蛋白質(zhì)范文10篇

蛋白質(zhì)范文10篇蛋白質(zhì)范文第9篇1質(zhì)譜分析的特點(diǎn)

質(zhì)譜分析用于蛋白質(zhì)等生物活性分子的討論具有如下優(yōu)點(diǎn)：很高的靈敏度能為亞微克級(jí)試樣供應(yīng)信息，能最有效地與色譜聯(lián)用，適用于簡單體系中痕量物質(zhì)的鑒定或結(jié)構(gòu)測定，同時(shí)具有精確?????性、易操作性、快速性及很好的普適性。

2質(zhì)譜分析的方法

近年來涌現(xiàn)出較勝利地用于生物大分子質(zhì)譜分析的軟電離技術(shù)主要有下列幾種：

①電噴霧電離質(zhì)譜；

②基質(zhì)幫助激光解吸電離質(zhì)譜；

③快原子轟擊質(zhì)譜；

④離子噴霧電離質(zhì)譜；

⑤大氣壓電離質(zhì)譜。在這些軟電離技術(shù)中，以前面三種近年來討論得最多，應(yīng)用得也最廣泛。

3蛋白質(zhì)的質(zhì)譜分析

蛋自質(zhì)是一條或多條肽鏈以特別方式組合的生物大分子，簡單結(jié)構(gòu)主要包括以肽鏈為基礎(chǔ)的肽鏈線型序列及由肽鏈卷曲折疊而形成三維結(jié)構(gòu)。目前質(zhì)譜主要測定蛋自質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)包括分子量、肽鏈氨基酸排序及多肽或二硫鍵數(shù)目和位置。

3.1蛋白質(zhì)的質(zhì)譜分析原理以往質(zhì)譜(MS)僅用于小分子揮發(fā)物質(zhì)的分析，由于新的離子化技術(shù)的消失，如介質(zhì)幫助的激光解析/離子化、電噴霧離子化，各種新的質(zhì)譜技術(shù)開頭用于生物大分子的分析。其原理是：通過電離源將蛋白質(zhì)分子轉(zhuǎn)化為氣相離子，然后利用質(zhì)譜分析儀的電場、磁場將具有特定質(zhì)量與電荷比值(M/Z值)的蛋白質(zhì)離子分別開來，經(jīng)過離子檢測器收集分別的離子，確定離子的M/Z值，分析鑒定未知蛋白質(zhì)。

3.2蛋白質(zhì)和肽的序列分析現(xiàn)代討論結(jié)果發(fā)覺越來越多的小肽同蛋白質(zhì)一樣具有生物功能，建立具有特別、高效的生物功能肽的肽庫是現(xiàn)在的討論熱點(diǎn)之一。因此需要高效率、高靈敏度的肽和蛋白質(zhì)序列測定方法支持這些討論的進(jìn)行。現(xiàn)有的肽和蛋白質(zhì)測序方法包括N末端序列測定的化學(xué)方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化學(xué)降解法等，這些方法都存在一些缺陷。例如作為肽和蛋白質(zhì)序列測定標(biāo)準(zhǔn)方法的N末端氨基酸苯異硫氰酸酯(phenylisothiocyanate)PITC分析法(即Edman法，又稱PTH法)，測序速度較慢(50個(gè)氨基酸殘基/天)；樣品用量較大(nmol級(jí)或幾十pmol級(jí))；對樣品純度要求很高；對于修飾氨基酸殘基往往會(huì)錯(cuò)誤識(shí)別，而對N末端愛護(hù)的肽鏈則無法測序。C末端化學(xué)降解測序法則由于無法找到PITC這樣抱負(fù)的化學(xué)探針，其進(jìn)展仍面臨著很大的困難。在這種背景下，質(zhì)譜由于很高的靈敏度、精確?????性、易操作性、快速性及很好的普適性而倍受科學(xué)家的廣泛留意。在質(zhì)譜測序中，靈敏度及精確?????性隨分子量增大有明顯降低，所以肽的序列分析比蛋白簡單很多，很多討論也都是以肽作為分析對象進(jìn)行的。近年來隨著電噴霧電離質(zhì)譜(electrosprayionisation，ESI)及基質(zhì)幫助激光解吸質(zhì)譜(matrixassistedlaserdesorption/ionization，MALDI)等質(zhì)譜軟電離技術(shù)的進(jìn)展與完善，極性肽分子的分析成為可能，檢測限下降到fmol級(jí)別，可測定分子量范圍則高達(dá)100000Da，目前基質(zhì)幫助的激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法(MALDITOFMS)已成為測定生物大分子尤其是蛋白質(zhì)、多肽分子量和一級(jí)結(jié)構(gòu)的有效工具，也是當(dāng)今生命科學(xué)領(lǐng)域中重大課題——蛋白質(zhì)組討論所必不行缺的關(guān)鍵技術(shù)之一。目前在歐洲分子生物試驗(yàn)室(EMBL)及美國、瑞士等國的一些高校已建立了MALDITOFMS蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)(序列)譜庫，能為解析FAST譜圖供應(yīng)極大的關(guān)心，并為確證分析結(jié)果供應(yīng)牢靠的依據(jù)。

3.3蛋白質(zhì)的質(zhì)譜分析方式質(zhì)譜用于肽和蛋白質(zhì)的序列測定主要可以分為三種方法：一種方法叫蛋白圖譜(proteinmapping)，即用特異性的酶解或化學(xué)水解的方法將蛋白切成小的片段，然后用質(zhì)譜檢測各產(chǎn)物肽分子量，將所得到的肽譜數(shù)據(jù)輸入數(shù)據(jù)庫，搜尋與之相對應(yīng)的已知蛋白，從而獵取待測蛋白序列。將蛋白質(zhì)繪制“肽圖”是一重要測列方法。其次種方法是利用待測分子在電離及飛行過程中產(chǎn)生的亞穩(wěn)離子，通過分析相鄰?fù)M類型峰的質(zhì)量差，識(shí)別相應(yīng)的氨基酸殘基，其中亞穩(wěn)離子碎裂包括“自身”碎裂及外界作用誘導(dǎo)碎裂.第三種方法與Edman法有相像之處，即用化學(xué)探針或酶解使蛋白或肽從N端或C端逐一降解下氨基酸殘基，形成相互間差一個(gè)氨基酸殘基的系列肽，名為梯狀測序(laddersequencing)，經(jīng)質(zhì)譜檢測，由相鄰峰的質(zhì)量差知道相應(yīng)氨基酸殘基。

3.3.1蛋白消化蛋白的基團(tuán)越大，質(zhì)譜檢測的精確?????率越低。因此，在質(zhì)譜檢測之前，須將蛋白消化成小分子的多肽，以提高質(zhì)譜檢測的精確?????率。一般而言，6-20個(gè)氨基酸的多肽最適合質(zhì)譜儀的檢測?，F(xiàn)今最常用的酶為胰蛋白酶(trypsin)，它于蛋白的賴氨酸(lysine)和精氨酸(arginine)處將其切斷。因此，同一蛋白經(jīng)胰蛋白酶消化后，會(huì)產(chǎn)生相同的多肽。

3.3.2基質(zhì)幫助激光解吸電離/飛行時(shí)間質(zhì)譜測量法(MALDI-TOFMS)簡而言之，基質(zhì)幫助激光解吸電離/飛行時(shí)間質(zhì)譜測量儀是將多肽成分轉(zhuǎn)換成離子信號(hào)，并依據(jù)質(zhì)量/電荷之比(mass/charge，m/z)來對該多肽進(jìn)行分析，以推斷該多肽源自哪一個(gè)蛋白。

3.3.3電子噴霧電離質(zhì)譜測量法(electrosprayion-izationmassspectrometry，ESI-MS)。

4蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析的應(yīng)用

人體對蛋白質(zhì)的需要當(dāng)然有量的要求，但更重要的是質(zhì)。換句話說，蛋白質(zhì)食物并非多多益善，而是越優(yōu)越好。

所謂優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，至少應(yīng)具備兩個(gè)條件：一是氨基酸品種齊全，特殊是8種必需氨基酸

將兩種或幾種養(yǎng)分價(jià)值較低的蛋白質(zhì)食物，根據(jù)肯定的比例搭配食用，就能取長補(bǔ)短，改善氨基酸的結(jié)構(gòu)與比例，比如豆類加谷物類即為最佳搭配。另外，可對植物性蛋白質(zhì)食品予以科學(xué)地加工，清除其中過多的纖維素，從而避開其對蛋白質(zhì)汲取的干擾。以大豆為例，如煮熟之后整粒食用。所含蛋白質(zhì)的汲取率為60％。而加工成豆?jié){飲用，所含蛋白質(zhì)的汲取率可提高到90％以上。

避開不合理的搭配

為了使蛋白質(zhì)食物能夠充分地消化、汲取與利用，還須在搭配上下功夫，避開不合理的搭配。

蛋白質(zhì)食物與水果同吃就不妥。由于水果中的果酸可抑制消化液分泌，破壞消化蛋白質(zhì)的胃蛋白酶，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)消化不良。

蛋白質(zhì)食物不宜和精制糖搭配。由于精制糖抑制胃酸分泌，并可滯留于胃中發(fā)酵產(chǎn)氣，降低蛋白質(zhì)的消化與汲取。而與蔬菜同食則有利，由于蔬菜中一種也不能缺；二是所含氨基酸的比例平衡，有利于人體消化與汲取。

按上述兩條標(biāo)準(zhǔn)來衡量，瘦肉、蛋類、魚蝦等動(dòng)物性食品當(dāng)屬優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)之列，而植物性食品則或多或少存在缺陷，如豆類蛋白質(zhì)缺乏蛋氨酸，大米蛋白質(zhì)缺乏賴氨酸，花生蛋白質(zhì)缺乏異亮氨酸，這些均屬于不完全蛋白質(zhì)。人體的汲取利用率也略低一籌。

植物蛋白質(zhì)食品巧組合

前面說過，動(dòng)物性蛋白最優(yōu)，當(dāng)為首選。但長期食用動(dòng)物性蛋白質(zhì)食物也簡單導(dǎo)致肥胖、膽固醇上升等不良后果。由于，最好的方法是將植物性食品奇妙組合