核糖霉素Ribostamycin發(fā)酵工藝規(guī)程

SI』JYQ-00 核糖霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 一25-1原料藥事業(yè)部**生物工程有限公司題目：核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵工藝規(guī)程第1頁(yè)共25頁(yè)制定人：黃啟鵬 日期：編碼：STP-JZGY-006-00審核人： 日期：生效日期：批準(zhǔn)人： 日期：頒發(fā)部門(mén)：質(zhì)量部分發(fā)部門(mén)：生產(chǎn)副總、總工程師、生產(chǎn)部、品保部、發(fā)酵車(chē)間l目的建立核糖霉素發(fā)酵工藝規(guī)程，作為制定核糖霉素發(fā)酵部分SOP的依據(jù)；供生產(chǎn)管理人員統(tǒng)一操作，保證工藝要求明確可行，產(chǎn)品質(zhì)量合格，保證發(fā)酵持續(xù)穩(wěn)定生產(chǎn)。2適用范圍核糖霉素發(fā)酵生產(chǎn)。3責(zé)任者核糖霉素發(fā)酵車(chē)間工藝員、車(chē)間負(fù)責(zé)人、生產(chǎn)部負(fù)責(zé)人、品保部負(fù)責(zé)人、總工程師對(duì)此工藝規(guī)程負(fù)責(zé)。目錄TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"1產(chǎn)品概述 22原材料質(zhì)量規(guī)格 3\o"CurrentDocument"3生物合成過(guò)程、生產(chǎn)工藝、設(shè)備流程 5\o"CurrentDocument"4工藝過(guò)程 6\o"CurrentDocument"5 生產(chǎn)控制和技術(shù)檢查 13\o"CurrentDocument"6技術(shù)安全及防火 19\o"CurrentDocument"7 綜合利用及“三廢”治理 208操作工時(shí)與生產(chǎn)周期 20\o"CurrentDocument"9勞動(dòng)組織、崗位定員 2110主要生產(chǎn)設(shè)備一覽表 22\o"CurrentDocument"11原材料、動(dòng)力消耗定額和技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo) 2312物料平衡 24\o"CurrentDocument"13附頁(yè) 25

ctd—匚」—nc核糖霉素(ctd—匚」—nc1產(chǎn)品概述核糖霉素(Ribostamycin)在20世紀(jì)70年代初被發(fā)現(xiàn)并用于臨床，其產(chǎn)生菌核糖甘鏈霉菌(S.ribosidificus)也被成功篩選出來(lái)。我公司該產(chǎn)生菌源于**—*,經(jīng)過(guò)一系列的菌種選育與工藝探索，己成功篩選出一些新的較高產(chǎn)、組分純的菌種，其中0*-8,P—**0等菌種作為現(xiàn)今生產(chǎn)菌；而培養(yǎng)基配比與用料等工藝條件也有很大改進(jìn)。其半合成抗生素硫酸核糖霉素在我公司批量生產(chǎn)。［抗生素名稱(chēng):核糖霉素［化學(xué)名稱(chēng)］O-3-D-吠喃核糖-(1-5)-0-［2—2,6-二氨基-2,6-二脫氧-D-毗喃葡糖-(1-4)］-2-去氧鏈霉胺。［結(jié)構(gòu)式］核糖霉素及其主要小組分、衍生物［主要產(chǎn)品］產(chǎn)品名稱(chēng)分子式硫酸核糖霉素C17H34N4O10?nH2S04(n<2)［抗菌譜］核糖霉素是一種廣譜抗菌素，抗菌譜與卡那霉素(Kanamycin)相似，對(duì)結(jié)核桿菌作用強(qiáng)大，對(duì)G―細(xì)菌，如鼠疫桿菌、流感桿菌、痢疾桿菌、肺炎桿菌抗菌作用較強(qiáng)。

ctd—匚」—nc核糖霉素(ctd—匚」—nc2.原材料質(zhì)量規(guī)格序號(hào)原材料名稱(chēng)規(guī)格控制項(xiàng)目質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)備注1飴糖工業(yè)外觀含量水分淺黃色粘稠液體，無(wú)異味，透明無(wú)渾濁。>70.0%<20%2固體葡萄糖工業(yè)外觀含量水分無(wú)色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末，無(wú)臭、味甜。>75.0%<14%3玉米淀粉工業(yè)外觀含量水分潔白的粉末，具有光澤。>78%<20%4黃豆餅粉工業(yè)外觀蛋白質(zhì)水分含油量細(xì)度淡黃色粉末，無(wú)霉味>37.0%<12%冷榨：9%-13%熱榨：<10.0%80目通過(guò)>72%5碳酸鈣(輕質(zhì))工業(yè)外觀含量白色粉末>97.0%6磷酸二氫鉀工業(yè)外觀含量白色結(jié)晶性粉末>96%7硫酸銨工業(yè)外觀含量白色結(jié)晶性粉末>96%8氯化鈉工業(yè)外觀含量白色結(jié)晶>96%

9淀粉酶工業(yè)外觀酶活力棕黑色液體>2000u/ml10豆油食用外觀酸值淡黃色粘稠液體<4.0mgKOH/g11泡敵G.P.E工業(yè)外觀酸值無(wú)色至淡黃色透明油狀液體<0.5mgKOH/g12片堿工業(yè)外觀含量白色片狀>99.5%ctd—匚」—nc核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-4STP-FJGY-006-00 核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝翅程一 25-53生物合成過(guò)程、生產(chǎn)工藝、設(shè)備流程3.1生物合成過(guò)程途徑：(a)加入口一葡萄糖胺(b)C一6,：胺化(c)加上D—核糖(在該合成過(guò)程中，由于少量中間產(chǎn)物未與D—核糖結(jié)合，殘留在發(fā)酵產(chǎn)物中，其含量在0.5-2%,在精制提煉過(guò)程當(dāng)中，必須去除)3.2工藝流程沙土管>母斜面33.5℃±1℃子斜面33.5℃±1℃11-12d10-11d33.5℃±1℃搖瓶種子 一級(jí)種子培養(yǎng)液40h±3h33±1℃45h±1h29.5±1℃沙土管>母斜面33.5℃±1℃子斜面33.5℃±1℃11-12d10-11d33.5℃±1℃搖瓶種子 一級(jí)種子培養(yǎng)液40h±3h33±1℃45h±1h29.5±1℃二級(jí)種子培養(yǎng)液 >發(fā)酵液28h±ih33℃±1。。中間補(bǔ)料2次 ?放罐發(fā)酵周期100-120h3.3發(fā)酵設(shè)備流程圖J過(guò)青>百分過(guò)鴇罌二最種子增OOO0,PP蛇*■:1區(qū)政糧至提煤_SmJ￥-006-00 核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 25-64.工藝過(guò)程核糖霉素采用生物合成法，本公司產(chǎn)生菌源于0*—*。核糖霉素生產(chǎn)采用純種深層、通氣攪拌及液體發(fā)酵。培養(yǎng)基消毒沿用飽和蒸汽實(shí)消法。各級(jí)培養(yǎng)基以玉米淀粉、麥芽糖或葡萄糖為碳源，黃豆餅粉為主氮源。4.1培養(yǎng)基配方菌種培養(yǎng)基配方配\級(jí)別名稱(chēng)固體培養(yǎng)基I(%)RIBS-I搖瓶種子培養(yǎng)基II(%)RIBS-II搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基III(%)RIBS-III可溶性淀粉22.0玉米淀粉4麥芽糖6葡萄糖2.0硫酸銨0.30.3磷酸二氫鉀0.010.01磷酸氫二鉀0.05黃豆餅粉2.53氯化鈉0.050.20.2硫酸鋅0.01硫酸鎂0.05硫酸亞鐵0.001碳酸鈣0.30.5硝酸鉀0.1瓊脂2.4消前pH7.2—7.47.2±0.057.2±0.05

ctd-f,inv-nnA-nn核糖ctd-f,inv-nnA-nn核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程?S-7生產(chǎn)培養(yǎng)基配方\級(jí)別0匕\名稱(chēng)^\規(guī)格RIBF-I一級(jí)種子罐%RIBF-II二級(jí)種子罐%RIBF-III發(fā)酵罐%RIBF-IV補(bǔ)料罐%黃豆餅粉工業(yè)2.52.53.03.0麥芽糖工業(yè)1.06.06.0玉米淀粉工業(yè)2.03.04.04.0葡萄糖工業(yè)21.0磷酸二氫工業(yè)0.010.01硫酸銨工業(yè)0.30.30.50.5氯化鈉工業(yè)0.20.50.5碳酸鈣工業(yè)0.30.30.50.5豆油食用0.050.050.020.02泡敵工業(yè)0.020.02淀粉酶工業(yè)0.1ml/kg干淀0.1ml/kg干淀粉消前pH7.2±0.057.2±0.057.2±0.057.2±0.05

SI』JYQ-00 核糖霉素發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 一25-8菌絲形態(tài)劃分：抗生素發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中，產(chǎn)生菌菌絲在不同代謝階段體現(xiàn)不同。核糖霉素發(fā)酵生產(chǎn)亦然，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期鏡檢總結(jié)，我們將其劃分為六個(gè)階段。編號(hào)菌絲形態(tài)階段菌絲特征號(hào)I絲狀、輪狀分枝、小朵（并存）絲狀彎曲而走勢(shì)舒展，分枝不定點(diǎn)，長(zhǎng)短不一，分枝漸多成小朵。形狀不一，染色較深。II小朵、中朵（并存）小朵繼續(xù)分枝達(dá)到中朵，染色較深。III大朵、局部成網(wǎng)、疏網(wǎng)狀大朵繼續(xù)分枝擴(kuò)展，根基部出現(xiàn)二至三倍于原菌絲寬度的粗菌絲。朵朵相連，局部成網(wǎng)，而后整體成硫網(wǎng)狀。染色仍較深，有些空抱。IV密網(wǎng)狀疏網(wǎng)很快生長(zhǎng)成密網(wǎng)。染色較深，有些空抱。V交聯(lián)密網(wǎng)狀密網(wǎng)進(jìn)一步生長(zhǎng)，互相交聯(lián)。染色由深漸淺。鏡檢涂片應(yīng)攤薄，或以無(wú)菌水稀釋?zhuān)苑直婢z。菌絲空抱明顯增多。VI菌絲自溶菌絲染色淺，鏡檢菌絲模糊難辨，可見(jiàn)空抱點(diǎn)點(diǎn)。稀釋鏡檢，方可分辨菌絲形狀，視野背景仍清晰。=SXMJ￥-006-00 核糖霉素（Ribostamycin）發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 -25-。種子制備沙土管制備砂：取河沙60目過(guò)篩后洗滌，用10%HCl溶液浸泡2—3小時(shí)，再用水沖洗至中性，曬干后烘干，以磁鐵吸去鐵屑備用。土：取離地面一米深的有機(jī)質(zhì)少的土，制成漿，去沉底砂粒和懸浮物，讓?xiě)腋∧酀{靜置過(guò)夜。棄上清液，把沉淀泥挖出曬干，烘干，破碎成粉狀，80目過(guò)篩備用。沙：±=2：1混合裝于12X120mm小試管中，每支1克左右，用棉花塞塞住試管口，并用牛皮紙?jiān)?。?.13MPa（124℃）飽和蒸汽高壓滅菌，間歇三次，每次1小時(shí)，滅菌后124℃電烘箱烤4小時(shí)冷卻備用。取高單位新鮮斜面一支（試管22X200mm）,加無(wú)菌水0.8ml,用無(wú)菌不銹鋼環(huán)刮下抱子制成懸浮液。再用無(wú)菌吸管吸取0.1山1加入沙士管內(nèi)，搖勻，塞上棉塞。置于裝有無(wú)水氯化鈣的真空干燥瓶中，用真空泵抽干。至振動(dòng)時(shí)沙土?xí)㈤_(kāi)（最好在6小時(shí)內(nèi)完成抽干），放4℃冰箱保存，使用期半年至一年。取用前應(yīng)做無(wú)菌測(cè)試并測(cè)定其生產(chǎn)能力。母斜面抱子制備（F1）按F1配方配制培養(yǎng)基。每個(gè)茄子瓶裝量60ml,以0.11MPa,121°C滅菌30分鐘，制成斜面?？瞻仔泵嬷糜?7℃培養(yǎng)間預(yù)培養(yǎng)7天，需無(wú)雜菌。在無(wú)菌操作條件下，將一小勺沙土管中沙土均勻涂布于空白合格茄子瓶斜面，于32.5—34.5°C培養(yǎng)6—8天，抱子呈灰褐色，抱子豐富。子斜面抱子制備（F2）按F2配方配制培養(yǎng)基，分裝于22X200mm大試管中，每支18ml,滅菌與預(yù)培養(yǎng)方法同母斜面。在無(wú)菌操作條件下，用接種環(huán)將F1斜面抱子移接到F2空白斜面，于32.5—34.5°C培養(yǎng)6—7天，抱子呈灰褐色，抱子層厚，抱子豐富，無(wú)雜菌，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.3.4搖瓶種子制備按搖瓶種子配方配制培養(yǎng)基，500ml三角瓶各分裝50ml培養(yǎng)基，塞好棉塞（每個(gè)棉塞約2.2克），包好牛皮紙，以0.1—0.11MPa飽和蒸汽，120—121°C滅菌30分鐘。在無(wú)菌操作條件下，用不銹鋼環(huán)將子斜面以挖塊法（5mmX5mm）接入三角瓶，置32.5—34.5°C培養(yǎng)46—50小時(shí)。每6瓶搖瓶種子并成1大瓶（約300ml菌液），經(jīng)無(wú)菌檢測(cè)，pH測(cè)定合格后，送車(chē)間進(jìn)種子罐，并進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)。=SXMJ￥-006-00 核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 _25-10種子罐接種當(dāng)一級(jí)種子罐罐溫按規(guī)定時(shí)間達(dá)到工藝規(guī)定要求時(shí)，先關(guān)閉門(mén)窗與通風(fēng)裝置，并用過(guò)氧乙酸噴灑接種罐周?chē)臻g。用火焰接種法接種，即在接種口圍上一圈酒精棉，點(diǎn)燃后，將罐壓放至零磅并迅速關(guān)閉排氣口，同時(shí)擰開(kāi)接種帽，將種子液倒入罐內(nèi)，立即擰緊接種帽，通入無(wú)菌空氣，使罐壓調(diào)節(jié)在工藝要求范圍開(kāi)車(chē)運(yùn)轉(zhuǎn)。培養(yǎng)基配制一級(jí)種子罐配料在洗凈的小罐配料槽內(nèi)加入一定量水，至攪拌葉處，開(kāi)動(dòng)攪拌。按工藝員所開(kāi)配料單，嚴(yán)格檢查倉(cāng)庫(kù)送來(lái)的物料，準(zhǔn)確稱(chēng)取物料，倒入配料槽，攪拌均勻，再加水至配料體積，調(diào)pH值至工藝要求，加入輕質(zhì)碳酸鈣，攪拌均勻后，經(jīng)泵輸送至一級(jí)種子罐內(nèi)。二級(jí)種子罐配料在洗凈的大罐配料槽內(nèi)先放水至攪拌葉處，開(kāi)動(dòng)攪拌，按工藝員所開(kāi)配料單，嚴(yán)格檢查倉(cāng)庫(kù)送來(lái)的物料，準(zhǔn)確稱(chēng)取小料，對(duì)不溶解的物料按量由大到小次序投料，再將可溶性小料投入，最后加消沫油，攪拌均勻并加水至配料體積，調(diào)pH至工藝要求，加入輕質(zhì)碳酸鈣，攪拌均勻后經(jīng)泵輸送至二級(jí)罐內(nèi)。發(fā)酵罐配料玉米淀粉先單獨(dú)液化，在配料罐內(nèi)先放水至下層攪拌葉處，在攪拌情況下加入。一淀粉酶，再投入玉米淀粉，攪拌均勻經(jīng)泵發(fā)酵罐內(nèi)，其體積必須達(dá)到最下層攪拌葉上方處，開(kāi)發(fā)酵罐攪拌(有工業(yè)控制機(jī)條件下30M3轉(zhuǎn)速70rpm),用蒸汽通入加熱至80—85℃,保溫30分鐘左右，再將配料罐其他原料輸送至發(fā)酵罐，達(dá)到總配料體積。補(bǔ)料罐配料補(bǔ)料罐配料按發(fā)酵罐配料進(jìn)行。培養(yǎng)基消毒一、二級(jí)培養(yǎng)基消毒拆檢取樣閥，鎖緊罐蓋，打好料，排盡夾套內(nèi)冷凝水，打開(kāi)罐上排氣口，依次從移種管道、空氣管道、取樣管道通入蒸汽進(jìn)行消毒，通過(guò)調(diào)整上述三路蒸汽閥門(mén)及罐上排氣閥，直接升溫至罐壓0.1MPa,罐溫120℃時(shí)，開(kāi)沖視鏡蒸汽閥，保壓30分鐘。消毒結(jié)束，再依次關(guān)閉各路進(jìn)汽閥，并調(diào)節(jié)排氣閥。當(dāng)罐壓低于分過(guò)濾器壓力 O.04-0.05MPa,通入無(wú)菌空氣。使罐壓維持在0.0加口2左右，開(kāi)啟夾套冷卻水進(jìn)水閥進(jìn)行冷卻。當(dāng)罐溫達(dá)40℃,開(kāi)啟冰水進(jìn)行冷卻。待罐溫冷至340.5℃即可接種。=SXMJ￥-006-00 核糖霉素（Ribostamycin）發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 _25-11發(fā)酵培養(yǎng)基消毒拆檢取樣閥，鎖緊罐蓋，第一料液化料打好后，開(kāi)動(dòng)攪拌，打開(kāi)自來(lái)水回水閥。打開(kāi)罐上排氣閥，依次從取樣進(jìn)汽管道、空氣進(jìn)汽管道、罐底進(jìn)汽管道、移種進(jìn)汽罐底管道通入飽和蒸汽加熱至80—85C,關(guān)掉各路進(jìn)氣，保溫30分鐘后，輸送第二料。待第二料輸送完畢，再依次從取樣進(jìn)氣管道、空氣進(jìn)汽管道、罐底進(jìn)汽管道、移種進(jìn)汽罐底管道通入飽和蒸汽進(jìn)行消毒。通過(guò)調(diào)節(jié)后三路蒸汽及罐上排氣，將罐溫升至100±1。1收小排氣，開(kāi)移種罐面管道、補(bǔ)料管道進(jìn)汽，打開(kāi)空氣管道相關(guān)小排汽，微開(kāi)沖視鏡蒸汽閥，繼續(xù)將罐壓升至0.10-O.11MPa（罐溫122±2。。，保壓30±1分鐘。消毒結(jié)束，再依次關(guān)閉小排汽、各路蒸汽，調(diào)節(jié)排氣閥，使罐壓低于分過(guò)濾器壓力 0.04—0.05MPa,通入無(wú)菌空氣，使罐壓保持在0.01MPa。從蛇管通入工業(yè)水進(jìn)行冷卻，待罐溫冷卻至40—45℃（由值班組掌握），開(kāi)冰水進(jìn)行降溫，罐溫31±0.5℃即可接種。4.6.3補(bǔ)料培養(yǎng)基的消毒按發(fā)酵培養(yǎng)基消毒進(jìn)行。發(fā)酵設(shè)備消毒新型總過(guò)濾器介質(zhì)安裝總過(guò)濾器罐內(nèi)壁以及下方花板均要求無(wú)鐵銹，無(wú)油跡，用生漆油漆罐壁內(nèi)封頭蓋，固定螺桿、預(yù)濾芯托板。在下花板裝填15kg棉胎，裝填時(shí)要均勻，靠罐壁處要裝填結(jié)實(shí)，固定花板螺帽要旋牢固。每臺(tái)總過(guò)濾器安裝350X1000規(guī)格的預(yù)濾濾芯7個(gè)。預(yù)濾芯密封橡皮圈應(yīng)完好。預(yù)濾芯密封圈朝上，并等分對(duì)準(zhǔn)空氣出口，上好螺桿，用固定圓板托住，鎖緊螺帽。安裝預(yù)濾芯，鎖好人孔，上封頭蓋。試壓，無(wú)漏，投入使用。分過(guò)濾器消毒只消精過(guò)濾器，不消預(yù)過(guò)濾器。蒸汽管道的冷凝水排盡，精濾及附屬管道泄壓后，壓力在0.2MPa以上的飽和蒸汽經(jīng)蒸汽過(guò)濾器通入精過(guò)濾器，調(diào)節(jié)相關(guān)小排汽，使壓力在0.11—0.15MPa之間，以免損壞超濾膜，消毒30分鐘，關(guān)蒸汽，通入空氣吹干，直至無(wú)水分，方可使用。空罐消毒（以30噸大罐為例）在洗凈發(fā)酵罐后，打開(kāi)排氣，打開(kāi)工業(yè)水排水閥，即可通入蒸汽消毒，先后通入空氣管、移種管、罐底、取樣管道各路蒸汽，待罐的壓力升至0.10—0.11MPa,溫度120℃時(shí)，再通入沖視鏡蒸汽，開(kāi)相關(guān)小排汽，調(diào)節(jié)控制罐壓在0.11-0.12MPa,保壓30分鐘，消毒結(jié)束，依次停止通入蒸汽。打開(kāi)下水道閥門(mén)，關(guān)緊排氣，通入無(wú)菌空氣，壓掉罐內(nèi)冷凝水，備用。25-12核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-12移種管道消毒總蒸汽壓力在0.2MPa以上時(shí)，將蒸汽通入接種罐與移種罐之間的管道，待移種末端有蒸汽排出，控制各支路排汽。保持管道有0.10-0.15MPa以上活蒸汽，消毒一個(gè)小時(shí)，即可移種。補(bǔ)料管道消毒總蒸汽壓力在0.2MPa以上時(shí)，將蒸汽通入補(bǔ)料罐和接料罐之間的管道，待接料末端有蒸汽排出，控制各支路排汽。保持管道有0.10—0.15MPa以上活蒸汽，消毒一個(gè)小時(shí)，即可補(bǔ)料。

=SXMJ￥-006-00 核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 _25-13.生產(chǎn)控制和技術(shù)檢查各級(jí)工藝控制點(diǎn)、\工藝條件工序崗位、工藝條件控制點(diǎn)斜面抱子F1培養(yǎng)溫度：33.5±1。C保存溫度：4K冰箱培養(yǎng)時(shí)間：1112d使用期：不超過(guò)7d斜面抱子F2培養(yǎng)溫度：33.5±1℃保存溫度：4K冰箱培養(yǎng)時(shí)間：1011d使用期：不超過(guò)21d搖瓶種子接種量：F2挖塊(約5X5mm)裝量：500ml搖瓶裝50ml通氣量：每個(gè)棉塞22g 培養(yǎng)溫度：33.5±1℃培養(yǎng)時(shí)間：40±3hr 搖瓶機(jī)轉(zhuǎn)速：220r/min偏心距：25mm搖瓶發(fā)酵(生產(chǎn)能力測(cè)定)接種量：2.5ml(5%)通氣量：八層紗布培養(yǎng)時(shí)間：56d偏心距：25mm裝量：50ml/500ml三角瓶培養(yǎng)溫度：33.5±1℃搖瓶機(jī)轉(zhuǎn)速：220r/min搖瓶效價(jià)：三5500u/ml一級(jí)種子罐接種量：每罐接250300ml 培養(yǎng)溫度：33±1℃培養(yǎng)時(shí)間：44—46hr 罐壓：0.03-0.04MPa攪拌轉(zhuǎn)速：250rpm 通氣量：空氣分過(guò)濾器壓降0.03-0.04MPa二級(jí)種子罐接種量：1012% 培養(yǎng)溫度：29.5±1℃培養(yǎng)時(shí)間：27—29hr 罐壓：0.02—0.03MPa攪拌轉(zhuǎn)速：200rpm 空氣流量：空氣分過(guò)濾器壓降0.03-0.04MPa發(fā)酵罐接種量：15—20%培養(yǎng)時(shí)間：100—120hr攪拌轉(zhuǎn)速：130±1r/min培養(yǎng)溫度：33±1。C罐壓：0.01MPa發(fā)酵過(guò)才王工藝：發(fā)酵28小時(shí)左右補(bǔ)料6m3,發(fā)酵42小時(shí)左右補(bǔ)料6m3

25-14核糖霉素（Ribostamycin）發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-145.2各級(jí)中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)3小崗位級(jí)另IJ項(xiàng)目質(zhì)量要求供斜面抱子（F1，F(xiàn)2）外觀呈灰褐色或黑褐色，抱子層厚，抱子豐富生產(chǎn)能力搖瓶效價(jià)三5500u/ml無(wú)菌檢查種無(wú)雜菌菌落外觀菌液粘度適中，顏色姜黃色，外觀均一部搖瓶種子菌絲形態(tài)細(xì)長(zhǎng)均勻，分枝多，呈網(wǎng)狀，染色深門(mén)（菌絲瓶）無(wú)菌度鏡檢無(wú)雜菌，同時(shí)做無(wú)試跟蹤pH6.4-6.7外觀呈黃褐色，較濃稠，有較多小空抱，粘度達(dá)80CPo以上 ▲消后：pH6.2-6.7總糖：3.0±0.5g/100ml級(jí)代謝情況氨基氮20±5mg/100ml；種子移前：pH6.7-7.2 粘度：三80cPo發(fā)菌絲形態(tài)細(xì)長(zhǎng)均勻，長(zhǎng)分枝，呈網(wǎng)狀，染色較深，有小空抱酵無(wú)菌度鏡檢無(wú)雜菌，斜面與肉湯檢測(cè)呈陰性工外觀呈黃褐色，較濃稠，有較多小空抱，粘度達(dá)200CPo以上段二消后：pH6.4-7.0總糖：3.0±0.5g/100ml級(jí)代謝情況氨基氮：20±5mg/100ml種移前：pH6.7-7.2 粘度：三180cPo子菌絲形態(tài)細(xì)長(zhǎng)，分枝多，呈網(wǎng)狀，染色深，有小空抱無(wú)菌度鏡檢無(wú)雜菌，斜面與肉湯無(wú)試檢測(cè)均呈陰性

發(fā)酵工段發(fā)酵罐外觀從黃褐色逐漸加深至棕褐色，較濃稠，粘度約在200-800Cpo之間代謝情況pH：消后6.4-7.0,24小時(shí)左右上升至7.0-7.2,48小時(shí)左右升至7.2-7.5,而后趨于平穩(wěn)，到96小時(shí)又開(kāi)始上升，放罐pH達(dá)7.8-8.2總糖：消后12±1g/100ml,發(fā)酵前期耗糖較快，后期耗糖較慢，放罐時(shí)殘?zhí)?.0±0.5g/100ml氨基氮：消后140±10mg/100ml,12—36小時(shí)后，上升至180mg/100ml左右，而后略有卜’降，72小時(shí)左右上升，放罐達(dá)200-260mg/100ml。效價(jià)：36hr時(shí)起步效價(jià)500u/ml以上，放罐達(dá)5500u/ml以上。菌絲形態(tài)初期細(xì)長(zhǎng)，染色深；中期細(xì)長(zhǎng)，密網(wǎng)狀，染色變淺；后期自溶，斷裂，有部分碎片無(wú)菌度鏡檢無(wú)雜菌，前84小時(shí)要求做無(wú)菌試驗(yàn)，斜面與肉湯無(wú)試檢驗(yàn)呈陰性放罐質(zhì)量要求外觀棕褐色，粘度500Cpo左右生化指標(biāo)pH：7.8-8.2殘?zhí)牵?.0±0.5g/100ml氨基氮：200-260mg/100ml預(yù)計(jì)效價(jià)：5500u/ml無(wú)菌度鏡檢無(wú)雜菌CTD—匚/—cc核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-15

25-16核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-16中間體分析檢查3小崗位檢查名稱(chēng)檢查時(shí)間檢查項(xiàng)目要求(標(biāo)準(zhǔn))檢查方法取樣人檢查人沙土抱子及種子準(zhǔn)備沙土抱子管制備后無(wú)菌度無(wú)雜菌肉湯斜面種子組種子組生產(chǎn)能力效價(jià)＞5500u/ml搖瓶試驗(yàn)種子組生測(cè)組斜面抱子培養(yǎng)好后外觀灰褐色或黑褐色，抱子層厚目測(cè)種子組種子組無(wú)菌度無(wú)染菌肉湯斜面種子組種子組生產(chǎn)能力效價(jià)＞5500u/ml搖瓶試驗(yàn)種子組生測(cè)組搖瓶種子培養(yǎng)好后外觀液體濃稠黃褐色目測(cè)種子組種子組菌絲形態(tài)分枝多，網(wǎng)狀鏡檢無(wú)菌度無(wú)染菌肉湯斜面PH值按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)PH計(jì)測(cè)定

3岡位檢查名稱(chēng)檢查時(shí)間檢查項(xiàng)目要求(標(biāo)準(zhǔn))檢查方法取樣人檢查人 ▲級(jí)種子罐種子罐培養(yǎng)液消后及接后每12小時(shí)一次pH值按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)測(cè)車(chē)間化驗(yàn)員化驗(yàn)員消后移前總糖化測(cè)氨基氮化測(cè)消后及接后每12小時(shí)一次菌絲形態(tài)按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)鏡檢車(chē)間無(wú)試人員工藝員無(wú)菌度無(wú)雜菌肉湯斜面鏡檢接后每12小時(shí)一次及移前粘度按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)粘度計(jì)車(chē)間化驗(yàn)員化驗(yàn)員菌濃離心機(jī)級(jí)種子罐種子罐培養(yǎng)液消后及接后每12小時(shí)一次pH值按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)測(cè)車(chē)間化驗(yàn)員化驗(yàn)員接后每12小時(shí)一次粘度粘度計(jì)消后及移前各一次總糖化測(cè)氨基氮化測(cè)消后及接后每12小時(shí)一次菌絲形態(tài)按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)鏡檢車(chē)間無(wú)試人員工藝員無(wú)菌試驗(yàn)無(wú)雜菌肉湯斜面鏡檢CTD—匚/—cc核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-17

3小崗位檢查名稱(chēng)檢查時(shí)間檢查項(xiàng)目要求(標(biāo)準(zhǔn))檢查方法取樣人檢查人發(fā)酵罐發(fā)酵液消后及接后每12小時(shí)一次pH值按中間質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)pH計(jì)測(cè)化驗(yàn)員化驗(yàn)員總糖化測(cè)氨基氮化測(cè)菌絲形態(tài)鏡檢車(chē)間無(wú)試人員工藝員36小時(shí)后每12小時(shí)一次生物效價(jià)生物測(cè)定車(chē)間化驗(yàn)員生測(cè)組接后每12小時(shí)一次粘度粘度計(jì)化驗(yàn)員化驗(yàn)員菌濃離心機(jī)inv-nnA-nn核糖霉inv-nnA-nn核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程25-18=SXMJ￥=Q06-00 核糖霉素（Ribostamycin）發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 _25-1。.技術(shù)安全及防火技術(shù)安全及防火知識(shí)，是企業(yè)生產(chǎn)車(chē)間每個(gè)職工必備的。它關(guān)系到國(guó)家財(cái)產(chǎn)以及個(gè)人的生命安全。發(fā)酵工段及菌種部門(mén)在日常生產(chǎn)中，涉及壓力容器 （如水罐、發(fā)酵罐、空氣貯罐等）、電氣設(shè)備、高壓飽和蒸汽、濃酸、強(qiáng)堿、易燃性酒精，以及一些有毒的化學(xué)誘變劑（如氮疥、NTG等）、強(qiáng)輻射物理誘變劑（如Co-60放射線），這些對(duì)人體都會(huì)帶來(lái)不安全因素，因而車(chē)間對(duì)技術(shù)安全和防火知識(shí)教育特別重視，以保障車(chē)間安全生產(chǎn)。防火規(guī)程一切易燃品不準(zhǔn)隨便放在車(chē)間內(nèi)，如生產(chǎn)上需要應(yīng)放在指定的安全處，車(chē)間內(nèi)外通道，嚴(yán)禁堆放物品，應(yīng)保持道路暢通。防爆區(qū)域內(nèi)不能隨便燒焊，如必須焊接則應(yīng)得到安全部門(mén)批準(zhǔn)，辦好動(dòng)火證，將附近易燃品移去，并備好防火用具方可動(dòng)火。蒸汽管路上不得放置棉花、衣服、手套等棉織品，謹(jǐn)防燃燒。在防火防爆區(qū)內(nèi)絕不能有明火，所有人員不得攜帶火種，嚴(yán)禁吸煙。禁止穿鐵釘?shù)男M(jìn)入防爆區(qū)及車(chē)間，在防爆區(qū)和生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)嚴(yán)禁強(qiáng)烈敲打鐵器，搬運(yùn)溶媒桶時(shí)，禁止在地面上拋擲、拖拉、碰撞，避免產(chǎn)生火花。為了防止輸送溶媒時(shí)產(chǎn)生靜電，工藝管道的法蘭、閥門(mén)二邊均要以導(dǎo)體相連。有接地裝置，接地總電阻不超過(guò)10。防爆區(qū)、所用電器設(shè)備，如開(kāi)關(guān)、照明、馬達(dá)均需用防爆型，并均需接地，電器設(shè)備發(fā)生意外時(shí)要迅速切斷電源，潤(rùn)濕的物體、手、工具、金屬等不可接觸有電部位。如遇以下情況發(fā)生時(shí)，應(yīng)迅速處理。一般化學(xué)品著火，可用泡沫滅火器或用沙土遮蓋，隔絕空氣。電器著火，首先切斷電源后用四氯化碳滅火器滅火。發(fā)現(xiàn)有人觸電，必須先立即切斷電源，千萬(wàn)不可直接接觸觸電人。被酸燙傷時(shí)，應(yīng)用大量水沖洗后，以10%的碳酸氫鈉溶液洗滌，若濺入口腔或眼內(nèi)，應(yīng)用5%碳酸氫鈉溶液漱口或沖洗。被堿燙傷時(shí)，用大量水沖洗后，用3—6%的醋酸溶液或1-2%鹽酸溶液洗滌，若濺入口腔，用3%的醋酸溶液涮口。若濺入眼內(nèi)，用1%的硼酸溶液洗滌。氨中毒時(shí)，應(yīng)把患者抬到室外新鮮空氣里。=SXMJ￥-006-00 核糖霉素（Ribostamycin）發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 _25-20.綜合利用及三廢治理發(fā)酵分廠各車(chē)間主要擔(dān)負(fù)核糖霉素生產(chǎn)，根據(jù)市場(chǎng)情況，部分車(chē)間生產(chǎn)西索霉素、林可霉素等，其廢液主要是發(fā)酵菌絲體殘液。放罐的發(fā)酵液中含大量的菌絲體及其它未分解物質(zhì)。林可霉素經(jīng)絮凝劑處理，板框過(guò)濾已去除濾渣，濾液經(jīng)溶媒萃取，提取林可霉素溶媒回收后，殘液由泵打入廠內(nèi)一級(jí)污水處理站。核糖霉素、西索霉素發(fā)酵液經(jīng)提煉離子交換吸附后，其菌絲渣過(guò)篩，懸浮液由泵打入廠內(nèi)一級(jí)污水處理站。對(duì)于染噬菌體、染菌等異常罐批的處理也應(yīng)除渣，懸浮液送污水處理站。濾渣作固廢處理，污水處理站處理后中性廢液排入******，廢液排放標(biāo)準(zhǔn)：*********************。.操作工時(shí)與生產(chǎn)周期：3小崗位操作單元操作時(shí)間一級(jí)罐罐體檢修進(jìn)料、消毒冷卻種子罐培養(yǎng)移種洗罐0.5小時(shí)2.5小時(shí)44—46小時(shí)1小時(shí)0.5小時(shí)二級(jí)罐（繁殖罐）罐體檢修進(jìn)料、消毒冷卻二級(jí)罐培養(yǎng)移種洗罐0.5小時(shí)4小時(shí)27-29小時(shí)1小時(shí)0.5小時(shí)三級(jí)罐（發(fā)酵罐）罐體檢修進(jìn)料、消毒冷卻發(fā)酵培養(yǎng)放罐洗罐0.5小時(shí)5小時(shí)100-120小時(shí)0.5小時(shí)1小時(shí)

=SXMJ￥-006-00 核糖霉素(Ribostamycin)發(fā)酵生產(chǎn)工藝規(guī)程 _25-21.勞動(dòng)組織、崗位定員崗位定員t-u>崗位名稱(chēng)班次每班定員總?cè)藛T備注值班43134班三運(yùn)轉(zhuǎn)大班長(zhǎng)一人，小班長(zhǎng)4人維修144其中班長(zhǎng)一人配料224其中班長(zhǎng)一人處理特殊情況消毒326其中大班長(zhǎng)一人化驗(yàn)225其中大班長(zhǎng)一人每班一人做分析，一人做霉菌以上以本廠發(fā)酵車(chē)間定員為例，有時(shí)因生產(chǎn)需要可增補(bǔ)人員。車(chē)