*免疫球蛋白（Ig）具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。

抗體都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白不一定都是抗體。

二、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)（一）Ig的基本結(jié)構(gòu)（以單體為例）*

1.二條相同的L鏈和二條相同的H鏈借二硫鍵連接呈“Y”字形。L鏈約214氨基酸/條，κ:λ≈2:1。H鏈約450～550氨基酸/條，根據(jù)重鏈抗原性的差異可將其分為5類：μγαδεIgMIgGIgAIgDIgE2.有氨基端（N端）和羧基端（C端）3.有可變區(qū)（V區(qū)）和恒定區(qū)（C區(qū)）

L鏈的VL(1/2)V區(qū)：H鏈的VH(1/4或1/5

)L鏈的CLC區(qū)：H鏈的CH（CH1CH2CH3）IgM和IgE有4個(gè)結(jié)構(gòu)域CH1-4

NH3+coo-**（二）J鏈和分泌片J鏈（Joiningchain）富含半胱氨酸，由漿細(xì)胞合成，借二硫鍵連接到μ鏈或α鏈。分泌片（SP/SC）由粘膜上皮細(xì)胞合成和分泌，結(jié)合到IgA二聚體上?？沟鞍姿饷?，保護(hù)SIgA的鉸鏈區(qū)。同時(shí)介導(dǎo)SIgA的轉(zhuǎn)運(yùn)。（三）單體、雙體、五聚體*（五）酶解片段1.木瓜蛋白酶（papain）水解IgG裂解部位：IgGH鏈鏈間二硫鍵近N端木瓜蛋白酶→IgG→2Fab﹢Fc2.胃蛋白酶（pepsin）水解IgG裂解部位：IgGH鏈鏈間二硫鍵近C端胃蛋白酶→IgG→F(ab′)2﹢pFc′3.意義①用于研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能②指導(dǎo)臨床應(yīng)用，避免過敏反應(yīng)2.Ig的型和亞型根據(jù)輕鏈恒定區(qū)（CL）抗原性差異分為兩型：κ型﹑λ型（κ:λ≈2:1）(二)同種異型(allotype)同一種屬不同個(gè)體間的Ig抗原性的不同?？勺鳛橐环N遺傳標(biāo)記。分布在C區(qū)。(三)獨(dú)特型（idiotype）

獨(dú)特型是指存在于Ig分子V區(qū)上的抗原特異性。由高變區(qū)的氨基酸組成、排列和構(gòu)型（獨(dú)特型抗原決定簇）所決定的。

抗獨(dú)特型抗體

四、抗體的生物學(xué)功能（一）與抗原特異性結(jié)合中和毒素作用中和病毒作用（二）激活補(bǔ)體IgG1～3和IgM→活化補(bǔ)體→經(jīng)典途徑凝集的IgA、IgG4→激活→旁路途徑（四）通過胎盤和粘膜1.IgG是唯一可通過胎盤的抗體，是胎兒和新生兒抗感染的主要抗體。IgG（母體）→胎盤FcRn→胎兒2.SIgA→呼吸道、消化道黏膜五、各類免疫球蛋白的生物學(xué)特性與功能

（一）IgG單體，有4個(gè)亞類，在血清中含量最高，約占血清總Ig的75%，出生后3個(gè)月開始合成，分布于血液及組織液中，半衰期為23天。是再次應(yīng)答的主要Ig。

1.具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用，起主力免疫作用。2.激活補(bǔ)體IgG1～3→激活→經(jīng)典途徑

溶菌殺菌IgG4→激活→旁路途徑3.通過胎盤4.結(jié)合細(xì)胞，介導(dǎo)調(diào)理作用和ADCC效應(yīng)5.某些自身抗體IgG可引起II、III型超敏反應(yīng)

（二）IgM

五聚體，90kD，分子量最大，巨球蛋白，約占血清總Ig的5～10%，胚胎晚期合成，半衰期短，約5天。是初次應(yīng)答的主要Ig。1.早期抗菌、抗病毒、抗毒素抗體，起先鋒免疫作用。2.活化補(bǔ)體比IgG強(qiáng)大。3.不能通過胎盤，若臍血中檢出IgM，提示宮內(nèi)有感染。4.天然血型抗體屬于IgM。5.在B細(xì)胞表面起抗原受體作用（mIgM）6.某些自身抗體IgM，可引起Ⅱ型、Ⅲ型超敏反應(yīng)（三）IgA

血清型IgA：?jiǎn)误w，出生后4-6個(gè)月開始合成，占血清總Ig的10%，半衰期約5～6天，可介導(dǎo)調(diào)理作用和ADCC效應(yīng)。

分泌型IgA（SIgA）：

二聚體，分布于初乳、唾液、淚液、胃腸液、氣管分泌液等外分泌液中，在免疫防護(hù)中起局部免疫作用。阻止病原微生物吸附于粘膜和易感染細(xì)胞，在粘膜局部發(fā)揮抗菌、抗病毒、抗毒素作用。2.通過母乳轉(zhuǎn)移給嬰兒，執(zhí)行自然被動(dòng)免疫3.抗腸道寄生蟲感染（四）IgD為單體，血清含量少（1%）。在B細(xì)胞表面起抗原識(shí)別受體作用（mIgD），是B細(xì)胞分化成熟的標(biāo)志。（五）IgEIgE為單體，血清含量極少，主要由黏膜下漿細(xì)胞分泌。為親細(xì)胞抗體，無鉸鏈區(qū)，有CH4區(qū)，介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)六、單克隆抗體(McAb)MonoclonalAntibody

*克隆(clone)是指由一個(gè)祖先細(xì)胞經(jīng)分化、增埴所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相同的細(xì)胞系或細(xì)胞群。*多克隆抗體(pAb):由多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的針對(duì)多種不同抗原表位的免疫球蛋白。*單克隆抗體(McAb)：由單一B細(xì)胞克隆針對(duì)某一特定抗原表位所產(chǎn)生的，只能與該抗原表位結(jié)合的均一特異性Ab?？贵w形成細(xì)胞＋骨髓瘤細(xì)胞→雜交瘤細(xì)胞→McAb1.基本概念與原理*雜交瘤細(xì)胞(hybridoma)

：2個(gè)或2個(gè)以上不同特性細(xì)胞（其中一個(gè)是瘤細(xì)胞）融合組成的異型核細(xì)胞。具有兩種親本細(xì)胞的基因和特性。該項(xiàng)技術(shù)稱為雜交瘤技術(shù)。*

1975年，kohler和milstein應(yīng)用小鼠骨髓瘤細(xì)胞和綿羊紅細(xì)胞致敏的小鼠脾細(xì)胞融合,得到的一融合雜交細(xì)胞既能穩(wěn)定持續(xù)生長(zhǎng),又能分泌抗SRBC抗體,將這種雜交細(xì)胞系統(tǒng)稱為雜交瘤。1.基本概念與原理⑴抗原無須純化(2)來源于同一細(xì)胞克隆,所分泌的抗體分子在結(jié)構(gòu)上高度均一,甚至在氨基酸序列及空間構(gòu)型上均相同.⑵由于抗體識(shí)別抗原分子上單一抗原決定簇,

且所有抗體分子均相同，由此單克隆抗體具有高度特異性.⑶產(chǎn)生該抗體的為一無性繁殖細(xì)胞系,且可長(zhǎng)期傳代并保存，為此可持續(xù)穩(wěn)定生產(chǎn)同一性質(zhì)的抗體2.主要特點(diǎn)七、基因工程抗體1、人源化抗體2、人鼠嵌合抗體3、雙特異性抗體4、小分子抗體人源化抗體：將人的輕、重鏈基因通過脂質(zhì)體導(dǎo)入或原生質(zhì)體融合入小鼠胚胎干細(xì)胞,獲得含目的抗體的輕鏈和重鏈的小鼠后,與內(nèi)源性輕、重鏈雙缺失的小鼠雜交,可篩選到能產(chǎn)生目的抗體的小鼠。人鼠嵌合抗體：應(yīng)用DNA重組技術(shù)將小鼠抗體基因上的可變區(qū)與人抗體基因的恒定區(qū)重組,再將重組后的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞中表達(dá),使可變區(qū)人源化。這種抗體相對(duì)于其它人源化抗體的優(yōu)點(diǎn)在于技術(shù)路線簡(jiǎn)單,易于操作;抗體完整性好,在體內(nèi)的潴留時(shí)間長(zhǎng);鼠源抗體的親和力和特異性都得到了保留,在臨床上具有良好的應(yīng)用前景。雙特異抗體(Bispecificantibody)是含有兩個(gè)不同配體結(jié)合位點(diǎn)的免疫球蛋白分子。