凝血因子VII基因多態(tài)性與疾病關(guān)系的研究進(jìn)展醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)專業(yè)

#凝血因子VII基因多態(tài)性與疾病關(guān)系的研究進(jìn)展綜述摘要人凝血因子Vila(FVIIa)是外源性凝血途徑的核心因子，凝血因子VII不同位點的基因突變會表現(xiàn)為相應(yīng)的癥狀與疾病。多種疾病與凝血因子VII基因多態(tài)性相關(guān)，如冠心病、顱腦創(chuàng)傷性凝血障礙、兒童腦性癱瘓、肺血栓栓塞癥、靜脈血栓栓塞癥等。本文基于國內(nèi)外凝血因子VII基因多態(tài)性與多種疾病關(guān)系研究的發(fā)展現(xiàn)狀，綜合評述了凝血因子VII的基因多態(tài)性，歸納了與FVII基因多態(tài)性有關(guān)的多種疾病，總結(jié)了近幾年有關(guān)凝血因子VII基因臨床表型的研究現(xiàn)狀，并分析了多篇文獻(xiàn)中所述的實驗數(shù)據(jù)，以及對凝血因子VII導(dǎo)致的凝血障礙疾病的基因工程技術(shù)診斷發(fā)展趨勢進(jìn)行展望?！娟P(guān)鍵詞】凝血因子VM基因突變；多態(tài)性1前言凝血因子皿，其簡稱是FVII,也被叫做穩(wěn)定因子，亦或是加速因子，通常形式下是以凝血酶原存在于人體血液中，與其他同類型因子如FIX等，具有同一屬性，那就是都為維生素K依賴因子，其在血液中濃度范圍取值在每毫升0.5微克,半衰期取值范圍區(qū)間在4到6小時。該物質(zhì)通常由肝臟分泌而成，并且其完全新蓋是一種單鏈糖蛋白，且其具體組成情況是由406個氨基酸構(gòu)成。當(dāng)血管受到損傷時，該物質(zhì)會與暴露的組織因子產(chǎn)生系列連鎖反應(yīng)，該物質(zhì)被活化為FVIIa,之后又與因子結(jié)合構(gòu)成FVIIa-TF,而此類物質(zhì)能夠活化FX,亦或是FXI,這些反應(yīng)的最終結(jié)果就是讓外源性凝血現(xiàn)象出現(xiàn)［1］。由于該病在人群中并不常見，發(fā)病率低，又并非顯性遺傳，因此對FVII展開的研究并不多，比對其他凝血因子重視度和關(guān)注度要低。通常來說，對基因多態(tài)性，又可以直接用多態(tài)性進(jìn)行表述，也可以用遺傳多態(tài)性進(jìn)行同樣指代，具體而言，指的是生物群落中同時期具有的兩種及以上數(shù)目的基因型，同時也也指的是變異型，并且值得注意的是，在類型上呈現(xiàn)不連續(xù)形態(tài)，另外，該種特性，也一般可以指等位基因。FVII基因多態(tài)性與遺傳性凝血因子皿缺陷癥的關(guān)聯(lián)性臨床癥狀該類病癥在臨床表現(xiàn)上主要有三類型出血表現(xiàn)，一種是大出血情況，一種是程度較輕的出血情況，一種是無癥狀出血情況。第一類情況中通常表現(xiàn)是中樞神經(jīng)、胃腸道等部位引起的大出血癥狀，或由關(guān)節(jié)血腫引發(fā)；第二類情況通常是既往病史中沒有大出血情況，但卻出現(xiàn)了牙齦、皮膚黏膜等多地方出血，女性可能會出現(xiàn)經(jīng)血過多，也可能是皮膚容易出現(xiàn)瘀斑等多類型癥狀表現(xiàn)；第三類是在檢查中被證實患有該類病癥但并不存在臨床上的各類型出血癥狀，因此也被叫做無癥狀患者［2］。在實際情況中，該類病癥患者中無癥狀表現(xiàn)的占絕大多數(shù)，約70%，剩下的全都具有輕重不一的出血癥狀，而其中危險性最高的當(dāng)屬中樞神經(jīng)出血［3］。在一般性的體格檢查中，該類型患者的表現(xiàn)是貧血，或者皮膚黏膜上有多處不明原因的出血點，更顯著的表現(xiàn)是出現(xiàn)頭顱血腫的情況等，尤其是對于嬰幼兒，如果在檢查中發(fā)現(xiàn)頭顱血腫就需要高度警覺，是否存在顱內(nèi)出血的癥狀［4］。該類病癥與血友病相比較，在中樞神經(jīng)出現(xiàn)病變的情況可能性較高，且是遺傳性病變，在于纖維蛋白原缺乏癥進(jìn)行相關(guān)比較時，與前者類同。該類病癥患者，如果其FVII水平取值表現(xiàn)在2%,那么就很可能在臨床上表現(xiàn)出出血性疾病癥狀，且癥狀程度會較為嚴(yán)重，反過來，如果FVII水平取值表現(xiàn)是20%,反而在臨床上并沒有出現(xiàn)明顯癥狀變化，但是部分該類病癥患者，其FVII水平始終維持在波動區(qū)間20%到50%范圍內(nèi)，卻反而出現(xiàn)了出血癥狀，與此同時，F(xiàn)VII水平僅僅維持在取值范圍1%,卻反而在臨床表現(xiàn)上為無癥狀，但是不管水平表現(xiàn)具體為何，都有形成血栓的風(fēng)險［5］。遺傳因素遺傳性凝血因子皿缺陷癥，其具體發(fā)病原理是由于F7基因在表達(dá)上出現(xiàn)了突變情況，從而讓人體器官無法有效合成FVII,導(dǎo)致其在體內(nèi)濃度減少，或出現(xiàn)其他功能異常情況，而出現(xiàn)的一類出血性疾病，通常來說在臨床上并不常見，屬于罕見病范圍，其在遺傳上一般表現(xiàn)形式是隱性遺傳。從人類基因突變數(shù)據(jù)庫的數(shù)據(jù)和資料顯示，F(xiàn)7基因突變有多種情況和不同類型，點突變是FVII基因突變中種類和占比最多的類型，約占80%左右⑹，超過50%的突變發(fā)生在編碼催化區(qū)的外顯子8上。表型分析FVII缺陷癥在臨床表現(xiàn)上的嚴(yán)重程度，也就是出血情況嚴(yán)重程度，主要與F7基因突變的具體情況，也就是數(shù)量及突變位相關(guān)，也與FVII功能情況存在著明顯的相關(guān)，反之，在臨床表型方面，其發(fā)展程度與F7基因突變情況，也就是數(shù)量及突變位并沒有顯著關(guān)聯(lián)性，同時也與FVII：C活性并不存在顯著關(guān)聯(lián)性⑺也因此如果患者在臨床上出現(xiàn)嚴(yán)重出血情況，那么其基因突變多數(shù)情況是一種雜合類型，且是純合或復(fù)合情況的，而單一類型雜合在臨床上并不會出現(xiàn)嚴(yán)重出血癥狀。這就意味著F7基因多態(tài)性突變情況越顯著，患者就會有高風(fēng)險的出血性，同時FVII水平也難以維持穩(wěn)定情況而會出現(xiàn)持續(xù)下降。純合或復(fù)合突變，此時FVII水平一般維持在區(qū)間1%到5%,此時出血程度表現(xiàn)較嚴(yán)重；而雜合突變FVII水平一般維持在超過30%的區(qū)間，此時大多表現(xiàn)為無癥狀。診斷標(biāo)準(zhǔn)若患者顯示PT明顯延長、APTT正常，應(yīng)考慮FVII缺乏癥的可能，為了能夠做出明確診斷，可以利用FVII等抑制物進(jìn)行。實驗室檢查PT及其糾正實驗、APTT及其糾正實驗、血小板計數(shù)、FVII：C及FVII：Ag。若FVII：C和FVII：Ag這兩個檢測實驗中數(shù)據(jù)表現(xiàn)均呈現(xiàn)較低水平，那么就是質(zhì)量缺陷（I型）；反過來，若這兩者在實驗中數(shù)據(jù)表現(xiàn)正常或者與正常相差無幾，則是數(shù)量缺陷，并且此時功能缺陷上的表現(xiàn)是蛋白（II型）。FVII：C<70%通常被認(rèn)為有FVII缺陷，而臨床上與癥狀相關(guān)時FVII：C<30%⑻?；蛐团c臨床表型的關(guān)系依據(jù)研究文獻(xiàn)［7,10，111,FVII缺陷癥，其在基因突變上表現(xiàn)是純合或復(fù)合，此時FVII活性一般維持在區(qū)間10%到50%范圍內(nèi)，但研究顯示，無癥狀患者也可能出現(xiàn)此類型突變，甚至其FVII活性在具體的檢測中還可能更高，這就意味著F7雜合或純合，不管是與臨床出血，還是與FVII活性或許有部分聯(lián)系但并非完全相關(guān)，而且FVII活性檢測所得數(shù)據(jù)情況差不多的患者也完全可能在臨床表現(xiàn)上出現(xiàn)程度不同的出血表現(xiàn)［7,9,121。分析Herrmann等人⑺的結(jié)論，F(xiàn)7基因在純合突變上存在著多種不同類型，具體來說有6種不同表達(dá)，如p.Gly283Ser等，不管哪一種表達(dá),該類患者中都既有無癥狀情況,也存在著臨床出血癥狀情況,如血腫或胃腸出血等。這表明患者的臨床表型與基因型存在很大的差異,發(fā)病機(jī)非常復(fù)雜,即使患者有相同的臨床癥狀,其臨床表型也不具有特異性,甚至差之千里。2.7治療方法目前，遺傳性凝血因子VII缺乏癥尚無某種根治方法，以替代治療為主要治療方案。目前要徹底治愈FVII缺陷癥，可行的辦法只有進(jìn)行肝臟移植［131。與此同時，在臨床上,替代療法是最有效的治療方法。在臨床上,糾正凝血系統(tǒng)異常的方法主要有以下幾種：表1治療遺傳性凝血因子VII缺乏癥藥物分析優(yōu)點缺點輸注新鮮冰凍血漿(Fresh-Frozenplasma,FFP)易獲取，價格低廉效果不佳，并且增加傳播血源性病毒的風(fēng)險，還會造成血容量過高人血漿提取凝血因子VII(Plasma-derivedFVII,pdFVII)FVII含量高，治療效果明顯變好易引起維生素K依賴，治療后有血栓風(fēng)險人重組FVIIa(RecombinantFVIIa,rFVIIa)臨床上被認(rèn)定為是最好的替代治療物，療效非常明顯而且沒有風(fēng)險，使用劑量低(0.02mg/kg)價格較高FVII基因多態(tài)性與顱腦創(chuàng)傷性凝血障礙的關(guān)聯(lián)性顱腦創(chuàng)傷性凝血障礙顱腦損傷會出現(xiàn)組織因子的嚴(yán)重暴露，同時血腦屏障開放，進(jìn)而與FVII結(jié)合引發(fā)連續(xù)反應(yīng),從而發(fā)生了外源性凝血［141文獻(xiàn)顯示［⑸血漿FVIIa下降在實驗中顯示其是顱腦創(chuàng)傷性凝血障礙中的一個高風(fēng)險因素，且是獨立型的，但國內(nèi)當(dāng)前并沒有FVII基因多態(tài)性與該類型病癥患者的FVIIa活性之間關(guān)聯(lián)性的研究報道，同時也沒有與是否為易感性因子間關(guān)聯(lián)性的報道。實驗方法使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和限制性片段長度多態(tài)性(polymerasechainreactionandrestrictionfragmentlengthpolymorphism，PCR-RFLP)方法可以進(jìn)行基因多態(tài)性檢測，總共顯示有6種多態(tài)性基因型，通過實驗由此得出結(jié)論［16］：其中Q等位基因存在著與FVIIa水平顯著相關(guān)性，而-323P0/P10多態(tài)性則是一種獨立易感因子會引發(fā)TBI患者出現(xiàn)對應(yīng)的凝血病癥狀。與此同時P10-H7-Q多態(tài)性患者相較于其他多態(tài)性類型，凝血病風(fēng)險更高。血漿FVIIa活性與FVII基因多態(tài)性的關(guān)系茨1KU狂出*蘋性g和X自FVI哥r亦性住點■田FW位*[￡l■活性CiM"FM>7el> TShhh-活性JK<m—:~1>IPO/EnPl?J■甘1442Dg口7*Polh14J*1I308士口dmffc?KH4MH<324