2023學(xué)年完整公開課版制藥衛(wèi)生3

滅菌技術(shù)滅菌方法與無菌操作

滅菌方法是指用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)手段將物品中活的微生物及其芽孢殺滅，從而使物品殘存活微生物的概率下降至預(yù)期的無菌保證水平的方法。常用術(shù)語

無菌：系指物體或任何一特定的介質(zhì)中，沒有任何活的微生物存在。滅菌：系指采用物理或化學(xué)手段等將物體上或介質(zhì)中所有致病和非致病的微生物及芽胞全部殺死的操作。消毒：系指用物理或化學(xué)等方法殺滅物體上或介質(zhì)中的病原性微生物。防腐（抑菌）：系指用物理或化學(xué)等方法防止和抑制微生物的生長、繁殖的操作。一、滅菌工藝的驗證無菌藥品是指物品中不含任何活的微生物，但是絕對無菌既無法保證也無法用試驗來驗證。只能用最終滅菌物品中微生物存活概述，即無菌保證水平（SAL）表示。無菌保證水平不得高于10-6。滅菌物品的無菌保證水平不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢查，而是取決于生產(chǎn)過程中采用的合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的無菌保證體系。已滅菌物品達到的無菌保證水平可通過驗證確定。滅菌程序的驗證是無菌保證的必要條件。一、滅菌工藝的驗證《中國藥典》和GMP均以F0值作為滅菌參考值。F0值即標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間，系指滅菌過程賦予被滅菌物品121℃下的等效滅菌時間。F0值用于評價熱（濕／干熱）滅菌工藝對微生物的殺滅效果，其可用于比較不同溫度下的滅菌效果?！吨袊幍洹芬?guī)定：對熱穩(wěn)定的物品，滅菌工藝可首先過度殺滅法，F(xiàn)0值不低于12min;對熱不穩(wěn)定的物品的F0值一般不低于８min。物理滅菌法化學(xué)滅菌法防腐技術(shù)濾過除菌法滅菌方法濕熱滅菌法干熱滅菌法紫外線滅菌法微波滅菌法輻射滅菌法物理滅菌利用溫度、聲波、電磁波、輻射等物理因素達到滅菌目的的方法

利用飽和水蒸氣或過熱水噴淋等手段殺滅微生物的方法。流通蒸汽滅菌法煮沸滅菌法低溫間歇滅菌法熱壓滅菌法分類該法滅菌能力強，為熱力滅菌法中最有效、應(yīng)用最廣泛的滅菌方法一、濕熱滅菌法微生物種類和密度芽孢＞繁殖體＞衰老體藥物與介質(zhì)的性質(zhì)藥物：含有營養(yǎng)成分者，微生物耐熱性高介質(zhì)：中性＞堿性＞酸性蒸汽的性質(zhì)飽和蒸汽熱含量高潛熱大穿透力強濕飽和蒸汽熱含量低過熱蒸汽穿透力差不飽和蒸汽溫度低滅菌時間在達到有效滅菌的前提下，盡可能降低滅菌溫度和縮短滅菌時間.115℃68kP121℃68kP115℃98kP飽和蒸汽過熱蒸汽不飽和蒸汽影響濕熱滅菌的因素

定義：是指在熱壓滅菌器內(nèi)，利用高壓飽和水蒸汽殺滅微生物的方法。適用：耐熱壓藥物及其制劑和一些耐熱用具。

設(shè)備：小型的手提式熱壓滅菌器、大型的臥式熱壓滅菌柜等。常用參數(shù)：

熱壓滅菌常用參數(shù)溫度℃

表壓(kPa)時間(min)11568.630121.598.020125.5137.215熱壓滅菌法熱壓滅菌器1用前檢查設(shè)備的完好性2加水適量避免產(chǎn)生過熱蒸汽3滅菌時先排冷空氣避免產(chǎn)生不飽和蒸汽4滅菌時間應(yīng)從待滅菌物品到達預(yù)定溫度時算起5正確開啟柜門：待壓力表降至0，放汽、開啟滅菌器，物品溫度降至80℃以下時才能將滅菌器門全部開啟熱壓滅菌器操作注意參數(shù)100℃30min或60min

適用范圍消毒；有抑菌劑藥液的滅菌1－2ml的注射劑不耐高熱的藥品不耐高壓的橡膠制品特點對繁殖型微生物滅菌效果好，不能保證完全殺滅芽胞流通蒸汽滅菌法與煮沸滅菌法參數(shù)60~80℃加熱60min室溫24h重復(fù)操作

3次以上適用必須加熱滅菌又不耐高溫者缺點時間長，效果不理想，須加抑菌劑低溫間歇滅菌法原理：加熱可使蛋白質(zhì)變性或凝固，核酸破壞，酶失去活性，導(dǎo)致微生物滅亡。種類

火焰滅菌法干熱空氣滅菌法二、干熱滅菌法1、火焰滅菌法

不易被火焰損傷的瓷器、玻璃和金屬制品、金屬或搪瓷容器。加入少量高濃度乙醇，點燃，可達滅菌效果不能用于藥品的滅菌

二、干熱滅菌法

2、干熱空氣滅菌法

適用：玻璃、金屬器皿和用具以及濕熱不易穿透的物質(zhì)或易被濕熱破壞的藥物；不適于：橡膠、塑料制品及大部分藥物的滅菌。參數(shù)：160~170℃2h;170~180℃1h;250℃45min二、干熱滅菌法波長：UV200-300nm,254nm最強原理：核酸蛋白變性，產(chǎn)生臭氧應(yīng)用：用于純凈水、空氣滅菌和表面滅菌三、紫外線滅菌法滅菌參數(shù)：滅菌的溫度：10～55℃；相對濕度：45%～60%；強度：6～15m3的空間裝一只30W紫外燈即可高度：距離地面為1.8～2.0m為宜。三、紫外線滅菌法應(yīng)用注意：人在不能開紫外燈；油脂類及易氧化的物質(zhì)不宜用此法滅菌；安瓿中的藥物不能用紫外線滅菌。三、紫外線滅菌法

頻率：300MHz～300KMHz原理：微波使分子間摩擦生熱。同時影響微生物自身代謝而死亡。特點：加熱表里一致。應(yīng)用：水溶性藥液、含少量水分的中藥飲片及固體制劑。時間：3～6min四、微波滅菌法原理：利用γ射線殺滅微生物和芽孢的方法輻射滅菌。最常用的是60CO-γ射線輻射滅菌特點：1）γ射線為高能射線，且穿透力強，尤其適于較厚物品，特別是已包裝密封物品的滅菌，滅菌效果可靠，并可以有效的防止二次污染2）被滅菌物品溫度變化?。?~3℃）適于不耐熱藥品滅菌3）缺點：設(shè)備費用高，療效可能降低，安全防護要求高。五、輻射滅菌法適于：不耐熱的低粘度藥物溶液和相關(guān)氣體物質(zhì)六、濾過除菌法要求１繁殖型微生物1um，芽孢約0.5um或以下，故0.45um可濾去大多數(shù)細(xì)菌２須進行無菌操作，須加防腐劑

孔徑0.025μm～14μm一般注射液的過濾：0.65～0.8μm；除菌過濾0.22μm（一）微孔濾膜--精濾、除菌過濾常用的除菌濾器（二）垂熔玻璃濾器--精濾1.濾器型號：1～6號或G1～G6號2.性質(zhì)特點：化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、吸附性小１號２號粗濾；２號油針劑的過濾３號４號精濾；５號較大的細(xì)菌、酵母菌６號濾除細(xì)菌常用的除菌濾器（三）砂濾棒—

預(yù)濾多用于注射劑脫碳之用常用的除菌濾器環(huán)氧乙烷無色醚樣臭味氣體，與空氣混合容易爆炸，需稀釋后用環(huán)氧乙烷：二氧化碳＝１:９對神經(jīng)系統(tǒng)有麻醉性，損害皮膚黏膜；殘余氣體通入水中1塑料包裝的固體藥物2不能采用高溫滅菌的物品3不適于含氯物品及能吸附環(huán)氧乙烷的物品。40%甲醛溶液（福爾馬林）20ml/m3加熱蒸發(fā),6～12h粘膜強烈刺激空氣消毒其他蒸汽熏蒸滅菌

過氧乙酸、丙二醇、乳酸、戊二醛、三甘醇，β－丙內(nèi)酯

空氣消毒化學(xué)滅菌法（一）氣體滅菌法皮膚消毒：碘伏、碘酊、新潔爾滅、乙醇等粘膜消毒：碘伏、過氧化氫、新潔爾滅、高錳酸鉀等器械消毒：甲醛、過氧乙酸等排泄物消毒：漂白粉、洗消凈（次氯酸鈉＋４０％的月桂醇硫酸鈉等量混合液）環(huán)境消毒：過氧乙酸、甲醛、苯酚等（二）表面消毒法醇類乙醇、異丙醇、、氯丁醇皮膚、物質(zhì)表面消毒酚類苯酚（石碳酸）甲酚（煤酚皂、來蘇兒）氯甲酚皮膚、器械、地面表面活性劑潔爾滅、新潔爾滅、杜滅芬、洗必泰（氯已定）皮膚、內(nèi)外環(huán)境、器械氧化劑過氧醋酸、過氧化氫、臭氧、高錳酸鉀塑料、纖維、玻璃等器具的浸泡消毒含氯消毒劑漂白粉、洗消凈、氯胺等皮膚、粘膜、器具等其他甲醛、戊二醛、過氧乙酸、碘伏、甲紫（二）表面消毒法整個過程控制在無菌條件下進行用具、材料、環(huán)境均須滅菌適于不宜采用加熱滅菌或其他方法滅菌者須在無菌操作室、柜內(nèi)進行無菌操作法空氣氣體滅菌+UV用具、墻面等3%酚、2%煤酚皂、0.2%新潔爾滅、75%乙醇工作前：UV1h無菌操作室的滅菌

直接接種法非抗菌作用的供試品薄膜濾過法具有抗菌作用的或大容量的供試品一般在層流潔凈工作臺操作無菌檢查法名稱性質(zhì)常用濃度(%)應(yīng)用特點抑菌效力苯甲酸/鈉白色，無臭或微臭0.1-0.25pH超過4.4，效果下降對霉菌作用強對羥基苯甲酸酯類尼泊金類甲乙丙丁四種;性質(zhì)穩(wěn)定0.01-0.25最適條件pH<6或7聯(lián)合應(yīng)用效果好；Tween類絡(luò)合不適合對霉菌作用強對細(xì)菌較弱山梨酸有特臭，易溶于醇微溶于水0.05-0.2酸性溶液好，分子型pH4.5以下與Tween類絡(luò)合，但可以用對霉菌和酵母菌效力好第四節(jié)防腐名稱性質(zhì)用途應(yīng)用特點抑菌效力杜米芬陽離子表面活性劑創(chuàng)面消毒皮膚、手術(shù)器械消毒禁與肥皂及鹽類消毒藥合用；不宜用于合成橡膠制品的消毒抗菌譜廣，殺菌力強，刺激性小潔爾滅殺菌，防腐新潔爾滅強烈殺菌穿透力強，毒性低名稱性質(zhì)濃度應(yīng)用特點酚類苯酚（石炭酸）＜甲酚＜氯甲酚甲酚皂（來蘇兒）溶液1-2（皮服）5-10（器械常用于外用制劑，也可用于注射劑氯甲酚對眼睛有刺激性乙醇無色透明具揮發(fā)性液體，與水、乙醚、氯仿可任意混合〉20(V/V)苯甲醇無色液體，芳香；醇中易溶，溶于水0.5-1偏堿性溶液即抑菌，又止痛三氯叔丁醇白色結(jié)晶，特臭，易揮發(fā)；乙醇易溶，水中微溶0.35-0.5