氧化應激應激

關于氧化應激應激第1頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>2動脈粥樣硬化的血管第2頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>3動脈粥樣硬化臨床分期無癥狀隱匿期：粥樣硬化斑塊已形成，但尚無明顯狹窄，因此無器官受累臨床表現(xiàn)。（脂質條紋多于5~10歲的兒童開始，粥樣斑塊始見于20歲)。缺血期：粥樣硬化斑塊導致血管狹窄、器官缺血，根據(jù)累及器官不同臨床表現(xiàn)也不同。壞死期：動脈堵塞或血管腔內血栓形成造成相應器官組織壞死產(chǎn)生的癥狀。纖維化期：長期缺血導致相應器官組織纖維化萎縮第3頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>4動脈粥樣硬化脂質氧化理論的提出

脂源性理論無法解釋4種現(xiàn)象:LDL-R缺乏的患者(家族性純合子型高膽固醇血癥)或動物模型,由于巨噬細胞表面的LDL-R缺乏,LDL無法通過LDL-R途徑被巨噬細胞攝取,但是該類患者或動物模型動脈粥樣硬化的發(fā)病率幾乎是100%。?1第4頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>5

體外試驗中,即使將單核-巨噬細胞和平滑肌細胞和濃度非常高的LDL血漿共同培養(yǎng)后,也并不能誘導膽固醇在細胞內的聚積。?2動脈粥樣硬化脂質氧化理論的提出第5頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>6動脈粥樣硬化脂質氧化理論的提出LDL-R受細胞內膽固醇含量的負反饋調節(jié)。LDL和LDL-R結合后,內吞進入巨噬細胞胞漿,與溶酶體結合后,在溶酶體酶的作用下,LDL中的蛋白質降解為氨基酸,而膽固醇酯水解為游離膽固醇和脂肪酸。但是,當細胞內膽固醇的含量飽和時,便會反饋性調節(jié)細胞表面的LDL-R的數(shù)量減少,功能下調。所以LDL經(jīng)這一途徑代謝只是一個生理過程,并不會引起膽固醇在巨噬細胞內堆積。?3第6頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>7

多個流行病學調查結果顯示,動脈粥樣硬化與高膽固醇血癥之間呈一種非線性關系,動脈粥樣硬化患者中合并高膽固醇血癥的不到60%,有40%多的患者血脂完全正常。?4動脈粥樣硬化脂質氧化理論的提出第7頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>8高LDL與動脈粥樣硬化形成之間存在中間環(huán)節(jié)??LDL-C動脈粥樣硬化氧化修飾ROS可導致脂質、蛋白質和DNA的修飾第8頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>9動脈粥樣硬化脂質氧化學說1983年,美國國家科學院院士DanielSteinberg提出動脈粥樣硬化脂質氧化學說,認為與天然LDL相比,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)更容易被巨噬細胞識別并吞噬形成泡沫細胞,奠定了ox-LDL在動脈粥樣硬化發(fā)生過程中的中心地位。第9頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>10氧化應激的概念機體自由基抗氧化有害刺激組織損傷ReactiveOxygenSpecis(ROS)氧化應激第10頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>11ROS的作用

機體防御細胞內第二信使，參與正常生理功能過量，導致病理損傷第11頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>12LDL如何被氧化修飾O2-

O2-LDL表面多不飽和脂肪酸雙鏈斷裂ApoB氧化共軛雙烯修改LDL表面結構交聯(lián)LDL表層LDL不再被LDL-R識別

轉而被SR-AI受體識別Witztum,J.L.etal.J.Clin.Invest.1991.88,1785-1792第12頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>13

Ox-LDL在泡沫細胞形成過程中的作用LDLLDL內皮細胞管腔單核細胞巨噬細胞泡沫細胞內膜氧化修飾

LDL細胞增殖、退化RossR.NEnglJMed1999;340:115-126.MCP-1穿越VCAM-1ICAM-1粘附SR高脂血癥細胞因子第13頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>14ROS與AS第14頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>15LDL體內氧化機制LDL氧化中性粒細胞單核細胞巨噬細胞

ECSMC成纖維細胞NADPH氧化酶髓過氧化酶細胞色素P450線粒體電子傳遞鏈過氧化亞硝酸鹽黃嘌呤氧化酶血漿銅藍蛋白脂氧化酶：體內/外第15頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>16OxLDL的致AS特性

促進SMC增殖抑制內皮細胞的血管舒張具有免疫原性細胞毒作用：破壞血管內膜完整性（炎癥因子和炎癥介質）

T細胞趨化因子MMP，影響斑塊穩(wěn)定性第16頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>17OxLDL的致AS特性

上調清道夫受體表達易被巨噬細胞迅速攝取，無負反饋調節(jié)，形成泡沫細胞刺激EC釋放MCP-1、CSF，促進單核細胞趨化并分化成組織巨噬細胞抑制局部巨噬細胞遷移；刺激單核細胞/巨噬細胞表達IL-1第17頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>18丙二醛（MDA）循環(huán)抗oxLDL抗體F(2)-異前列烷(IsoPs)定量方法體內、簡便、準確人體液：血漿和尿液

AS危險因素如吸煙、高膽固醇、糖尿病、肥胖時，F(xiàn)(2)-IsoP增加ROS的檢測第18頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>19氧化應激反應總結nLDLoxLDL底物oxLDL形成AS的主要原因MMPS斑塊破裂的關鍵因素血栓形成不良事件

第19頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>20導致血栓形成原因總結外因：各種危險因素：高血壓、糖尿病、高半胱氨酸血癥、吸煙、飲酒。內因：斑塊破裂，其中基質蛋白酶（MMPS）是影響斑塊穩(wěn)定性的關鍵生物酶。第20頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>21如何判定斑塊是否穩(wěn)定CRP大于3.0栓子監(jiān)測腦彩超頸動脈易損斑塊成像（MRE）第21頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>22天然抗氧化劑VitE,VitC,β-胡蘿卜素,類黃酮,泛醇-10,超氧化物岐化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH)合成抗氧化劑普羅布考(probucol),丁羥甲苯(BHT),聯(lián)苯二胺(DPPA),AGI-1067(普羅布考衍生物)抗氧化治療第22頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>23ProbucolStatinsAT1RBandACEIVitaminsEandCPPAR-γligands.抗氧化治療第23頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>24中度降低LDL有效抑制LDL氧化修飾，獨立于其降脂作用恢復NO生物活性抑制VCAM-1和MCP表達，抑制人主動脈SMC增殖抑制模型動物AS形成Probucol第24頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>25抗氧化劑抗動脈粥樣硬化的循證研究抗氧化劑循證研究結果普羅布考MVP(MultivitaminsandProbucolStudy)+MVP-Small(MultivitaminsandProbucolStudyinSmallcoronaryartery)+CART(CanadianAntioxidantRestenosisTrial)+FAST(FukuokaAtherosclerosisTrial)+PART(ProbucolAngioplastyRestenosisTrial)+PQRST(ProbucolQuantitativeRegressionSwedishTrial)-PRO-MPP(ProbucolintheMultifactorialPrimaryPrevention)+ISHIN(InsightofStentIntimalHyperplasiaInhibitionbyNewARB)+AGI-1067CART-1(CanadianAntioxidantRestenosisTrial)+CART-2(CanadianAntioxidantRestenosisTrial)+ARISE(AggressiveReductionofInflammationStopsEvents)未獲得第25頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>26抗氧化劑抗動脈粥樣硬化的循證研究抗氧化劑循證研究結果VitECHAOS(CambridgeHeartAnti-OxidantStudy)+HOPE(HeartOutcomePreventionEvaluation)-ATBC(AlphaTocopherolBetaCarotenePrevention)-SPACE(SecondaryPreventionwithAntioxidantsofCardiovascularDiseaseinEndstageRenalDisease)+ASAP(AntioxidantSupplementationinAtherosclerrosisPrevention)±

PPP(PrimaryPreventionProject)-GISSI(GruppoItalianoperloStudiodellaSorpravivenzanel’Infartomiocardico)-β-胡蘿卜素ATBC(AlphaTocopherolBetaCarotenePrevention)-CARET(Beta-Carotene&RetinolEfficacyTrial)-VitCCLAS(CholesterolLoweringAtherosclerosisStudy)-復合維生素IEISS(TheIndianExperimentofInfareSurvivalStudy)-第26頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>27為何普羅布考循證研究獲得陽性結果而抗氧化維生素卻未?普羅布考是目前最強的斷鏈抗氧化劑,其抗氧化能力是VitE的5～6倍,且結合氧自由基反應為不可逆普羅布考分子具有14個親脂性甲基,決定了普羅布考與LDL結合能力遠強于其他脂溶性抗氧化劑(1個LDL顆粒僅能結合6個VitE和2個β-胡蘿卜素分子),因此與LDL結合的普羅布考分子消耗氧自由基的能力遠強于VitE和β-胡蘿卜素。除了抗氧化作用外,普羅布考還是個降膽固醇藥物,且對動脈粥樣硬化過程中諸多的炎性細胞因子有較強抑制作用VitE和β-胡蘿卜素在大多研究中劑量不足。值得注意的是,VitE每日劑量在400IU以上的臨床試驗結果均為陽性,而每日劑量在400IU以下則對動脈粥樣硬化無明顯效果。VitC為水溶性抗氧化劑,抗脂質氧化作用微弱。第27頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>28他汀類藥物

抑制NAD(P)H氧化酶表達降低oxLDL對氧化的易感性抑制LOX-1上調增加eNOS表達及mRNA

穩(wěn)定性，NO

抑制ATR1表達抗氧化劑第28頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>29ACEI和ARB-從源頭阻斷ROS產(chǎn)生

抑制NAD(P)H氧化酶活性SOD表達改善NO生物活性，改善內皮功能抑制早期斑塊形成

ACEI

緩激肽水平NO釋放第29頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>30ApoE敲除小鼠高脂喂養(yǎng)：LOX-1、MMP-1,MMP-2,MMP-9,CD40，p38MAPK活性

rosuvastatin或candesartana：中度抑制

rosuvastatin加candesartana：完全抑制-ChenJ,etal.JAmCollCardiol(inpress)ACEI/ARB與statins的協(xié)同作用第30頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>31

抑制NADPH氧化酶表達、ROS產(chǎn)生抑制EC和SMCs表達致AS蛋白調節(jié)巨噬細胞-泡沫細胞形成和炎癥反應，AS病變高膽固醇兔的血管壁白細胞聚集TNF-α-介導的人冠狀動脈EC凋亡PPAR-γ配體第31頁，講稿共36頁，2023年5月2日，星期三<#>32

增加局部NO生物利用度抑制LDL氧化動物模型：糖尿病、高血脂改善內皮功能，減緩AS進展VitaminsE局限性對O2-、OH-、ONOO-無