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文檔簡介
化學(xué)發(fā)光實驗步驟第一頁,共十頁,編輯于2023年,星期日溶液配制Na2CO3-NaHCO3緩沖液(CBSS,0.1mol/L):Na2CO3Mr=105.99,0.1mol/L溶液為10.599g/L;NaHCO3Mr=84.01,0.1mol/L溶液為8.401g/L;pH10.2Na2CO3:NaHCO3(6:4)Fe2+SO4-EDTA(3mM):100mlH2O加入Fe2+SO4·7
H2O0.08346g,EDTA0.0877g0.1MNaOH:0.2gNaOH加入到50mlH2O.0.1mMluminol溶液:10mMluminol儲液,88.585mgluminol溶于少量DMSO中,加0.1MNaOH定溶至50ml.0.1mMluminol,1ml10mMluminol加99mlCBSS(pH10.2).3%H2O2:100μl30%H2O2
加900μlH2O第二頁,共十頁,編輯于2023年,星期日檢測儀器檢測儀器:WDD-1型發(fā)光測試儀(北京第二光學(xué)儀器廠)檢測條件:電壓:讀數(shù)調(diào)零后,該儀器電壓調(diào)至主針(內(nèi)圈)8,副針(外圈)6.第三頁,共十頁,編輯于2023年,星期日反應(yīng)過程0.1mMluminol溶液880μl100μl樣品(對照為H2O)10μlFe2+SO4-EDTA(3mM)10μlH2O2(3%)第四頁,共十頁,編輯于2023年,星期日注意事項H2O2溶液應(yīng)當(dāng)?shù)蜏乇芄獗4鏅z測過程中,反應(yīng)溶液均在冰浴中保存更佳Fe2+SO4-EDTA和H2O2溶液,均分開貼在檢測管管壁,開始記時時搖勻開啟反應(yīng).樣品混勻后,記錄30S后的讀數(shù).第五頁,共十頁,編輯于2023年,星期日超氧陰離子清除實驗(鄰苯三酚自氧化)溶液配制檢測儀器反應(yīng)過程注意事項第六頁,共十頁,編輯于2023年,星期日溶液配制
0.1mMluminol溶液:10mMluminol儲液,88.585mgluminol溶于少量DMSO中,加0.1MNaOH定溶至50ml.0.1mMluminol,1ml10mMluminol加99mlCBSS(pH10.2).4MNaOH:1.6gNaOH+10mlH2O3mM鄰苯三酚:H2O,用HCl調(diào)pH值為3.5;0.3M鄰苯三酚,0.037833g鄰苯三酚,加入1mlpH3.5的H2O中,3mM鄰苯三酚,10μl0.3M鄰苯三酚+990μlH2O(pH3.5).第七頁,共十頁,編輯于2023年,星期日反應(yīng)過程0.1mMluminol溶液810μl100μl樣品(對照為H2O)80μlNaOH(4M)10μl鄰苯三酚(3mM)第八頁,共十頁,編輯于2023年,星期日檢測儀器檢測儀器:WDD-1型發(fā)光測試儀(北京第二光學(xué)儀器廠)檢測條件:電壓:讀數(shù)調(diào)零后,該儀器電壓調(diào)至主針(內(nèi)圈)10,副針(外圈)0.第九頁,共十頁,編輯于2023年,星期日注意事項
實驗過程中,鄰苯三酚溶液需冰浴中保存鄰苯三酚溶液堿性條件下容易氧化,若對照數(shù)值有較大變化,則
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