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檢驗(yàn)儀器分析技術(shù)滄州醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校代榮琴滄州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校王鳳玲臨床分析化學(xué)儀器儀器的工作原理高效液相色譜儀高效液相色譜(HPLC)儀,是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器。優(yōu)點(diǎn):分離效率高、選擇性好、檢測靈敏度高和分析速度快等。HPLC儀廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。儀器的工作原理儀器的工作原理
高壓輸液泵將儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相泵入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)由進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,并被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi)。由于樣品液在兩相中作相對運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)歷多次反復(fù)的吸附-解吸附分配過程,而各組分在流動(dòng)相和固定相中分配系數(shù)不同,其移動(dòng)速度差別較大,因此被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出。通過檢測器時(shí)樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號并傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。儀器的工作原理依據(jù)分離機(jī)制差異,HPLC可分為以下幾類:液固吸附色譜法液液分配色譜法(正相與反相)離子交換色譜法離子對色譜法分子排阻色譜法HPLC原理分類儀器的工作原理儀器的工作原理液固色譜法:使用固體吸附劑。根據(jù)固定相對組分吸附力大小不同而使組分得以分離。分離過程是一個(gè)吸附-解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁,粒度5~10μm。適用于分離分子量200~1000的組分,大多數(shù)用于非離子型化合物。儀器的工作原理液液色譜法:根據(jù)被分離的組分在流動(dòng)相和固定相中溶解度不同而分離。根據(jù)極性不同正相色譜法(NPC)
反相色譜法(RPC)根據(jù)固定相工藝不同涂布式
化學(xué)鍵合式儀器的工作原理離子交換色譜法:固定相是離子交換樹脂,主要用于分析有機(jī)酸、氨基酸、多肽及核酸。儀器的工作原理離子對色譜法:又稱偶離子色譜法,是液液色譜法的分支。主要用于分析離子強(qiáng)度大的酸堿物質(zhì)。儀器的工作原理
分子排阻色譜法:固定相是有一定孔徑的多孔性填料,流動(dòng)相是可
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