從業(yè)人員健康體檢沙門氏菌、志賀氏菌檢測操作程序

..從業(yè)人員安康體檢沙門氏菌、志賀氏菌檢測操作程序一、目的菌檢測的方法，以標(biāo)準(zhǔn)操作程序，保證檢測數(shù)據(jù)的有效性。二、適用范圍：存的梯相關(guān)操作。三、生物安全要求BSL-2生物安全試驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)展。四、試劑及儀器設(shè)備試劑Cary-Blair運(yùn)送培育基、亞硒酸增菌液S〔SB--脫氧膽酸瓊脂XL、麥康凱瓊脂、沙門顯色培育基、結(jié)晶紫沙門培育基Y、TS--〔MI志賀氏菌屬診斷血清、API20E生化試劑條、磁珠菌種保存管儀器設(shè)備恒溫培育箱、微生物鑒定儀五、采樣方法標(biāo)本應(yīng)為穎的或轉(zhuǎn)移至Cary-Blair運(yùn)送培育基的糞便或肛拭子，最優(yōu)標(biāo)本是轉(zhuǎn)移到Cary-Blair運(yùn)送培育基的糞便拭子。肛拭子不是最正確標(biāo)本，僅在病人無糞便標(biāo)本時承受。糞便標(biāo)本：應(yīng)采集自然排出的穎糞便，取稀水樣、粘血樣、膿血樣，黏液樣局部。盛于清潔、枯燥、無吸水性的無菌容器，避開混入尿液、水和其他物質(zhì)。肛拭標(biāo)本：假設(shè)無法獲得糞便〔如排便困難或嬰幼兒4-5cm童約2-3c2-3入Cary-Blair運(yùn)送培育基。1h；Cary-Blair24小時內(nèi)送檢。六、檢驗(yàn)程序糞便標(biāo)本或肛子糞便標(biāo)本或肛子XLD或麥康凱SBG增菌可疑菌落接種TSIMIUXLD或顯色平板可疑菌落接種TSIMIU生化符合者做血清凝集和系統(tǒng)生化反響生化符合者做血清凝集和系統(tǒng)生化反響菌株保存管保存菌株上送七、操作步驟XLD平板〔YS平板、麥康凱平板〕1管9ml改進(jìn)亞硒酸鹽磺綠增菌肉湯SB〔或SF液。1個無菌拭子取少量標(biāo)本〔可見血或黏液的部位收集〕XLD平板的第一區(qū)，接著把拭子放入SBGXLD平板的其余區(qū)進(jìn)展劃線接種。假設(shè)是Cary-Blair運(yùn)送培育基的糞便拭子，則輕攪混合標(biāo)本后接種增菌液與平板。36℃±1℃培育，SBG的最正確增菌時間是液劃平板。觀看平板：取培育后的平板，觀看有無可疑菌落。XLD平板可疑菌落觀看：志賀菌在XLD平板上為粉紅或無1-2mm，而大局部的大腸桿菌類的菌落為黃色、混濁、凸起、潮濕、邊緣整齊或不規(guī)章2-3mm。大多數(shù)沙門菌在XLD平板上中心黑色的透亮、光滑、潮濕、邊緣整齊、圓形的菌落〔2〕7.4.２YS平板可疑菌落觀看：7.4.淺粉色、半透亮、光滑、潮濕、邊緣整齊或不規(guī)章、圓形菌落，直徑2-3mm；大多數(shù)沙門菌為無色菌落，粉紅色，帶或不帶黑心，傷寒沙3-4mm。7.4.４SBG肉湯增菌：SBG16~18XLE36℃±118～24h。沙門顯色平板2-3mm。7.4.4建議的初步篩查方案〔初步生化特征見表1：大局部沙門菌大局部沙門菌傷寒沙門菌枸櫞酸桿菌TSI〔斜面〕TSI〔底面〕TSI〔產(chǎn)氣〕MIU〔動力〕MIU〔吲哚〕MIU〔尿素〕A〔黃色〕A〔黃色〕A〔黃色〕+〔黑色〕小局部--+〔黑色〕+〔黑色〕+〔氣泡〕--+〔氣泡〕+〔氣泡〕+〔氣泡〕+〔布滿+〔布滿-〔沿接種+〔布滿+〔布滿+〔布滿生長〕生長〕線生長〕生長〕生長〕生長〕-〔黃色-〔黃色-〔黃色加試劑加試劑-〔黃色圓環(huán)〕圓環(huán)〕圓環(huán)〕變紅色〕變紅色〕圓環(huán)〕-〔黃色〕-〔黃色〕-〔黃色〕-〔黃色〕-〔黃色〕+〔紅色〕A：糞便〔或肛拭子〕SBG或SF增菌XLD分別接種TSI和MIUB〔或肛拭子〕SBG或SF增菌YS分別接種TSI和MIUC：糞便〔或肛拭子〕 SBG或SF增菌 XLD和麥康凱分別 接種TSI和MIUD：糞便〔或肛拭子〕 SBG或SF增菌 YS和沙門顯色分別 接種TSI和MIUE：糞便〔或肛拭子〕 SBG或SF增菌 XLD和沙門顯色分別 接種TSI和MIU生化初步鑒定3~5個分別較好的單個可疑菌落，分別接種到三糖TS-〔MI361℃培育18～242。系統(tǒng)生化試驗(yàn)沙門菌和志賀菌初步鑒定陽性菌經(jīng)轉(zhuǎn)種養(yǎng)分瓊脂單，取單個菌落〔APE20E或全自動生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)展。血清學(xué)試驗(yàn)志賀菌血清學(xué)試驗(yàn)挑取生化反響實(shí)篩符合志賀菌的養(yǎng)分瓊脂斜面，首先用四D群)。凝集者則用B群多價、D群和A1、A2、血清分別凝集。C群或A3～12C群的四種多價和A群另三種多價血清做玻片凝集。沙門菌血清學(xué)試驗(yàn)挑取生化反響實(shí)篩符合沙門菌的養(yǎng)分瓊脂斜面，首先用A-F群O多價血清做玻片凝集反響。OO4→O10→O9→O7→O8→O19→O2→O11挨次凝集。H抗原凝集有不消滅自凝時，才可以報告陽性結(jié)果。結(jié)果報告最終綜合生化及血清學(xué)結(jié)果，可以報告檢出〔或未檢出〕沙門菌〔或志賀菌。接在檢驗(yàn)軟件中錄入相應(yīng)結(jié)果。其他單位可以設(shè)計(jì)特地的報告格式反響給送檢單位或送檢科檢測結(jié)果為陰性，可以報告為未檢出腸道沙門菌和志賀菌；檢測結(jié)果為陽性，依據(jù)檢測狀況報告具體的型別。檢驗(yàn)部門應(yīng)當(dāng)保存全部受檢樣品的根本信息，檢測到陽